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工程分析報告范文1
關鍵詞:勐邦水庫 除險加固 綜合效益 分析
一、工程概況
勐邦水庫是2002年我省病險水庫除險加固工程之一,是西雙版納州勐??h三座中型水庫中的一件。水庫除險加固對水庫下游的勐遮鎮、勐海縣城以及流沙河流域內的六級電站有著舉足輕重的作用,是促進勐??h的工農業生產發展和經濟繁榮必不可少的水利工程。
勐邦水庫建成于1960年,位于西雙版納傣族自治州勐海縣勐遮壩邊緣的南木冷混河上,地理坐標為東經100°18′,北緯21°54′。南木泠混河是流沙河支流,屬瀾滄江水系。水庫距勐??h城23km,距景洪80km,距昆明783km。水庫的專用公路與佛雙公路、昆洛公路相連,交通便利。
二、勐邦水庫除險加固工程鑒定及審批立項情況
2000年5月,西雙版納州水利電力局組織專家對水庫進行了大壩安全鑒定,鑒定結果認為:勐邦水庫大壩為不能保證安全運行的Ⅲ類壩。2001年4月9日,省水利廳下發《關于勐??h勐邦水庫大壩安全鑒定意見的通知》(云水農水[2001]35號文)給予確認大壩安全鑒定的結論,并對水庫主要險情作了高度的概括。
根據《關于做好重點中型病險水庫除險加固工程前期工作的通知》(云水規計[2001]17號文)的精神,勐??h水利電力局委托云南省水利水電勘測設計研究院對勐邦水庫除險加固工程進行初步設計工作,2001年10月初步設計工作完成,提交了《勐??h勐邦水庫除險加固工程初步設計報告》,初步概算總投資2436.07萬元。2002年2月21日,云南省發展和改革計劃委員會和云南省水利廳連文下發《關于勐海縣勐邦水庫除險加固工程初步設計報告的批復》(云水規計[2001]110號文)對初步設計報告作了批復,審定該項目概算總投資2400.72萬元。2001年11月20日,云南省水利廳下發《關于勐??h勐邦水庫除險加固工程水土保持發案初步設計的批復》(云水水保[2001]111號文)將工程投資列入工程投資概算中。2002年6月27 日,云南省發展和改革計劃委員會和云南省水利廳連文下發《云南省2002年第二批病險水庫除險加固工程中央預算內專項資金(國債)股計劃的通知》(云計投資[2002]659號文)確定該項目資金的來源:中央1600萬元,省級480萬元,地縣321萬元。
三、勐邦水庫除險加固工程項目各部位險情情況及參數 (一)水庫實際抗御洪水標準低于部頒水利樞紐工程除險加固近期非常運行(500年一遇)洪水標準。溢洪道渲泄500年一遇洪水時,水位已超過溢洪道側墻50cm,洪水無法安全下泄。
(二)大壩不滿足抗震穩定要求。在地震工況下,下游坡最小抗滑穩定安全系數為0.716,遠低于規范要求。
(三)大壩蟻害嚴重。壩體內蟻道貫通前后壩坡,蟻巢空洞達1~2m3,致使大壩漏水嚴重,局部出現管涌現象,危及大壩安全。
(四)副壩壩底老涵洞始建的無壓圬拱涵與后襯砌的鋼筋砼面漏水嚴重,滲漏量大于10L/s,并且老涵洞過水能力不能滿足下游工農業用水需求。
四、勐邦水庫除險加固前各項指標及發揮的效益 勐邦水庫是以灌溉為主,兼顧工業供水、鄉鎮人畜飲水和水產養殖并兼有一定削峰和滯洪功能的綜合利用水庫。
勐邦水庫加固前設計總庫容為2460×104m3,相應校核洪水位的防洪庫容為396×104m3,水庫實際運行最高水位控制在1243.0m,低于正常蓄水位2.5m,有效庫容減少553萬m3,實灌面積僅為2萬畝(毛面積),灌溉水量利用系數為0.623,年用水量為1377.5×104m3;鄉鎮及工業年用水總量為545.6×104m3;年度漁業總產量為15噸。由于水庫存在著較大的安全隱患,對下游勐海縣城、勐遮鎮、勐遮農場及國家二級企業景真糖廠共11萬人的生命和財產安全存在著較大的威脅,同時影響到下游19.43萬畝耕地的正常運作。
五、勐邦水庫除險加固工程的主要內容及投資完成情況
勐邦水庫除險加固由四個單位工程組成:第一單位工程是圍堰工程;第二單位工程是主、副壩加固工程(包括主壩、副壩加固培厚工程,副壩壩底輸水涵洞的封堵工程,主、副壩防滲墻工程及主、副壩帷幕灌漿工程);第三單位工程是溢洪道改建工程;第四單位工程是輸水隧洞新建工程。
依照工程建設的法定程序,在上級及地方行政主管部門的監督下,在業主的精心組織以及各參建單位的積極努力和配合下,在工程建設過程中嚴格執行相關規范及規程的要求,順利進行了各項工作的招投標、施工圖設計、施工及監理工作。該項目工程計劃總投資為2400.72萬元,實際投資審定為2446.45073萬元,比計劃投資增加了1.9%。
六、勐邦水庫除險加固后的各項指標完成情況 勐邦水庫加固后設計總庫容增為2540.4×104m3,相應校核洪水位的防洪庫容增為423.74×104m3,解決了水庫的安全隱患。
勐邦水庫加固后實際灌溉面積增為4.5萬畝,灌溉水量利用系數達到0.75,年用水量增為1530×104m3;鄉鎮及工業年用水總量增為664.08×104m3,設計保證率達到95%;年度漁業總產量增為25噸。
七、勐邦水庫除險加固后的綜合經濟效益、生態效益及社會效益情況 勐邦水庫除險加固工程實施后,保障了當地人民生命財產安全;保證了下游4.5萬畝耕地的灌溉用水,同時下游人民生活飲用水、工業用水要求也得到了保證。由于勐邦水庫是勐海大型灌區續建配套與節水改造規劃中重要水源工程之一,水庫加固后,提高了渠道輸配水能力,緩解了用水矛盾,為當地農業、農村經濟發展提供了有力的支撐和保障。通過項目建設,取得了以下幾方面的效應:
(一)
社會經濟效益
勐邦水庫位于勐遮壩區上緣,是勐遮壩區的第一水源點。勐遮壩自然資源豐富,是版納州水稻和甘蔗生產基地。勐遮在“十五”期間主要是進行農業種植結構調整,改造中低產田,重點發展優質品質水稻,推廣冬季農業,改善農業設施。在工業上,景真糖廠在縣政府投入了大量的資金進行技術改造后,年生產總值突破8億元人民幣大關,生產效益平均年遞增8.5%。在農業上,勐邦灌區“十五”計劃和2015年發展目標為:到2005年,農業生產總值為1.18億元,平均年遞增5.5%;到2015年,農業生產總值為2.4億元,平均年遞增5%。水庫庫區養殖面積增加,漁業產量增加了67.7%。
