小組鑒定范例6篇

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小組鑒定范文1

大學生畢業實習小組鑒定評語一：該生綜合素質較好，愛崗敬業，工作能力強，有一定的工作組織能力，能和同事友好相處，短短實習工作期間，是個出色的教學能手，相信會在今后的工作中，取的出色的成績。

二：該學生實習期間工作認真，勤奮好學，踏實肯干，在工作中遇到不懂的地方，能夠虛心向富有經驗的前輩請教，善于思考，能夠舉一反三。對于別人提出的工作建議，可以虛心聽齲在時間緊迫的情況下，加時加班完成任務。能夠將在學校所學的知識靈活應用到具體的工作中去，保質保量完成工作任務。同時，該學生嚴格遵守我公司的各項規章制度，實習期間，未曾出現過無故缺勤，遲到早退現象，并能與公司同事和睦相處，與其一同工作的員工都對該學生的表現予以肯定。

三：該生綜合素質較好，愛崗敬業，工作能力強，有一定的工作組織能力，能和同事友好相處，短短實習工作期間，是個出色的教學能手，相信會在今后的工作中，取的出色的成績。

大學生畢業實習小組鑒定意見一：該學生實習期間工作認真，勤奮好學，踏實肯干，在工作中遇到不懂的地方，能夠虛心向富有經驗的前輩請教，善于思考，能夠舉一反三。對于別人提出的工作建議，可以虛心聽齲在時間緊迫的情況下，加時加班完成任務。能夠將在學校所學的知識靈活應用到具體的工作中去，保質保量完成工作任務。同時，該學生嚴格遵守我公司的各項規章制度，實習期間，未曾出現過無故缺勤，遲到早退現象，并能與公司同事和睦相處，與其一同工作的員工都對該學生的表現予以肯定。

二：熱情、主動、積極。對事物保持高度的好奇與興趣，虛心求教并勇於建言。隨時調整自己，力求成長、盡善。積極爭取已完成實習規定的任務，實習報告符合標準，達到實習目的。

三：勤奮好學，遵守廠規廠紀，帶來先進管理理念。工作能力及專長 在不斷的社會實踐中，自己以認真敬業，責任心強，工作效率高，執行公司指令堅決得到了各實習單位的認可。

大學生畢業實習小組鑒定評價一：該學生實習期間工作認真，勤奮好學，踏實肯干，虛心好學。善于思考，能夠舉一反三。。能夠將在學校所學的知識靈活應用到具體的工作中去，保質保量完成工作任務。同時，該學生嚴格遵守我公司的各項規章制度，實習期間，未曾出現過無故缺勤，遲到早退現象，并能與公司同事和睦相處，與其一同工作的員工都對該學生的表現予以肯定。

小組鑒定范文2

隨著市場經濟在農村的不斷深入發展,使得農村穩定的社會局面對農村經濟發展的影響顯得尤為重要。然而，當前農村的社會治安綜合治理工作，在一定程度上，還不能很好的為農村經濟的發展提供有力的后方穩定保障。農村經濟及社會各項事業的發展受到了一些制約,針對這一問題，和靜縣正在深入討論如何創建平安鄉鎮,為打造我鎮的平安局面，現就結合實際談談如何創建平安村、組。

一、轉變工作思維創新工作理念

村級組織是黨和國家的各項“三農”政策和法規、法律的具體落實層,同時在維護社會穩定工作中起看非常關鍵的作用,如果村、組穩定工作做的不好，那么就談為上全鎮的穩定。我想我鎮村兩委班子一定要改變以往常規的工作模式,以更加長遠、有效、實際的方法來解決發展中的問題。切實做好兩個轉變,即把被動的執行轉變為主動的服務；空洞的文字轉變為扎實的成效。把一個管轄區域在一定時間內發案數量的多少，作為衡量該村在綜合治理工作方面的重要指標，通過對責任狀的學習，使各村正確、深刻的認識到綜合治理工作“一票否決”的重要性和嚴肅性。為激發各村領導班子對綜合治理工作重視。我們有必要把綜合治理工作做得好壞作為提拔或繼續錄用村干部的一個重要指標。

二、增強責任意識控制案件攀升

為有效的推進社會治安綜合治理工作,我鎮每年都要和各村、各單位主要負責人簽定了《社會治安綜合治理責任書》使責任明確到人.我想從今年開始,我們能否結合創建平安村組,由鎮派出所根據每個季度的發展情況對各村的刑事案件及治安案件作一個量化標準,使各村的發案率在一定的時期內有一個度。這樣更能明確職責,比如烏郎尕扎村20__年第一季度盜竊案件10起、縱火1起、搶劫1起等,鎮綜治委每季度在召開評審會之前就要求各村針對本季度易發案件做出相應應急措施,比如在這一季度重點加力巡邏力度,杜絕不法分子的盜竊動機。我想只要工作有側重點,切實抓好主流犯罪侵向，我們本季度的綜合治理工作就算成功了,當然在切實抓好主流犯罪活動的同時，也不能放松對其他作案動機的關注,這樣才可以有效的遏制我鎮案件的攀升趨勢。

