前言：中文期刊網精心挑選了簡歷篩選范文供你參考和學習，希望我們的參考范文能激發你的文章創作靈感，歡迎閱讀。
簡歷篩選范文1
以下是小編收集整理的《用人單位如何篩選簡歷》全部內容，希望對大家有所幫助。如果您喜歡小編的推薦，請繼續關注。，給你不一樣的人生。
相信大部分人對個人簡歷的作用都有一定的了解，在編寫個人簡歷之前，需要了解招聘的信息，還需要了解關于個人簡歷篩選方式的信息，如此才能有針對的寫出高質量的個人簡歷。那么，在簡歷的篩選上，HR一般具有怎樣的特點呢?
一者，懷疑的態度用人單位的HR在篩選簡歷的時候都會帶有懷疑的態度，首先懷疑的就是你的能力，其次就是個人簡歷中信息真實性。相比較來說在個人簡歷方面，HR的經驗更多，所于看過的個人簡歷也非常多，求中有很多含有水分的個人簡歷都是造成懷疑態度的因素。那么，在編寫個人簡歷的時候尤其要注意保持個人簡歷的真實性，從而才能讓個人簡歷更加具有說服力。
二者，時間緊張、迅速瀏覽用人單位在篩選個人簡歷上，大多數都是由HR先來審核，而HR在審核上所需要瀏覽的個人簡歷非常多。那么時間上也就很緊張，因此由HR來篩選簡歷的話，一般都會十幾秒看一份。在這種快速的瀏覽下，要個人簡歷要寫的簡潔，并且有重要的關鍵詞，可以抓住HR的眼睛。
簡歷篩選范文2
個人簡歷是求職者給招聘單位發的一份簡要介紹。包含自己的基本信息：姓名、性別、年齡、民族、籍貫、政治面貌、學歷、聯系方式，以及自我評價、工作經歷、學習經歷、榮譽與成就、求職愿望、對這份工作的簡要理解等。
現在一般找工作都是在通過網絡來找，因此一份良好的個人簡歷對于獲得面試機會至關重要。
你所編寫個人簡歷能夠讓用人單位認可，則求職的面試機會才能夠獲得。用人單位在招聘上也是先征集個人簡歷，然后從個人簡歷中篩選自己所需要的人才，也就是說求職成功首先需要通過篩選部分。招聘官在篩選簡歷的時候，也頗具特點。一來其篩選的時間非緊迫，一份個人簡歷瀏覽的速度非?？?，二來在篩選個人簡歷上，也是一個體力活，長時間的看個人簡歷也會造成審美疲勞。
那么，就個人簡歷的篩選特點來看，要如何來有針對的來寫呢?
一、個人簡歷要有重要的關鍵詞
在個人簡歷編寫原則上，首先要求的就是精簡，個人簡歷的篇幅不能過長，最好是能偶在十秒鐘的時間內能夠讀完。在這種快速閱讀的情況下，哪些信息能夠給對方留下印象呢?自然是一些關鍵詞，關鍵詞在快速瀏覽中能夠起到指引的作用，也能夠起到的優勢暗示的作用。因此，在編寫個人簡歷的時候也要注意關鍵詞的使用。
二、個人簡歷要有個性化的設計
招聘官在篩選個人簡歷上長久的時間會導致審美疲勞，如果你的個人簡歷沒有任何特點，又不巧是排在下面的，那么很容易就會被忽略掉。在編寫個人簡歷的時候，適當的追求個性化也可以提高個人簡歷的好感度，進而被對方所關注。
三、有足夠的亮點吸引對方
簡歷篩選范文3
關鍵詞：向日葵黃萎??；抗性品種；病圃；篩選鑒定
中圖分類號 S435 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2013）21-39-03
向日葵（Helianthus annuus L.）是重要的經濟作物，在我國主要利用其油用和食用價值。它具有耐鹽堿、耐貧瘠、抗干旱、適應性強等特性，在許多國家廣泛種植。近年來，由于土地面積有限，輪作倒茬受到限制，使得向日葵病害不斷加重，導致向日葵單產下降，造成向日葵經濟效益的降低，嚴重影響向日葵生產[1-2]。
向日葵黃萎病是向日葵普遍發生的一種病害，特別是近年來向日葵黃萎病的嚴重發生極大地影響了向日葵種植業的穩步發展。目前，該病在我國東北3省、寧夏及內蒙古等向日葵產區均有發生，一般年份發病率達10%，嚴重年份可達50%～64%[3-6]。近幾年，由于外來品種的引進等各種原因，赤峰地區向日葵黃萎病發病率也逐年提高。本試驗以生產中大面積推廣的向日葵品種和育種單位新近培育的品種作為試驗材料，采用自然病圃的方式進行田間抗性篩選，以期為生產中選用抗病品種防治向日葵黃萎病提供依據[7-9]。
1 材料與方法
1.1 材料 供試向日葵品種由國家向日葵產業體系各試驗站提供，共52個向日葵品種。其中食葵品種28個，油葵品種22個，另外設置食葵感病對照LD5009和油葵感病對照諾葵212。
1.2 方法
1.2.1 自然病圃 病圃位于內蒙古赤峰市農牧科學研究院試驗地，為多年向日葵重茬地，向日葵黃萎病發病嚴重，該地塊一直作為向日葵研究所的向日葵黃萎病病原圃。隨機區組排列，52個品種各設置3個重復，每個重復播種50穴。
1.2.2 調查方法 在向日葵的各生育期觀察記載發病情況，盛花末期對全部植株進行病情調查。調查各品種的發病情況，計算病株率、病情指數和相對病情指數。
表1 成株期向日葵黃萎病分級標準
