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血細胞分析儀范文1
【關鍵詞】血常規分析儀；比對
由于具檢測結果準確、精密度高、操作簡便等特點，血細胞分析儀在檢驗醫學領域的應用愈來愈廣泛，但因不同品牌或同一品牌不同型號的血細胞分析儀的測定原理及方法存在相異之處，可引致測定結果出現差異。本文參考美國臨床和實驗室標準化協會頒布的EP9-A2文件[1]和國際血液學標準化委員會文件[2]本實驗室所使用的4臺血細胞分析儀測定結果執行比對試驗，以確保為臨床疾病診療提供準確、可比的血液學檢驗數據。
1資料和方法
1.1材料
1.1.1儀器和試劑四臺血細胞分析儀分別為：sysmex XE-2100i、sysmex 1800i、sysmex800i、日本光電。所用試劑均為相應廠家配套試劑，所有試劑均在有效期內使用。
1.1.2質控物均為原裝配套質控物。
1.1.3抗凝管及新鮮抗凝全血[3]乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）抗凝真空采血管購自美國BD公司，抗凝新鮮全血來自健康體檢者或住院患者。
1.2方法
1.2.1實驗方法
1.2.1.1檢驗人員熟悉每一檢測系統的各個實驗環節，熟悉評價方案。
1.2.1.2以sysmex 1800i血細胞分析系統為比較系統，sysmex XE-2100i、sysmex800i、日本光電血細胞分析系統為實驗系統。實驗系統和比較系統分別測定質控物，各項指標在控后檢測實驗樣本。
1.2.1.3每天檢測1份樣本，且在抽血后2小時內完成檢測，連續檢測30天，共檢測30份樣本。
1.2.2統計學分析計算每一項目在每臺儀器上雙份測定的均值，以sysmex 1800i為比較儀器，采用SPSS12軟件建立回歸方程。依據已建立的回歸方程，并求出最大偏倚。
2結果
三臺比對機與標準機血細胞分析儀檢測結果，經統計分析，相關性顯著，r2均大于0.95，說明三臺儀器在5項指標上均有非常高的優擬合度。最大偏倚結果均在美國CLIA，88能力驗證分析質量要求范圍內，見表1。
3討論
目前，許多醫院都有數臺血細胞分析儀，同一檢驗項目在不同儀器上的檢測結果可能存在偏差，如何保證不同檢測系統間檢驗結果的一致性、準確性及穩定性是目前醫學界關注和討論的熱點[4]。不同血細胞分析儀對同一檢驗結果的可比性是檢驗質量管理的最終目標，因此，工作中應重視實驗室內檢測系統的比對，確定比對方案并嚴格操作規程。目前許多檢測系統比對試驗是采用統計學t檢驗進行方法學比對評價，兩臺儀器檢驗結果經t檢驗，若差異無統計學意義，即認為2個檢測系統有很好的可比性。然而，這種驗證方法不夠規范[5]。《檢測和校準實驗室能力的通用要求》（GB/T15481-2000、ISO/IEC10725-1999）和《醫學實驗室質量和能力的專用要求》（ISO15189-GB/T22576）這2個國際標準對檢驗結果的可溯源性和可比性均有明確要求，強調比對試驗是實現準確度溯源和患者標本檢驗結果可比性的重要途徑。而比對試驗則要參考CLSI-EP9-A2文件，用回歸統計法分析不同系統的SE%和醫學決定水平處的SE%。以1/2CLIA，88TEa為標準，判斷檢測系統的可比性即為臨床可接受水平[6]。筆者嚴格按照CLSI‐EP9‐A2文件要求，在保證兩臺儀器精密度和穩定性良好的條件下，對其進行WBC、RBC、Hb、PLT、HCT5項檢測結果的方法學比對和評估，以比對方法為橫坐標，試驗方法為縱坐標，再進行均值散點圖的離群值檢查、相關回歸分析以及可接受性評估。本研究結果表明，四臺儀器具有良好的可比性，SE%在允許范圍內，本組比對試驗結果可以接受。另外，在實驗中要注意方法學的比較必須與臨床相結合，實驗時選擇的數據要圍繞醫學決定水平，并統計各個水平的系統誤差。若某項目只有一個臨床決定水平，需估計在實驗數據均值附近的SE%。從r值及其與1/2CLIA′88TEa比較等方面，綜合評估不同儀器檢測同一項目結果間的準確性和一致性，從不同角度評估檢測結果更為科學、客觀。各實驗室熟悉儀器的技術人員應定期對不同檢測系統的結果進行分析、評價，確保檢驗結果穩定、準確、可靠。
參考文獻
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[4]汪艷，朱敏，張靜.同型號全自動細胞分析儀的比對試驗[J].國際檢驗醫學雜志，2010，31（2）：166-167.
