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林業大學碩士論文范文1
關鍵詞:高速公路、綠化、問題
中圖分類號: U412 文獻標識碼: A 文章編號:
現階段高速公路綠化現狀分析
無論是從目前國情的需求還是社會的需求出發,還是我們國家經濟發展帶來的車流快速增加都是對高速公路的建設提出的客觀需求。它對我們國家公路混合交通問題帶來很大的好處,不但使道路通行能力得到提高,而且還使投資環境得到很大的改善,對經濟發展起到很大的促進作用。與此同時,高速公路的建設也給生態環境帶來很大的破壞,高速公路的路線較長,占地的面積也比較大,并且有較長的施工周期,對周圍的生態環境造成嚴重的影響,給我們國家的生態系統帶來很大的負面影響。因此,將公路的生態綠化納入公路及沿線的綠化范圍,用來改善行車舒適度,使路容得以美化,避免公路對生態規律的破壞。一些發達國家對高速公路的綠化都非常重視,強調一定要與自然相融,與周圍的環境相融,盡最大努力恢復原來的自然景觀,這也把環境與生態意識充分的體現出來。在一九六五年時,美國就有對公路美化的相關規定,一九七六年日本也對公路綠化技術標準做出相關制定,一九七五年原蘇聯也對公路的建筑及景觀的設計規范做了規定。對于綠化技術,法國多數路段都不采用鐵絲網和隔離帶,路邊的居民區則是采用三米高的透明隔音板,并且藤蔓植物爬滿在隔音板上。德國也非常重視綠化植物的種類選擇,植物有合適的生長環境就會長的茂盛,這對后期的養護管理是非常有利的。而在美國,中央分隔帶全部是由具有彈性的樹列代替了原有的金屬路柵,比如野薔薇樹列,車輛的運動能量能被它們大量的吸走,對發生車禍以后的司乘人員的損傷起到很大的作用,日本對邊坡的治理與綠化也非常重視,并且對于邊坡的綠化技術方法有二十種以上,最近幾年,我們國家的高速公路的建設力度在不斷加大,環保意識也有快速增強,因此,也越來越關注高速公路的綠化,并且,在綠化的技術與水平方面有了很大的提高。對于邊坡綠化技術需要堅持下面幾項原則:保證邊坡的穩定及安全、與周圍環境保持協調一致、避免重復建設以及盡量減少日常維護和管理的費用。
我國高速公路綠化分類
路體綠化、房建區綠化及互通立交區的綠化是構成高速公路綠化的三部分,因為土壤會由于高速公路的建設而遭到破壞,特別是在剖切山體時,所以,對路體的綠化有較高的要求,具體包括邊坡綠化、中央分隔帶綠化及兩側預留綠化帶綠化。房建區綠化不但要具有一定的景觀價值,與此同時還要有隔離噪音、遮蔭美化的作用。而對于互通立交區的綠化來講常規的有四種模式,一是色帶的模紋式綠化,二是簡單的疏林草坪式綠化或者僅以草坪綠化,三是喬灌草相結合的自然式立體綠化,四是以喬木為主成片成林的碳匯林模式。調查顯示,喬灌草與模紋色帶多用于城區立交,而其他模式多用于其它地區。
現階段我國高速公路綠化中出現的問題及對策
首先,我們國家的高速公路的綠化景觀設計并沒有把功能、藝術與科學性很好的結合在一起,沒有統一的規劃,造成各路段之間的景觀不協調與不連續的效果。高速公路的綠化模式也比較單一,沒有太多種類的植物。在全國尤其是在北方的高速公路綠化中用量最多的就是松柏類植物,造成景觀單調的視覺效果,沒有豐富的季相變化,沒有把我們國家的豐富多彩的植物資源充分的體現出來,也容易給司機造成視覺疲憊。在選擇樹種的時候也沒有充分考慮是否與周圍環境的生態相協調,尤其是我們國家的西北區很多高速公路在經過蘋果產區的時候依然采用大量的松柏類樹種,松柏類植物對蘋果樹易產生危害,容易引發蘋果樹發生銹病。其次,施工技術存在一定的問題,我們國家的高速公路的綠化施工人員沒有較高的素質,也沒有專業技術人員對他們進行指導,導致綠化植物沒有較高的成活率,進行補苗后的生長不均,沒有較好的綠化效果。在高速公路建設過程中,都有各種各樣的挖方護坡,兩邊許多巖石被暴露出來,造成景觀的不協調不美觀。
