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干細胞在臨床醫學中的應用范文1
[關鍵詞] 骨組織工程；臍帶；間充質干細胞
[中圖分類號] R329 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2014）10（c）-0195-02
骨折及骨科疾病是臨床中較為常見的病癥，為患者帶來了一定身體痛苦與經濟負擔。目前臨床中針對骨折與骨科疾病的治療，主要采用自體移植、人工植入及異體移植等，但上述方式均存在一定缺陷。MSCs具強大的多向分化功能，能夠誘導分化成骨細胞，幫助提升骨折或骨科疾病的治療效果。在此背景下，對骨組織工程中臍帶間充質干細胞的應用進展進行分析具一定現實意義。
1 MSCs的分離與培養
1.1 MSCs的分離
吉林大學生物醫學工程學院的楊晨[1]對MSCs的分離進行了研究，首先在手術室收集得到足月分娩的、健康的、新鮮的胎兒臍帶，將其放于融入了濃度為0.1%雙抗的氯化鈉溶液中，在實驗室內對臍帶進行間充質干細胞分離。其次，將臍帶取出，浸泡于酒精內約5 min，后以碘酒進行充分擦拭消毒，置于氯化鈉溶液下反復清洗，直至血塊完全沖掉。將臍帶剪至2 cm/段的大小，以鑷子固定住臍帶邊緣，用剪刀小心剔除臍帶外膜，將內含的華氏膠組織分離出來。取膠完成后接著剔除臍帶內的血管，再次以氯化鈉溶液沖洗，或直接在融入了濃度為0.1%雙抗的氯化鈉溶液中進行，以保證操作的無菌性。
1.2 MSCs的培養
武漢大學中南醫院的胡培[2]等人對MSCs的分離、培養進行了研究，其MSCs分離操作與楊晨基本相同，華氏膠組織成功分離后，將其放入α-MEM培養液（內涵100 U/mL鏈霉素與青霉素、10%胎牛血清）中，在CO2濃度為5%、箱內溫度為37℃的培養箱內進行培養，根據細胞生長情況，以0.25%胰蛋白酶進行傳代培養。北京協和醫學院的李鐸[3]選擇將切成管狀的臍帶繼續切片，再將片狀臍帶組織切割致2～3 mm3，利用吸管逐一將碎狀臍帶組織植入T75培養瓶中，培養瓶已預先由D/F12培養基（內含有濃度為20%的FBS）包被完成，植入密度為每瓶20～25塊碎狀臍帶組織；再將培養瓶置于溫度為37℃，CO2濃度為5%的溫箱中，定時向箱內補充培養基（1 mL/d），每隔3 d全量換液。
哈爾濱第五醫院手外科分院的聶廣辰[4]等人對臍帶間充質干細胞生長曲線的繪制進行了研究，在細胞傳代培養至第3代時將其分別種植于6孔板的其中4孔中持續培養8 d，按MTT法對細胞的增值情況進行測定，當細胞增值密度飽和，細胞進入平頂期時停測。卓峰等人[5]在細胞增殖特定于曲線繪制的研究中提出，現階段培養MSCs普遍采用的方法包括酶消化法與培養法，對MSCs細胞進行初代培養，該過程消耗約2 w，當細胞融合率致80%時開始傳代培養，在細胞種植2～4 d時增殖趨勢最盛，傳至第15代時增殖速度開始減慢，至20代時增殖基本結束。早期的細胞增殖的潛伏期在植入后的36 h內，之后開始了成對增長（5～6 d），增殖密度達到飽和后進入到平頂期，綜上可知細胞增殖曲線呈“S”型。
2 MSCs的特征
2.1 細胞形態與生長特征
第二軍醫大學的胡凱猛[6]在顯微鏡下對MSCs的形態進行觀察，按貼塊法獲取初代細胞后對其進行種植，4～5 d后即可在貼塊下方觀察到沿瓶底生長的hUMSCs，種植7 d后能夠觀察到細胞數量不斷增多，主要呈小梭形及小三角形，繼續培養細胞漸成集落狀生長，且生長狀態較為均衡，邊界清晰，伴有生長暈。酶消化法培養下初代細胞生長速度較培養法快，通常2～3 d后即在瓶底出現細胞，7 d后由小梭形及小三角形變為多角形、紡錘形，且生長迅速，集落生長呈緊靠型。14～15 d后達到約85%的融合。MSCs胞漿較少，小梭形的形態較為顯著，細胞核周的顆粒物質較少，消化傳代完成后細胞解除集落樣生長，且分布均勻。
2.2 細胞免疫學特征
呂鵬飛等人[7]在關于細胞免疫學特征的研究中提出，MSCs的免疫學優勢顯著，主要表現在其可以脫離免疫抑制作用而沖破MHC屏障，將細胞植入遠交動物體內。在UCMSC的免疫學特征分析中，證實其對人外周血單核細胞、鼠脾細胞及純化T細胞等免疫細胞具有抑制作用，從而減緩其增殖速度。毛希宏[8]的相關研究證明MSCs表面的抗原存在非專一性，主要包括細胞因子與生長因子受體類、粘附分子類、整和素家族成員類與其他分子類等四大類，實驗結果表明UCMSCs中，CD29、CD73、CD44、CD13、CD105的陽性率超過90%，而CD134、CD45、CD11b則為陰性，在23代內的傳代培養中，各類細胞因子無明顯差異，證明UCMSCs在經過多代培養之后免疫學性質較為穩定。
2.3 細胞的誘導分化特征
hUCMSC的誘導分化能力較強，能夠實現多向分化，包括內胚層、中胚層與外胚層。在張亞斌等人[9]的細胞誘導分化體內研究中，證實hUCMSC能夠分化成為內皮細胞、心肌細胞、骨骼細胞、多巴胺能神經元細胞、神經細胞等，而在細胞誘導分化體外研究中，還發現hUCMSC可分化為成骨細胞、肝細胞、脂肪細胞、胰島樣細胞、生殖細胞、平滑肌細胞等，在研究hUCMSC分化成為成骨細胞時，發現在誘導過程中hUCMSC的ALP活性提升，且鈣結節與鈣沉積現象明顯，證明其具成骨細胞的誘導潛能。上述研究結果表明，hUCMSC誘導分化功能強大，在臨床中的應用價值與應用范圍明顯優于造血干細胞。
3 討論
骨組織工程是近年來臨床新興的學科，其中胚胎干細胞作為骨組織工程研究的熱點與重點，受到了臨床醫學界的廣泛關注。通過上述研究可知，MSCs分化潛能較高，在軟骨、成骨、韌帶、肌腱、肌肉、神經、心肌、肝等組織中均具誘導分化潛能，臨床應用前景廣闊。李素萍等人[10]相關研究發現，在標準的細胞培養環境下，MSCs能夠沿培養瓶進行增值，可以表達CD44、CD105及CD90，但不能表達HLA-DR、CD34及CD45，在體外培養時表現出成骨細胞的誘導分化潛能。
在此背景下通過改進現有MSCs誘導分化為成骨或軟成骨細胞的培養方式，或在已知干細胞的基礎上找尋新型干細胞，以提升胚胎細胞在骨組織工程研究中的合適度，成為目前國內外相關研究的探索目標。在現代生物科技快速發展的時代背景下，學者們一定可以尋找到理想的培養途徑或干細胞類型，不斷推動骨組織工程的發展前進。