三、健全會議制度加強互通力度

鎮綜合治理委員會為有針對性地作好對全鎮綜合治理工作的部署和安排。能否建立周會、月會和季員制度。周會由鎮綜治辦召急各村分管穩定工作的民兵連長參加,主要是反饋他們在本周內針對主流案件的排查和預防過程中有何進展，有何問題。之后由鎮綜治辦整理匯報主管領導，由主管領導作出及時安排,綜治辦將安排傳達至各村民兵連長。月會制度由鎮主管綜合治理工作的領導主持,派出所所長、各村黨支部書記、村委會主任、民兵連長參加。派出所所長通報各村當月發案情況,首先由村兩委班子向與會人員對發案原因進行分析,主要從主觀方面談,他們在工作中做到了什么程度。然后由派出所所長分析發案原因,最后由鎮主管領導作出指示,對做得不好的村提出批評意見，同時要求限期整改。季會于每季度的第三個月召開,在季會上首先要完成第三個月的月會議程,然后由鎮派出所對一個季度累計的發案情況與責任狀對比，當場對各村的發案情況進行評審,這樣有助于各村領導對本村的發案情況有一個清醒的認識,增強他們的責任意識及緊迫感,也有利于鎮黨委、政府年終對各村社會治安綜合治理工作的考核。

四、加大宣傳力度提高防范能力

綜合治理工作是一個非常系統，而且面非常廣的工作。其主要目的在于維護社會穩定,但單靠幾個政法成員單位的力量是遠遠不夠的,我們要調動全鎮的農牧民群眾自覺的參與到維護穩定、發展農村經濟的工作中。只有這樣那些不法分子才沒有市場,就不敢那么名目張膽的侵害農牧民群眾的生命財產安全。怎樣才能提高農牧民群眾的自我防范意識呢？我想最我效的辦法就是宣傳,在這方面，由于我鎮的宣傳工作近幾年仍處于薄弱環節，所以在這一方面我們做的很不夠。但在有限的宣傳資源下，我認為從以下幾方面做比較好：一是利用常規的宣傳方法，比如在農牧民群眾較為集中的場所辦板報,張貼標語、治安常識等。把這一工作落實的情況做為年終綜合治理檢查的一方面,二是在以往對綜全治理工作的宣傳中，我們沒有充分利用廣播電視站的喉舌作用,在這一方面，我想結合我鎮實際主要做好談兩點意見：一是開辦以廣播為主要媒體的《每日案例分析欄目》。二是不定期的播放以綜合治理委員會牽頭的《致農牧民群眾的一封穩定信》。案例分析主要從本鎮往年及近年發生的案例中挑取，時間放在每天下午8：00—8：30。體裁主要以每季度的主流案件為主，主要由鎮派出所提供數量不限?！吨罗r牧民群眾的一封信》主要由我鎮宗治辦提供稿件，主要就是在一定時期內針對某個熱點問題讓農牧民朋友做好預防工作。對以上兩個節目的播放都實行動態的播放方式。三是充分調動各中小學法制副校長的積極性，每周對五、六年級及初中生進行一次法制教育專題講座，內容要結合我鎮實際，主要以青少年犯罪，預防家庭盜竊案件等為主，這樣可以有效的擴大宣傳面，通 過學生回家以后與家長的交流，即可得到事半功倍的效果。但在宣傳的同時一定要注意教案的正面作用。所講的內容絕不能對學生幼小的心靈造成誤導。每位法制副校長每周都要定期將教案交鎮宗治辦，由主管領導審核備案。

五、健全聯動機制發揮網絡作用

新的時期，對社會治安綜合治理工作也提出了新的要求，尤其是在農村，因地域廣、農牧民居住分散、文化素質相對較低、農牧民群眾的法律意識淡薄。就以上一些制約因素就給我鎮綜合治理工作的進展帶來了很大的難度。僅靠鎮綜治辦、派出所、司法所、辦等幾個綜治成員單位不可能做好此項工作。所以說，我們就要在農村建立一個有效的聯動機制，我想主要從以下幾個方面考慮：一是加強鎮綜治委與各成員單位就本部門工作范疇有針對性的簽定責任狀，明確各職能部門的職責。二是加大鎮綜治委對村級民兵連、治保會等治安組織的領導力度，同時加強與之聯系和溝通的力度。三是切實發“十五戶”聯防的作用。這一點是非常關鍵的，在這一方面，要想讓十五戶長切實發揮作用，鎮黨委、政府能否給他們一些政策上的傾斜，比如優先考慮農業小額信貸、糧食補貼、糧食直補的發放等，從而調動他們的工作積極性。只要我們各成員單位齊心協力、上下聯動、左右互動、各負其責，切實發揮治安網絡作用,使我鎮的社會治安綜合治理工作取得更好的成績。

六、強化聯防隊伍管理明確聯防隊員職責

小組鑒定范文3

實際上我們的學生小到自己的同桌，大至以后的工作環境，合作成員都難以隨心更換。都必須更快的適應，很好的長時間的合作。我的固定小組合作模式就是全面考慮分組優劣因素，四個學生一組在課堂之外互幫互助，以團體的成績為評價標準，小組長帶頭發揮作用，指導小組成員展開合作，發揮群體的積極功能，提高個體的學習動力和能力，達到完成學習任務的目的。對學生而言，合作意味著心態的開放，主體性的凸現，個性的張顯，創造性的解放。固定小組合作學習不僅僅改變了學生在傳統學習中的單維學習，豐富了學生學習知識的渠道。發揮了學生的主動性、創造性，更是培養了各個小組長的指導能力，各個組員之間的協調能力，適應能力和長期合作能力。讓固定合作學習成為學生的第二課堂――延續合作學習。它不僅是一種學習活動方式，更是彌漫、充盈于學生之間的一種學習情境和精神氛圍。并且一旦形成一種氣候，將改變整個班級學習數學的氛圍，減輕教師課后輔導學困生的負擔，使教師可將更多的時間用在鉆研教材，提高班級學習數學的層次上。