高速公路也是現代經濟迅速發展的產物,隨著人類不斷加強的環保意識,人們也越來越關注綠化。在合適的季節合適的地方種各種各樣的植物,采用多結構、多功能、多景觀的綠化形式,這是現代高速公路綠化景觀的必然趨勢。高速公路綠化景觀不但給行車帶來安全,在美化環境的同時還給生態保護帶來實際的意義,也只有不斷的研究與探索,才能把高速公路綠化景觀的綜合功能充分的發揮出來。
高速公路綠化首先應滿足公路行車的視距視線等安全功能要求,同時應做到點線面相結合的全方面發展,各有各的特色,避免相同的情景出現,通過不同植物品種的綠化,使灌木與喬木、闊葉與針葉、草本與木本相結合,按照近處是花草,中間有灌木,無處是喬木的原則,由路的兩側向外展天,使草花重占突出,喬木以及灌木作為襯托,使得一年四季常綠,并且又有分明的層次,針對互通、立交的設計可采用各種綠化的類型,使綠化景觀不斷得到豐富;對于各房建站點以及服務區來講,首先應結合區域特點,滿足房建站點對綠化設計的特殊要求,如遮蔭、吸塵、屏蔽高速公路上汽車的噪音等,同時因為這些地方也是工作或是休息的地方,也要兼顧園林美化的要求。可栽植一些有觀賞價值的灌木以及花草,或是比較珍貴的樹種和果樹類,做到標準高、投入多,才能達到有較快的效率,美觀的使用以及引人入勝的效果。充分把喬木、花草以及灌木充分的利用起來,在高速公路的路塹、分隔帶或是沿線地帶都用可以綠化的培植覆蓋起來,加強高速公路兩側的綠化修飾美化。
參考文獻:
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林業大學碩士論文范文2
關鍵詞:城市濱水區;親水性;
中圖分類號:TU984 文獻標識碼:A 文章編號:
當前,城市濱水區的建設正成為中國城市發展的重要議題,而濱水區如何處理好城市與水的關系,成為城市建設進程中引人注目的焦點之一。人的濱水游憩活動進行分析可以分成展覽型游憩、娛樂型游憩、購物型游憩、餐飲型游憩、居住型游憩、聚會型游憩、休憩型游憩、體育型游憩、觀景型游憩、散步型游憩等10個方面。不同的游憩活動對應不同的游憩空間,與水的關系也各自不同。
城市水環境設計一個很大的目的就是要創造一個舒適的親水環境,所謂的親水設計也就是能夠讓人們容易親近水的設計,親水設計主要包括親水護岸、親水平臺、親水步道與水域戲水空間四個方面。
1親水護岸
1.1護岸的立面形式
在城市濱水空間,人們總是希望能夠接近水域或者接觸到水,這就需要安全而友善的濱水邊緣,于是具有保護作用的護岸工程應運而生。人工護岸根據剖面形態的差別,可分為直立式、斜坡樣式和臺階式三種。直立式護岸就是將塊直立堆積或用鋼筋混凝土砌筑形成的護岸;斜坡式護岸是沿斜面堆砌石塊或做護坡,局部可以種植攀附力較強的植物;臺階式護岸為面向水面像階梯狀的護岸,臺階式護岸采用逐漸下降的階梯形狀,可以很容易接觸到水,同時還可以坐在臺階上眺望水面,這是一種親水性很高的護岸。
垂直型的混凝土護岸,以防洪作為唯一的設計準則,容易造成刻板生硬的濱水景觀,令人望而卻步。護岸的設計應盡量采用斜坡型或階梯型,并運用自然的綠地和碎石修筑,既可提供視覺的美感,又能種植樹木。常常對于濱水綠地采用不同高度臨水臺地的做法,按淹沒周期,分別設置了無建筑的低臺地,允許臨時建筑的中間臺地,和建有永久性建筑的高臺地三個層次。
1.2岸線平面形式
平直的岸線會帶來單調的景觀,客觀上造成單一的游憩活動。結合游憩活動的特征來改造岸線,不僅增加了臨水邊界的長度,創造了豐富的景觀,并且在功能上具有了更好的適用性。在具體選擇岸線形態時,應該考慮與實際的功能相結合。曲線的岸線形態與水的運動相適應,并且具有連續、多變的景觀角度,當曲線向內部凹進的時候容易形成聚心的心理感覺,適宜設置濱水步行道和營造視覺和活動的中心點,如小廣場和觀景平臺等。垂直的岸線形態為建筑的設置提供了方便,并且可以利用其圍合的空間作為一些水上運動(如游泳、潛水等)的場所。折線的岸線形態增加了更多的臨水岸線長度,適宜設置小型船舶??康拇a頭,也可以組織釣魚活動,例如福特·朗岱爾的濱水岸線設計成折線型,既方便了水上公交的??浚瑫r也形成了豐富多變的岸線形態。