水庫加固后保證了人民生命財產的安全,保證了勐遮鎮的工、農業用水需求,促進勐遮鎮的工、農業發展。保證了農業高產穩產、農民增收、社會安定,同時對發展優質、高效農業,農作物起到了促進作用,農業種植結構的調整,增加了農民收入,為當地的經濟發展帶來了生機和活力。
(二)生態效益
勐邦水庫加固后在生態環境中最突出的影響有:加固后其防洪庫容增加,水庫的削峰和滯洪能力增強,在大洪水來臨后可以蓄滯部分洪峰,保證下游河道不被過度的沖刷,降低河流區域生態環境的惡化。
工程分析報告范文2
針對資產公司鋼材貿易所處的行業發展趨勢,面臨的競爭環境,充分結合資產公司的競爭優劣勢分析,資產公司制定了鋼材貿易初期發展戰略,確定了從傳統貿易商向供應鏈綜合服務商轉型的經營思路,在穩固并壯大鋼材貿易的前提下,增強供應鏈一體化管理綜合服務水平,最終將資產公司鋼材貿易打造為南昌市乃至江西省領先的供應鏈一體化價值創新服務平臺。
為研究資產公司鋼材貿易合資公司的可行性,資產公司對南昌市鋼材貿易現狀進行了細致的摸底,現將掌握情況總結如下:
一、資產公司鋼材貿易發展現狀及瓶頸
1、資產公司鋼材貿易發展現狀
歷年鋼材貿易供應量、收入及毛利明細表
單位:萬元
年份
供應量(萬噸)
收入
成本
毛利
毛利率
2013年
1.21
4,100.27
3,863.06
237.21
5.79%
2014年
3.45
10,625.22
9,854.48
770.74
7.25%
2015年
9.94
21,974.86
20,662.26
1,312.60
5.97%
2016年
6.12
13,261.04
12,708.91
552.13
4.16%
2017年
4.61
15,809.19
15,421.89
387.30
2.45%
2018年
3.67
14,073.56
13,717.63
355.93
2.53%
2019年(預估)
1.8
7.000.00
6.822.90
177.10
2.53%
從上以上表格中可以分析出資產公司主體業務鋼貿供應量從2015年開始逐步下行,同時也說明了現有的鋼材貿易經營模式改變不了目前鋼貿現有的囧境。
2、資產公司鋼材貿易發展瓶頸
通過以上分析得出鋼貿業務逐年下滑的主體原因是受困于鋼貿經營模式上的缺乏創新等因素,資產公司鋼貿在苦苦支撐的幾年中不斷摸索,不斷學習,總結出導致目前逐年產量下行的局面主要有以下3點:
1、甲供鋼材的取消導致資產公司鋼貿在沒有任何緩沖期或保護期就直接面對千變萬化的鋼材市場時顯得有心無力,再加上沒有自購權,在鋼材價格波動劇烈時對鋼材采購成本控制及供應及時性上比較被動。對于我們來說,施工單位的鋼材需求是可以比較準確預測的,如果可以在某個時段相對低價采購一批鋼材,在供應及時性及收益上將會有更好的表現。遇到突發事件還要按時上會,層層審批,時效性慢,相對鋼材市場上摸扒滾打,靈活多變,手段百出的競爭對手時處處被動挨打,毫無反手之力。最終結果,對外開展鋼貿業務始終無法突破,鋼貿產值無法持續上行。
2、資金上的支持沒有根據業務的發展進行調整,眾所周知,鋼貿行業是一種資金密集性行業,對資金有著較高的要求?!扒蓩D也難為無米之炊”,我們也經歷過反復談判,好不容易把鋼材業務談下來的時候卻因為沒有資金的支持而放棄的歷程。
3、在鋼材貿易的實際操作過程中,一般要經過業務洽談、合同簽訂、貨物采購、貨物銷售、支付結算、款項回收等基本環節。鋼材貿易因鋼材單價高,且為項目施工主材,對資產公司的資金需求量大,目前因多數施工單位長期拖欠貨款,也成為制約資產公司鋼貿擴大發展的瓶頸。針對施工單位的拖欠貨款,資產公司經過多次實地了解和溝通,施工單位拖欠貨款的主要原因還是因為工程進度計量時間跨度過長等各種客觀原因造成。但不可否認這種現狀已嚴重影響資產公司資金的正常運作及鋼材業務擴展。
二、南昌市鋼材貿易經營模式分析
為更好完成集團對資產公司鋼貿發展設定的目標,資產公司現有的鋼貿經營模式亟需轉型升級,找尋新的競爭優勢。目前,整個鋼材行業由于受產能過剩影響和經營模式單一化兩個因素的影響,幾乎所有鋼貿公司在近些年遇到了發展瓶頸,而近年來南昌鋼材市場的低迷,鋼材貿易效益嚴重下降,導致許多鋼貿公司經營困難,“大浪淘沙始見金”,雖然鋼貿公司間的同質化競爭愈發激烈,但還是有幾家鋼貿公司的業績卻逆流而上,傲視群雄,成為這個行業的領導者。
1、采購(托盤)
具有雄厚資金實力的鋼貿公司多采用這種經營模式,行業內稱之為“托盤”業務。此類鋼材貿易業務經營方式簡單直觀,即通過合同鎖定鋼材采購價格,托盤方委托鋼貿公司到鋼廠訂貨或市場采購,托盤方則要一定期限內(一般在7天左右),一次或幾次提貨完畢,而鋼貿公司通過自身的渠道優勢賺取價差。由于托盤方在采購前已找好了終端客戶,簽訂了銷售合同并鎖定了價格。這種經營模式在鋼材采購量及鋼材收款有保障的前提下容易做大產值,但收益很低,風險幾乎為零。因為市場價格上漲則鋼貿公司享受利潤;市場價格下跌則鋼貿公司承擔風險。托盤方不享受超額利潤也不承擔市場風險。
南昌鋼貿托盤的領導者江西省出版集團公司供應鏈管理分公司,該公司自 2014年成立至今,供應鋼材約45萬噸,創造產值約20億元。
2、自主經營(獨資)
由鋼貿公司直接向鋼廠或鋼材銷售單位付貨款采購鋼村,放在倉庫、碼頭、車站或鋼材交易市場進行銷售。采購前沒有確定銷售下家,價格隨行入市,也叫“零售”。這種方法受市場價格波動影響巨大,市場價格上漲則利潤豐厚:反之,市場價格下滑,則無人問津,造成虧損,如果不出貨則資金壓力沉重,無法掌握銷售速度。