為此，我從學生的整個學習數學過程入手。進行了我的課堂之外固定四人小組合作模式的實踐與反思。雖然我的有些做法是否合適還有待探討，但此時勇于實踐顯得更為重要。

一、優化分組

合理分組之前我們首先要全面深入地了解每一個即將被分組的學生的差異，包括學生的知識基礎和學習能力，學生的性格特征和主被動學數學等。包括與家長聯系，與班主任探討。如何更全面的考慮各個因素，優化四人組合，在我的頭腦中逐步醞釀。

1.首先將班級學生按照知識基礎掌握情況和能力強弱按1：2：1分成三個組。其中第一組為組長人選?；A知識掌握好，能力強，主動學習；第二組為互助組，第三組為學困組，基礎知識掌握較差，能力弱，被動學習。其中第二組按主動被動學習分成兩組。所有學生又按性格內外向分成兩組。(發放調查問卷對學生性格進行測試及分類。見附表一)

2.初步將所有學生四人一組分成若干組。每一組配備一個甲組學生為組長。組長為師傅帶一丙組學生為徒弟。另外兩個都是乙組學生，互相督促互相追趕。以每次學習結果優先于另外一個為目標，誰優先這個階段誰就是另外一個的師傅。每個組有兩對，組長除了帶徒弟還要管理好整個小組。每一對中一個主動學習一個被動學習，或兩個都主動學習；每一對中一個性格外向一個性格內向，或兩個都外向。

3.初步分組后，向所有學生說明：目前分組也許不如你意，但是，這對你來說是一次難得的鍛煉與他人合作的機會。每個同學都要學會適應對方，適應整個小組這樣一個環境。在這個環境中讓自己的成績有飛躍。如果確實有特殊原因沒辦法很好合作，個別考慮更換伙伴。一周后，所有組的成員固定，本學期內不再變更。二、互助方法：

a)在練習課和作業整理課上以四人分組排位置坐，便于練習時相互幫助。b)布置的課外探究活動，以四人分組為標準展開。組長分工要明確。c)遇到不懂的問題師傅要幫助解決，并負責同類型問題再次出題，看是否掌握。d)每周一次開小組學習會。每個同學說明自己本周學習情況，并由組長負責填寫師徒結隊情況并填寫感想。e)當徒弟進步時要給予鼓勵，當徒弟懶散時，學習放松時要給予嚴厲批評，并督促其改進，也可給其指定短期目標。當徒弟暫時學習上有情感障礙時要幫助一起克服。比如和他談心，建議解決方法，必要時也可向我說明，尋求支持。

三、獎勵規則：

規則的詳盡和公平是學生努力的一個方向。獎勵機制中有三個標準。

一是隱性的但實際上是最重要的一個衡量標準，那就是老師每一次對進步學生的口頭激勵。在合適的時間你的激勵會是讓學生堅持這么去努力的一個原動力。針對已存在差異，但又有著巨大潛能的學生，努力提高他們的成就動機是教育成功的關鍵。而我的每一次口頭激勵都在告訴學生你獲得了一些成就，你有潛力繼續獲得更多的成就，促使學生提高被激勵的需要，有了一種希望自己成功的美好愿望。

二是向家長匯報你的孩子進步了!每一階段之后將進步大的這幾組同學以祝賀信的形式，只字片語讓孩子帶回的是勝利的感覺，被別人肯定的感覺。作為家長收到的不僅僅是只字片語，也是激發了他們要把孩子培養成才的愿望，他們會花更多的時間在教育孩子鼓勵孩子關注孩子上，這種無形的力量總是能促使我們的學生更加努力地去完成老師的任務。

三是和班級的評比制度掛鉤，將優勝組的學生名單匯報給班主任，在班會課上向這些同學表示祝賀，并上墻祝賀!以次表明我們的合作學習是一件比較“嚴肅”并且需要每個同學認真去做的事情，讓每個學生更加重視合作的存在以及合作帶給我們的學習進步了的快樂。

但是，不管是哪一種獎勵，獎勵時都必須整組四人一起獎勵，榮辱與共。讓學生們知道不僅要為自己的學習負責，而且要為小組負責。為他們所在小組中其它同學的學習負責。讓學生充分認識到個人與集體的關系，學習對集體負責，主動參與討論學習。不能有消極等待或依賴小組其它成員的思維情緒，而是和組員形成積極互賴的關系。當然不妨以“特別是某某同學表現出色”這樣的話語指出學生中的榜樣，讓別的同學像他學習。

小組鑒定范文4

關鍵詞：超聲定位；神經阻滯；麻醉效果

Application of Ultrasound-guided Interscalene Brachial Plexus Block

MA Jun

(Wuchang Hospital of Wuhan City,Wuhan 430063,Hubei,China)

Abstract：ObjectiveTo investigate the clinical application of anesthesia effect of ultrasound-guided interscalene brachial plexus block.MethodsThepatients with upper limb trauma in our hospital from 2013 January toSeptember during this period in the selected 100 people as sample,dividedinto two groups,each group of 50 people,were named as the experimental group and the control group.For the experimental group using a portable B Ultrasound instrument in the neck by two-dimensional ultrasound images to determine the puncture for interscalene position,the control group withtraditional anatomic landmarks were punctured,with two groups of patients with operation time of the first block,block onset time,complete block time,adjuvant drug cases and complication rate as evaluation index of treatmentthus,comparative analysis. Results Compared with control group, the test group patients with operation time block,block onset time,complete block time is shortened obviously, P value of less than 0.05,and the test grouppatients adjuvant drug cases and complication rate was significantly lower than the control group,the P value is less than 0.05.Conclusion Goodanesthesia effect ultrasound-guided interscalene brachial plexus block in clinical application, and can effectively shorten the block time,reduce the complication rate,is a new technology of high efficiency,good safety,can be widely used in clinical treatment.