2親水平臺
親水護岸的水體邊緣設置的小場地就成了親水平臺,親水平臺可滿足人們觀景休息類和與水接觸類等多種濱水游憩活動。例如丹麥哥本哈根市中心的親水平臺,它在平臺上設置了戲水池和室外游泳池等種不同形式的娛樂活動,它們為游人增添了更多的趣味性,多變的高程為游人提供了豐富的空間感受,而無障礙步行系統則加強了交通上的便利性。
對于親水平臺,這里特別應強調它的安全性。從安全性角度考慮,應設置親水平臺,親水平臺周邊2m范圍內水深應小于0.5m,平臺寬度≥2m。當親水臺階或平臺臨近深水側,應設置牢固的安全護欄。
3親水步道
親水步道連接了水域內外的環境空間,組織了人在水環境中的活動,是十分重要的連接元素。引入水空間的親水步道。從高地走近濱水環境空間的親水步道有臺階式和緩坡式。當坡度比較大、邊坡比較窄的時候步道設置不適宜垂直水面,不僅有不安全的隱患,并且在視覺上效果也不好。臺階式步道的臺階可以兼作休憩平臺,而緩坡可以結合無障礙坡道設計。一般來說,以大致平行水面的步道進入水環境空間增加了步行距離,且順應地勢變化,帶來更為豐富的環境體驗。
水中親水步道的設計還可以與凈水設施相結合,增加親水設計的生態性。以杉山惠一設計的日本三島市源兵衛川親水步道為例,源兵衛川本是一條來自
受到家庭廢水嚴重污染的河道,經過巧妙的多孔性火山巖石過濾池與凈化水路分流的設計后,把溪水的水質提高到可以供魚類繁殖、小孩玩水的程度。其親水設計是把過濾箱做成水面上的棧道,讓人有如涉水而過的感覺,有些岸邊過濾器則做成臨水賞魚的平臺。
4水域戲水空間
水域戲水空間的設計在內容上除了劃船、水上餐廳等傳統形式外,還包括室外游泳池,水中浮桶浮臺等新型的活動形式。
4.1室外游泳池
使用室外游泳池是一項很受歡迎的水上活動節目。它既能在游泳時親近自然,又能提供室內游泳池的安全和衛生。例如柏林的歡樂河上的室外游泳池設施。它有岸上的人造沙灘,水中的室外游泳池和連接兩者的木質棧橋,三部分構成。水中的室外游泳池有舊的船體改造而成,在較冷的季節里,室外游泳池里的水溫從早上8點到午夜一直維持在24攝氏度左右,而在冬季它將成為一個溜冰場。木質棧橋上設置了吊床,人們可以在上面盡情的享受日光浴。
4.2水中浮桶、浮臺
水中浮桶浮臺屬于特別適合兒童參與的一項活動,兒童可以坐在浮桶,在水中自由漂游,或站在浮臺上依靠繩索在水中來回移動,盡情享受水給他們帶來的樂趣。
4.3水中浮島、浮莊
水中的綠島隨著水位的變化而上下浮動,始終保持極強的親水感,可以讓置身其中的游人帶來遠離都市的喧囂,可以充分體驗大自然的寧靜與平和。
4.4水中植物種植池與浮床
水中植物種植池與浮床可以看成是岸上的綠化向水體的延伸,讓游人在視覺和心理上加強岸域和水域的聯系。
4.5水中噴泉與雕塑
水中噴泉與雕塑能給游人帶來不同尋常的新奇感和吸引力。在羅德島州的普羅維登斯,藝術家巴拿比·艾溫斯創造了“水與火”這一奇觀,它神奇地改變了位于城市商業區中的濱水區,使從前美麗但空曠的地方如今擠滿了人?!八c火”的設施包括一組噴火的火把,在烏那斯夸特克特河的中央,一團團從金屬火盆中噴射出的火焰在熊熊燃燒,這幅壯觀的景象還伴隨著世界流行樂曲展示給人們,無論是在幾里以外漫步、聊天或是觀看火焰的人都能聽得到。
5 總結
城市水環境中多創造親水空間能夠吸引人更多的使用環境,并且為人帶來很好的環境體驗。但是親水設計不能和生態性相違背,如果因為要親水這一個目的而要破壞水體本身的生態結構,那么這種親水設計就不是可取的。因此我們這里所提到的親水設計是在人們既能夠親近水又不與保護水體的自然生態相矛盾的親水設計。親水設計不應成為表現自然隸屬于人類這種環境倫理觀的設計,而應該更多的尊重水體本身。
參考文獻:
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林業大學碩士論文范文3
關鍵詞:內源激素;高效液相色譜;板栗(Castanea mollissima Bl.)