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干細胞在臨床醫學中的應用范文2
【關鍵詞】流式細胞術；臨床；進展
流式細胞術(flowcytometry,FCM)是20世紀70年展起來的對單細胞定量分析的一種新技術。它借鑒了熒光標記技術、激光技術、單抗技術和計算機技術,具有極高的檢測速度與統計精確性,而且從單一細胞可以測得多個參數,為生物醫學與臨床檢驗提供了全新視角和強有力手段[1]。目前,隨著單克隆抗體技術的發展,流式細胞儀檢測技術已經廣泛使用在基礎研究和臨床實踐的各個方面,發揮著重要作用。本文就其在臨床上的應用綜述如下。
1 流式細胞術在免疫學中的應用
FCM可以進行淋巴細胞亞群分析,可同時檢測出一種或幾種淋巴細胞表面亞群分析,將不同的淋巴細胞亞群區分開來,并計算出它們相互間的比例。通過對患者淋巴細胞各亞群數量的測定了解淋巴細胞的分化功能,鑒別新的淋巴細胞亞群。更重要的是通過研究大多數疾病的特異性淋巴細胞亞群或某些細胞表面標志的存在、缺乏、過度表達等,對一些疾病,如免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤等診斷、治療、免疫功能重建和器官移植監測等有重要的臨床意義。如HIV主要侵襲CD4+T細胞而導致CD4淋巴細胞減少,CD4/CD8淋巴細胞比值下降,為艾滋病的診斷和治療提供依據[2]。在其它免疫功能性疾病的診治方面如系統性紅斑狼瘡(SLE)患者的淋巴細胞變化可反映該病的活動情況和器官侵犯程度,伴有嚴重腎臟損害的SLE患者可出現低CD4+、高CD8+的現象[3]。此外,FCM可以用來進行組織相容性抗原(HLA)群體分析;HLA-B27抗原陽性與強直性脊柱炎等一系列關節病有著不同程度的正相關。FCM應用HLA-B27特異性單抗檢測抗原，其敏感性較傳統的微量細胞毒性實驗大大提高,同時多參數的熒光測定使我們能夠在特定的細胞亞群中分析HLA-B27[4-5],還可以利用FCM進行移植配型移植后免疫狀態監測。
2 流式細胞術在血液學中的應用
血液系統腫瘤的診斷和治療 FCM通過對外周血細胞或骨髓細胞表面抗原和DNA的檢測分析，對白血病、淋巴瘤等各種血液病的診斷、預后判斷和治療起著舉足輕重的作用。FCM采用各種抗血細胞表面分化抗原的單克隆抗體，借助于各種熒光染料測定一個細胞的多種參數，以正確地判斷出該細胞的屬性。各種血細胞系統都具有其獨特的抗原，當形態學檢查難以區別時，免疫表型參數對各種急性白血病、淋巴瘤的診斷和鑒別診斷有決定性作用，其診斷的準確性可達到90%左右[5]。微小殘留病變(MRD)是白血病復發的主要根源,FCM能在患者緩解期檢測是否有殘留病變細胞，及早發現后采取措施避免復發。而且測定 DNA倍體和進行細胞周期分析對指導白血病化療也有一定作用，不同的白血病患者或同一患者在不 同病期白血病細胞增殖狀況不同，定期了解細胞增殖情況采取相應藥物可以提高療效。急性白血病的多耐藥基因(MDR)也常用FCM檢測，FCM特有的敏感性和特異性，用于檢測二氨基苯茚酮 mRNA的表達產物 P糖蛋白(Pgp)及其活性(作為藥物的排出泵，降低細胞內藥物濃度)，可以更直接的反映耐藥程度。陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)是一種造血干細胞克隆病,細胞 CD55、CD59抗原表達減低是該病的一個特點。FCM采用熒光標記的單克隆抗體對血細胞 CD59的表達做定量分析，可以協助臨床做出診斷并判斷疾病的嚴重程度。網織紅細胞計數是反映骨髓造血功能的重要指標。FCM通過某些熒光染料(吖啶橙等)與紅細胞中 RNA結合，定量測定網織紅細胞中 RNA，得到網織紅細胞占成熟紅細胞的百分比。有報道認為[6]FCM比目測法的精確度更高。此外，FCM還可以測量出網織紅細胞的成熟度，對紅細胞增殖能力的判斷很有意義，為干細胞移植術后恢復的判斷、貧血的治療監測、腫瘤患者放、化療對骨髓的抑制狀況等提供了依據。造血干/祖細胞計數造血干/祖細胞具有自我復制和多向分化潛能，是各種血細胞和免疫細胞的始祖。造血干/祖細胞計數對造血干細胞移植意義重大。CD34抗原是早期造血干/祖細胞的表面標志，應用 FCM分析、計數 CD34 細胞已成為造血干/祖細胞移植、造血重建的重要指標。由于血小板的活化程度可由血小板膜糖蛋白的表達水平的高低來判斷,FCM測定血小板膜糖蛋白的表達情況可以診斷血小板膜糖蛋白異常所致疾病,這類疾病很少見但病因明確,主要是GpⅡb/Ⅲa或GpⅠb/Ⅸ/Ⅴ缺陷所致?；颊哐“迥pⅡb/Ⅲa的缺乏,導致血小板聚集功能明顯低下,這就是常染色體隱性遺傳病-血小板無力癥。而巨血小板綜合征是由于GpⅠb/Ⅸ/Ⅴ復合物數量或質量的缺陷導致的遺傳性出血性疾病。FCM還可以通過單抗免疫熒光標記血小板膜糖蛋白監測血小板功能及活化情況,評價活化血小板程度在血栓性疾病和血栓前狀態發生發展中的作用,有利于血栓栓塞性疾病的診斷和治療,此外血小板活化時細胞內的鈣離子濃度是活化血小板監測的一項非免疫性指標,免疫性血小板減少性紫癜患者血漿中可產生血小板自身抗體,結合在血小板表面,稱為血小板相關抗體,檢測血小板表面或血清中的相關抗體,可用于該病的診斷及治療監測[7]。
3 流式細胞術在腫瘤學中的應用
FCM在腫瘤學中的應用主要是利用DNA含量測定進行包括癌前病變及早期癌變的檢出、化療指導以及預后評估等工作,FCM可精確定量DNA含量,能對癌前病變的性質和發展趨勢做出判斷,有助于癌變的早期診斷[6]。首先需要把實體瘤組織解聚、分散制備成單細胞懸液,用熒光染料(碘化吡啶P1)染色后對細胞的DNA含量進行分析,將不易區分的群體細胞分成三個亞群(G期、S期、G2期),DNA含量直接代表細胞的倍體狀態,非倍體細胞與腫瘤惡性程度有關。DNA非整倍體細胞峰存在可為腫瘤診斷提供有力依據[6]。腫瘤細胞DNA倍體分析對患者預后的判斷亦有重要作用。異倍體腫瘤惡性病變的復發率、轉移率及死亡率均較高,而二倍體及近二倍體腫瘤的預后則較好。FCM不僅可以對惡性腫瘤DNA含量進行分析,還可根據化療過程中腫瘤DNA分布直方圖的變化去評估療效,了解細胞動力學變化,對腫瘤化療具有重要的意義。臨床醫師可以根據細胞周期各時相的分布情況,依據化療藥物對細胞動力學的干擾理論,設計最佳治療方案。從DNA直方圖直接地看到腫瘤細胞的殺傷變化,及時選用有效的藥物對腫瘤細胞達到最大的殺傷效果。