[病級＼&代表值＼&病變面積占整個葉片面積百分比（%）＼&1＼&0＼&0＼&2＼&1＼&0.1～25.0＼&3＼&2＼&25.1～50.0＼&4＼&3＼&50.1～75.0＼&5＼&4＼&75.1～100.0＼&]
1.2.3 調查結果計算 按照計算各品種3次重復的品種病株率、病情指數和相對病情指數的平均值，以平均相對病情指數確定品種的抗病性。用下列公式計算各指標：
病株率發病率（%）=（發病株數/調查總株數）×100
病情指數=[Σ（各級病株數×相應病級）/調查總株數×最高病級（4）]×100
校正系數（K）：K=50/感病對照品種的實際病情指數
為保證鑒定結果的準確性，要求K值范圍在0.75～1.25之間。
相對抗病指數（X）=K×鑒定材料的病指
2 結果與分析
2.1 校正系數 校正系數（K）：K=50/感病對照品種的實際病情指數。所以，分別利用食葵感病對照LD5009和油葵感病對照諾葵212計算食葵品種和油葵品種的校正系數。
食葵校正系數：K1=50/66.51=0.75
油葵校正系數：K2=50/43.37=1.15
K在0.75～1.25（相當于病情指數40.00～66.67）時，鑒定結果可靠。
2.2 食葵和油葵品種的抗向日葵黃萎病鑒定結果
2.2.1 食葵品種的抗性鑒定結果 如表3所示，28個食葵參試品種中，有感病品種（S）13個，中抗品種（MR）4個，抗病品種（R）5個，高抗品種（HR）6個。
其中6個高抗品種分別是JK102、JK103、JK107、JK108、巴葵138、甘10138；5個抗病品種分別是科陽1號、BK11-90、赤3009、新食葵7號、赤4072×2R。在食葵品種中，高抗向日葵黃萎病的品種植株發病率均低于25%。
2.2.2 油葵品種的抗性鑒定結果 如表4所示，22個油葵參試品種中，有高感品種（HS）3個，感病品種（S）2個，中抗品種（MR）3個，抗病品種（R）11個，高抗品種（HR）3個。
其中11個抗病品種分別是隴葵雜1號、赤CY101、S67、S31、57151×52284、赤KY11-23、赤KY11-06、赤KY11-46、S27、赤KY11-52、赤128A×116R；3個高抗品種分別是F08-02、S26、赤CY102。在油葵品種中，植株發病率普遍較高，3個高抗品種的植株發病率也高于30%。
3 結論與討論
利用向日葵黃萎病自然病原圃對多個向日葵品種進行向日葵黃萎病抗性鑒定，得出結果：28個食葵參試品種中，有感病品種（S）13個，中抗品種（MR）4個，抗病品種（R）5個，高抗品種（HR）6個；22個油葵參試品種中，有抗病品種（R）11個，高抗品種（HR）3個。
其中6個高抗食葵品種分別是JK102、JK103、JK107、JK108、巴葵138、甘10138；5個抗病食葵品種分別是科陽1號、BK11-90、赤3009、新食葵7號、赤4072×2R；11個抗病油葵品種分別是隴葵雜1號、赤CY101、S67、S31、57151×52284、赤KY11-23、赤KY11-06、赤KY11-46、S27、赤KY11-52、赤128A×116R；3個高抗油葵品種分別是F08-02、S26、赤CY102。說明這些品種較為適合在本地區種植，并且大面積發生向日葵黃萎病的概率較低。
食葵品種中感病品種較多，而抗病和高抗品種較少，說明食葵品種普遍對向日葵黃萎病的侵染較為敏感。油葵品種中高抗和抗病品種較多，而感病和高感品種較少，說明油葵品種對向日葵黃萎病的侵染普遍不敏感。
6個食葵高抗品種的植株發病率均低于25%，而3個油葵高抗品種的植株發病率均高于30%，且油葵品種的植株發病率普遍較高。
本試驗不僅鑒定了多個食葵和油葵高抗及抗病品種，并且建立了本地區唯一的向日葵黃萎病自然病原圃，為今后向日葵黃萎病抗病品種的篩選和鑒定奠定了基礎。
參考文獻
[1]蘭海燕.幾種向日葵菌核病抗性鑒定方法的比較[J].植物保護，2000，26（6）：26-28.
[2]曹麗霞，徐利敏，云曉鵬，等.內蒙古地區向日葵主要病蟲害發生現狀及研究建議[J].內蒙古農業科技，2009（6）：83-85.
[3]曹雄，卜浩宇，趙君，等.向日葵黃萎病的研究進展[C].中國植物病理學會2011年學術年會論文集，2011.
[4]曹雄.向日葵黃萎病發生規律及向日葵抗黃萎病機制的研究[D].呼和浩特：內蒙古農業大學，2012.
[5]付劍樺.新疆北疆地區向日葵黃萎病病原與品種抗性研究[D].烏魯木齊：新疆農業大學，2012.
[6]張翠芳.棉花抗黃萎病鑒定體系的優化和抗性機制的研究[D].烏魯木齊：新疆農業大學，2010.
[7]樂素菊，儲王龍，邵光金，等.利用自然病圃初步評價茄子資源對青枯病的抗性[J].江西農業科學，2011，23（3）：98-101.