中圖分類號:S-3 文獻標識碼:A 文章編號:1674-0432(2011)-03-0076-1
植物的內源激素與植物生長發育的基本規律和代謝過程的調節控制都密切相關[1]。果樹的許多生命活動過程都與激素息息相關,對激素的定性、定量研究是調控果樹生長發育、開花結實的一種十分重要的途徑和手段[2],但是植物激素的含量很少,用傳統的方法無法實現精確的研究,隨著現代儀器的快速發展使我們對植物激素含量的定性、定量研究成為現實,尤其是色譜儀器的快速發展,幾乎成為植物激素測定的必備設備,這為我們從宏觀上用植物生長調節物質進行調控植物花芽分化、生長發育、開花結果、落葉休眠奠定了重要的基礎[3]。
使用高效液相色譜法測定植物內源激素比較準確,在植物痕量測定方面起著重要作用[4]。用高效液相色譜法測定植物內源激素,提取方法和色譜條件是關鍵,通過反復實驗,獲得測定板栗(Castanea mollissima Bl.)枝條頂芽內源激素合適的實驗條件、純化方法和色譜條件。
1 采樣方法
采用完全隨機區組試驗設計,三次重復,每株采八個不同方位枝條上的頂芽,每次50個,包入錫箔紙中,進行標記,放入液氮罐中,帶回試驗室,放入-60℃超低溫冰箱中備用。
2 液相儀器分析條件
2.1 主要儀器和試劑
主要儀器:Agilent 1100型高效液相色譜儀。
主要試劑:色譜用甲醇、高純水、0.1M冰醋酸和其他化學分析試劑。
2.2 色譜條件
色譜柱:Waters C18 3.9×150mm,4.5um;
流動相:甲醇:水:冰醋酸=46.0:53.5:0.5;
柱溫:36℃;進樣量:15uL;流速1.0mL/min;
標樣:ZR、IAA、GA3、ABA均為Fluka產品。
采用外標峰面積定量方法,梯度洗脫,洗脫條件如表1:
表1IAA、GA3、ABA和ZR梯度洗脫條件
3 板栗頂芽內源激素提取純化方法
首先,從超低溫冰箱中取出樣品,用精確度為0.1mg的化學分析天平迅速準確稱取0.5g樣品,在研缽中加入冰醋酸研磨直至成為漿狀,研磨好的漿狀物倒入準備好的小燒杯中,用甲醇沖洗研缽數遍,保證漿狀物全部洗入燒杯中。研磨時注意避光,需要在研缽中加入少量抗氧化劑,用錫箔紙封住燒杯口,放入恒定3℃冰箱中浸提過夜。
其次,從冰箱中取出燒杯,加入不溶PVP(聚乙烯聚吡咯烷酮),進行攪拌,大約8min左右,進行抽提、棄殘渣、過濾,將過濾液倒入濃縮瓶中,加入幾滴氨水,用旋轉蒸發儀器進行濃縮(溫度不要超過40℃,然后用試管定容在5ml,放入冰箱中冷凍過夜(溫度在-18℃以下)。
再次,取出樣品,放入離心機中進行離心,離心前用水配平,轉速在4500轉以上,離心15min左右,離心后取出試管,倒出上清液于燒杯中,調ph值大約為2.8左右,定容至10ml試管中,用等體積的乙酸乙酯萃取三次,取出上清液倒入濃縮瓶中,在38-40℃溫度下用旋轉蒸發儀濃縮至干。
第四,濃縮后的濃縮瓶用流動相溶液溶解,然后定容到1ml青霉素管中,放入高效液相儀器中測定樣品中激素含量。
4 實驗結果與討論
在上述色譜條件和樣品提取純化方法下,樣品中IAA、GA3、ABA、ZR激素可以獲得比較好的分離效果,從圖1中可以看出,基線比較平直,峰型好,拖尾少,能夠獲得比較好的色譜圖;從圖2中可以看出標樣中GA3、IAA、ZR和ABA激素的峰高、峰型和保留時間,同圖1中樣品混合液中峰1、峰2、峰3和峰4比較符合,說明樣品混合液中峰1、峰2、峰3和峰4分別是IAA、GA3、ABA和ZR,因此,本實驗采用的色譜分離條件和樣品提取純化方法適用于板栗頂芽內源激素定量和定性測定。
注:1-GA3(赤霉素);2-IAA(生長素);3-ZR(玉米素);4-ABA(脫落酸)。
參考文獻
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林業大學碩士論文范文4
(一)相關的生物技術網站
充分利用現代生物技術相關的網站資源是“基因工程”課程教學的重要一環。這些網站實時反映了生物技術最前沿的理論和技術成果,可以對教學內容作出實時補充與更新。因此,筆者在教學過程中,向學生推薦了一些生物類網站,如影響力較大的中文網站生物谷、生物秀,目前國內內容最專業、系統最完善和技術最先進的生物醫藥門戶網站生物通。另外,國外還有許多生物技術類的網站,通過這些網站可以檢索到開展基因工程研究的信息資料。筆者多年的教學實踐證明,通過課程教學中實時鏈接相關網站進行教學以及學生自己在課下瀏覽網站內容,可以大大激發學生學習“基因工程”課程的興趣。
(二)文獻數據庫