4 流式細胞術在細胞凋亡和多藥耐藥基因中的應用
細胞凋亡是機體生長發育、細胞分化和病理狀態中細胞死亡的過程,凋亡典型的形態特征是核染色質固縮并分離,細胞質濃縮,細胞膜和核膜皺曲,核斷裂形成片斷,最后形成數量不等的凋亡小體。FCM可以進行DNA含量分析,通過二倍體細胞G0/G1期峰前的亞二倍體峰來確定。在凋亡早期,一些與膜通透性改變及凋亡有關的蛋白在細胞膜表面有特定表達。通過FCM結合單克隆抗體可以檢測表達這些蛋白的細胞,從而確定細胞的凋亡情況。多重耐藥性(multidrugresistance,MDR)是由多藥耐藥基因編碼的P糖蛋白(P-gp)親脂化合物,包括多種抗癌藥物和熒光染料的跨膜性排出泵。從人淋巴細胞排除熒光染料與細胞內P-gp的含量直接相關。當淋巴細胞出現MDR陽性細胞時,患者對化療藥物開始出現耐藥性,需要考慮其它治療方式。多藥耐藥是腫瘤患者化療失敗的主要原因,FCM對多藥耐藥基因(如P170)和凋亡抑制基因及凋亡活化基因表達的測定,可為臨床治療效果分析提供有力依據[8]。
5 流式細胞術在器官移植中的應用
FCM在器官移植中占有重要地位,可被用來判斷供者與受者之間是否合適,用來鑒別和定型同種異體反應抗體[6]。通過供者白細胞和受者的血清共同孵育,如果受者血清中存在針對供者的循環抗體,就會同供者的淋巴細胞結合,再加入熒光素標記的二抗來顯示這種結合,此方法能在移植手術前發現高風險的受體。移植后免疫表型的監測也很重要。FCM可用于檢測移植后血液或移植內免疫成分的變化,以預防移植后免疫
排斥反應,細胞免疫抑制治療效果和移植存活情況,可敏感地預測排斥反應的發生,為臨床治療提供有效依據。
6 流式細胞術在臨床細菌學中的應用
流式細胞術在臨床細菌學中的應用具有快捷、靈敏,能同時進行多參數分析等優點,可廣泛用于細菌、病原體、毒素和血清抗體及藥敏試驗。免疫熒光檢測方法中的流式微球分析(CBA)是FCM的一個新應用。這種方法也可用于真菌、寄生蟲、病毒以及這些病原體的混合感染的檢測。近年來,FCM與熒光染料的聯合運用可判斷細菌的活力和功能狀態,由于速度快,該方法已被建議作為臨床實驗室的常規藥敏試驗。FCM藥敏檢測方法較多,通過測量加入藥物孵育后的散射光的DNA含量來判斷抗生素對細菌的敏感性。該法現被認為是FCM在該領域應用的經典方法[6]。
7 FCM在細胞生物學中的應用
在細胞周期內,DNA含量隨時相發生周期性的變化,通過熒光探針對細胞進行相對DNA含量測定,可分析細胞周期各時相細胞的百分比,周期動力學參數以及DNA異倍體。可利用與鈣離子特異結合的熒光染料和激發光譜或發射光譜是pH值依賴熒光染料進行細胞內鈣離子濃度測定和細胞內pH值測定[9]。
8 流式細胞術在優生遺傳領域中的應用
流式細胞術可使含量極微的胎兒有核紅細胞得到富集,因為有核紅細胞含有胎兒的全部基因,并具有不影響多胎妊娠等優點,結合FISH,PCR等技術,使之具有應用于無創性產前診斷的廣闊前景[10]。
參考文獻
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干細胞在臨床醫學中的應用范文3
關鍵詞：流式細胞術；臨床醫學；應用
近年來，隨著單克隆抗體的應用及流式細胞術的快速發展，流式細胞術（FCM）已成為許多疾病診斷和分性的重要依據。流式細胞術是20世紀70年展起來的一項高新技術，它作為一門生物檢測技術集計算機技術、測量技術、激光技術、流體動力學、細胞化學、細胞免疫學于一體，是對快速直線運動狀態中的細胞、生物顆粒或液體中的大分子物質進行多參數的、快速的定量分析和分選的一種技術［1］。1973年美國BD公司推出全國第一臺流式細胞儀，通過對流動液體中排列成單列細胞或顆粒進行逐個檢測得到該細胞或顆粒的光散射和熒光指標，分析它們的體積、內部結構、DNA、RNA、蛋白質、抗原等物理及化學性質，還能對所需要的細胞進行分選等。具有檢測速度快、測量指標多、采集數量大，對所需的細胞或生物顆粒進行分析或分選等特點［2］，其在生物學、臨床醫學、遺傳免疫學、腫瘤學等眾多研究領域得到廣泛應用。
1流式細胞儀的結構及工作原理
1．1流式細胞儀的結構
主要由五部分組成：（1）流動室及液流驅動系統；（2）激光光源及光束形成系統；（3）光學系統；（4）信號檢測與儲存、顯示、分析系統；（5）細胞分選系統。
1．2流式細胞儀的工作原理
將待測細胞染色后制成單細胞懸液，用一定壓力將待測樣品壓入流動室，不含細胞的硫酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度，這樣鞘液就能夠包繞樣品高速流動，組成一個圓形的流束，待測細胞在鞘液的包繞下單行排列，依次通過檢測區域。流式細胞儀通常以激光作為光源，經過聚焦整形后的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細胞在激光束的照射下，產生散射光和激發熒光，這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收，光散射信號在前向小角度進行檢測，這種信號基本上反映了細胞體積的大?。粺晒庑盘柕慕邮芊较蚺c激光束垂直，經過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個不同波長的熒光信號，這些熒光信號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或核內物質的濃度，經光電倍增管接收后可轉換為電信號，再通過模／數轉換器將連續的電信號轉換為可被計算機識別的數字信號，計算機系統將這些數字信號收集、儲存，以一維直方圖或二維點陣圖及數據表或三維圖形顯示出來，可以用不同的標記物進行雙參數、三參數甚至多參數的分析［3，4］。
2流式細胞儀的技術指標