簡歷篩選范文4
/
1 ClB法簡介
ClB系果蠅中，X染色體上有三個特殊序列：C為染色體某片段位置顛倒的區段，可以抑制帶有ClB的X染色體與另一X染色體交叉互換；隱性致死突變基因l，致使該基因的純合果蠅致死；顯性棒眼基因B，有ClB的X染色體的雌蠅具備棒眼性狀。檢測的方法是讓經X射線照射的受檢雄蠅與具有ClB的X染色體和普通X染色體的雌蠅（圖1），產生的F1棒眼雌蠅再與正常眼雄蠅雜交（圖2），觀察子二代的性狀。（1） 如果F2中沒有雄蠅，則受檢雄蠅的X染色體產生了隱形致死突變基因l；（2） 如果F2中，雌蠅∶雄蠅=2∶1，則受檢雄蠅的X染色體沒有產生隱形致死突變基因l。如果不是致死變異，只是普通的隱性突變，則F2雄蠅都表現為隱性突變性狀。因此，可以讓F1全部雌蠅分別與正常眼雄蠅，調查F2中不出現雄蠅或突變性狀的雄蠅，可檢測各種突變的頻率。
2 例題
（2014年江蘇卷第33題改編）有一果蠅品系，其一種突變體的X染色體上存在ClB區段（用XClB表示）。B基因表現顯性棒眼性狀；l基因的純合子在胚胎期死亡（XClBXClB與XClBY不能存活）；ClB存在時，X染色體間非姐妹染色單體不發生交換；正常果蠅X染色體無ClB區段用（X+表示）。果蠅的長翅（Vg）對殘翅（vg）為顯性，基因位于常染色體上。圖3是研究X射線對正常眼果蠅X染色體誘變示意圖。請回答下列問題：
為了鑒定X染色體上正常眼基因是否發生隱性突變，需用正常眼雄果蠅與F1中 果蠅雜交，X染色體的誘變類型能在其雜交后代 果蠅中直接顯現出來，且能計算出隱性突變頻率，合理的解釋是 ；如果用正常眼雄果蠅與F1中 果蠅雜交，不能準確計算出隱性突變頻率，合理的解釋是 。
參考答案：棒眼雌性；雄性；雜交后代中雄果蠅X染色體來源于親代雄果蠅，且X染色體間未發生交換，Y染色體無對應的等位基因；正常眼雌性；X染色體間可能發生了交換。
解析：親代XCIBX+與X？Y雜交產生的F1中，雌性XCIBX？（棒眼）和X？X+（正常眼），雄性X+Y（正常眼）和XCIBY（死亡）。由于ClB存在時，X染色體間非姐妹染色單體不發生交換，即XCIBX？不發生交叉互換；若ClB不存在時，X？X+可能發生交叉互換。又因為F2中雄蠅的X染色體來源于親代雄蠅，Y染色體無對應的等位基因，故隱性突變可以在F2代雄性中顯性出來。當選擇F1棒眼雌性XCIBX？與正常眼雄性X+Y，F2代雄性將會出現表現型為棒眼、正常眼或棒眼、隱性突變體，可根據F2代隱性突變體在雄性中的比例，計算出隱性突變頻率；當選擇F1雌性正常眼X？X+與正常眼雄性X+Y，由于雌性染色體X？與X+可能發生交叉互換，不能準確計算出隱性突變頻率。
3 試題拓展
ClB測定法可用于檢測果蠅X染色體上的隱性突變[由顯性基因（+）產生隱性基因（-）]和致死突變（突變基因使個體死亡），并測定隱性突變基因的頻率（突變頻率是指突變個體在一個群體中所占的比例）。ClB的果蠅具有1條正常的帶有某顯性基因的X染色體（X+）和1條ClB的X染色體（XClB），基因型為XClBX+。C表示該染色體上存在1個染色體某片段位置顛倒的區段，可抑制染色體發生交換；l表示該區段有1個隱性致死基因，該基因純合的胚胎在最初發育階段死亡；B為控制棒狀眼的顯性基因。ClB測定法的過程可分為三個階段，分別用①②③表示。
（1） 由于l基因的作用，在胚胎發育階段即死亡的果蠅的基因型為 。
（2） ClB染色體上存在一個染色體片段位置顛倒的區段，可抑制四分體時期的交叉互換，可能的原因是 。
（3） ③過程雜交后代中雌性果蠅共1 600只，雄性果蠅中隱性個體20只，則基因（+）的突變頻率為
。
（4） 經誘變處理后的基因通常具有較高的突變頻率，如果③過程雜交后代中未發現雄性的隱性個體，最可能的原因是 。
（5） 控制果蠅灰身（D）和黑身（d）的常染色體上一對等位基因?，F有基因型為DdXClBX+和DdX+Y的一對親本，則雜交后代中灰身正常眼的個體所占比例為 。
參考答案：（1） XIXI和XIY
（2） ClB染色體上存在一個染色體片段位置顛倒的區段，與另一條X染色體無法正常配對而抑制了交叉互換
（3） 2.5%
簡歷篩選范文5
【關鍵詞】FGF-21；藥物篩選；糖尿病藥物
糖尿病是臨床常見的代謝性疾病，全球糖尿病患者的數量已經達到了2億以上，其中2型糖尿病患者的比例約占90%［1］。2型糖尿病的發病機理相當復雜，目前治療主要通過藥物作用胰島β細胞或者改善胰島素的敏感性進行治療。但是以上療法療效低且伴有明顯的不良反應。FGF-21在血糖控制方面具有重要作用，目前FGF-21是臨床篩選新型降血糖的新藥物。FGF-21的生物學作用與傳統FGF家族信號通路不同，其不與FGFR之間特異性結合，FGF-21則與p klotho轉膜蛋白相互作用來調節脂肪細胞對葡萄糖的吸收［2］。本研究以FGF-21信號通路作為靶點，建立了糖尿病新藥篩選的模型。
1材料與方法
1.1pBMN-p klotho-IRES-EGFP病毒載體本研究根據pklotho基因設計引物，PCR擴增p klotho基因，PCR反應條件如下：98 ℃預變性5 min, 98 ℃變性1 min, 55 ℃ 退火30 s, 72 ℃延伸1 min,循環30次,72 ℃延伸 7 min, 瓊脂糖凝膠電泳對PCR產物進行分析。將pBMN-IRES-EGFP 載體與PCR擴增產物采用 SacII 和 EcoRI進行雙酶切，然后用T4 DNA連接酶將載體和目的片段酶連，得到pBMN-p klotho-IRES-EGFP載體［3］。轉化DH5α在氨芐LB平板篩選陽性克隆，陽性克隆小提質粒進行雙酶切鑒定，陽性克隆進行測序鑒定。測序正確者采用質粒大提試劑盒提取質粒，用于病毒包裝。