高校和科研院所的文獻數據庫可為“基因工程”課程教學內容提供有益的補充。全國各高等院校與科研院所圖書館購買多個中英文全文數據庫,中文數據庫主要有CNKI科技期刊全文數據庫,維普中文科技期刊全文數據庫,博士、碩士論文全文數據庫等,其中與基因工程相關的期刊包括“中國生物工程雜志”“生物工程學報”“農業生物技術學報”“分子植物育種”等。此外,“中國農業科學”“林業科學”等綜合性期刊也有與基因工程相關的動態信息。此外還有各類專業性較強的生物技術類期刊。通過對這些數據庫相關期刊文獻的追蹤,可以讓高校師生與研究人員及時獲取新的基因工程知識、掌握基因工程研究領域的前沿動態信息。
二、網絡資源在“基因工程”課程教學中的應用
(一)利用網絡資源,提高備課效率和質量
互聯網的最大優勢是可以突破時空界限,實現資源的共享。利用互聯網很容易獲取關于基因工程的有關信息資料,例如精品課程教學大綱、教學課件、教案、實驗教學錄像等。教師可根據教學內容需要,通過搜索引擎得到同行的教案與課件等教學素材。教師借鑒這些素材,不僅節約了時間,提高了備課效率,而且還博采眾長,有效地提高了備課質量。
(二)利用網絡資源,追蹤科學前沿,更新教學內容
進入21世紀,生命科學研究領域的理論和技術不斷創新,而“基因工程”是集生命科學理論和生物技術于一體的實踐性很強的一門課程,更新的理論和技術不斷應用到基因工程的研究和實踐應用中。因此,僅依靠教材不能實時反映基因工程相關領域的最新理論、技術及其應用現狀?;ヂ摼W信息量大且更新速度快,它為教學提供了豐富的信息資源和最新的學科資訊。例如,筆者2006年在“基因工程”課程教學過程中,在講授基因表達調控———基因沉默技術這一節內容時,實時地介紹了因發現RNA干擾機制而獲得2006年諾貝爾生理醫學獎的美國科學家安德魯•法爾和克雷格•梅洛)的有關實驗,進而將RNA干擾技術的最新研究進展技術進行了重點介紹,包括amiRNAi的原理和優點、WMD3軟件使用方法、amiRNAi技術應用案例分析等內容。
(三)利用網絡資源,豐富教學手段,提高教學效果
網絡資源內容具有多樣性,不僅可以利用文字和圖片,做到圖文并茂,而且還可以利用動畫、視頻等多媒體資源,使抽象、難懂、枯燥的內容變得生動、直觀、形象,便于學生理解和記憶,這樣不僅能夠激發學生的學習興趣,還能提高學生的學習效率。例如,教師在介紹PCR、qPCR技術原理時,可通過Flas將在PCR管中的一個生化反應以形象可視的方式進行展示,使抽象的原理變得直觀易懂,學生很容易理解且印象深刻,同時教師的教學效率也得到了提高。另外,教師在進行RNAi內容教學時,通過一個視頻短片對RNAi的作用機制進行了生動展示和講解,使復雜的調控機制化繁為簡,再加上短片配有背景音樂,使教學成為一種享受。
三、網絡資源在“基因工程”課程教學中的應用效果
筆者在“基因工程”課程教學中,充分利用網絡資源,實時補充和更新生命科學前沿的理論與技術成果,利用Flash、Movie等聲像資料開展動態直觀的教學活動,不僅使學生拓寬了知識面,而且極大地激發了學生的學習興趣。按照北京林業大學教務處設計的學生對教師教學質量評價的標準,對生物技術專業135名學生的調查發現,92.7%的學生認為“基因工程”這門課程合理地運用了網絡、多媒體等現代教育手段;93.2%的學生認為教學內容豐富充實、信息量大,而且還補充了新知識;93.0%的學生通過“基因工程”課程的教學活動激發了學習興趣,學習成績得到了提高。筆者綜合分析了11個評價項目,發現各項累計得分為93.45分,取得了較好的教學效果。
四、總結
林業大學碩士論文范文5
論文摘要:植物組織培養過程中,褐變問題普遍存在,與菌類污染和玻璃話現象并稱為植物組織培養的三大難題。針對褐變難題,本文結合相關資料,對影響褐變的因素作了全面分析,褐變的影響因素是復雜的,隨植物種類外植體的部位幾生理狀況培養基及培養條件的不同而危害的程度有所不同,對這些因素是內因外界影響作用作了分析并針對這些因素提出了相應的解決措施。
在許多植物組織培養過程中,常遇到褐變問題。褐變主要發生在外植體,在植物愈傷組織的繼代、懸浮細胞培養以及原生質體的分離與培養中也經常發生。褐變產物不僅使外植體、細胞、培養基等變褐,而且對許多酶有抑制作用,從而影響培養材料的生長與分化,嚴重時甚至導致死亡。本文探討植物組織培養中褐變現象的影響因素、機理及防范措施,對我們進行科學研究或工廠生產,包括植物組織的培養,原生質體、懸浮細胞和植物器官的培養都有著十分重要的現實意義。
1褐變原因及危害