血細胞分析儀范文2
關鍵詞 血細胞分析儀 檢測結果 比對試驗
隨著檢驗醫學的快速發展，全自動血細胞分析儀在醫學實驗室得到廣泛使用，但由于其品牌種類多，同一實驗室可同時擁有多臺不同型號、不同分析原理的血細胞分析儀，導致同一血液標本在不同儀器之間測定的結果不可避免的會存在系統誤差。為了解兩臺血細胞分析儀的性能，并為今后的室內及室間質量控制方案做準備，保證兩臺血細胞分析儀測定結果的準確性和可比性，根據1984年國際血液學標準化委員會（ICSH）公布的關于全自動血細胞分析儀評價的文件［1］，使用標準全血質控品及患者新鮮全血標本在不同型號的血細胞分析儀上進行了WBC、RBC、HGB、HCT、PLT等5個主要項目的檢測，對所檢測的結果進行比對分析，現將比對結果報告如下。
資料與方法
標本來源：每天隨機抽取本院門診和住院患者血液標本20例，空腹靜脈血1.5ml，用EDTA-K2抗凝。儀器：Sysmex XS-800i型血細胞分析儀，倍肯公司AC-920型血細胞分析儀。試劑：稀釋液、溶血劑、清洗液等均采用原裝進口配套試劑。質控液：全血細胞質控品，由新成生物有限公司提供。
方法：實驗前首先對兩臺儀器進行日常維護，保證儀器的工作環境及運行狀態在正常狀態，再用血細胞分析儀的校準液對分析儀的主要參數進行校準，然后用質控液在Sysmex XS-800i型血細胞分析儀和瑞典倍肯公司AC-920型血細胞分析儀兩臺血細胞分析儀上分別進行檢測，并使用患者的新鮮全血樣本在兩臺儀器上分別進行檢測，使用質控液所測定的WBC、RBC、HGB、HCT、PLT等5個項目的檢測結果來評價兩臺血細胞分析儀的批內、批間精密度。
儀器穩定性監控：每臺儀器每天以全血質控物做室內質控（批間精密度），分別計算參數WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值、SD和CV。
儀器精密度測定：取正常人新鮮抗凝靜脈血1份，分別在每臺儀器重復測定10次，計算WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值，SD和CV。
結 果
精密度測定：①批內精密度：用質控液在每臺血細胞分析儀上連續測定20次。兩臺血細胞分析儀的測定結果和批內精密度均在質控品參考范圍內，經t檢驗，測定結果之間的差異均無統計學意義（P＞0.05）。②批間精密度：將質控液每日隨機插入常規標本中在每臺血細胞分析儀上檢測1次，連續20天作為每臺儀器的批間精密度。兩臺血細胞分析儀的檢測結果和批間精密度均在質控品參考范圍內［2］，經t檢驗，兩臺儀器檢測結果差異均無統計學意義（P＞0.05）。
隨機取門診和住院患者EDTA-K2抗凝全血標本20份，同時在兩臺血細胞分析儀上分別檢測兩次取其平均值。將兩臺血細胞分析儀測定的同一檢測項目的結果進行配對t檢驗（P＞0.05），說明兩臺儀器檢測的各項檢驗結果間的差異無統計學意義。
討 論
血紅蛋白含量的測定是在被稀釋的血液中加入溶血劑后，使紅細胞釋放出血紅蛋白，后者與溶血劑中有關成分結合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統，在特定波長（一般在530～550nm）下比色，吸光度的變化與液體中Hb含量成比例，儀器便可顯示Hb濃度。不同系列的血液分析儀配套溶血劑配方不同，形成的血紅蛋白衍生物也不同，但大多數的最大吸收光譜接近540nm。近年來許多高檔的分析儀上采用了激光散射法進行單個血紅細胞血紅蛋白的分析，以盡量減少高WBC、乳糜血、高膽紅素等對HBG比色的影響。