包括：（1）分析速度：很高可以達到5000個／s左右，大型的流式細胞儀的分析速度可達10000個／s；（2）熒光檢測靈敏度：單個細胞上的熒光分子＜600個，或兩個細胞之間的熒光差＞5％就能區分；（3）前向角散射光檢測靈敏度：一般的可以檢測到的最小顆粒直徑在0．2～0．5μm；（4）分辨率（CV）：一般流式細胞儀能夠達到＜2．0％；（5）分選速度：一般流式細胞儀分選速度＞100個／s，分選細胞純度可達99％［5］。
3流式細胞術在臨床中的應用
3．1在血液學中的應用
流式細胞術通過對外周血細胞和骨髓細胞表面抗原和DNA的檢測分析對各種血液病如白血病、淋巴瘤等血液系統疾病的分型、診斷、治療及預后判斷均有重要作用。血細胞在白細胞系、紅細胞系、巨核細胞系、血小板及非造血細胞均有不同的分化抗原表達，分布在細胞質、細胞膜中。血液腫瘤細胞的特征是喪失了正常細胞的系類專一性和分化階段的規律性，運用流式細胞術將具有系列特異性并涵蓋不同分化階段的單克隆體作為分子探針來檢測血液腫瘤細胞的內外抗原，可以反映其本質上與正常造血細胞的差異［6］。流式細胞術采用各種抗血細胞表面分化抗原的單克隆抗體，借助于各種熒光染料（異硫氰基熒光素FITC，藻紅蛋白PE等）測定一個細胞的多種參數，以正確判斷出該細胞的屬性。流式細胞術還可以應用在白血病免疫分型方面，目前國內外均主張采用FCMCD45／SSC雙參數散點圖設計方法進行白血病免疫分析。采用此法可將骨髓細胞清晰地分成淋巴細胞、單核細胞、成熟粒細胞、幼稚細胞和有核紅細胞群，這樣可以排除正常細胞對免疫分型的干擾，從而提高免疫分析的準確性，而且測量細胞一般在1～5萬個細胞，快速特異、準確性好，并且能夠提供正常細胞在演變成惡性腫瘤過程細胞基因及抗原標志發生變化的信息。而這種細胞的變化是常規FAB法所不能分辨的。這種分型對于治療方案的正確選擇與預后有著重要的意義同時也提供了可靠的依據［7］。近年研究發現，在臨床血液病檢測和診斷中診斷準確率高達90％以上，與普通檢測法相比準確率提高達20％［8］。流式細胞術可以通過某些熒光染料與紅細胞中的RNA結合，定量地測定網織紅細胞中的RNA，得到網織紅細胞占成熟紅細胞的百分比，從而準確地反映骨髓造血功能。有作者報道FCM方法比目測法結果精確度更高［9］。此外FCM還可以測出網織紅細胞的成熟度，對紅細胞增值能力的判斷很有意義，為干細胞移植術后恢復的判斷、貧血的治療監測、腫瘤患者放化療對骨髓的抑制狀況等提供依據。
3．2在腫瘤學中的應用
流式細胞術在腫瘤學中的應用主要是對腫瘤細胞DNA含量進行測定，包括癌前病變及早期癌變的檢出，輔助腫瘤的早期診斷和鑒別診斷。不僅如此，還可以根據化療過程中腫瘤DNA分布直方圖的變化評估療效，了解細胞動力學的變化。臨床醫生可根據各細胞周期各時相的分布情況，結合化療藥物對細胞動力學的干擾理論，設計最佳治療方案，再依照DNA直方圖直接地看到腫瘤細胞的殺傷變化，及時調整治療方案，選取有效藥物以使對腫瘤細胞達到最大的殺傷效果［10］。
3．3在免疫學中的應用
利用抗原抗體特異性反應的原理將流式細胞儀與單克隆抗體結合，對細胞表面和細胞內抗原、癌基因蛋白及膜受體進行定量檢測，廣泛應用于臨床，對人體細胞免疫功能的評估具有重要的意義。流式細胞術可進行T、B和NK淋巴細胞水平的分析，還可以進行淋巴細胞亞群的分析，區分不同的淋巴細胞亞群，計算其相互間的比例，進而了解淋巴細胞的分化功能。更重要的是，通過研究大多數疾病的特異性淋巴細胞亞群，對一些疾病如免疫性疾病、感染性疾病、腫瘤等的診斷、治療、免疫功能的重建具有重要的指導意義。例如CD4是輔淋巴細胞，它是遲發性超敏反應的啟動者，是促使B淋巴細胞產生抗體的輔細胞，也是抑制性T細胞的誘導細胞，而CD8是抑制性T細胞，是細胞毒性T細胞介導反應的效應細胞，是抑制B細胞產生抗體的抑制性細胞［11］。在許多免疫性疾病中，淋巴細胞亞群的增多與減少對疾病的發展具有重要的作用。如在先天性發育不良綜合征中FCM分析顯示外周血CD3TCD4＋和CD8＋T細胞均減少，在殘余T細胞中T細胞受體（TCR）αβ分子表達減少，γδ分子表達正常，CD4＋／CD8＋T細胞比例升高，隨著受累者年齡的增加CD8＋細胞數增多，而有些患者T細胞數量增加，最終可達正常［12］。流式細胞術還可以進行HLA群體分析，在強直性脊柱炎患者中用流式細胞術檢測HLA－B27抗原陽性率高達92．6％，而且可以排除交叉反應，提高檢測的靈敏度和準確性［13］。
3．4在中醫藥研究方面的應用
流式細胞術可用于單味中藥有效成分的作用效果測定分析。如研究復方苦參方劑對大腸癌LoVo細胞體外增值凋亡的影響中，分析DNA含量及細胞周期，結果顯示Lo－Vo細胞可檢測亞G1峰，凋亡率于對照組相對比例增高，細胞周期分析發現S期阻滯現象，表明復方苦參方劑具有一定的抑制腫瘤細胞增殖和誘導凋亡的作用［14］。在慢性阻塞性肺疾病的肺氣虛證、肺陰虛證患者中CD4＋、CD4＋／CD8＋均降低，CD8＋升高，說明肺氣虛證與肺陰虛證患者均存在細胞免疫功能低下［15］。
3．5在細菌學中的應用
流式細胞術具有快速、靈敏、精確并能進行多參數分析的特點，可廣泛應用于細菌的診斷和藥敏實驗，是研究細菌異質性、細菌抗生素后效應、多種病原菌混合感染等的有效方法。常用的為流式細胞術藥敏試驗：檢測不同細菌時，根據藥物對細菌的作用機理選擇合適的熒光染料，通過細菌總體平均熒光強度束反映抗生素對細菌的抗菌活性，3h左右即可得出檢測結果，尤其適用于急需藥敏報告的重癥感染病菌的檢測。
3．6在血小板疾病診斷中的作用
血小板是止血機制中一個重要因素，其表面含有多種糖蛋白及各種受體，這些受體與相應的配體相結合后，血小板被激活，并發生形態變化，血小板聚集和顆粒釋放等一系列反應。利用流式細胞術檢測血小板標志物在許多血小板相關疾病的診斷上具有重要的臨床價值［16］。如GPⅠb／Ⅸ復合物先天缺陷導致巨大血小板綜合征；GPⅡb／Ⅲa復合物先天缺陷導致血小板無力癥［17］。在免疫性血小板減少性紫癜的患者中，FCM可以測定患者血液中的PAIgG、PAIgM、PAIgA，熒光陽性百分率的診斷效率為45．8％，平均熒光強度的診斷效率為72．5％，兩項指標聯合的診斷效率為74．2％［18］；因此FCM檢測血小板抗體可用于免疫性血小板減少性紫癜的診斷及治療監測。用FCM內參定位法定量分析血小板微粒在血栓性疾病和血栓前狀態的發生發展中的作用，有利于血栓性疾病的診斷和治療。