Key words：Ultrasound localization; Nerve block; Anesthesia

肌間溝臂叢神經阻滯是上肢手術中常用的麻醉方法之一，近幾年來隨著醫學技術的發展，超聲定位引導肌間溝臂叢神經阻滯在我國臨床治療中得到了推廣應用。與傳統的肌間溝穿刺相比，這項新技術的麻醉效果更為顯著。傳統的肌間溝穿刺主要依靠解剖標志和麻醉醫生經驗進行操作，失敗率和并發癥發生率較高，而超聲定位能夠有效縮短阻滯操作時間、阻滯起效時間，同時也對降低并發癥發生率、減少對神經以及血管傷害等方面有著顯著效果[1]。

1資料與方法

1.1一般資料將上述兩組患者的基本資料進行整理分析，得到試驗組患者中男性27例，女性23例，年齡為45~73歲；對照組患者中男性28例，女性22例，年齡為41~69歲，兩組患者中均無頸部畸形，頸部手術史及局麻藥過敏史。將兩組患者的基本資料進行統計學分析得到兩組資料的差異性在統計學中無意義，即差異性不顯著，具有可比性。

1.2方法兩組患者的局麻藥均為1%利多卡因和0.5%羅哌卡因，最大劑量為20ml[2]。

試驗組患者平臥去枕，降頭偏向外側約30°左右，采用彩色超聲引導系統進行操作，將探頭的頻率調整至7.5 MHz，之后將探頭置于患者的側頸部，選擇探頭外側約1cm處為穿刺點，當超聲圖像顯示為針尖接近神經時，固定穿刺針，注入局麻藥[3]。

對照組患者是用標志定位進行麻醉操作，在患者的前、中斜角肌肌間溝進入，調整穿刺針的方向及深度，尋找異感，固定針頭，將局麻藥注入[4]。

1.3統計學方法本研究使用的統計學軟件是SPSS 17.0，計量資料采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗。

2結果

兩組患者的局麻藥用量差異性在統計學中不顯著，而在阻滯操作時間、阻滯起效時間以及阻滯完善時間三個指標中，試驗組患者明顯低于對照組患者，此外，試驗組患者的并發癥發生率也明顯低于對照組患者,見表1。

3討論

臂叢神經阻滯的兩個關鍵因素是準確的解剖定位和局麻藥的均勻擴散。在傳統的臨床操作中，常使用盲探異感定位的方法，但是這種方法通常對于麻醉醫生的穿刺經驗有較高的要求，因此，由于缺乏相對客觀的指標判斷，該方法通常成功率較低，并發癥發生率較高，安全性、有效性較差。近幾年來，隨著醫療技術的發展，超聲影像定位技術逐漸取代了傳統的麻醉操作方式，成為了我國臨床中一項較為先進科學的麻醉技術。超聲定位影像能夠較為直觀地表達出穿刺部位的肌肉、血管以及神經分布，能夠清晰的展現出患者前中斜角肌之間的臂叢神經橫斷面，使得整個操作過程中實現了可視性和可控性，從而有效地降低了傳統穿刺中血管和神經損傷情況的發生率[5]。

本研究結果顯示，采用超聲引導臂叢神經阻滯，能夠有效縮短阻滯操作時間、阻滯起效時間以及阻滯完善時間，提高了阻滯操作的有效性，保證了操作的安全性。此外，在研究過程中，有3例患者由于肥胖、頸短等原因很難實施盲探異感定位法進行麻醉操作，但在超聲引導操作下成功完成了麻醉，因此，與傳統的麻醉方式相比，超聲定位方式的適應性較強。

綜上所述，超聲定位在溝臂叢神經阻滯中的麻醉效果較好，與傳統方法相比，能夠有效降低阻滯時間和并發癥率，在有效性和安全性方面較為突出。此外，對一些神經解剖復雜、肥胖、小兒等患者，該方法的適應性和靈活性也較好，因此該方法可以在臨床治療中推廣應用。

參考文獻：

[1]段世明.理學[M].北京:人民衛生出版社,2000:115

[2]杭燕南,莊心良,蔣豪.當代麻醉學[M].上海:上海科學技術出版社,2002:359.

[3]許彬溈,許旦紅.甲磺酸羅哌卡因用于臂叢神經阻滯50例臨床觀察[J].社區醫學雜志,2010,8(4):30.

小組鑒定范文5

【摘要】 采用超高效納升液相色譜電噴霧串聯質譜對重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白進行了分析。樣品經胰蛋白酶酶切后，進行液相色譜串聯質譜分析和數據庫檢索。結果表明， 分別有5個和7個肽段匹配于人腫瘤壞死因子受體和人Ig gamma1 chain C region。比對分析表明，重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白中檢測到的人IgG的7個肽段完全與人IgG1的序列匹配，與其它3個亞型只有部分肽段匹配。說明重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白一級結構正確，Fc片段確實為人IgG1的Fc片段。

【關鍵詞】 基因重組受體抗體融合蛋白，納升液相色譜，電噴霧串聯質譜，蛋白鑒定

Abstract The Nano ultrahigh performance liquid chromatographyelectrospray ionization mass spectrometry tandem mass spectrometry(UPLCESIMS/MS) was used to characterize the primary structure of recombinant human necrosis factorα receptorⅡ∶IgG Fc fusion protein. Samples were digested by trypsin， followed by liquid chromatographytandem mass spectrometry analysis and database search. Five peptides matched with tumor necrosis factor receptor and seven peptides matched with human IgG1 fragment of the Fc. Further analysis demonstrated that seven peptides all matched with the IgG1 Fc but only partly peptides matched with the other subtypes. RhTNFR:Fc is fused by IgG1 Fc but not other subtypes.