1.2病毒收集和包裝293E細胞用10%FBS+DMEM培養液，置于37 ℃、5% CO2培養箱中進行培養，待細胞生長到狀態良好后接種于6孔板，當細胞生長至85%時，用Lipofectamine 2000將重組質粒 pBMN-p klotho-IRES-EGFP 載體轉染293E細胞，具體步驟根據說明書進行，轉染8 h后更換新鮮培養基，36 h后收集培養上清，0.45 μm濾膜對病毒上清液進行過濾。NIH3T3 細胞分別接種于6孔板，細胞貼壁后將上清液棄掉，然后加逆轉錄病毒上清液0.5 ml,置于37℃、5% CO2培養箱中培養48 h，然后將細胞消化，同時以未感染的細胞作為陰性對照，細胞用PBS洗3遍，重懸于500 μlPBS中；采用流式細胞對陽性細胞百分比進行分析，并對病毒的滴度進行計算。
1.3穩定細胞系的構建在上述的具有較高滴度的病毒上清液中加入polybrene，使其終濃度為5 μg/ml。3T3-L1前體脂肪細胞接種于6孔板，生長至指數生長期后，加入上述液體感染，置于細胞培養箱中培養，連續感染4 d。結束后用胰酶消化細胞，并采用流式細胞術進行分選。為了得到能夠穩定表達P klotho的3T3-L1穩定細胞系，流式分選時應保持無菌條件，每6 d再次篩選，直到得到穩定細胞系為止。
1.4葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法分析上述構建的穩定3T3-L1-pP klotho細胞在無血清培養基中培養12 h，細胞用人源的不同濃度的FGF-21和人重組胰島素(1、10、100及1 000 nmol L-1)處理細胞24 h，對培養上清中的葡萄糖含量進行測定。設立三個復孔。
2結果
2.1重組pBMN-p klotho-IRES-EGFP 的鑒定本研究根據GenBank提供的序列設計引物，以P klotho 基因的質粒為模板擴增出了與預期分子量大小一致的基因片段。然后將pBMN-IRES-EGFP病毒載體與PCR產物進行雙酶切，酶連轉化DH5a，在抗生素平板上篩選，生長的克隆提取質粒進行雙酶切鑒定，陽性克隆送基因公司進行測序，測序結果顯示PCR產物與GenBank提供的基因序列相同。
2.2病毒滴度的測定和穩定細胞系構建逆轉錄病毒上清液0.5 ml感染NIH3T3細胞，感染48 h后消化細胞進行流式細胞術分析，并計算病毒滴度，結果顯示病毒的滴度為8×109。將獲得的新鮮的缺陷性病毒上清感染3T3-L1脂肪細胞，經過多輪篩選后得到了穩定表達p klotho細胞系。
2.3FGF-21與人重組胰島素介導3T3-L1-p klotho細胞的活性檢測用不同濃度梯度的FGF-21與胰島素處理3T3-L1細胞和3T3-Ll-p klotho穩定細胞系24 h，對不同濃度下的葡萄糖消耗量進行檢測，結果如表1所示，FGF-21和胰島素對3T3-L1細胞葡萄糖消耗沒有影響，而對3T3-Ll-p klotho穩定細胞系的葡萄糖消耗呈現濃度依賴性的促進作用。當FGF-21與胰島素的濃度達到1 000 nmol L-1時，葡萄糖的消耗率最高。
表1不同濃度梯度的FGF-21與胰島素對葡萄糖的消耗分析
組別3T3-L1細胞(%)3T3-Ll-p klotho穩定細胞系(%)11010010001101001000FGF-2115.4±1.216.3±2.016.9±2.317.0±2.135.5±3.544.3±4.254.7±3.563.6±3.9胰島素20.1±3.422.1±3.019.8±3.521.1±4.230.5±2.339.4±4.243.5±3.253.2±2.8
作者單位：457001河南省濮陽市油田總醫院藥劑科3討論
FGF-21是由肝細胞分泌的一種多肽，其具有不依賴葡萄糖而促進糖的吸收的作用［4］。目前，關于FGF-21的分子機制研究較少，但是現已研究顯示其在調節血糖方面具有重要的作用，暗示其可能在糖尿病方面意義重大。由于FGF-21與其受體P klotho 結合發揮作用，本研究以P klotho作為靶點建立了糖尿病藥物篩選模型［5］。
本研究以3T3-L1細胞為基礎，采用逆轉率病毒將P klotho整合到3T3-L1細胞的基因組上，最終篩選出了穩定表達p klotho受體的細胞株。同時通過FGF-21與胰島素處理測定了該細胞對葡萄糖的吸收，結果顯示其可對FGF-21蛋白和胰島素做出反應，具有劑量依賴性。目前高通量藥物篩選是藥物開發的主要手段。本實驗建立了可穩定表達p klotho的細胞系，對FGF-21相關的藥物的篩選提供了平臺。
參考文獻
［1］Yie J, Hecht R, Patel J, et al. FGF21 N-and C-termini play different roles in receptor interaction and activation. FEBS Lett, 2009, 583: 19-24.
［2］Tomiyama K, Maeda R, Urakawa I, et al. Relevant use of Klotho in FGF 19 subfamily signaling system in vivo. Proc Natl Acad Sci USA, 2010, 107: 1666-1671.
［3］Ogawa Y, Kurosu H, Yamamoto M, et al. p Klotho is required for metabolic activity of fibroblast growth factor 21. Proc Natl Acad Sci USA, 2007, 104: 7432-7437.