南昌鋼貿自主經營的領導者江西偉夢鋼貿有限公司,江西偉夢近3年來鋼貿規模發展迅速,2016年年銷量在45萬左右,2017年年銷量在58萬左右,2018年年銷量在83萬左右。的鋼廠有方大特鋼,九江萍鋼,新余鋼廠和馬鞍山馬鋼。銷售模式主要為直送終端和市場批發,同時還會在期貨上進行套保。其優勢在于體量大,鋼廠多。劣勢在于所需資金量大,時常會出現周轉困難;發展速度過快,自營能力跟不上,鋼廠普遍強勢,加大了虧損風險。隨著和鋼廠協議量的增加,目前已經感受到較大壓力,其公司已經準備減量。
3、合資經營(強強合作)
鋼貿合資經營模式是近幾年來鋼材市場化合作的一種比較典型的鋼貿經營模式。從投資分析角度來看也是可行的,用相對較少資金獲得較多收益。從風險角度來看,合資經營模式風險共擔,有效的降低資金風險。
合資經營的領導者江西南昌旅游集團新創實業發展有限公司(以下簡稱新旅集團),新旅集團通過跟民營企業參股合資的模式成立貿易公司,新旅集團控股但不參與經營,經營由民企負責。新旅集團模式在鋼材市場運營有3年多,鋼廠有九江萍鋼和新余鋼廠,目前年銷售量在36萬噸左右,年產值超10億元。從新旅集團近3年來的運營結果來看,總體表現較為穩定,風險小,產值高,利潤率較低。
三、資產公司的優勢及展景
資產公司作為一個具有很強本地資源性的公司,一方面,在品牌形象、資產規模、客戶資源、業務基礎、經營人才及規范化管理等方面具備了一定優勢,另一方面,也存在著落后于市場需求、企業功能單一、專業化程度低、缺乏網絡支持、信息系統不健全等制約企業發展的“瓶頸”。目前南昌市正處在“大投入、大建設、大發展”城市發展理念當中,相對于以上幾種鋼貿經營模式而言,合資經營模式優勢更明顯。除獲取對方資金和渠道擴大鋼材貿易規模,進一做大產值增加收益,合并財務報表,還可以有效降低資金風險。
從理論上來說,合資模式具備國有制和私有制的優點,即可促進鋼貿公司生產力的進一步發展,也可以提高員工積極性和創造性,同時也有利于籌集資金,引進和利用外資加快發展壯大。合資鋼貿公司結構和組織方式靈活多變,可以快速適應鋼材市場靈活的密集性資金運作模式。
資產公司合資經營也有先例,早在2013年為了充分發揮各自的優勢,提高整體競爭力,實現優勢互補、效益共贏的合作經營目標,資產公司作為甲方在南昌地鐵2號線混凝土項目上與南京蘭葉集團、南昌三建進行了戰略合作。三方合資成立有限責任公司,實行獨立核算、自主經營、自負盈虧,資產公司按出資比例為控股方,由集團委派董事長和財務總監。近3年共銷售328.1萬方混凝土,產值107,823萬元。
合資公司目前首要任務是解決資產公司今年產值困境,在解決今年產值困境后,預計成立合資公司第一年將為南昌軌道交通集團創造產值3億元人民幣,第二年約5億元人民幣。資產公司需要持續高效整合現有及遠期的地鐵資源,同時借助合作方的市場經營手段與市場資源,做大做強合資公司鋼材貿易,我們要把現在單一的鋼材貿易衍生為多元化鋼材貿易以及物資配應一體化公司,最終我們要完成合資公司的大宗物貿采供銷改革,打造合資公司大物貿概念。
四、合作公司簡介
江西斯蒂爾貿易有限公司成立于2017年4月27日,地址位于江西省南昌市經濟技術開發區昌北鋼材大市場7號樓,注冊資本壹仟萬元整,是一家鋼材批發和零售的貿易有限公司,主營螺紋鋼、線材、盤螺,各種管材、板材、型材等,經營品牌為南鋼、新鋼、萍鋼、馬長江。公司至創辦以來,在激烈的市場競爭下,秉承“敬業、誠信、共贏、合作”的經營理念,努力耕耘,奮發進取,勇于開拓,培養了一批具有高素質的市場營銷隊伍,分別設立了總經辦、業務部、財務部、行政部、人事部,現有員工20人,其中本科人員8人,專科6人,有專業技術職稱3人。
近年來公司快速成長,業績屢創新高,財務狀況穩健。2017年銷售鋼材2.06萬噸,營業額9200萬。 2018年銷售鋼材18.5萬噸,營業額8億。2019年1-7月銷售鋼材9.11萬噸,營業額3.35億。公司堅持質量第一,服務為本的原則,曾為江西建工第一建筑有限責任公司、江西建工第四建筑有限責任公司、江西康成建設工程有限公司、海南工控國鑫國際貿易有限公司、江西嘉業建設工程集團公司、中禾元豐建設工程有限公司等公司的多個工程提供優質鋼材。公司通過近幾年的發展,已經形成了自己的核心的競爭力和競爭優勢。
五、成立合資公司的主要事項
合資公司的成立不是簡單的聯合,更不能是泛泛合作,為此,資產公司鋼貿經營在轉型發展中,明確了發展方向,明晰合資的主線。為使資產鋼貿業務發展的步伐邁得更快,走得更穩,結合此前10余次的實地調研得出以下建議:
1、建議合資公司初期注冊資金1000萬人民幣,后續根據鋼貿業務發展規模進行追加,結合自身及合資方鋼貿業務摸底,
2、建議合資公司成立之初我方鋼貿利潤不低于銀行同期銀行貸款利率,在鋼材甲供實現以后按股比分成。
3、建議為避免合資雙方在初期因經營理念管理方式、行為準則的沖突致使效率低下、資產公司占股不超過百分之三十,資產公司為控股方且合并財務報表。
4、建議為了合資公司長遠健康發展和保障投資收益,做大做強集團融資平臺,提升相關人員在合資公司中的創造性,主動性,應建立完善相關合資公司工作人員的股權激勵制度。
六、鋼材甲供特點及優勢
根據集團公司的戰略部署,資產公司早在2013年以地鐵2號線臥龍山站為試點,開展了鋼材甲供及地鐵相關工程的鋼材貿易拓展業務。此前,由集團林潔總經濟師帶隊,我司會同集團企管部、合約部對同行業的鋼材甲供操作模式進行了全面深入的學習調研。在借鑒其他地鐵城市的經驗和做法的基礎上,結合南昌地鐵的實際情況,制定并出臺實施了一系列鋼材甲供管理辦法和措施,為保證地鐵工程鋼材質量,實現工期和成本控制,以及集團融資平臺的建立,奠定了夯實的基礎。
1、鋼材實行甲供,能夠更加有效地控制項目成本
目前各大中型建設工程項目一般都實行總承包制,如由施工單位自行采購鋼材對甲方來說雖然省事,但施工單位大多要求鋼材供貨商墊資,而施工單位所付出去的鋼材供貨款墊資成本大多通過各種不同形式轉嫁給了甲方。
而甲方供應鋼材,實行的是大批量集中采購,通過公開招標,中標單位可以與國內鋼材大廠簽訂戰略合同框架協議,從而成為國內鋼材大廠的重點客戶,具體體現在鋼材供應及時性和穩定性上有著非甲供可比擬的優勢。
2、鋼材實行甲供,能確保項目品質及工程質量。