Keywords Recombinant human necrosis factorα receptorⅡ∶IgG Fc fusion protein， nano ultrahigh performance liquid chromatographyelectrospray ionization mass spectrometry tandem mass spectrometry， protein identification

1 引 言

類風濕關節炎(rheumatoida rthritis， RA)是一種以累及關節為主的系統性自身免疫性疾病。近年來研究表明，腫瘤壞死因子a（TNFa）是RA發病機制中的關鍵因子。阻斷TNFa即在RA發病機制的上游阻斷了炎癥反應，達到治療RA的目的[1]。注射用重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白(rhTNFR：Fc)用于治療RA，不僅可緩解癥狀，還可阻止關節變形，臨床效果好。該藥是由Ⅱ型TNF受體P75的細胞外部分和人免疫球蛋白(IgG)1的Fc段形成的融合蛋白。Ⅱ型TNF受體P75的細胞外部分是與游離腫瘤壞死因子特異結合的部位，競爭性地阻斷腫瘤壞死因子和效應細胞表面的腫瘤壞死因子受體結合，阻斷腫瘤壞死因子的生物活性，達到減輕炎癥的目的[2]。人IgG1的Fc段可延長藥物半衰期。

基因重組藥物需要經過嚴格的質量控制來確保藥效和藥物的質量。目前， 基因產物的質量控制主要包括分子量測定、等電點測定、純度分析、結構分析以及生物活性分析等[3]。結構測定主要是包括蛋白質N端序列分析[4]、C端序列分析、二硫鍵分析及蛋白質肽譜分析[5，6]。形成了以等電聚焦電泳[7] 、氨基酸組成分析、氨基酸序列分析[8]、生物質譜[9]、細胞學實驗及動物實驗[10]等為基礎的綜合鑒定體系。對于高度同源蛋白，如果N端或C端含有不同的氨基酸，則可以通過N端或C端測序來區分。對于重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白(商品名益賽普)，這兩種方法都不能區分。本實驗采用同時具有分離能力和測序功能的超高效納升液相色譜電噴霧串聯質譜（NanoUPLCESIMS/MS）法進行分析，對其進行了準確鑒定。目前，尚未見到準確鑒定融合蛋白中高度同源人IgG的報道。

益賽普是我國第一個實現產業化的人源化單克隆抗體藥物（生物制劑），已于2005年在國內獲得批準上市銷售。但是該藥品進入國際市場必須確定融合蛋白抗體部分為人IgG1的FC片段。人IgG共有4個亞型，序列高度相同，一般的分析鑒定方法難以區分，因此高效、高分辨的質譜鑒定方法成為首選的鑒定方式。本實驗采用NanoUPLCESIMS/MS法對樣品酶切溶液進行質譜分析，經肽段序列分析比較，準確鑒定了益賽普的結構組成，證明益賽普中的IgG確實為IgG1，為其出口提供了可靠依據。

2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

超高效納升液相色譜電噴霧串聯質譜(美國Waters公司)。樣品來源：重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白（益賽普）由上海中信國健藥業有限公司提供。胰蛋白酶為美國羅氏公司測序級的酶；碘乙酰胺（ACROS公司）；DTT（美國ICN公司）；實驗用水為MilliQ 純水器制備的去離子水；其余試劑均為國產分析純。

2.2 樣品的還原、烷基化和酶切

稱取重組蛋白樣品2 μg，溶于0.025 mol/L NH4HCO3中制得1 g/L溶液，以0.01 mol/L DTT在56 ℃還原60 min， 以0.055 mol/L碘乙酰胺室溫閉光烷基化30 min，然后加入1 μg胰蛋白酶，在37 ℃酶切過夜即可。

2.3 酶切肽段的NanoUPLCESIMS/MS分析

取2 μL 酶切產物，加3 μL 1%甲酸溶液酸化，然后進樣2 μL用NanoUPLCESIMS/MS分析。Symmetry C18(20 mm×180 μm， 5 μm)為富集柱；NanoACQUITY UPLC 超高效液相色譜鍵合乙烷雜顆粒柱為BEH C18（250 mm×75 μm， 1.7 μm）為分析柱。柱溫度：35 ℃；流速：200 nL/min；流動相A：含0.1%甲酸的水溶液； 流動相B：含0.1%甲酸的乙氰。梯度：0～80 min，B從1%上升到40%；80～90 min，B從40%上升至80%；90～100 min，80% B停留10 min；100～105 min，B從80%降至1%；105～120 min，1% B平衡15 min。質譜條件：離子化方式：納升電噴霧正離子；數據采集模式：DDA方式，每次掃描中兩個強度最高的離子進行串聯質譜分析；毛細管電壓：2500 V；錐孔電壓：35 V； 源溫：90 ℃，采集范圍：MS， 350～1600，MS/MS， 50～2000。數據分析軟件：PLGS V2.3處理后通過Mascot檢索軟件的MS/ MS 離子方式檢索數據庫。檢索條件：Trypsin 酶切，M氧化和碘乙酰胺烷基化為可變修飾，漏切位點為1。 MS和 MS/MS的質量誤差均為0.2 Da。