3．7在相關疾病檢測中的應用
質量檢測是診斷男性不育癥的重要手段，由于檢測數低及主觀因素的影響，常規的檢查只能反映的形態特征和有限的功能，不能為生育能力提供準確評估的依據，用FCM檢查可把定性的描述變成定量的研究，提高了實驗結果的準確性，可對進行高通量、多參數分析，得到不同時期的細胞數據及形態指標，對臨床診斷發生障礙的性質、原因和程度提高了客觀依據，可對少、弱和無癥的判斷、治療及療效的觀察作出正確的評價，為客觀評價男性生育能力提供了有力的依據。用FCM檢測生精細胞凋亡情況是迅速、準確、客觀、可靠地評估功能和男性生育力的新方法［19］。
3．8在器官移植中的作用
可用流式細胞術判斷供者與受者之間的配型是否合適。檢測受者血清中抗供者的抗HLA抗體，如果受者血清中存在針對供者的循環抗體，就會同供者的淋巴細胞結合，在加入熒光素的二抗來顯示這種結合，就可在移植前后發現高風險抗體，以判斷供者與受者之間是否合適。移植后的免疫表型監測也很重要，移植后的CD4／CD8比值低下的患者排斥反應發生較多，受者血清中產生抗供體細胞抗體預后較差，應及時監測以便進行抗排斥的預防和治療［4］。綜上所述，流式細胞術是一種在醫學基礎、臨床及科學研究中具有廣泛應用前景的細胞分析技術。它具有分辨率高、分辨細胞數量大、參數多、準確性高、速度快等優點。隨著流式細胞分析技術與方法的迅速發展，流式細胞術在臨床的應用范圍也不斷拓展，并將成為推動臨床醫學發展的重要手段。
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干細胞在臨床醫學中的應用范文4
1．1轉化醫學的發展歷程及現狀
轉化醫學提倡以患者個體為中心，強調多學科交叉合作。轉化醫學作為一個新的領域，從發展走向成熟，需要多專業的交流與協作。在國外轉化醫學起步較早。2003年，美國國立衛生研究院（NIH）宣布了發展生物醫學的長期計劃，主要是培養具有不同專業背景、能在基礎研究和臨床工作間互相協作研究的團隊。在NIH的推動下，2011年美國已有包括哈佛大學、耶魯大學、斯坦福大學等名校在內的38個大學和醫學院建立了進行轉化研究的醫學中心；2005年蘇格蘭政府與惠氏制藥公司合作，建立了世界上第一個轉化醫學合作研究中心；2007年，歐盟實施的第7個框架研究計劃，將預算中的60億歐元用于轉化醫學研究方面。同時世界著名醫學類核心期刊都為轉化醫學開辟了專欄，相繼組建了ScienceTranslationalMedicine、JournalofTranslationalMedicine和TranslationalResearch等國際性專業雜志。相比較而言，中國在轉化醫學的研究和實踐方面尚處于初級階段，但發展勢頭日趨高漲。2007年上海交通大學成立了專門從事轉化醫學研究的“Med－X研究院”；2008年上海復旦大學依托其附屬醫院，率先成立了“出生缺陷研究中心”；2009年中南大學湘雅醫院組建了“湘雅轉化醫學研究中心”，研究惡性腫瘤；2011年總醫院附屬八一腦科醫院建立了國內第一個“神經科學轉化醫學中心”等。
2010年陳竺等在《科學》雜志上發表了一項研究成果，揭示了砷劑治療急性早幼粒細胞性白血?。ˋPL）的直接藥物作用靶點為PML－RARa。這一研究成果對于推動該類型白血病的分子靶向治療具有重要意義。砷劑成功治療APL的研究成果成為我國轉化醫學研究的典范之一。
1．2轉化醫學的研究內容
轉化醫學是蛋白質組學和基因組學及生物信息學等生物醫學發展的時代產物，其中心思想是以解決臨床和健康問題為目標的實驗室基礎研究。轉化研究是轉化醫學中最重要的內容之一，主要包括：①分子靶向治療；②尋找適當生物分子標志物，提高臨床輔助技術對臨床工作的輔助效力；③藥物二期臨床實驗。此外，還有基因診斷治療、干細胞與再生醫學、基因組藥理學與個體化醫學。其中最重要的環節是生物分子標志物的研究。
1．2．1基于分子分型的個體化治療惡性腫瘤、心腦血管病及糖尿病等大多數慢性病是多病因疾病，其發病機制復雜、疾病異質性很大，因此，對這些疾病不能采用單一方法來進行診治。著眼于患者的遺傳、分子生物學特征和疾病基本特征進行分子分型，以此為基礎實施個體化治療是現代醫學的目標。實施個體化的治療，可以對治療方法、藥物、劑量進行優化，達到最好的治療效果。
1．2．2生物分子標志物的鑒定與運用基于各種組學方法篩選出早期診斷疾病、預測疾病、判斷藥物治療效果和評估患者預后的生物分子標志物及藥物靶標，如DNA、miRNA、蛋白質及多肽、炎性因子及其通路等，有利于針對性地探索新的藥物和治療方法，提高藥物篩選的成功率，縮短藥物研究從實驗走向臨床應用階段的時間。這些分子標志物的開發應用，對疾病的預防、診斷、治療和預后有重要指導作用。
1．2．3藥物臨床實驗及研發美國曾有報告稱，研制一種新藥，從選題到臨床應用，平均要用14年的時間。近40年來，美國在惡性腫瘤的研究方面投入2000多億美元，收獲了156萬篇研究論文，但腫瘤患者的生存率卻沒有得到顯著改變。轉化醫學通過收集和分析分子生物學和生物信息學的海量數據，篩選出分子標志物和藥物靶標，有效地降低在臨床二期實驗中藥物靶點驗證性研究的失敗率，提高了基礎研究的轉化率和速度，為新藥的臨床應用和個體化治療研究開辟出一條革命性的道路。
2轉化醫學與中醫藥學的基本理念一致
中醫學是我國醫學重要的組成部分，進入新世紀，中醫學先進的理念與落后的技術手段之間的矛盾愈發突出，限制了中醫理論的廣泛傳播及其診療技術的普及與應用。然而轉化醫學的出現為中醫藥的現代化研究提供了一個良好的發展機遇。轉化醫學的基本理念與中醫藥學從臨床到基礎理論再到臨床的發展歷程和“辨證論治”的個體化治療思想不謀而合。
2．1轉化醫學與中醫學的運行模式相同臨床實踐一直是中醫學產生、發展、繁榮的根本原因，從臨床積累的經驗中抽提理論，再用理論指導臨床實踐的過程是中醫藥發展的經典模式?；诨A科學與臨床應用出現嚴重脫節而產生的轉化醫學，其主要目的就是加強基礎醫學與臨床醫學之間的聯系，將實驗室的研究成果快速轉化為臨床應用，同時臨床上出現的新問題可以指導基礎研究方向。雖然傳統中醫學不進行實驗室研究，但其“臨床－理論－臨床”這個螺旋上升的模式與轉化醫學的運行模式是一致的。
