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[摘要]近年來，病原微生物引發的生物安全問題備受社會關注，也成為各高校重視的實驗室安全問題之一。本文主要結合本校免疫與病原生物實驗室的具體情況剖析了實驗教學中存在的危險因素并提出相應的防護對策，為下一步實驗教學改革及實驗室安全管理提供指導方向。
[關鍵詞]實驗教學；生物安全；免疫與病原生物學
為了建設平安和諧的校園環境，近年來各高校都普遍加強了實驗室安全管理工作，但關注點主要集中在危險化學品，易燃、易爆、易制毒藥品的管理方面，對實驗室生物安全關注較少[1]。實驗室生物安全是在從事病原微生物相關的實驗活動中，避免病原微生物造成實驗室相關人員感染和環境污染，以及對外圍人群帶來危害的意識和措施指防止病原微生物、毒素等生物危險因子造成實驗室操作人員傷害，或避免其向實驗室外擴散而導致環境污染及公共危害的綜合性措施[2-3]。近年來，實驗室致病性微生物感染的事故感染事件屢有報道，給社會以及師生健康帶來危害，造成嚴重后果，也讓相關主管部門充分認識到生物安全的重要性[4]。作為承擔高校醫學生基礎實驗課程病原微生物專業相關的教學實驗室，除了培養學生掌握本學科的基本技能外，更有培養學生樹立實驗室生物安全意識和職業素養的責任。本文主要結合本校免疫與病原微生物實驗室的具體情況分析實驗教學中存在的危險因素并提出相應的防護對策，為下一步實驗教學改革及實驗室安全管理提供指導方向。
1免疫與病原生物學實驗室生物安全現狀
《醫學免疫學》《醫學微生物學》是高校所有醫學生必修的基礎課程，也是理論和實踐緊密聯系的學科[5]，其實驗教學在培養學生實踐能力和創新能力方面是非常關鍵的一環?；趯W科專業的特點，對實驗室硬件設施以及實驗操作人員技能、安全防護意識有較高的要求?，F結合本校免疫與病原生物學教學實驗室的情況分析在生物安全方面存在的隱患，為預防和規避風險提供思路。
1.1實驗室生物安全設施防護等級低。各類病原微生物以及血清制品(如金黃色葡萄球菌，傷寒沙門氏菌，痢疾志賀氏菌以及乙肝病人陽性血清等)是免疫與病原微生物學實驗室主要的實驗材料，具有一定的感染風險。根據國家相關法規條例規定的要求部分實驗材料應在BSL-2級水平甚至更高級的實驗室中展開，但因實驗室條件受限此部分的教學實驗仍在普通實驗室開展，這就存在著很大的安全隱患，此類情況在全國高校醫學類教學實驗室普遍存在[6]。
1.2師生生物安全意識薄弱。近年來，在醫學院校新入職的大部分教師沒有醫學背景，缺少系統的病原微生物實驗室生物安全管理培訓，淡化了對病原實驗室生物安全的意識。盡管學生進實驗室前進行過有關實驗室安全的考試，但無菌觀念不強。通常也只是在首次實驗課上帶教老師講述實驗室規則和注意事項，未能使學生充分知曉實驗室所從事的實驗存在哪些潛在危險因子以及可能被感染的途徑等，導致學生對潛在的隱患認識不足，缺乏自我防護意識。此外，學生的日常習慣很差，比如直接將書包等與實驗無關物品放在實驗操作臺，更甚者有的直接在書本上面進行微生物接種操作等；實驗結束后沒有及時洗手和消毒，就離開實驗室等問題，都體現了學生生物安全防護意識淡薄，更意味著加強學生病原微生物實驗室安全教育的緊迫性和必要性。
1.3實驗操作不規范，防范意識淡薄。在學生實驗操作過程中，尤其是在做細菌涂片相關實驗時(如抗酸染色、玻片凝集實驗等)，細菌極易形成氣溶膠，在嘈雜的環境中很容易導致污染周圍環境或經呼吸道吸入氣溶膠而被感染。腸道菌鑒定的生化反應穿刺接種時，由于操作不規范導致砂輪劃傷手指而被感染；乙肝病毒的酶聯免疫吸附檢測實驗中，廢棄物(酶標板、毛紙，槍頭等)沒有按照要求分類放置處理消毒滅殺等，這些常常不被重視的小細節都是可能造成實驗室生物感染事故發生的潛在危險因素。因此，在實驗課中加強生物安全管理和自我防護教育是十分必要的[7]。
2免疫與病原生物學實驗室生物安全管理的工作方向
據有關資料統計顯示，實驗室安全事故的發生是人的不安全行為和物的不安全狀態相互復雜關聯、共同作用的結果[8]。因此我們主要從人和實驗室兩個方面探討如何加強生物安全管理才能將風險控制到最低。