3 結果與討論

3．1 數據庫檢索結果

酶切后的益賽普樣品采用NanoUPLCESIMS/MS分析后，經數據庫檢索鑒定到2個蛋白，其中一個是腫瘤壞死因子受體（tumor necrosis factor receptor），有5個肽段相匹配，Mascot得分563；另一個是人Ig gamma1 chain C region，有7個肽段相匹配，Mascot得分382（Mascot得分37即為鑒定有意義），說明該樣品確實由腫瘤壞死因子受體和人IgG Fc片段兩個蛋白融合而成。表1為檢測到的人IgG Fc片段7個肽段的質量數、測量誤差及氨基酸序列信息。圖解1為人Ig gamma1 Fc片段上的氨基酸序列及所檢測到的7個匹配位置（加粗斜體標示）。如表1所示，所有肽段的測量誤差均小于0.01 Da，說明鑒定準確可靠。表1 益賽普 IgG Fc片段中檢測到的7個肽段的氨基酸序列及相關信息（略）

3.2 檢測結果與IgG四亞型比較

人IgG共有4個亞型，4個亞型序列高度同源，NCBI登陸號分別為IgG1，CAC20454；IgG2，CAC20455；IgG3，CAA67886；IgG4，CAC20457。為進一步確認益賽普中IgG確實為IgG1，將從益賽普中檢測到的7個肽段和IgG的 4個亞型的序列進行了比對分析，結果見表2。在益賽普中檢測到的7個肽段均與IgG1 Fc片段相匹配，只有1個可與IgG2 Fc片段相匹配，5個與IgG3相匹配，1個與IgG4相匹配。其中有2個肽段為IgG1 Fc片段所特有的肽段，這2個肽段的串聯質譜測序圖見圖1和圖2。從圖1和圖2可見，強度高的峰得到了很好的匹配，這也說明本方法的測序效果是非常好的。同時進一步證明了重組人Ⅱ型腫瘤壞死因子受體抗體融合蛋白中的Fc片段確實為人IgG1的Fc片段。表2 益賽普中檢測到的7個肽段和4個人IgGs Fc片段預測肽段的比較（略）

生物質譜，尤其是電噴霧串聯質譜的應用，為蛋白及多肽的測序開辟了一條新的途徑，成為鑒定微量蛋白和蛋白修飾的有力工具[11]。NanoUPLCESIMS/MS方法具有分離能力強、測序效果好和靈敏度高等優點，已成為研究蛋白質最強大的工具 [12]，在蛋白質的翻譯后修飾研究和同源蛋白的區分方面也顯示出獨特的優勢，在重組蛋白藥物的質量控制方面也將發揮重要作用。

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小組鑒定范文6

[關鍵詞] 肌間溝；臂叢神經阻滯；地塞米松；羅哌卡因

[中圖分類號] R614.2 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2015）02（b）-0081-05

[Abstract] Objective To compare the differences of sensory block and motor block effects of the same concentration of Ropivacaine with deferent dosages of Dexamethasone for ultrasound and nerve stimulator guided interscalene bronchial plexus block. Methods Sixty six cases of patients underwent shoulder surgery under interscalene brachial plexus block in Department of Sport Medicine of Beijing Jishuitan Hospital from December 2012 to May 2014 were chosen and randomly divided into three groups： using Ropivacaine 0.5% 20 mL （group A， n = 22）， Ropivacaine 0.5% with Dexamethasone 0.05 mg/kg 20 mL （group B， n = 22）， Ropivacaine 0.5% with Dexamethasone 0.1 mg/kg 20 mL （group C， n = 22）. Onset time and duration time of sensory and motor block， adverse reactions and patients' satisfaction for anesthesia among the three groups were recorded. Results There were no significant differences in onset time of sensory or motor block among the three groups （P > 0.05）. Compared with group A， Dexamethasone can significantly lengthen the duration time of sense block [group A： （15.3±5.3） h vs group B： （28.9±6.9） h， P = 0.000； group A： （15.3±5.3） h vs group C： （31.3±4.9） h， P = 0.000] and motor block [group A： （10.3±3.8） h vs group B： （17.3±4.4） h， P = 0.000； group A： （10.3±3.8） h vs group C： （18.8±2.5） h， P = 0.000] of Ropivacaine 0.5%； but there was no significant difference of different dosages of Dexamethasone for sensory block （group B vs group C， P = 0.198） and motor block （group B vs group C， P = 0.343）. The resting numerical rating scale （NRS） at postoperative 12， 24， 36 h in group B and group C were lower than those of group A， but there were no significant differences between group B and C at any time （P > 0.05）. There were no significant differences of postoperative incidence of nausea and vomiting and satisfaction for postoperative analgesia among the three groups （P > 0.05）. Conclusion Dexamethasone can lengthen the duration time of sense block and motor block of Ropivacaine 0.5%， but there are no significant differences by using 0.05 mg/kg or 0.1 mg/kg Dexamethasone.