施工單位供應鋼材,從品牌上得不到保證,就算甲方指定國內大廠某品牌,施工單位經常會以某大廠品牌的鋼筋規格不齊,要求增加品牌,從而降低施工單位采購鋼材的成本。而甲供鋼材能夠有效的控制材料來源,避免項目建設過程中施工承包商以次充好。
3、鋼材實行甲供,加速鋼材供貨周期、推動項目整體進展。
施工單位供應鋼材,往往資金不足,鋼材供應商往往發貨斷斷續續,造成鋼材供應不足,從而影響工程進度。
而甲供鋼材不存在資金不足,且合同約定甲供鋼材品種、數量、品牌,預先避免糾紛的發生,甲供鋼材應有效的避免施工方在工程施工過程中有關材料方面的扯皮問題由于批量采購,同時甲供鋼材供應商提前備貨充足,不會出現部份規格斷貨而影響工程進度。
綜上,甲供鋼材的重要性在于節省投資、控制鋼材質量,避免花高價買到低質量的產品,資產公司通過甲供鋼材貿易實現盈利,成為集團融資平臺,南昌地鐵鋼材甲供勢在必行。
七、需要解決的問題
1、政策上希望集團能夠在推動所有地鐵項目所用鋼材全部列為甲供項目,授權合資公司特許經營,并通過鋼材甲供制度確保鋼材資金的及時回籠上給予支持。
工程分析報告范文3
關鍵詞: 高速公路;改擴建;保通措施
中圖分類號:U41 文獻標識碼:A 文章編號:1006-4311(2012)22-0114-020 引言
伴隨著公路的高速發展,對原有高速公路的改建、交匯施工的工程越來越多,由此引發的施工與通行之間的矛盾越來越突出。因高速公路設計時速高,車輛行駛速度快,經常因施工與保通處置不當引發交通事故。如何協調高速公路改擴建工程中施工與車輛通行之間的矛盾,采取何種措施保障被施工高速公路的通行順暢,如何將設計好的保通措施在路面上進行逐步實施,是擺在廣大公路工作者面前的一項艱巨任務,現根據商周高速公路上跨濟廣高速公路現澆箱梁施工中所采取的保通措施與實施步驟進行詳細分析,希望能為以后的高速公路改擴建施工起到一定的幫助。
1 商周高速跨濟廣高速現澆箱梁保通措施
1.1 工程施工簡介 商周高速二期工程和濟廣高速公路交匯于濟廣高速樁號K348+080處,工程設上跨濟廣高速12孔現澆箱梁橋一座,現澆箱梁采用滿堂支架施工,濟廣高速為正在通行的道路,日交通量約1000輛,80%為小型車,車流量不大,但車速高。為保證商周二期高速公路施工與濟廣高速車輛運營共同進行,在經過實地調查的基礎上,認真研究分析,制定了詳細的施工保通措施。
1.2 保通措施 跨線橋A匝道橋在K348+080處上跨濟廣高速,橋面寬度19米,橋下凈空大于5.5米。為現澆箱梁結構,施工方案為在濟廣高速路面上搭設滿堂支架施工,左右兩幅在位于中央分隔帶處分別預留通行門洞各一處,門洞寬度4.5米,高度大于5.0米,確保正常運營車輛的通行。行車道由雙車道改為單車道通行,既保證了原有高速公路車輛的正常通行,同時又滿足了高速公路改擴建工程的施工。如圖2所示。
1.3 保通措施的具體實施步驟 第一步:施工警示標志設置。在高速公路路面進行施工作業,第一步需要設置醒目的施工警告標志,此項步驟參照公路《公路養護技術規范》(JTG H10)2009中的規定執行,共需設置“前方施工”標志、“限速”標志、“合并車道”標志、“向左或向右”轉向標志、“禁止通行”標志、“限速解除”標志等,按照公路養護技術規范預留足夠的警告距離,并在重要位置增加爆閃燈、電子警察等警告標志,安排專職保通人員監控路面車輛通行情況。警告標志布置完后,即可進行下一步驟的實施。
第二步:隔離門洞施工區,施工預留門洞。搭設滿堂支架,需先行設置施工臨時性通行通道,預留通道兩側門柱下設置寬1米,高0.6米混凝土防撞墩,在防撞墩上設置門柱支架,支架上方架設工字鋼橫梁。施工時將作業區與行車區采用反光水馬隔離墩嚴格分離,通行車輛,施工車輛及人員由上一個高速公路入口進入,然后行至作業區施工,施工完畢由下一出站口駛出。施工期間安排專職保通人員指揮車輛,施工車輛到場后將警示隔離墩打開一道缺口,進入作業區后馬上封閉隔離墩,防止其他通行車輛誤入,預留通道施工完畢后轉入滿堂支架搭設第三道工序。
第三步:隔離滿堂支架施工區,搭設滿堂支架。門洞搭設完畢后,進行剩余滿堂支架的搭設,剩余滿堂支架搭設在預留通道外側直至路線以外。搭設門洞時所設置的施工警告標志一直保留,然后設置作業區警示水馬隔離墩,將作業區與行車區嚴格分離,仍按照第二步驟行駛作業。在作業區外側的波形梁護欄打開寬度8米的開口,施工所需模板、鋼筋等設備由此進入施工區,不施工時立即封閉,防止路外人物進入高速公路。
此三步實施完畢,現澆箱梁滿堂支架搭設工作就進行完畢,即可按照正常施工工序進行現澆箱梁的模板支護、鋼筋綁扎、混凝土澆筑等一系列的工程施工。
工程分析報告范文4
一、原實驗失敗原因
1.實驗材料準備不充分
(1)在新課程中,該實驗安排在12月份至次年1月份。由于洋蔥根尖是較理想的實驗材料,但是天氣寒冷,根尖的培養需要很長時間,而且此時的生根率不高,如果不準備充足的根尖,往往會出現實驗材料不足而無法開展實驗的情況。
(2)由于洋蔥根尖的有絲分裂活躍時期在根長約5cm時,上午10:00至下午2:00。不可能所有班級都在這段時間進行實驗。因為按照教材上講的用鮮活材料做實驗,學生不可能都取到處在細胞有絲分裂最活躍時期的根尖,所以會影響實驗效果。
2.教材要求剪取2~3mm根尖進行解離
由于根尖太小,解離后又很滑,因此不容易用鑷子取出,即使取出解離酥軟的根尖,也容易把根尖破壞。此外,在染色時又會出現根尖太短的現象,它浸沒在染液中很難找到,更難取出。
3.教材要求將材料在清水培養皿中漂洗10min
由于實驗時間太長,要完成實驗時間很緊張。
4.根據教材要求制作的裝片效果差
(1)“用鑷子弄碎洋蔥根尖”,這樣制成的裝片會出現根冠細胞、生長點細胞、生長區細胞雜亂排列重疊嚴重的現象,不利于學生觀察。
(2)教材描述:“在裝片的蓋玻片上再加一片載玻片,然后輕壓?!边@樣操作會出現壓片后拿去載玻片時帶起蓋玻片的現象,破壞臨時裝片,導致實驗失敗。
二、改進方法
1.材料準備