2．2轉化醫學與中醫學的理念統一基礎醫學與臨床醫學存在著方法論方面的差異，主要體現在：臨床醫學以系統論為導向，基礎醫學則以簡化論為基礎。轉化醫學研究的對象是人，人的健康除與人體結構與功能相關外，還涉及自然環境和社會環境因素的作用，這決定了轉化醫學必然是一種復雜性研究系統。以轉化醫學為基礎的系統生物學應用系統工程的概念、定量分析生物系統若干組成部分的動態相互作用，通過反復計算和／或數學建模及試驗來研究復雜的生物系統。中醫學是借助古代哲學、自然科學和臨床實踐發展起來的一種系統科學，其蘊含的“整體觀”、“天人合一”等思想，與系統生物學的理念相統一。
2．3轉化醫學與中醫學所倡導的治療方式相同現代疾病譜逐漸向慢性病方向轉變，其發病原因有多種且機制復雜，以往的單一治療方法難以奏效。轉化醫學針對這一問題提出了基于患者遺傳、分子生物學特征和分子分型的個體化治療方案。中醫學治病的基本原則———辨證論治，其本質就是個體化醫學，體現了現代個體化醫學的特征。
3中醫藥轉化醫學的特點
3．1以中醫基礎理論為指導原則中醫基礎理論是中醫學的精髓，如果中醫藥的研究忽視中醫學的特色，一味地追求細胞乃至分子層面的機制，或盲目地模仿化學藥物研發模式，必然導致臨床與科研的脫節，最后中醫臨床只能依據古代經典，缺乏令人信服的科學證據。因此，中醫藥轉化醫學研究必須以中醫基礎理論為指導，才能更好地服務于臨床。
3．2以患者個體為中心中醫學的整體觀既強調人是一個有機整體，又強調人與自然、社會環境的密切相關，并建立“觀其脈證，知犯何逆，隨證治之”的辨證論治體系，也是一種人本主義的醫學研究模式。
3．3基礎研究與臨床應用之間相互促進的連續過程中醫藥轉化醫學的實質是理論與實踐的結合，是基礎與臨床的整合，具有“實驗室－臨床－實驗室－臨床”不斷循環的運作特色。中醫學也是在不斷的臨床實踐中逐漸發展壯大。只有通過基礎與臨床之間不斷地循環轉化，才能促進中醫醫療技術水平的整體提高。
4中醫藥轉化醫學的實施
中醫藥轉化醫學研究如何開展，如何順應世界醫學發展潮流，是當前中醫藥界必須思考的一個重要問題，其中中醫藥語言現代化和中醫臨床、中藥創新藥物研究的現代化是中醫藥轉化醫學實施的關鍵。
4．1建立中醫學轉化研究機構有條件的研究型或教研型中醫藥大學、研究型醫院或國家中醫臨床研究基地可采用加盟或聯合方式進行資源整合，建立以臨床和基礎及藥物研發為主體，結合中醫古籍研究的跨學科中醫藥轉化研究中心，并吸引相關企業共同參與，以平臺管理方式進行統一部署和聯合攻關，構建起一條高效率的轉化鏈。此外，也可以通過內部選拔或對外招聘的方式組建一個交叉學科研究室。此外，生物醫學信息學為解決轉化醫學相關問題提供了一系列方法學，其研究者應該成為中醫藥轉化醫學研究團隊的核心成員。
4．2加強轉化醫學推廣教育和轉化型人才培養長久以來，基礎研究領域人才的提拔和獎勵主要依據研究者的論文，而不是其帶來了多大的臨床效果。而臨床醫生則缺少時間去閱讀相關文獻，這在相當程度上限制了基礎研究與臨床之間的交流。要解決這個問題，就必須加強基礎研究者和臨床醫生之間的交流、合作。當前中醫藥基礎研究的人才隊伍建設比較薄弱，整體科研水平較低，知識結構也較單一，學科滲透和交叉能力相對欠缺，對世界醫學最新進展和前沿動態信息了解滯后，創新能力不足。因此，需要加強對既懂中醫又具有現代西醫科學實驗技能，并有轉化醫學理念的復合型人才的培養。國內中醫藥大學與開設的中醫學國家理科基地專業是一個很好的探索。
4．3加大扶持力度與政策引導長期以來，高昂的經費支出是造成轉化醫學研究發展十分緩慢的核心問題，原因在于科研成果從實驗室走向臨床的轉化過程成本高，前期的巨大投入使許多企業和醫療機構失去投資的動力。其次，中醫藥轉化研究的過程涉及多學科、多部門的利益協調，很容易在關鍵環節產生脫節現象。因此，政府除了要在政策上加以傾斜和扶持，引導大型企業贊助中醫藥轉化研究外，還應制定有效的體制、規定，將各學科、各部門緊密地聯系在一起，形成一個團結高效的研究團隊。
4．4緊密結合中醫特色和優勢，展開中醫藥轉化研究中醫藥轉化研究是中醫藥現代化研究的需求，有助于更好地促進和加快中醫藥向更深層次水平邁進。中醫藥轉化研究的開展應緊密結合中醫特色和優勢。主要包括：①重視中醫經典的指導作用：2006年頒布的《中醫藥創新發展規劃綱要》，明確了中醫藥發展的“繼承、創新、現代化、國際化”四項基本任務，強調在“繼承”基礎上加以豐富發展、充實完善，才會有中醫的創新。②推動經典復方的方劑組學研究：方劑組學以中醫方劑作為研究內容，以提取物的質量控制為前提，以臨床療效為基礎，然后應用基因組學和蛋白質組學明確其作用靶點、研究其調控機制。③協作進行病證結合的轉化醫學研究：陳可冀院士認為，西醫診斷與中醫辨證的病證結合充分體現了中西醫兩種醫學的優勢互補，是中西醫結合的最佳模式。④注重結合中醫臨床：進行中醫藥轉化研究時，必須充分體現中醫整體觀及辨證論治的特色，針對證候的分類、治則治法、方藥選用、證候轉變、療效評價等關鍵環節，應用各種組學技術，篩選出不同層面的與證候發生發展、辨證分類、治法方藥和療效評價相關聯的敏感性生物標志物群，并給予其在臟腑及四診信息中的定位。
5結語
干細胞在臨床醫學中的應用范文5
【關鍵詞】生物化學；微信平臺；教學應用
生物化學是醫學類院校一門極其重要的基礎學科，在臨床醫學中具有顯著的應用價值。但由于該課程理論抽象、概念繁多以及代謝反應錯綜復雜的特點一直是生物化學教學中亟待解決的難題[1]。目前醫學類生物化學教材內容有所刪減，根據安徽中醫藥大學臨床專業學生的掌握水平來看，仍未達到良好的教學效果。面對教學難題，教學改革的重點不僅是教材內容本身，而應適當考慮教學方式的改革與創新。
1目前生物化學教學存在的問題