簡歷篩選范文6
【摘要】 應用現代科學技術研究中藥有效成分，是中藥現代化研究的重要內容。利用分子烙印高分子制成親和色譜柱，利用色譜分離技術的高速高效性和質譜測定技術的高靈敏度和獨有的混合解析能力，在線連接HPLC-MS，可以直接從中藥復雜體系中分離、篩選出有效成分并進行直接鑒定，實現中藥有效成分的分離、篩選、鑒定一體化技術。文章簡要從分子烙印聚合物及其制備、模板分子、功能性單體及聚合條件的選擇、技術特點、應用狀況及前景等方面簡單介紹中草藥有效成分篩選鑒定一體化技術中最有應用前途的分子烙印高分子技術。
【關鍵詞】 中藥有效成分； 分離篩選鑒定一體化技術； 分子烙印技術
Abstract：It is an important aspect of modernization for Chinese traditional herb that active composition of Chinese traditional herb is studied with modern science and technology.Affinity chromatography is prepared through molecularly imprinted polymers (MIPs) . Based on high performance of chromatographic separation technology and highly sensitive and special combinational analysis ability of mass spectrogram， MIP-HPLC-MS is connected. Therefore， active composition from Chinese traditional herb may be separated， selected and identified， which realized combinational technology of separation， selection and identification for active composition of Chinese traditional herb. The mechanism of molecular imprinting technology (MIT) and synthetic processes of MIPs were introduced in this paper. Application of MIT for separation， selection and identification for active composition of Chinese traditional herb were summarized， and the trends of MIT were also discussed in this paper.
Key words： Active composition of Chinese tradational herb； Combinational technology of separation，selection and identification； Molecular imprinting technology
隨著科學技術的快速發展，現代藥物的創制經歷了由快速、低成本向研發周期延長、高成本的模式發展。為了加速新藥研制的速度，歐美制藥公司不斷地采用及開發先進技術。例如，采用組合化學方法快速生產建立包含成千上萬化合物的庫；采用各種快速高效的篩選檢測方法去發現藥物前體；將藥物新陳代謝機理和毒性的研究提前到藥物發現這一環節來進行等。中藥是我國的優秀特色醫藥遺產，其種類繁多，歷史悠久，實踐證明對許多疾病療效確實。因此，從中草藥中創制新型藥物是切實可行又簡捷的方法。
應用現代科學技術研究中藥有效成分，是中藥現代化研究的重要內容。經過幾十年的努力，已經取得了許多重要成果，發現了大量活性化合物，有些已經開發成新型的藥物。事實證明，中藥有效成分是中藥發揮治療作用的物質基礎。但到目前為止，僅有一百多種常用中藥的主要成分經過了比較詳細的研究，大量中藥及其成分仍有待研究。研究中藥含有的有效成分，特別是對大量的中藥進行活性成分的研究，應用高通量藥物篩選的方法具有明顯的優勢，可以提高研究速度和效率。高通量藥物篩選需要大量的樣品，也可以借助新的樣品制備方法和設備，提取不同的樣品，包括單一化合物、提取組分或部位。同時積累各種中藥樣品，建立樣品庫，供不同的篩選模型使用，提高樣品的利用率。對中藥單一化合物成分的活性篩選，可以根據獲得的結果直接評價化合物的生物活性和藥理作用。但對于含有多種成分的提取物或部位，則可以根據活性結果進行跟蹤提取分離，最終發現活性化合物或確定活性組分［1］。
將化合物分離鑒定手段與高通量藥物篩選技術相結合，可以直接對提取的組分進行分離和活性檢測并鑒定，不僅可以節省研究費用，提高發現活性化合物的速度，同時也可以保證研究目標的準確性。
基于分子識別原理，根據靶酶、分子烙印高分子及藥物抗體與活性成分結合能力的差異，分別利用靶酶、分子烙印高分子及藥物抗體制成親和色譜柱，利用色譜分離技術的高速高效性和質譜測定技術的高靈敏度和獨有的混合解析能力，在線連接HPLC-MS，可以直接從中藥復雜體系中分離、篩選出有效成分并進行直接鑒定，實現中藥有效成分的分離、篩選、鑒定一體化技術，其過程如圖1所示。這是最近幾年出現的藥物篩選新技術之一［2］。如利用細胞膜色譜法篩選鑒定了當歸、太白花、紅毛七中的有效成分［3～5］；利用抗體親和色譜柱篩選出抗丙型肝炎的先導化合物；利用分子烙印聚合物親和色譜柱成功篩選出抗腫瘤的EGFR抑制劑，實驗證明活性化合物在這幾種柱中的保留時間與活性成正比［6］。
圖1 中藥有效成分的分離、篩選、鑒定一體化技術（略）