[Key words] Interscalene； Brachial plexus block； Dexamethasone； Ropivacaine

肩關節鏡手術在臨床已廣泛開展，由于術中需行控制性降壓，術后需早期活動進行功能鍛煉，完善的術中及術后鎮痛顯得尤為重要。由于肌間溝臂叢神經阻滯不僅可以阻滯臂叢神經的所有分支，并可能阻滯來源于頸淺神經叢的鎖骨上神經，可以覆蓋肩關節手術所有累計神經支配范圍，因此被常規應用于肩關節鏡手術麻醉及術后鎮痛。近年來超聲引導神經阻滯技術不斷發展和完善，不僅提高了阻滯的準確性，同時減少了不良反應的發生[1]。羅哌卡因應用于臨床已近二十年，它對心血管毒性低，低濃度下可產生運動感覺分離現象，作用持續時間相對較長，可提供術后8～12 h的完善鎮痛[2]。目前研究顯示地塞米松復合羅哌卡因可以明顯延長肌間溝臂叢神經阻滯持續時間，但使用不同劑量地塞米松對羅哌卡因神經阻滯持續時間的影響是否不同目前尚不清楚[3]。本研究擬評價不同劑量地塞米松對超聲引導神經刺激器定位肌間溝臂叢神經阻滯時使用0.5%羅哌卡因起效及作用持續時間的影響，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究采用隨機、雙盲、對照的研究方法，經北京積水潭醫院（以下簡稱“我院”）倫理委員會批準，所有患者均簽署知情同意書。選擇2013年12月～2014年5月于我院運動醫學科行肩關節鏡下肩袖修補手術患者66例，隨機分為三組：A組、B組、C組，各22例。麻醉方法均為超聲引導神經刺激器定位肌間溝臂叢神經阻滯復合全身麻醉。病例排除標準：既往神經病變，局麻過敏，嚴重凝血功能障礙，穿刺局部感染，認知功能障礙或未簽署知情同意書的患者。

1.2 材料

超聲：Sonosite，M-turbo，USA；探頭：Sonosite，M-turbo，USA，高頻（5～12 MHz），50 mm；短斜面穿刺針：Stimuplex；B/Braun Medical，Melsungen，Germany，22G，0.7 mm×50 mm，30°；外周神經刺激器：HNS11，B/Braun Medical，Melsungen，Germany；羅哌卡因：AstraZeneca Pty Ltd，North Ryde，NSW，Australia。

1.3 麻醉方法

1.3.1 麻醉前準備 患者入室行心電圖、無創血壓、脈搏血氧飽和度常規監護，選擇任一下肢開放靜脈通路。對側于局部浸潤麻醉后行橈動脈穿刺置管檢測動脈血壓。前額正中、眉弓上方和外眼角處的皮膚乙醇脫脂后，貼上專用電極監測腦電雙頻指數（bispectral index，BIS）。

1.3.2 臂叢神經阻滯方法 患者去枕仰臥位，肩下墊一薄枕，雙臂自然垂于體側，頭向對側45～60°，定位前中斜角肌間隙，采用高頻線性探頭（HFL 50×/13-6 MHz，SonoSite M-Turbo，索能生公司，美國），將超聲探頭放置C6橫突水平，采集橫斷面圖像，探頭可沿胸鎖乳突肌上下滑動直至獲得滿意的肌間溝臂叢神經圖像（圖1）。選用短斜面穿刺針（Stimuplex，貝朗醫藥公司，德國），將穿刺針連接外周神經刺激器（HNS11，貝朗醫藥公司，德國），在超聲引導下由外側向內側實時進針。當穿刺針針尖接近目標神經后開啟神經刺激器，若電流強度為0.3～0.5 mA仍可引出相應肌肉運動，則認為位置正確?；匚鼪]有血液后分別注入0.5%羅哌卡因20 mL（A組，n = 22）；0.5%羅哌卡因加入地塞米松0.05 mg/kg混合液20 mL（B組，n = 22）；0.5%羅哌卡因加入地塞米松0.1 mg/kg混合液20 mL（C組，n = 22）。

1.3.3 麻醉誘導 所有患者均依次靜脈注射咪達唑侖0.04 mg/kg、芬太尼3 μg/kg、異丙酚TCI至效應室濃度3 μg/kg、羅庫溴銨0.07 mg/kg，待BIS值降到60以下，下頜松弛后進行氣管插管，并確定氣管導管位置正確。通氣滿意無漏氣后接通Ohmeda麻醉機行機械通氣，維持呼氣末二氧化碳分壓（partial pressure of carbon dioxide in endexpiratory gas，PetCO2）35～40 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）。

1.3.4 麻醉維持 術中微量泵持續輸注丙泊酚維持麻醉，調節丙泊酚用量維持BIS值為40～60；按需間斷靜脈注射羅庫溴銨維持肌松。手術于臂叢神經阻滯完成40 min后開始。術中維持血壓低于基礎值30%并無缺血表現，若BP波動大于此控制性降壓值10%則間斷給予芬太尼或血管活性藥物以維持血流動力學穩定。手術結束前30 min靜脈給予地佐辛10 mg。

1.3.5 術后鎮痛 術后靜脈給予氟比洛芬酯鎮痛（100 mg，2次/d）。若視覺模擬評分（visual analogue score，VAS）>4，則肌注杜冷丁50 mg鎮痛。

1.4 觀察指標

阻滯后30 min內，每隔5 min，用22號穿刺針分別在正中神經、尺神經、橈神經、肌皮神經及腋神經支配區域輕刺患者，評估感覺阻滯情況；同時觀察肌肉力量，評估運動阻滯效果。感覺阻滯評估標準為：正常感覺=0（阻滯失?。?，感覺下降=1（部分阻滯），感覺缺失=2（完全阻滯）。運動阻滯評估標準為：肌力正常=0（阻滯失?。?，對比對側上肢肌力下降=1（部分阻滯），肌力完全喪失=2（完全阻滯）。上述神經支配區域感覺和運動阻滯評分均達到2為阻滯完全，記錄從穿刺針拔出至阻滯完全所需時間。記錄術后4、8、12、24、36 h及48 h的靜息疼痛數字評分（NRS）。記錄不良反應的發生情況，包括出血血腫、局麻藥毒性反應、全脊麻，若患者主訴呼吸困難于吸氧后無緩解則拍攝胸片以除外氣胸或膈神經阻滯。記錄患者對術后鎮痛的滿意程度（0=不滿意，10=非常滿意）。