生物化學是安徽中醫藥大學臨床各專業的一門基礎課程，在臨床和科研中起著舉足輕重的作用。但由于生物化學的學科特點，一定程度上影響了學生的學習興趣，學生對生物化學的學習存在抵觸和懼怕。目前安徽中醫藥大學生物化學教學中存在的主要問題總結如下：（1）學生化學基礎參差不齊。我校臨床專業實行文理科招生，學生化學基礎參差不齊，其中文科學生的化學三基知識大多停留在初中階段，導致教學進度和教學內容難以統一。（2）學生認知程度不足。臨床醫學專業學生普遍對該門課程認知程度不足，生物化學的重要性尚未充分體現，學生并未把生物化學和臨床實踐有效連接起來。（3）教學形式單一。目前我校生物化學理論教學仍采用傳統的講授法，學生的學習積極性未充分調動，一定程度上影響了學生的學習熱情。（4）教學學時不足。我校臨床專業生物化學理論教學僅有40學時，在這種學時較少的情況下，授課教師只能采用滿堂灌的方式，很難激發學生的學習積極性和主動性。（5）課程銜接不充分。其它醫學相關課程與生物化學存在廣泛的聯系，這就要求學生在學習生物化學前具備一定的醫用化學等知識。但由于部分文科學生基礎薄弱等多種原因，在學習生物化學之前，對醫學相關課程特別是醫用化學的知識掌握程度不夠。（6）缺乏師生交流。授課教師與學生的交流機會少，導致學生在日常學習中遇到問題得不到及時解答，挫傷了學生學習的欲望。
2微信平臺在生物化學教學中的應用
微信是一款具有支持語音、視頻、圖片和文字傳送，具有多人群聊、實時交流功能的特色手機應用軟件[2]。隨著微信平臺在大學生中的普及，在高校各學科教學應用的越來越廣泛，給高校師生提供了一個彼此交流、共享知識的新的輔學習平臺。它是移動學習和傳統課堂教學相結合的一項新技術，是一種易于接受的輔助教學手段[3]。授課教師可以根據課程特點與學生特點，進行針對性的教學設計，通過微信平臺傳送到學生手機終端。學生可以隨時進行課下學習，解決問題，充分實現師生互動交流，是傳統教學模式的一種創新。
2.1課前建立資源庫，充分準備教學內容
上課一周前，組建授課班級微信群，推送相關學習材料（包括教學目標、教學重難點、教學課件、知識點總結、自主學習任務單、同步習題等），讓學生對即將所學內容進行充分預習。學生通過教材、圖書館、網絡等多種途徑完成學習材料，并在上課前將預習情況通過微信反饋給授課教師。授課教師對學生反饋的情況進行分析，找出學生已經掌握的知識點和需要課堂教學重點講授的內容。同時，授課教師可以在微信平臺上傳、轉載有趣的相關病例討論資料、實時新聞、醫學前沿等，拓展學生視野，提高學習積極性，擴大學習廣度和深度，提高學生對專業的熱愛度。
2.2互動式課堂教學
通過授課教師課前的學習材料以及授課教師在課堂上有針對性地進行知識點講解后，學生則可以根據自己的預習結果在課堂教學中抓住重點，做到心中有數、有的放矢，提高學習效果。這種模式能讓學生與教師有更多的時間進行交流，使傳統的講授式教學方法轉變為師生互動交流和探討學習，從而提高了學生主動學習的積極性。
2.3課后交流反饋
通過微信平臺，學生課后學習中遇到困惑和無法解決的問題時，可及時與授課教師及班級其它同學進行互動、討論，發揮學習主動性，提高學習積極性。授課教師課后可以利用微信平臺檢查學生對所講知識點的掌握情況，然后獲得學生的反饋信息，最后進行課堂小結與反思，及時優化教學方法、方式，努力達到良好的教學效果。授課教師在每章教學結束后可以利用微信平臺進行在線測試，對學生進行階段性評價，及時了解學生的掌握情況，發現學生學習中存在的問題，及時給予糾正。
3微信平臺應用在生物化學教學中的優勢
傳統的課堂灌輸式教學模式抑制了學生的學習熱情，如何激發學生學習興趣，培養學生對知識點理解能力、應用能力是生物化學課程改革的重要目標。隨著現代網絡技術的蓬勃發展，網絡環境不斷優化，在生物化學課程改革過程中，只要合理設計，以手機為媒介的微信互動必然成為高效的教學輔助工具，發揮積極的作用[4]。
3.1傳統教學的有力補充
微信平臺的應用對傳統的課堂教學是一個有力的補充，在一定程度上能夠解決我校生物化學課時少，內容多的矛盾。在傳統的講授方式中，授課教師在課堂上機械的向學生灌輸生物化學的知識點，學生并未完全理解教師講授的內容，也不可能把課堂中學習的內容融會貫通。利用微信教學平臺，學生可以方便快捷的學習，它與傳統教學相輔相成，是傳統教學的重要補充形式。
3.2培養學生的興趣，激發學習的積極性
微信平臺是目前學生非常喜愛并經常使用的網絡交流平臺，以此平臺輔助生物化學教學，學生樂于接受。從傳統的“教師-教材-學生”轉變為新型的“教師-教材-微信-學生”，學生可以通過微信，下載到與生物化學相關的材料進行輔助學習。一方面學生在課堂上可以獲得有限的知識，另一方面學生又可以通過微信獲取更多的相關知識，這種教學模式將有助于學生將教學重點掌握的更牢，教學難點理解得更加透徹，能夠激發學生學習的興趣。在這種教學模式下，學生由“被動學習”變為“主動學習”，授課教師由“主導者”轉變為“合作者”。
3.3加強師生交流溝通，構建教學輔助平臺
教學過程是情感過程和認知過程的統一。融洽的師生感情有助于學生非智力因素的開發，并能夠提高課堂教學效果。目前，授課教師課下很少與學生當面交流并答疑解惑。學生遇到的問題如果未能及時解答，會影響學習該門課程的學習積極性和效果。微信平臺作為共同語言把授課教師與學生聯系起來，通過微信聊天、朋友圈等進行交流和溝通，拉近了師生距離，建立了良好的師生感情，使授課教師的角色由單純的老師轉變為老師和朋友，得到了學生的廣泛支持，通過授課教師和學生的互動交流，對教學目標的圓滿完成具有積極的促進作用，授課教師也能及時反思教學過程，改變教學策略，以此逐步提高教學質量。
3.4促進教師教學水平逐步提高
在以微信平臺為輔助的教學模式下，學生掌握和理解的知識進一步增加，他們會提出更多的專業問題，這就要求授課教師應充分利用課余時間拓寬知識領域，并及時掌握生物化學的最新理論和研究成果。通過微信平臺向學生介紹生物化學方向的重大進展。例如，體細胞克隆的流程，干細胞的研究進展等。這些資料給學生打開了一扇窺視生物化學前沿的窗口。微信平臺也是自由、平等的社交平臺，學生可表達自己對授課教師的喜愛和肯定，同時學生也可以向授課教師提出一些教學上的建議或意見，授課教師可以實時的根據學生的反饋及時地進行反思。這樣授課教師將會投入更多的精力和熱情在課堂教學中，不斷豐富教學內容，改進教學方法，促進教學質量的提高。
4網絡教學平臺應用展望