避開寒冷,在天氣溫暖的時候培養根尖。此時的洋蔥生根率高,根生長旺盛。待根長到約5cm時,在上午10:00至下午2:00剪取健壯的根2~3cm進行固定,以便隨時取用。操作如下:將剪好的根尖放在固定液中(固定液的配制:一份冰醋酸+3份95%酒精)15~30min,再取出放入70%酒精中保存。由于固定好的根尖都處在有絲分裂最活躍時期,不僅是做裝片的理想材料,還可以根據需求量來準備根尖。
2.解離
取固定好的洋蔥根,將有生長點的一端放在解離液中,另一端架在裝解離液的培養皿沿上,充分解離3~5min。
3.漂洗
待根尖酥軟后,用鑷子夾住沒有解離的一端取出,用細流水漂洗解離端約2~3min。
4.染色
將漂洗后的根尖用吸水紙吸去表面的水,把解離過的一端放進盛有質量濃度為0.01g/mL的龍膽紫溶液的培養皿中,另一端置于培養皿沿上,染色3~4min。如果染色劑質量濃度大或染色時間長,就會出現染色過深的現象,從而影響觀察。
5.制片
用鑷子將染色后的根尖取出,用吸水紙吸去根尖上的多余染液,再用剪刀剪取處理端的根尖2~3mm,放于載玻片上,加一滴清水,蓋上蓋玻片,再在蓋玻片上蓋一層有載玻片大小的吸水紙,最后在吸水紙上加一片載玻片,垂直用力壓載玻片,力求一次成功,使材料成云霧狀,此時細胞分散開來。當取下上層的載玻片及吸水紙時,不僅不會帶起臨時裝片的蓋玻片,而且裝片的觀察效果很理想。
工程分析報告范文5
一、職業院校校園文化建設的必要性
校園文化是指學校這個特殊場所所具有的特定的精神環境和文化氛圍,是各類學校教育不可缺少的重要組成部分,是學校師生在學習、工作和生活過程中所形成并共同擁有的價值觀、信仰、態度、作風和行為準則。具體而言,校園文化可分為物質、制度、觀念三個層面。從內涵上體現為顯性課程和潛在課程兩方面,顯性課程指學校規定學生必須掌握的知識、技能、思想、觀點、行為規范等;潛在課程包括校園建筑,文化設施和環境布置等有形環境和校風、教風、學風、人際關系、集體、輿論、心理氣氛以及校園群體觀點、信念等,而校園精神和校園價值觀等觀念形態的東西是校園文化的深層結構和核心內容,對校園的生存和發展都具有指導意義,是與辦學質量連接在一起的。事實證明:健康和諧的校園文化能給師生創造一個有形而莊重的“磁場”,能在無形中統攝全體師生的靈魂,起到“潤物細無聲”的教育魅力。它具有陶冶性情、規范行為,培養健全的人格,促進健康的心理、養成良好的習慣;還有利于培養學生正確人生觀、價值觀、世界觀;還可以增強學生集體意識、競爭意識、創新意識;因而,校園文化在學生思想品德教育和良好行為習慣中發揮著獨特的作用,校園文化建設是社會主義精神文明的需要,也是學校素質教育的需要,它在學校育人過程中發揮著不可低估的作用。
職業教育是我國教育體系中一個重要的組成部分,是我國國民經濟和社會發展的重要基礎。職業院校是與當今社會經濟發展相適應而存在的,其校園文化建設有其自身的特點。
首先,從職業院校的性質來看,它不同于普通中小學,也不同于普通高校,它主要培養生產、經營、管理、服務一線的高素質技術人才。它以“以服務為宗旨,就業為導向,以能力為核心,以學生為本位”。它要將教、學、做貫徹于教學始終,培養社會職業人,因而,職業院校的這些特質決定了其校園文化的特殊性。
其次,從學生主體來看,有其獨特的“個性”。這些學生有理想,有報負,有上進心,有求知欲,有為目標的實現不懈努力的精神。但由于他們基本上都經歷了升學的挫折,在求學過程中有特殊的經歷,與其他同齡人相比,更加敏感,自尊心更強,在遇到困難時易放棄,學習、生活中常常表現出更多的困惑、自卑,行為習慣不佳,因此他們需要更多的關注、愛護。他們渴望尊重、賞識,渴望立業、成功。那么,要把這些特殊的培養主體培養成合格的職業人才,加強職業院校校園文化建設勢在必行。
二、職業院校語文課程的特殊性
語文課作為各類學校教育開設的一門公共基礎課,它在人才培養過程中發揮了其他課程無法替代的作用,彰顯了自身獨特的魅力,在整個課程體系中具有獨特的價值,而職業院校的語文課程更具有特殊性。
第一,它不同于中小學基礎教育階段,主要是夯實學生語言文字的基礎,培養學生閱讀、理解、表達、寫作的能力,為今后高層次的教育打下堅實的基礎;也不同于普通高校的語文課,主要是培養學生的文學素養,提高人文精神和綜合素質;在職業院校,語文課主要為專業課服務,突出人文性、工具性,將人文素質教育浸透于語文教學的始終,并以此提升職業能力和職業素養。同時培養學生思維的開放性、創造性及解決問題的主動性、自覺性,為學生可持續發展奠定良好的基礎。
第二,在職業教育的過程中,語文課與其他學科相比,它是通過形象生動的經典美文的教學,語文實踐活動的開展,來凈化學生的心靈,陶冶學生的性情,使之養成良好的習慣,形成健康人格,同時還培養了學生分析問題、解決問題的能力及交際溝通能力,從而全方位地提高學生的綜合能力。
第三,從教育對象需求來看,更需要校園文化的熏陶和感染。這些教育群體,在學習理念上,注重專業課,輕視公共課;注重眼前利益,忽略長遠發展的潛能;往往把人的職業性和社會性割裂開來。同時,學生的文化基礎較差,學習習慣、行為缺失嚴重,面對這一特殊的對象,只有通過寓教于樂的方式,采取學生樂于接受的方式,激發學生的主動性、積極性,鼓勵他們參與課堂,參與實踐,從而培養學生的團隊協作精神和競爭意識,培養學生的語文素質和能力。職業院校語文課的特殊性決定了它在職業院校校園文化建設中獨特的地位和作用。
三、職業院校校園文化建設中語文課程功能研究的可行性
(一)以校園環境為陣地,發揮語文課程在校園文化建設中的作用