1.5 統計學方法

采用SPSS 12.0統計軟件對數據進行統計分析。采用Kolmogorov-Smirnov正態檢驗對數據進行正態分布檢驗，采用變量的重復測量ANOVA分析檢驗重復測量的數據（如NRS評分）是否符合正態分布。計量資料符合正態分布以均數±標準差（x±s）表示，非正態分布資料以M（Q）表示。三組患者符合正態分布資料采用ANOVA分析檢驗組間差距；三組患者計數資料組間比較采用Pearson相關檢驗。三組患者術后NRS評分及患者滿意度比較采用Kruskal-Wallis檢驗。以P < 0.05為差異有統計學意義。

3 討論

肩關節鏡下肩袖修補手術術后疼痛劇烈，目前多采取持續靜脈鎮痛，但臨床觀察發現持續靜脈鎮痛效果欠佳，且嗜睡、頭暈、惡心、嘔吐等不良反應發生比例較高[4]。有報道指出，行臂叢神經阻滯時加入一些藥物如腎上腺素、可樂定、阿片類等可以延長局麻藥的作用時間，推遲患者術后疼痛出現時間，減少阿片類藥物使用，并減少相關并發癥的發生[5]。目前研究發現行外周神經阻滯時局麻藥中加入一定劑量的腎上腺皮質激素可明顯延長局麻藥物的感覺及運動阻滯效果持續時間[6]。

本次研究發現，同樣使用0.5%羅哌卡因20 mL用于超聲引導神經刺激器定位肌間溝臂叢神經阻滯，加入一定劑量的地塞米松可以明顯延長感覺及運動阻滯持續時間，且無論使用0.05 mg/kg還是0.1 mg/kg，其延長作用效果相當[感覺B組：（28.9±6.9）h比C組：（31.3±4.9）h，P = 0.198；運動B組：（17.3±4.4）h比C組：（18.8±2.5）h，P = 0.343]。一般認為糖皮質激素可以使局部血管產生收縮，從而減緩局麻藥的吸收，延長作用時間[7]。還有人認為地塞米松增加了C纖維上異質性鉀通道的活性從而減輕疼痛[8]。研究發現地塞米松還可以有效抑制創傷部位氧化酶活性和前列腺素的合成發揮抗炎鎮痛作用。羅哌卡因脂溶性高與蛋白質結合，作用于臂叢神經軸突，兩種藥物混合后，地塞米松作為載體可對羅哌卡因起協同作用，使羅哌卡因代謝減慢，存留于臂叢神經鞘管內的作用時間延長。本研究顯示在臂叢肌間溝阻滯中加入地塞米松能明顯延長羅哌卡因的感覺阻滯時間和術后鎮痛效果，這與Parrington等[9]的報道一致。

本次研究三組患者臂叢神經阻滯感覺及運動阻滯完善時間相似，這可能是因為使用了超聲引導神經刺激器定位后注藥更加精確，起效時間均很短[感覺：A組（13.2±3.9）min比B組（12.7±4.8）min比C組（12.3±4.0）min，P = 0.780。運動：A組（19.3±5.8）min比B組（17.3±6.5）min比C組（18.6±5.6）min，P = 0.518]，因而無法得出地塞米松不會加速羅哌卡因起效這一結論。

本次研究A組患者雖然在12、24、36 h時靜息NRS評分明顯高于B、C組患者，但是由于術后隨訪細致到位，對于疼痛及其他不適主訴均給予及時處理，因而三組患者對于術后鎮痛的滿意程度差異無統計學意義；同時由于加入地塞米松使患者運動喪失時間明顯延長，且部分患者主訴存在較長時間的上肢麻木感，因而降低了B、C兩組患者對術后鎮痛的滿意程度。今后應對術后鎮痛時所需的最適地塞米松劑量做進一步研究。

三組患者均未觀察到出血血腫、局麻藥毒性反應、全脊麻及呼吸困難等嚴重不良反應的發生。超聲引導可以觀察目標神經及其周圍比鄰結構的位置關系，并可實時引導穿刺針進針，不僅效果明確同時可以避免不良反應的發生，尤其對于熟練掌握這一技術的麻醉醫生來說，完全可以避免相關并發癥的發生[10-11]，研究中同時使用神經刺激器定位，它不僅可以明確目標結構性質，與周圍有可能混淆的結構區分（如血管、肌腱、淋巴結等），同時調節合適的閾電流可以避免神經內注射或神經損傷的發生[12]。本次研究無嚴重呼吸困難發生，雖然有研究指出，由于膈神經在C4水平走行于前斜角肌表面，因而肌間溝臂叢神經阻滯隔神經阻滯發生率近乎100%，單側膈神經阻滯會使有效肺容量損失30%左右，對于正常人來說可以代償，因而本次研究患者均為主訴嚴重的呼吸困難；而對于過度肥胖、COPD或存在對側膈肌麻痹患者則會造成嚴重不良后果，因而行肌間溝臂叢神經阻滯前完善的檢查尤為重要。

綜上所述，使用0.05 mg/kg和0.1 mg/kg的地塞米松均可以同樣延長臂叢肌間溝阻滯時0.5%羅哌卡因感覺及運動阻滯持續時間，可以為肩關節鏡下肩袖修補手術提供接近36 h的有效術后鎮痛，但是其最適劑量、濃度需進行進一步探索研究。

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