褐變是指外植體在培養過程中,自身組織從表面培養基釋放褐色物質,以致培養基逐漸變成褐色,外植體也隨之進一步變褐而死亡的現象。褐變的發生與外植體組織中所含的酚類化合物數量多少及多酚氧化酶活性有直接關系。很多植物,尤其是木本植物都含有較高的酚類化合物,這些酚類化合物在完整的組織和細胞中與多酚氧化酶分隔存在,因而比較穩定。在切割外植體時,切口附近的細胞受到傷害,其分割狀態被打破,酚類化合物外溢。對于外植體本身來講,酚類物質從外植體切口向外溢出是一種自我保護性反應,可誘導植保素或無物理屏障的形成,以防止微生物侵染組織。但酚類很不穩定,在溢出過程中與多酚氧化酶接觸,在多酚氧化酶的催化下,迅速氧化成褐色的醌類物質和水,醌類物質又會在酪氨酸酶等的作用下,與外植體組織中的蛋白質發生聚合,進一步引起其他酶系統失活。從而導致組織代謝活動紊亂,生長停滯,最終衰老死亡。此外,由于組織的老化病變也會使多酚氧化酶激活而引起褐變。
2褐變產生的機理
2.1非酶促褐變
非酶促褐變是由于細胞受脅迫或其他不利條件影響所造成的細胞程序化死亡或自然發生的細胞死亡,即壞死形成的褐變現象,并不涉及酚類物質的產生。徐振彪等[1]將生長正常的愈傷組織轉移到含NaCl的培養基中,組織周圍尤其是接觸培養基部分發生褐變,但培養基中沒有看到擴散的褐化物質。當溫度升高時繼代保存時間過長,也會發生此類現象。但這種褐變若采取適當措施或者愈傷組織適應了脅迫環境就不再發生了[3]。
2.2酶促褐變
目前認為植物組織培養中的褐變主要是由酶促褐變引起的,培養材料變褐主要是由傷口處分泌的酚類化合物引起的[4]。酶促褐變如同一般的酶促反應,其發生必須具備三個條件,即酶、底物和氧。引起褐變的酶有多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶等。從初次培養和繼代培養過程中試管苗的褐變程度和PPO的活性來看,表明PPO活性的高低是引起培養材料褐變的關鍵。引起褐變的酶的底物主要是酚類化合物,按其組成可分成3類:苯基羧酸(包括鄰羥基苯酚、兒茶酚、沒食子酸、莽草酸等),苯丙烷衍生物(包括綠原酸、肉桂酸、香豆酸、咖啡酸、單寧、木質素等),第三類是黃烷衍生物(包括花青素、黃酮、蕓香苷等),但并非所有的酚類物質都是PPO的底物。
在正常發育的植物組織中,底物、氧氣、PPO同時存在并不發生褐變,是因為在正常的組織細胞內由于多酚類物質分布在細胞的液泡內,而PPO則分布在各種質體或細胞質中,這種區域性分布使底物與PPO不能接觸。而當細胞膜的結構發生變化和破壞時,則為酶創造了與PPO接觸的條件,在氧存在的情況下使酚類物質氧化成醌,進行一系列的脫水、聚合反應,最后形成黑褐色物質,從而引起褐變。
3褐變產生的影響因素
影響植物組織培養褐變的因子是復雜的,因植物的種類、基因型、外植體部位及生理狀態等不同,褐變的程度也有所不同。
3.1植物種類及基因型不同的植物和不同的基因型決定了不同的褐化程度。在組織培養中,品種褐化難易可能是與該品種中多酚類物質含量的多少及多酚氧化酶(PPO)活性的差異有關。
3.2外植體部位及生理狀態外植體的部位及生理狀態不同其褐化程度不同,同時,不同時期和不同年齡的外植體在培養中褐變的程度也不同。
3.3培養基成分培養基成分中的無機鹽、蔗糖濃度、激素水平等對褐變的程度的影響尤為重要。另外,其pH值也與褐變程度有較大關系。
3.4培養條件溫度過高或光照過強,均可加速被培養組織的褐變。不利環境條件都能造成細胞的程序化死亡,溫度是誘導程序化死亡的主要因素[1]。
4防止外植體產生褐變的對策
從理論上講,酶促褐變可以通過以下三種方法加以抑制:一是除去引起氧化的物質——氧;二是捕捉或減少聚合反應的中間產物;三是抑制有關的酶。實際操作上,下列措施是被認為行之有效的。
4.1適當外植體的選擇
取材時應注意選擇褐變程度較小的品種和部位作外植體。成年植株比幼苗褐變程度厲害,夏季材料比冬季及早春和秋季材料的褐變要嚴重。冬季的芽不易生長,宜選用早春和秋季的材料作為外植體。王異星[5]用荔枝無菌苗不同組織的誘導試驗表明,莖最容易誘導出愈傷組織,培養2周后長出淺黃色的愈傷組織;葉大部分不能產生愈傷組織或誘導出的愈傷組織中度褐變;而根極大部分不產生愈傷組織,誘導出的愈傷組織全部褐變。
4.2對外植體的處理
通過對較易褐變的外植體材料的預處理能減輕醌類物質的毒害作用。處理方法如下:外植體經流水沖洗后,在2-5℃的低溫下處理12-24小時,再用升汞或70%酒精消毒,然后接種于只含有蔗糖的瓊脂培養基中培養5-7天,使組織中的酚類物質部分滲入培養基中。取出外植體用0.1%漂白粉溶液浸泡10分鐘,再接種到合適的培養基中。若仍有酚類物質滲出,3-5天后再轉移培養基2-3次,當外植體的切口愈合后,酚類物質減少,這樣可使外植體褐變減輕或完全被抑制。何瓊英等[6]用抗壞血酸預處理香蕉吸芽外植體,能減輕外植體褐變,從而提高芽叢誘導率。