學校無閑處,處處熏陶人。陶行知先生說:“一草一木皆是情。”蘇霍姆林斯基說過:讓校園的每一塊墻壁都會“說話”。環境不僅是學生生活的空間,也是培養學生文明素質的載體。整個校園,就是思想品德教育的大課堂,要讓學生視線所到的地方都賦予生命。在這一特定的校園環境中,語文課程在校園文化育人中發揮著獨特的作用。因為不論是有形環境還是無形環境中都是以語言文字為載體彰顯思想,交流情感,滋潤心田。如校園宣傳欄、警示標語、教學大樓的布置、教室內外的名人名言、學生的學習園地、校園題詞、校訓、教學儀器使用的注意事項等等都承載著校園文化的內涵。這些感人肺腑的語錄,鼓舞人心的題詞,鞭策言行的語言都凝聚著前輩們或廣大教育工作者的思想,其目的是讓學生在濃郁的文化環境中得以感染、陶冶、凈化,從而明事理、懂禮儀、知廉恥、辯是非、曉丑惡,最終形成正確的人生觀、價值觀、審美觀。因而,在校園環境建設中,語文課有其得天獨厚的優勢。
(二)以課堂教學為陣地,發揮語文課在校園文化中的建設作用
語文課不同于其他課程,它是以生動的形象影響著學生,以思想情感感染學生的。不論是指導學生學習弘揚傳統文化的經典作品還是現當代時尚美文,在學習過程中,作品深刻的思想情感總能觸動學生的情思,震撼著學生的心田,洗禮著學生的靈魂,不知不覺,學生會用榜樣人物鼓勵自己,用成功的事實鞭策自己,用正確的人生道理指導自己。因而,語文課教學過程就是心靈凈化,境界提升、性情陶冶的過程,是接受真善美,拒絕假惡丑的過程,是完成自我成長的過程,是激發學生創造力和生命力的過程。也許只是一次感動就改變了學生的世界,也許只是一次啟發就成就了學生的將來,也許只是一次鼓舞就讓學生拋棄了自卑??傊Z文課獨特的人文性是其他課程不可比擬的,也是校園文化建設中主要的內容。
(三)以豐富多彩的校園活動為陣地,發揮語文課在校園文化建設中的作用
活動是學校生命力所在,是對學生進行思想教育的有效載體。而校園活動又是語文課最好的實踐活動。也是加強校園文化建設中的一種行之有效的形式。如在傳統節日,法定節日開展豐富多彩、形式多樣的詩文朗誦、演講、辯論、主題班會、講故事等,既豐富了校園文化,又對學生進行了愛國主義、集體主義、社會主義、中華民族精神的教育。如在“學雷鋒活動”、運動會、教師節等活動中,鼓勵學生撰寫倡儀書,通訊稿件等,既增強校園文化的氛圍,又加強學生的思想道德教育。也可以在課余生活中,要求學生創辦主題鮮明的黑板報、??⑿?,撰寫廣播稿,這既鍛煉了學生主動創作的能力,又使學生獲得心靈上的滿足。因而,充分發揮語文課在校園文化建設中的作用不僅必要,而且可行。
(四)從學生自身發展、成長的歷程中渴求一種沁入心脾的校園文化的滋養,而語文課更具有利的條件
作為職業院校的學生,個性鮮明,有理想、有活力、有上進心,但由于社會閱歷所限,升學諸多挫折,加之成長中的種種困惑,感悟能力等諸因素的影響,他們對美好人生的追求有很多不解,對美的事物理解僅停留在表面。為此,語文課可以結合職業院校學生的實際,舉辦形式多樣的美學、禮儀、職業生涯規劃,交際等講座。同時,采用學生參與互動的形式,用優秀社會價值觀念、道德標準、行為模式感染學生使其樹立信心和遠大的目標,用知識、禮儀、修養武裝他們,讓他們真正明白:只有作為,人生才是美好的,虛度年華,碌碌無為,實在是對生命的浪費,對父母的不孝,對社會的不恭。因此,以學生心理情感需求為出發點,發揮語文課在校園文化建設中的作用也是可行的。
(五)以加強師德建設為陣地,發揮語文課程在校園文化建設中的作用
前蘇聯教育家烏申斯基說:“在教育中,一切都應以教育者的人格為基礎……,只有人格才能影響人格的發展和形成?!痹趯W生面前,教師就是一本無字德育書,學生時刻都在閱讀。教師是立校之本,而師德師風則是教育之魂。要使學生成為品格高尚的人,就必須加強師德建設。因此,通過舉辦教師學習班、組織教師參加各種活動,樹立良好的師德,規范教師的言行舉止,感染學生的行為,養成良好的教風。而這些加強師德的活動,也是以語言文字為載體而具體實施的。因而,語文課在教師師德師風促校園文化建設中發揮著獨特的作用。試想一下,一個知識淺陋,語言粗俗,舉止不雅,品行不端的教師怎么能培養出德才兼備的學生。因而,以加強師德建設為陣地,也可以發揮語文課程在校園文化建設中的作用。
(六)從學校培養人才的目標出發,發揮語文課在校園文化建設中的作用
學校的天職是為社會培養大量合格的人才。而學校不論是制度文化還是精神文化都以語言文字來承載。著名的教育家烏申斯基說過:一個民族把自己全部的精神生活的痕跡都珍藏在民族的語言里。語文是民族文化的載體,文化的抽象與概括,外延與傳遞,都必須借助語文這個工具和載體。因而,對學校而言,其校園文化都是以語文為工具,承載著思想、情惑、價值趨向,發揮著獨特的育人的效力。不論是校報、校刊、校園宣傳欄布置,校園設計,還是校園規章制度,學校各項文件,都傳達出校園文化的精華,竭盡全力地為培養職業人才服務,而校園的這一切活動和文化熏陶都離不開語言文字的承載。因而,語文課程在學校育人的整個過程中,滲透著校園文化的內涵,發揮著應有的作用。
(七)從社會對人才需求的角度,發揮語文課程在校園文化建設中的作用
職業教育是我國教育的一種類型,它主要是培養一大批面向生產、經營、管理、服務第一線的高素質技能型人才。社會對這些學生的要求不僅包括應具有綜合素質,還包括要具備綜合能力,因此,良好的職業素質和職業能力是學生在今后職場的激烈競爭中立于不敗之地的關鍵,他們必須具有社會人和職業人的屬性,這也是職業院校校園文化建設中必須明確的因素,在今后的職場上除了擁有精湛的專業技能,還應具備溝通、交際、讀寫,應變等相關能力,而這些能力絕大多數依賴于語文課程的訓練才能實現??紤]學生的就業和將來的發展,就必須在校內根據社會對人才的需要來對其進行培養,而其中語文課程較之于其他課程更有先天性的優勢。
總之,校園文化建設是各類學校高度關注的一項內容,它關系整個校園的生存和發展,與學校的辦學質量聯系在一起,是學校重要的可持續發展要素之一,它以形象直觀的表達方式,把思想教育寓于各種具體可感的情境中,而語文課程以其獨特的性質和形式在校園文化建設中發揮著重要作用。只有充分挖掘這一資源,利用這一資源,才會使職業院校校園文化的內容更豐富,形式更多樣,效果更顯著。
(本文系陜西省教育科學“十二五”規劃2012年度課題 編號:SGH12568)
參考文獻:
[1]楊文欽.高職語文與校園文化建設探討[J].漯河職業技術學院學報,2009,(06).