由于MIPs具有較高的預定選擇性，獨特的化學、物理穩定性，分子識別能力不受酸、堿、熱、有機溶劑等環境因素影響的優點，以及制備簡單、可重復使用等特點，在分離、分析中展示了美好的應用前景。下面從分子烙印聚合物及其制備、模板分子、功能性單體及聚合條件的選擇、技術特點、應用狀況及前景等方面簡單介紹中草藥有效成分篩選鑒定一體化技術中最有應用前途的分子烙印高分子技術。
1 分子烙印聚合物及其制備
分子烙印技術，也稱分子印跡技術（MIT），其應用前提是能夠制備出具有分子識別能力的聚合物材料-分子烙印聚合物(MIPs)。MIPs的制備過程大致為：①將模板分子和功能單體按照一定比例混合后在一定條件下反應，通過共價鍵或非共價鍵作用形成可逆的模板分子-功能單體復合物；②加入交聯劑等，使之與前面的模板-功能單體復合物通過聚合反應形成多孔性的高聚物；③將模板分子從高聚物中抽提出來，這樣在聚合物的骨架上便留下了一個對模板分子有“預定”選擇性的分子識別位。分子烙印聚合物中的空腔和模板分子形狀、大小完全一樣，從而實現對模板分子的特異性識別。其過程見圖2 ［7］。
根據模板分子和功能單體形成復合物時作用力的性質，MIPs分為共價型和非共價型兩種。共價型MIPs制備過程中，模板分子和功能單體通過可逆的共價作用，如形成可逆的硼酸酯和席夫堿。而在非共價型MIPs生成過程中，模板分子和單體則可通過氫鍵、偶極、離子、金屬螯合、電荷轉移、π-π共軛作用、疏水乃至范德華力等相互作用形成復合物。
圖2 分子烙印材料的制備過程示意圖（略）
當這些微弱的相互作用在溶液中建立起來后，參與自組裝的分子自發地安置在液相溶劑中，聚合作用被引發，這些分子因高度的交聯聚合作用而在空間上被固定，然后將模板分子抽提移走，中間形成一個空穴。用這種方法合成的MIPs檢驗模板分子和/或類似物時，其擴散進入分子烙印聚合物的互補位置，它們之間又能重新成鍵。
共價型MIPs中，單體-模板所形成的配合物十分穩定，且相互間存在著當量關系。因此分子烙印過程（即高聚物內客體鍵合點的結構等）明確而清晰；由于共價連接的穩定性，因此可在較寬的聚合條件下，如在高溫，高或低的pH，或高極性溶劑中進行聚合。但是，單體-模板配合物的合成較困難，同時也不經濟；可以采用的可逆共價聯接體系數目有限；在某些情況下，會因第3步劇烈的工作條件（使共價鍵聯接斷裂）而使烙印效果變差；客體的結合和釋放都較慢，這是因為它們都涉及鍵的形成和斷裂過程。
非共價鍵型MIPs中，不必合成共價的單體-模板配合物；因為其之間僅有較弱的非共價相互作用力，可在溫和的條件下將模板從聚合物中除去，同時客體的鍵合和釋出都有很快的速度。但是，烙印過程的輪廓不夠清晰，因為單體-模板加成物易于變化，而無嚴格的計量關系；聚合過程的條件必須仔細加以選擇，使混合物中非共價的加合物能最大程度的穩定存在；由于在大量功能單體存在的條件下（為使平衡有利于加合物生成）常會出現非特征的鍵合點，于是體系結合底物的選擇能力降低。對非共價鍵克侖特羅MIPs的液相色譜特性的研究表明，在磷酸鹽緩沖液/乙腈洗提條件下，其可以識別出其他所有腎上腺素結構樣物質［8］。目前絕大多數MIPs均是通過非共價型MIT制得的。
除了以上兩種基本模式以外，還有一種將這兩種模式綜合在一起的技術，即聚合時功能性單體與模板分子間的作用力是共價鍵，而在對烙印分子的識別過程中，二者之間的作用力是非共價鍵。Whitecombe等［9］將膽固醇與功能性單體4-乙烯基苯基碳酸酯共價結合后，用堿水解時隨著CO2的釋去而打開了單體和烙印分子間的共價鍵，此時MIP上便產生了一個非共價型的分子識別位，在分子識別中通過氫鍵結合膽固醇。用這種方法已經制備了體積較大底物（如藥物分子、類固醇、糖類等）的分子烙印聚合物，這些聚合物具有多位結合的結構。
2 模板分子、功能性單體及聚合條件的選擇
MIPs形成中經過的兩大步驟是兩個相反的過程，它要求模板分子既能參加聚合反應，又能提取出來。作為模板的分子都應含有形成弱相互作用力或可逆共價鍵的基團，能滿足要求的化合物主要有糖類（包括甘露糖、半乳糖、果糖）、氨基酸及其衍生物；蛋白質、核苷酸及其衍生物；嘌呤、嘧啶等生物堿；羧酸、二醛、膽固醇、維生素、酶、神經遞質如乙酰膽堿；殺蟲劑、除草劑、染料、藥物以及重金屬等。
功能單體的選擇主要由模板分子決定，首先必須能與模板分子成鍵，且在反應中它與交聯劑分子處于合適的位置，能使模板分子恰好鑲嵌其中。常用的功能性聚合單體有甲基丙烯酸（MAA）、4-乙烯苯基硼酸、吡啶衍生物、丙烯酰胺等等。一般認為MAA與氨基之間可發生質子化作用，同?；?、羧基、氨基甲酸酯之間可產生氫鍵作用。為得到穩定的模板-單體復合物，所選擇的功能單體應與模板間存在盡可能強的分子間作用力（如氫鍵、離子對作用等），因此對含有堿性官能團（如氨基等）的模板應選擇含羧基的功能單體（MAA等）；而含酸性功能基團（如羧基、酚羥基）的模板應盡可能用堿性功能單體如乙烯基吡啶。有時根據模板分子的結構，采用與模板分子具有多作用位點的功能單體，可使聚合物的選擇性大大提高。此外，對某些模板分子采用混合功能單體，亦能提高分子烙印聚合物的選擇性。Jorge Luis［10］在研究氯霉素分子烙印時采用混合功能單體，二乙氨基乙基丙烯酸甲酯（DAM）與2-乙烯基吡啶摩爾比是25 : 75，混合功能單體與氯霉素的摩爾比為2 : 1，在50 ℃條件下，制備的氯霉素分子烙印聚合物，實驗結果表明混合功能單體聚合物的烙印效果優于單一功能單體；Wang等［11］在研究氨基酸衍生物分子烙印時，2-乙烯吡啶和丙烯酰胺的混合物為功能單體，也得到了類似的結果。
交聯劑最常見的主要是乙二醇二甲基丙烯酸酯（EDMA）、季戊四醇三丙烯酸酯以及一些乙烯基衍生物，如二乙烯基苯等。
分子烙印過程主要通過自由基引發，其引發方式主要有高溫熱引發和低溫光引發。具體的聚合條件選擇則視具體情況而定，因為影響反應的因素很多，如濃度、溫度、光照及溶劑的種類和極性等。常用的引發劑有偶氮二異丁腈（AIBN）、偶氮二異庚腈（ADVN）等。
由于非共價作用的強弱強烈地依賴于溶液的極性，所以非共價方式一般選擇在有機溶液如氯仿、甲苯中進行，而共價方式一般選擇在極性較強的水、醇等溶液中進行。