4.3適宜的培養基
培養基的成分與褐變程度有關,要考慮所選培養基的狀態和類型。
4.3.1適當的無機鹽濃度張妙霞等[7]在柿樹組織培養防止褐變所進行的試驗中,4種培養基的無機鹽以改良MS(大量元素減半)和1/2MS的效果最好,MS的效果較差,結果證明低濃度的無機鹽可促進外植體的生長與分化,減輕外植體褐變的程度。徐振彪[1]在對玉米幼胚耐NaCl愈傷組織的篩選表明,隨NaCl濃度升高,褐變現象加重。
4.3.2適當和適量的激素王異星[5]在荔枝的組織培養過程中,培養基中添加1mg/LBA+0.5mg/L2,4-D時,愈傷組織較堅硬,增殖緩慢,易產生褐變。培養基中添加1mg/LBA+1mg/L2,4-D時,愈傷組織淺黃疏松,增殖也快。
4.3.3培養基的硬度在一定范圍內,瓊脂用量大,培養基硬度大,褐變率低[8],這可能是培養基的硬度影響了酚類物質的擴散速度的緣故。
4.3.4培養基中水的硬度的影響硬度低的蒸餾水褐變率低,而使用硬度較高的自來水,褐變嚴重,甚至會出現褐變死亡[8]。這可能是配制培養基的水改變了培養基中無機鹽的濃度,間接地影響了植物外植體的褐變。
4.3.5培養基的pH值在水稻體細胞培養中,pH值為4.5-5.0時MS液體培養基可保持愈傷組織處于良好的生長狀態,其表面呈黃白色,而pH值為5.5-6.0時,愈傷組織嚴重褐變[9]。一般來說,酸性環境(pH值為4.5-5.0)不利于褐變過程的發生[10]。
4.3.6培養條件如溫度過高或光照過強,光照會提高PPO的活性,促進多酚類物質的氧化,從而加速被培養的組織褐變。高濃度CO2也會促進褐變,其原因是環境中的CO2向細胞內擴散,細胞內CO32-增多,CO32-與細胞膜上的CO32-結合,使有效CO32-減少,導致內膜系統瓦解,酚類物質與PPO相互接觸,產生褐變[11]。因此,初期培養要在黑暗或弱光下進行。
4.4添加褐變抑制劑和吸附劑
褐變抑制劑主要包括抗氧化劑和PPO抑制劑。在培養基中加入偏二亞硫酸鈉、L-半胱氨酸、抗壞血酸、檸檬酸、二硫蘇糖醇等抗氧化劑都可以與氧化產物醌發生作用,使其重新還原為酚[12]。由于其作用過程均為消耗性的,在實際應用中應注意添加量,其中L-半胱氨酸和抗壞血酸均對外植體無毒副作用,在生產應用中可不受限制。在水稻細胞的培養基中,添加植酸(PA),可防止褐變,PA分子中眾多的羥基產生抗氧化作用,使生色物質的含量下降或PA與PPO分子中的Cu2+結合,從而降低了其活力。陳學森等[13]在對植酸在銀杏組織培養中應用的研究中也證實了植酸具有抑制多酚氧化酶活性的作用。
常用的吸附劑有活性炭和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。活性炭是一種吸附性較強的無機吸附劑,能吸附培養基中的有害物質,包括瓊脂中的雜質、培養物在培養過程中分泌的酚、醌類物質以及蔗糖在高壓消毒時產生的5-羥甲基糠醛等,從而有利于培養物的生長。粉末狀的活性炭與顆粒狀的活性炭相比吸附性更強,一般在培養基中加入1-4g/L的活性炭。在使用過程中應注意,盡量用最低濃度的活性炭來對抗褐變的產生,因為活性炭的吸附作用是沒有選擇性的,在吸附物質的同時,也會吸附培養基中的其他成分,對外植體的誘導分化會產生一定的負面影響[14]。而聚乙烯吡咯烷酮(PVP)是酚類物質的專一性吸附劑,在生化制備中常用作酚類物質和細胞器的保護劑,可用于防止褐變[15]。
4.5進行細胞篩選和多次轉移
在組織培養過程中,經常進行細胞篩選,可以剔除易褐變的細胞。在外植體接種1-2天后應立即轉移到新鮮培養基中,能減輕酚類物質對培養物的毒害作用,降低抑制作用,使外植體盡快分生,連續轉移5-6次,可基本解決外植體的褐變問題。
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林業大學碩士論文范文6
【關鍵詞】市場比較法;房地產;評估;問題
市場法(Market Comparative Method),又稱市場比較法、市價比較法、交易實例比較法,是通過類似房地產的成交價格來求取估價對象價值的方法,較具體地說,是選取一定數量、符合一定條件、發生過交易的類似房地產,然后將它們與估價對象進行比較,對它們的成交價格進行適當的處理來求取估價對象價值的方法。是房地產估價三大方法之一,其理論基礎為替論。市場法的本質是以房地產的實際成交價格為導向來求取房地產的價值。 但房地產評估價格并不是對實際成交價格的簡單的歸納、整理、修工兩者無論在理論上還是在實際表現上均有一定的差異。下面對兩者的差異進行分析。