微信教學平臺輔助教學創造了一個新型的教學模式，實現了與傳統課堂教學的優勢互補，正逐漸成為高校生物化學教學改革的重要手段之一[5]。授課教師應該積極更新教學觀念，努力提高專業素養，掌握更多的網絡新技術，努力探索網絡環境下的教學模式，盡快適應新媒體時代教學的挑戰。如何能更好地發揮授課教師在微信平臺輔助教學中的指導作用，建立更加合理的、完善的、操作性強的網上作業、網上測試、教學效果評價體系等，還有待于進一步的研究。
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干細胞在臨床醫學中的應用范文6
【關鍵詞】 甲狀腺腫瘤； 外科手術； 保守治療； 效果
中圖分類號 R736.1 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2016）4-0046-02
doi：10.14033/ki.cfmr.2016.4.026
甲狀腺腫瘤是一種內分泌腫瘤，為臨床常見病癥，具有多發性。甲狀腺腫瘤分為良性與惡性兩種，部分發展為惡性淋巴瘤和癌癥，大多數發生良性病變。在甲狀腺腫瘤的治療過程中，隨著臨床醫學的發展，目前有多種治療方法，外科手術治療與保守治療是主要的治療方法類型[1-3]。本次研究將選取2014年3月-2015年3月筆者所在醫院收治的甲狀腺腫瘤患者78例作為研究對象，探討甲狀腺腫瘤外科手術冶療效果，現報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取2014年3月-2015年3月筆者所在醫院收治的甲狀腺腫瘤患者78例作為研究對象，隨機分為觀察組與對照組，各39例。觀察組患者男18例，女21例，年齡21～61歲，平均（42.6±13.2）歲；病程5個月～19年，平均（3.1±1.2）年。對照組患者男17例，女22例，年齡20～59歲，平均（42.3±12.9）歲；病程6個月～18年，平均（3.0±1.3）年。此次研究方法與目的均告知患者及其家屬，均在自愿原則下參加本次試驗，且簽署知情同意書。兩組患者的性別、年齡、病程等一般資料比較差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法
對照組采取保守治療。對患者疾病屬性和發展進度進行了解、分析，對患者的身體機能進行全面的檢查與分析，制定出調理方案，通過對患者體質進行有效的改善，來達到對疾病的治愈能力。
觀察組采取外科手術治療。對患者進行全面的術前檢查，主要采用CT、高頻超聲檢查，對患者的病灶性質與大小進行了解分析，制定最佳的手術時間，行手術治療。依據目前甲狀腺腫瘤外科手術治療指征標準，選取合適的外科手術治療方法。對于原發狀腫瘤（直徑
1.3 觀察指標與療效評價標準
觀察比較兩組患者治療效果和復況。療效評價指標：（1）治愈：臨床癥狀消失，無復發，無其他并發癥。（2）顯效：臨床癥狀消失，有復發或者其他并發癥。（3）有效：臨床癥狀基本消失，有復發與其他并發癥。（4）無效：臨床癥狀未改善或病情加劇[4]?？傆行?治愈率+顯效率+有效率。復發率=復發例數/（總例數-無效例數）[5]。
1.4 統計學處理
采用SPSS 17.0軟件對所得數據進行統計分析，計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。P
2 結果
2.1 觀察組患者手術治療情況
觀察組手術中出血量為20.5～70.5 ml，平均（36.5±8.5）ml；手術時間為50.6～98.5 min，平均（64.9±10.2）min；住院時間為5～13 d，平均（7.2±0.6）d。觀察組患者中出現胸部麻木不適
1例，切口淤血1例，暫時性喉返神經損傷2例，并發癥發生率為10.3%，護理之后癥狀消失。
2.2 兩組患者治療效果和復發率比較
兩組復發率比較，差異無統計學意義（P>0.05）；觀察組治療總有效率為82.1%，明顯高于對照組的61.5%，組間比較差異有統計學意義（字2=4.052，P
3 討論
本次研究結果表明，觀察組手術中出血量為20.5～70.5 ml，平均（36.5±8.5）ml；手術時間為50.6～98.5 min，平均（64.9±10.2）min；住院時間為5～13 d，平均（7.2±0.6）d。觀察組患者中出現胸部麻木不適1例，切口淤血1例，暫時性喉返神經損傷2例，并發癥的發生率為10.3%，護理之后癥狀消失。對甲狀腺腫瘤患者行外科手術冶療，手術效果較好，手術時間短，術中出血量較少，但是術后有并發癥的發生，需要結合較好的護理進行處理。對患者可能造成一定的心理緊張，需要加強對患者的心理護理。兩組復發率比較，差異無統計學意義（P>0.05），采用保守治療與外科手術治療均會出現病情反復的現象，需要在臨床醫學中對這一問題進行更加深入的研究，希望在未來能有所進展。觀察組治療總有效率為97.4%，明顯高于對照組的74.4%，組間比較差異具有統計學意義（P
林舒文[9]在腔鏡在甲狀腺手術患者應用中的護理配合與管理探討中，討論了甲狀腺腫瘤外科手術治療中腔鏡手術與術后護理之間的重要關系，與本次研究中得出術后護理能夠有效促進并發癥狀的消失具有一致性。可見，在臨床上對甲狀腺腫瘤患者進行外科手術治療的過程中，需要加強護理措施，提高護理效果，幫助患者消除術后并發癥，促進患者早日康復。李家發等[10]在甲狀腺側葉切除術治療孤立性甲狀腺結節78例臨床分析中，討論了甲狀腺腫瘤外科手術治療中甲狀腺側葉切除術對孤立性甲狀腺結節的治療效果，其總有效率為85.5%，本次研究所得結果基本一致，雖然為甲狀腺腫瘤外科手術治療中的個別手術方法的治療，但具有一定的參考價值。因此，對甲狀腺腫瘤患者采取外科手術治療方法，具有普遍的應用意義和較好的應用效果，同時能夠促進相關護理的發展。對患者的康復和生活質量的提高具有十分重要的意義。
綜上所述，本次研究通過對外科手術治療甲狀腺腫瘤的手術中出血量、手術時間以及術后并發癥、復發率的研究分析，了解到甲狀腺腫瘤外科手術冶療效果顯著，手術時間短，術中出血量較少，但是術后易發生并發癥和復發現象。同時，結合保守治療進行探討，比較兩種治療方式在甲狀腺腫瘤治療中的臨床療效，發現保守治療不會有并發癥現象的發生，在臨床治療過程中可與保守治療相結合，以促進患者病情好轉與早日康復。
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