3 分子烙印技術(MIT)的特點
3.1 選擇性高MIP依靠分子形狀、大小及官能團進行分子識別，類似于生物體系中酶對底物、抗體對抗原或受體對抑制劑的作用，因此，其對模板化合物及其類似物（包括空間結構相似的化合物）具有較高的選擇性，在某些體系中，MIP的識別已優于傳統方法制備的抗體，從而MIP又被稱為模擬抗體。目前，MIP作為分子識別材料，除了被用于手性分離、免疫分析、傳感器、模擬酶催化以外，在固相萃取(SPE)方面的應用也越來越引起人們的注意。
3.2 穩定性好與生物大分子（酶或抗體）相比，MIP具有制備簡單、周期短、性質比較穩定（耐酸、堿，耐高溫、高壓等）、可在普通條件下存放、能重復多次使用的優點。
3.3 藥物篩選模型的替代性對有些疾病尚無篩選模型或所建立的藥物篩選模型繁瑣危險性較高，可以以對該疾病防治確實的已知藥物為模板，研制MIP與高效液相和色譜聯用技術作為高通量預篩模型的最佳替代，前景廣闊。
3.4 應用范圍廣利用MIPs的選擇性，用其作為吸附劑可以實現對目標化合物的提取、純化和濃縮，使之達到能夠被直接檢出的濃度，從而降低檢測限，提高分析的準確性和精密度，克服樣品體系復雜、預處理繁瑣等不利因素，為痕量組分的富集和分析提供極大的方便。隨著研究的深入，MIT與色譜、毛細管電泳、熒光、電分析法等分析、分離手段結合，利用MIPs的選擇性以及多孔性，在藥物分析、有害成份檢定、環境監測以及催化方面得到廣泛應用。
3.5 藥物研發應用前景大MIP與高效液相和色譜聯用技術可以在中藥研究開發的如下四大領域應用［2］：
3.5.1 尋找先導化合物以一種已知的活性化合物為模板合成相應的分子烙印聚合物，可以將其用于合成的組合化學庫或者天然組合化學庫-中藥體系(包括復方)，直接從構型多樣的庫中提取出來其他結構類似的先導化合物，從而避免了傳統分離提取的非特異性和低效性。
3.5.2 尋找已知藥物替代品高活性的抑制劑在成為藥物之前，必須經過藥理研究、毒性篩選等，許多有效的抑制劑往往因為高毒性或副作用，或者在體內吸收不好而無法最終成藥。而中藥的毒性較小。若以某種高效高毒性的分子作為模板分子烙印出來的聚合物，可以直接從這種天然組合化學庫中篩選出來其他有效并且低毒性的化合物作為替代品；或者某種高效無毒的藥物分子由于合成困難而導致非常昂貴，此時也可以用分子烙印的方法尋找其他成本低廉且容易得到的替代品。
3.5.3 高效提取微量(或痕量)成分在中藥的傳統分離提取過程中，許多有效成分往往因為含量低微而被漏篩或者難以純化出來，利用分子烙印的強特異性和高選擇性可以將一些含量很低的化合物直接從粗提物中提取出來。
3.5.4 制定中藥質量標準中藥在中國的應用已經有幾千年的歷史，但往往由于其成分的復雜性和有效成分不夠明確而難以在國際市場上被認可。如果能夠利用分子烙印的方法對某些有效成分的含量進行監控(可以用色譜或者質譜的手段檢測目標產物的存在及確定其含量)，制定一套質量標準，將有利于中藥的進一步應用推廣。
4 MIT在中草藥有效成分分離鑒定中的應用研究
MIP分離化合物的機制見圖3所示［12］。MIP 應用于動物組織中藥物及其代謝物、中草藥成分提取分離的研究報告較多，也取得了一批有價值的分析方法和材料［13］。如郭文生等［14］采用分子模板聚合物技術對中草藥馬錢子Strychnos nux-vomica L. 粗提物中有效成分馬錢子堿(brucine)、士的寧(strychnine) 進行了選擇性分離。用丙烯酸為單體，TMPTA為交聯劑，合成對馬錢子堿有特異選擇性的模板聚合物(MIP)。選擇性分離出粗提物中的馬錢子堿，純度可達99.7 %，同時得到士的寧為主的生物堿，純度為94.6 %。周力等［15］制備了以槲皮素為模板的分子烙印聚合物（ABC），從沙棘粗提物中分離提取槲皮素和異鼠李素兩種黃酮，得到良好的效果。
a-表示MIP的連接位置對烙印分子有較高的裝載能力；b-表示由于烙印分子對MIP有較高的親和力使得烙印藥物分子緩慢釋放；c-表示烙印對應體（+）被吸附在MIP上，而非烙印對應體（-）由于對MIP連接位置的不相配而釋放；d-表示在連接位置，由于親和力的作用，有較低親和力的藥物被有較高親和力的藥物所取代。
圖3 類似藥物在分子烙印材料上的裝載釋放過程（略）
MIP-HPLC-MS應用于中草藥有效成分分離鑒定研究報告較少，但以僅有的報告來看，其前景看好。謝建春等［16］以駱駝蓬種籽中抗腫瘤活性化合物哈爾明及哈馬靈的結構類似物哈爾滿作為模板，用非共價鍵法制備了對哈爾明及哈馬靈具有強親和性的分子烙印聚合物。此分子烙印聚合物作為液相色譜固定相與大氣壓電離飛行時間質譜聯用，直接分離鑒定了草藥駱駝蓬種籽甲醇粗提物中所含的哈爾明及哈馬靈兩種抗腫瘤活性成分。實驗結果證明了通過分子烙印親和色譜與質譜聯用方法，快速有效地對中草藥活性成分分離鑒定是可能的。謝建春等［17］嘗試以丙烯酰胺作為功能單體，以槲皮素為模板，在極性溶劑中，用非共價鍵法制備了MIP。結果表明，MIP對槲皮素具有特異親和性，將該MIP直接分離銀杏葉提取物水溶液，得到主要含模板槲皮素及其結構類似化合物山奈酚兩種黃酮類組分。利用MIP特異親和性從中藥復方中提取、分離具有相同空間結構、相似功能團的有效部位，將會成為中藥復方有效部位提取、分離的有效手段。Vallano等［18，19］利用分子烙印的原理，以抗抑郁癥的去甲替林(NOR)為模板，將去甲替林烙印粒子填充在毛細管HPLC柱上，利用毛細管液相色譜篩選結構類似的抗抑郁癥化合物，結果表明具有和模板大部分結構類似的化合物都能被印跡分子所識別， 尤其是具有環和亞胺的化合物選擇性更好。
5 MIT的發展趨勢