依據經濟學原理相同的商品具有相同的價格。但房地產實際成交價格并非如此,相間房地產的實際成交價格并非完全一致,這主要是由于房地產開發商不斷調整房地產出售價格以適應市場需求或達到一定的目的,只要能滿足開發商的預期目的,開發前就可以出售房地產;從購買者的角度出發,只要能滿足購買人的要求,在其允許的經濟條件下,購房人就可以購買。因此,由于開發商的預期目的、預期的收益率、購房人的經濟條件、購房人的偏好等情況的不同,就引起同樣房地產實際成交價格的差異。造成房地產實際成交價格差異的因素。具體表現在以下幾個方面:
(1)房地產成交價格受成交量的影響和一般商品類似,一次性購買的房地產數量越大,價格一般越低,零散出售一般價格較高。
(2)房地產成交價格受房地產現狀的影響房地產開發商為了提前回收資金、降低銀行負債率、降低開發風險,在建設期就升始預售房地產其預售房地產價格一般低于建成后同類房地產價格。
(3)房地產成交價格受付款方式的影響開發商為了迅速回收資金,一般對一次性付款的情況給予適當優惠。從理論上講,優惠價格應該是分期付款價格的貼現值。
(4)房地產成交價格與房地產銷售速度的關系房地產開發商為了迅速出售房地產,也經常采用降價銷售的方法。對于類似房地產若開發商適當降低其售價,銷售速度較快,反之則銷售速度較慢。
(5)房地產的申報價格存在瞞價或變相瞞價的情況為了逃避政府應征收的稅費,有的房地產申報價格低于其實際成交價格。有的則采用聯營、聯建、聯合開發的形式變相買賣房地產。
綜合以上分析,房地產成交價格受諸多因素的影響,由于不同因素的影響,同一宗房地產會有不同的成交價格,因而建立在房地產成交價格基礎上的市場比較法的評估價格具有個確定性。因此,采用市場比較法進行房地產價格評估,對其評估價格應有明確的定義,否則就失去了意義。
房地產評估價格的定義,應主要明確以下幾點:
(1)不同的評估目的具有不同的價格定義例如房地產抵押價格評估。因考慮到房地產的變現能力及擔保債權期間房地產價格變動等風險回素,評估價格一般保守,其評估價格應是在整體出售并且出售時的價格。而對于一般的資產評估如股份制改造、現值評估等,其價格定義與抵押價格評估就有所不同。同一宗房地產在不同評估日目的的評估價格不同。
(2)房地產價格評估應是特定時點時的評估價格隨著時間的不同,房地產自身狀況、房地產市場狀況等因素隨之變化,房地產價格也隨之變化,因而房地產評估價格必須有確定的時間點。
(3)在具體的房地產價格計估中,評估人員對具體的價格定義應有明確的認識房地產評估人員必須明確評估出的房地產價格是很容易成交時的價格、較易成交時的價格、較難成交時的價格還是有行無市時的價格。
總之,房地產評估價格并不是簡單的對房地產成交實例價格做交易日期、區域因素等因素修正,而要結合其房地產評估的價格定義、評估目的對比實例實際成交價格進行調整,以使其達到要求的價格定義的價格。因此,房地產評估機構應該采取的積極措施:
(1)加快自身的信息化、網絡化建設,建立和完善市場信息資料庫,實現信息化管理 評估過程是以基礎數據資料為依據,應用評估理論、方法進行分析、對比、計算的過程。市場法進行評估尤其需要大量的市場交易參考資料。在計算機技術和網絡技術的飛速發展,以及房地產市場日益規范、成熟的前提下,評估機構獲得市場信息的渠道會越來越多,此時的房地產評估機構,應該抓住機遇,利用計算機和網絡,積極建立起自己的市場信息資料庫,強化評估信息的搜集、處理、儲備能力,這樣才能及時得到想要的交易案例,提高評估結果的正確性,使市場法得到更好的應用。
(2)提高評估人員的執業水平和經驗技能 采用市場法對房地產進行評估時,要求評估人員能夠全面準確地調查市場資料,合理選擇比較案例,并將比較案例與評估對象進行全面、細致的比較,確定適當的修正系數,以保證評估結果的準確性。因此評估人員的執業水平和經驗技能的高低與評估結果的準確性有著緊密的關系。但是目前國內缺少能夠熟練運用市場法的高素質人才制約了市場法的應用,說明我們的評估人員運用市場法的執業技能還有待提高。
(3)改善觀念,提醒各界加強對房地產市場法應用的關注 除了政府盡快建立健全房地產評估的法律、法規體系,保障市場法的應用環境外,行業學會的引導也有利于提醒各界加強對房地產市場法應用的關注。建議行業學會采取的引導措施有:
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