2.1完善實驗教學環境，優化實驗教學材料。為了克服免疫與病原生物學實驗室的生物安全防護級別比較低的現狀，我們可以通過不斷的完善實驗室布局與功能，提升其防護水平。比如配備獨立的滅菌消毒間，方便教師講解和示范各類消毒設備；教室外設置儲物柜，讓學生存放與實驗無關物品；教室內配備洗手、消毒設施、應急藥箱以及明確標識實驗廢棄物放置區等。此外，要加強實驗設備管理，盡量避免因儀器設備故障造成實驗室安全事故。如用不銹鋼酒精燈替換玻璃酒精燈；定期檢查高壓蒸汽滅菌鍋、細菌培養箱、生物凈化工作臺等設備的穩定性及運行狀態；定期對離心機、振蕩器、酶標儀等儀器以及實驗室進行消毒滅菌處理等，保障相對安全的實驗環境。根據學校實驗室現有的條件和學生的實際操作能力，可以在菌毒株的選擇上下功夫。首先，保證實驗教學過程中使用的標準菌株獲得途徑正規；其次，依據《人間傳染的病原微生物名錄》對實驗室目前使用的菌株進行逐一比對，采用符合生物安全要求的微生物菌毒株，依法保障實驗教學的安全性。比如具有較強致病性且在實驗操作中易發生生物安全問題的野生型傷寒沙門菌株以及結核分枝桿菌疫苗株，可以使用對人物無致病性的恥垢分枝桿菌和減毒傷寒沙門菌疫苗株Ty21a替代，這樣可以既保證實驗教學效果，又無生物安全風險[6]。
2.2樹立強化生物安全意識，規范實驗操作技能。有研究指出，實驗人員的安全知識缺乏、安全意識淡薄是導致不安全行為和不規范操作的直接原因，也是導致實驗室事故發生的根本原因[9]。而提升實驗操作人員的生物安全意識和規范操作技能也是生物安全管理的一項重要內容[10]。教師在教學活動起的主導作用，首先要更新教師的生物安全知識體系。實驗技術人員以及實驗帶教老師，應該認真研讀《浙江省病原微生物實驗室生物安全管理辦法》、《病原微生物實驗室生物安全通用準則》(WS233-2017)等相關法規及文件；定期參加省市衛健委部門舉辦的“病原微生物實驗室生物安全及技術”培訓班，不斷更新知識系統，強化自身的生物安全觀念。此外，帶教老師應該在首次實驗課上增加《病原微生物實驗室安全管理條例》、《人間傳染的病原微生物名錄》等相關政策法規的介紹，以及對實驗室生物安全相關儀器(如高壓蒸汽滅菌鍋、干烤箱、生物凈化臺等)的功能、實驗室常發生的意外事件及處置方法的介紹。課上帶教老師應該針對不同的實驗內容反復強調實驗過程中可能潛在的危險以及注意事項，進一步強化學生的生物安全觀念；實驗結束后再次明確實驗廢棄物的分類處置等。再者，通過引入典型的實驗室安全事故案例，讓學生直觀地切身感覺到事故就發生在身邊。讓學生從思想上認識到病原微生物實驗與以往的形態學、生理學實驗不同，本學科實驗環境存在感染風險從而提高自我防護意識。學生是實驗教學活動中的主宰者參與者，實驗課的生物安全很大程度上取決于學生的安全意識以及實驗習慣。學生可以采取多種途徑學習實驗室生物安全相關知識，比如通過慕課學習或參加學校舉辦的相關知識講座、科技社團舉辦知識競賽等形式，增強自我防護意識。此外，在實驗操作中仔細觀摩老師的示范過程，注意每一步的操作要點及注意事項，規范自己的操作方法，強化操作技能。對自己實驗過程中遇到突發事件(比如菌液濺灑、劃破手指等)要及時反饋給老師，及時采取補救措施以降低危害；實驗結束后，將實驗臺整理擺放整齊，所有使用過的實驗材料按要求放到指定位置，不得擅自處理或帶出實驗室。因此，只有養成良好的實驗習慣和掌握標準的實驗技能，提升自我防護意識才是規避實驗室安全事故發生的關鍵。
3結束語
高校實驗室的生物安全對學校教學、科研事業的可持續發展以及平安和諧至關重要。涉及病原微生物的教學實驗室的生物安全風險系數相對較高，尤其是在承擔不同專業、學生人數多的情況下，開展有效的實驗室生物安全教育，提升師生自我保護意識、規范實驗操作和培養良好的實驗素養等是保障涉危實驗室生物安全的關鍵環節，也是順應時展要求，新形勢下醫學人才培養的目標之一。
作者:康艷華 蔡玲斐 趙冬久 單位:杭州師范大學