分子烙印高分子技術與分離鑒定的一體化技術，其核心是基于MIPs的快速高效發展。在未來一段時間MIT的研究可能主要集中在如下幾個方面：①分子烙印和識別過程的機理，從熱力學和動力學角度研究增多，從目前的定性和半定量描述向完全定量描述發展，其應用范圍進一步擴大；②合成種類更多、性能更好的功能單體和交聯劑，提高MIPs的吸附行為和吸附容量，如最近雖已提出聚酚、聚氨苯基硼酸酯、過度氧化的聚吡咯、聚氨酯、聚苯二胺、聚苯胺等，但僅能適應相應特殊要求，性能尚待完善；③分子烙印和識別過程從有機相轉向水相，以便接近或達到天然分子即模擬機體內識別系統的水平，從而提高分子烙印聚合物的選擇性和模擬受體的真實性；④在分離技術方面，手性分離和固相萃取手性藥物的MIT步入產業化階段，而商品化的可用于檢測特定化合物的MIPs將不斷出現；⑤烙印技術將從氨基酸、藥物等小分子，過渡到核苷酸、多肽、蛋白質等生物大分子，甚至生物活體細胞；⑥MIP向高效率高特異性發展，如模板與功能單體間的多位點協同作用可提高MIP選擇性，同時最好結合多種作用力。如Cheng等［20］在制備模擬酶時同時采取3種單體(MAA、4-VP和高鐵原卟啉)、3種作用力(氫鍵、靜電和金屬配位作用) ，實現了水相中高的選擇性和催化性能。
【參考文獻】
［1］ 杜冠華. 藥物篩選新技術與中藥現代化研究［J］. 世界科學技術-中藥現代化，2000，2（24）：47.
［2］ 王 夔. 中藥研究現代方法學［M］. 北京：化學工業出版社， 2004∶42.
［3］ 趙惠茹，楊廣德，賀浪沖. 用細胞膜色譜法篩選當歸中的有效成分［J］. 中國藥學雜志，2000，35（1）∶13.
［4］ 張漢利，楊廣德，賀浪沖. 太白花活性成分的篩選與藥理作用相關性研究［J］. 中國藥學雜志，2003，38（2）：∶92.
［5］ 高 琨，賀浪沖，楊廣德. 用細胞膜色譜法篩選研究紅毛七中的有效成分［J］. 中國藥學雜志，2003，38（1）∶14.
［6］ 謝建春，駱宏鵬，朱麗莉，等. 利用分子烙印技術分離中草藥活性組分［J］. 物理化學學報，2001，17 (7) ∶582.
［7］ C.J. Allender， C. Richardson， B. Woodhouse， et al. Pharmaceutical applications for molecularly imprinted polymers［J］. International Journal of Pharmaceutics， 2000， 195: 39.
［8］ Giancarlo Masci， Giulia Casati， Vittorio Crescenzi．Synthesis and LC characterization of clenbuterol molecularly imprinted polymers［J］. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis， 2001， 25(2): 211.
［9］ Michael J. Whitcombe， M. Esther Rodriguez， Pablo Villar， et al．A new method for the introduction of recognition site functionality into polymers prepared by molecular imprinting: synthesis and characterization of polymeric receptors for cholesterol［J］. Journal of American Chemical Society， 1995， 117(27): 7105.
［10］ Jorge Luis Suárez-Rodríguez， Marta Elena Díaz-García．Fluorescent competitive flow-through assay for chloramphenicol using molecularly imprinted polymers［J］. Biosensors & Bioelectronics， 2001， 16(9-12): 955.
［11］ WANG Jin-Fang， ZHOU Liang-Mo， LIU Xue-Liang， et al．Novel polymer system for molecular imprinting polymer against amino acid derivatives［J］. Chinese Journal of Chemistry， 2000， 18(4): 621.
［12］ Cornelus F. van Nostrum. Molecular imprinting: A new tool for drug innovation［J］. Drug Discovery Today: Technologies. 2005， 2（1）:119.
［13］ 林 喆， 羅 艷， 原 忠.分子印跡技術在中藥活性成分分離純化中的應用［J］. 中草藥，2007，38（3）: 457.
［14］ 郭文生，丁 超，宛彤昕，等. 從馬錢子中選擇分離馬錢子堿新方法的研究［J］. 天然產物研究與開發， 2002， 16（2）：97.
［15］ 周 力，謝建春，戈育芳，等.分子烙印技術在沙棘功效成分提取中的應用［J］. 物理化學學報，2002，18（9）：808.
［16］ 謝建春，朱麗荔，徐筱杰. 分子烙印親和色譜與質譜聯用實現中草藥活性成分分離鑒定一體化［J］. 化學學報，2002，60（3）：385.
［17］ 謝建春，駱宏鵬，朱麗莉，等. 利用分子烙印技術分離中草藥活性組分［J］. 物理化學學報，2001，17 (7) ∶582.
［18］ Vallano P T， Remcho V T. Affinity screening by packed capillary high-performance liquid chromatography using molecular imprinted sorbentsⅠDemonstration of feasibility［J］. J.Chromatogr. A， 2000， 888:23.