工程分析報告范文6
摘 要:目的:觀察肺瘤平膏及其拆方干預體外培養體系中Dc抗原遞呈功能的作用并探討其分子機制。方法:建立體外人血PBMc誘導分化成熟Dc的誘導培養體系,從健康人外周血中分離獲得PBMC,采用多種細胞因子(TNFα、IL-4、GM-CSF)聯合誘導,獲得了分化與功能相對成熟的DC,并采用流式細胞儀檢測技術,對肺瘤平膏及其拆方含藥血清干預成熟DC與抗原遞呈功能相關表面分子表達,及其對DC分泌IL-12水平影響進行初步研究。結果:肺瘤平膏可上調DC與抗原遞呈功能相關膜分子MHC-Ⅱ、CD80、CD83、CD86及CD40的表達,并促進Dc分泌IL-12水平,其芳中扶正部分的作用不容忽視。結論:在扶正培本治則指導下的肺瘤平膏能夠調節DC抗原遞呈功能,提高機體的抗腫瘤免疫監視功能。
關鍵詞:樹突狀細胞:肺瘤平膏:抗原遞呈
樹突狀細胞(Dc)是目前體內已知功能最為強大的抗原遞呈細胞(antigen presenting cells,APC),其最顯著的特征是能攝取、加工及遞呈抗原,刺激初始型T細胞(naive Tcells)的活化和增殖,從而啟動機體早期特異性抗腫瘤免疫應答。由于DC對細胞毒T細胞(CTL)識別并殺傷腫瘤細胞,以及正常機體免疫監視功能有著十分重要的意義。本研究通過對肺瘤平膏及其拆方干預健康人外周血經多種細胞西子(TNFα,IL-4、GM-CSF)聯合誘導分化成熟DC膜分子表達,揭示該藥調節早期抗腫瘤免疫作用機制。
1 材料和方法
1.1 材料
正常人新鮮濃縮白細胞:由北京市紅十字會中心血站提供。
1.2試劑及儀器
Ficoll,Biosciences公司提供;Foetal calf 8erlLrn,Sigma公司提供;MHC-Ⅱ(FITC)F-Mab、CD40(FITC)F-Mab、CD80(FITC)F-Mab、CD83(PE)F-Mab、CD86(PE)F-Mab由Biolegend公司提供;rhTNF-α、rhIL-4、rhGM-CSF由TBDSCIENCE公司提供;IL-12兔抗人ELISA試劑盒,由武漢博士德生物工程有限公司提供。
FACSort流式細胞儀,美國Becton Dickinson公司生產;LP400型全自動酶標儀,為法國巴斯德公司產品。
1.3 方法
1.3.1 肺瘤平膏及其拆方含藥血清的制備分別制備肺瘤平膏全方、益氣方(黃芪、黨參)、解毒方(白花蛇舌草、草河車、敗醬草)、益氣解毒方(白花蛇舌草、草河車、敗醬草、黃芪、黨參)中藥的含藥血清,具體方法如下。
①藥物:肺瘤平膏,由中國中醫科學院廣安門醫院制劑中心統一制備,批準文號:(98)京衛藥研字[058]DF-1657號;經生理鹽水稀釋為終濃度為1.71g/mL后備用。其余各拆方草藥均購自廣安門醫院中藥房,劑量以原方為準,制成浸膏后備用,其終濃度為分別為含生藥2.32、3.62、2.77g/mL。②動物:大白兔。③血清采集方法:大白兔隨機分為5組,分別于空腹時灌服生理鹽水和各組中藥湯劑10mL,中藥用藥劑量均按照動物體表面積折算成等效劑量,連續給藥4天,共計7次,末次給藥后2h從兔耳緣靜脈采血8-10mL,離心取上清夜,將同組兔血清混合,56℃水浴滅活30min,0.22μm微孔濾膜除菌,分裝,置于-20℃冰箱中保存。
1.3.2 DC的培養與鑒定①DC培養:采集正常人外周血濃縮白細胞,Ficoll―Hypaque密度離心分離PBMC,將經分離得到的PBMC,置入37℃5%CO2培養箱中培養2h。采用貼壁法,去除巨噬細胞,加入含有細胞因子完全PMI一1640液(含IL-4 IOOU/mL、GM-CSFIS0ng/mL、TNK-αS00U/mL)。置入37℃,5%C02培養箱中培養,隔日半換液。在倒置顯微鏡下每日連續觀察細胞的生長狀態及形態變化。待成熟后,1%胎盤蘭染色,光鏡下細胞計數后,根據需要,將細胞數調整到1×106/mL備用。分別用MHC-Ⅱ(F1TC)、CD80(F1TC)、CD83(PE)、CD86(PE)、CD40(F1TC)標記后,常溫下靜置30min,加入PBS,1500r/min,10離心洗脫,流式細胞儀檢測其純度及表達。
②DC形態學特征及組化鑒定:光鏡下形態學特征觀察:于倒置顯微鏡下,每日觀察細胞的生長狀態及形態學變化,并拍照記錄。掃描電鏡觀察:將培養第10天收獲得到的DC滴于多聚賴氨酸包被的玻片,37℃溫育4h后,用2.5%戊二醛固定1h,0.01M PBS沖洗3次后,1%鋨酸固定90min,梯度30%、50%、70%、90%、100%乙醇脫水,掃描電鏡觀察細胞形態,攝片。
S-100蛋白免疫組化染色:吸取培養第10天的DC。均勻涂片,I抗用鼠抗人S-100單克隆抗體,按SABC-AP常規免疫組化方法,進行染色。對照組用PBS代替I抗。中性樹酯封片。光鏡下觀察200個細胞并計算陽性細胞的百分率,攝片。
1.3.3 DC表面分子流式細胞儀檢測成熟DC分為6組:全方組、益氣方組、解毒方組、益氣解毒方組、DC對照組及單核細胞組。于DC培養第4天,細胞中加入相應的中藥含藥血清1mL,空白血清組加入不含藥血清lmL,終濃度約為17%;DC對照組及單核細胞組中加入不完全1640液1mL;隔日半換液。每日倒置顯微鏡下觀察其生長狀態及形態的變化。
采用雙標法,將培養第10天PBMC及IX:分別采用MHC一Ⅱ(FITC)、CD80(FITC)、CD83(PE)、CD86(PE)、CIMO(FITC)FITC威PE標記的熒光探針,常溫避光,反應30min。洗脫未結合探針,流式細胞儀測定。FITC―IgG1、PE-IgGl陰性參照抗體(購自Biolegend公司)。同樣實驗重復3次,取均值,記錄結果。
1.3.4 DC培養上清分泌IL-12水平的檢測于培養第10天收集各組DC,離心后吸取上清,按照人血清IL-12ELISA試劑盒說明書,常規操作;室溫下,用酶標儀于530nm波長處,檢測OD值;根據標準曲線,換算成IL-12含量(pg/mL)。
1.4 統計學方法
采用t檢驗和方差分析。
2 結果
2.1 DC鑒定
2.1.1 人外周血來源DC的形態學特征觀測 倒置顯微鏡觀察:在培養初期細胞貼壁生長,有的呈簇狀聚集,第3日細胞逐漸散開,并從壁上脫離,細胞形態各異,有的呈梭狀,以懸浮生長為主。培養5天后,胞體明顯增大,大小約
為單核細胞的2-3倍,形態不規則,異型性較大,細胞表面伸出偽足或呈毛刺狀,呈現典型的樹突狀細胞形態特征。扶正方組細胞體積及核仁增大明顯,有的細胞伸出較長的樹枝樣突起;而未經對照組的DC,僅個別細胞有突起,胞體也較前為小解毒方組細胞貼壁較多,生長狀態欠佳;其他各組細胞在數量和形態上與對照組無顯著差異。
2.1.2 DC掃描電鏡形態學特征掃描電鏡下可見,成熟DC細胞形狀不規則,細胞表面可見大量的折疊結構,可見球莖狀,泡狀,薄片狀,絲棒狀等突起,長短粗細不一。
2.1.3 DC表面分子S-100蛋白免疫組化染色光鏡下觀察,陽性細胞漿著色較深呈紫紅色,胞核為淡橙紅色,胞體不規則,邊緣有突起。細胞陽性率>99%。
2.1.4 體外單核細胞與成熟DC膜表面分子表達的變化在富含GM-CSF、TNFα、IL-4的誘導體系中培養10天,與非誘導培養的PBMC比較,成熟DC表達MHC-Ⅱ+99.5%、CD80+99.2%、CD83+99.42%、CD86+93%、CD40+96.96%。而體外培養的單核細胞低表達MHC-Ⅱ41.1%、CD80 27%、CD40 28%,不表達或極低表達CD83、CD86及分子等成熟DC的膜表面標志。
2.1.5 肺瘤平膏及其拆方對DC膜表面分子表達的影響經誘導培養第10天,對照組DC與PBMC比較,膜表面高表達MHC-Ⅱ及CD80、CD83、CD86、CIM0等共刺激分子,與成熟DC抗原遞呈功能相關各膜分子的熒光強度顯著升高。其中以MHC-Ⅱ、CD86、CIMO于DC表面熒光強度最高。益氣組對上述DC膜分子表達的影響優于其他拆方組,而解毒組則呈現抑制DC表面分子表達的趨勢,但益氣解毒組則上調DC膜表面分子的表達。結果表明,肺瘤平膏可明顯上調DC膜表面與抗原遞呈相關的膜分子的表達水平,方中益氣組的作用最為明顯。
2.1.6 肺瘤平膏及其拆方對體外培養DC分泌IL-12功能的影響經誘導培養第10天,DC。與PBMC比較,IL-12表達量明顯升高(P<0.05)。中藥含藥血清可明顯促進體外培養DC的IL-12分泌水平(P<0.05或0.01),其中益氣組優于對照組。結果表明,扶正中藥(益氣為主)可促進DC體外IL-12的分泌。
3 討論
3.1 人外周血DC培養體系的建立
筆者采用密度梯度離心及貼壁法收集并分離人外周血單核細胞(PBMC),采用粒細胞一巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、白細胞介素-4(IL=4)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)聯合刺激培養體系,誘導DC的增殖與分化。體外培養第9-14天,S-100蛋白免疫組化染色,倒置顯微鏡、掃描電鏡、激光共聚焦顯微鏡成像觀察,表現為典型的成熟DC的形態學特征。ELISA檢測DC的IL-12分泌水平,流式細胞儀表面標志分析結果均證實,經該法誘導成熟的DC高表達與抗原遞呈功能相關的IL-12,表面分子MHC-Ⅱ、CD80、CD83、CD86、CD40。其中CD40分子的表達率(96.96%)明顯高于國內報道(44%),可能與細胞因子的比例不同有關。以上研究結果表明采用本方法建立的體外培養體系是穩定和成功的。
3.2 拆方研究的必要性
拆方研究是近年來研究中藥復方藥理學的常用方法,已有許多關于中藥復方拆方研究實驗藥理學研究的報道。多數研究是通過拆方比較藥理作用的差異,闡述方中藥味對全方藥理作用的貢獻和地位。拆方研究不僅有助于解釋中藥復方的配伍、組方的科學意義,還有助于揭示中藥復方的作用機制。一般認為,中藥復方的藥理作用是方中藥物所含多種成分作用的綜合效應,其中多種成分的相互作用與其藥效的最終表現具有密切關系。拆方研究為全方藥理作用和作用機制的研究提供了一個視角,可獲得許多信息,因此拆方研究不僅對于闡述中藥復方的配伍原理有所幫助,也是中藥復方藥理作用機制研究的一個重要手段。本次研究依照肺瘤平膏的立法原則,將原方拆解為益氣方、解毒方、益氣解毒方,通過觀察肺瘤平膏及其拆方對樹突狀細胞抗原遞呈功能的影響,探究扶正培本治則在腫瘤治療中的地位,以期更好地指導臨床實踐。
3.3 肺瘤平膏及其拆方對DC抗原遞呈功能的影響
在DC刺激T細胞活化中,需要由MHC-Ⅱ及TCR/CD3介導的特異性抗原刺激,以及T細胞與抗原遞呈細胞(APC)膜表面共刺激分子對的結合,即雙信號的刺激。成熟DC組成性高表達MHCⅡ分子,高表達黏附分子和共刺激分子CDS0(B7-1),CD86(B7-2),CD40,CD54(ICAM-1),CD44等是其遞呈特異性抗原并有效活化T細胞的分子基礎。其表面分子的表達水平也是衡量DC成熟與抗原遞呈功能的重要標志。為中西醫結合調節DC抗原遞呈功能的應用與研究提供了重要的切入點。
通過對中藥復方含藥血清干預體外培養人外周血DC表面分子表達的研究,初步證實扶正中藥(益氣為主)可明顯上調DC膜表面分子MHC-Ⅱ、CD80、CD83、CD86及CD40的表達水平,從而促進DC的成熟與分化;而祛邪中藥(解毒為主)對DC膜表面分子CD83、CD86的表達有下調趨勢,不利于DC的進一步成熟,但當此兩組中藥合用的時候,CD83、CD86的表達又得到上調;全方的DC膜表面分子表達水平最高。本研究顯示,以益氣為主的扶正中藥可明顯促進體外培養DC的IL-12分泌水平,說明該復方發揮抗腫瘤免疫調節機能的作用機制之一可能與益氣藥物促進DC分泌IL-12的水平有關。