Sysmex XS-800i型血細胞分析儀利用光檢測器模塊應用流式細胞計數法進行白細胞分析和五分類分析，紅細胞檢測器利用流體聚焦法進行紅細胞和血小板計數，血紅蛋白檢測器利用SLS血紅蛋白檢測法來分析血紅蛋白。分析模式可采用手動模式和毛細管模式，為保證結果的準確性，定期對儀器進行校準，并且每天用全血質控品進行室內質量控制分析，定期參加室間質量評價活動，通過長期使用發現Sysmex XS-800i型血細胞分析儀的檢測結果重復性好，準確性高，具備完善的質量控制程序，儀器性能優良，室間質量評價成績優良，可以為臨床提供準確、快速、及時的血細胞分析檢測數據。
AC-920型血細胞分析儀利用電阻抗法進行白細胞、紅細胞和血小板的檢測，用光吸收法進行血紅蛋白的檢測，可采用預稀釋模式和抗凝全血兩種模式進行檢測，可對白細胞進行三分類分析，尤其對于不易采血的嬰幼兒可采取末梢血稀釋后進行檢測，用血量少，非常方便。
對于同一實驗室的不同類型的血細胞分析儀，定期進行比對試驗是保證其檢測結果準確性的重要手段，正確評價和合理使用血細胞分析儀，對提高臨床檢驗質量和工作效率起著積極作用。
參考文獻
血細胞分析儀范文3
為了解我室幾臺血細胞分析儀的性能，并為今后的室內及室間質量控制方案做準備，筆者采用新鮮血對本室幾臺血細胞分析儀做了比對實驗，現報道如下。
1 材料與方法
1.1 儀器與試劑：血細胞分析儀共3臺，其中Pentra-60 1臺
（ABX公司），ACT-diff2 1臺（BECKMAN公司），F-820 1臺（Sysmex公司），所有儀器都使用配套試劑，全血質控物（四川邁克公司批號090515F）。
1.2 標本收集
1.2.1 每天隨機選取臨床病人新鮮靜脈抗凝血小板（EDTA-K2抗凝）。
1.2.2 選取我院體檢正常者新鮮抗凝血標本（EDTA-K2抗凝）。
1.3 方法
1.3.1 儀器穩定性監控：每臺儀器每日以全血質控物做室內質控（批間精密度），并依據室內質控做隨程監控。分別計算參數WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值、SD和CV。
1.3.2 儀器精密度測定：取正常人新鮮抗凝靜脈血1份，分別在每臺儀器重復測定10次，計算WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值，SD和CV。
1.3.3 比對儀器的確定：根據我室的具體情況，依據室內質控，選定Pentra-60（ABX）為參考比對儀器，其他2臺為測試儀器。
1.3.4 比對實驗：每日用2.1所采集的標本4份，在3臺儀器上分別進行測試，連續26天，比較測試儀器和參考比對儀器的測定結果，包括WBC、RBC、PLT、HGB、HCT。
1.4 統計處理
1.4.1 對各個儀器與參考比儀器結果做回歸和相關分析，求其相關系數r及回歸方程y=bx+a，然后根據回歸方程求x在允許誤差內的取值范圍，即有效檢測范圍，查閱相關文獻后，參考美國CLIA’88能力比對檢驗質量要求和國際血液學標準化委員會及NCCLS制定的標準設定允許誤差為：WBC：±5%，RBC：±2%，PLT：±9%，HGB：2%，HCT：±2%。
1.4.2 以參考范圍為界限（RBC為3.5～5.5×109/L，WBC為4～10×109/L，HGB為110～160 g/L，HCT為0.37～0.55L/L,PLT為100～300×109/L）[2]，低于參考值為低值，高于正常參考范圍為高值，在參考范圍內為中間值，以參考比對儀器高中低值區段均值為測定值，計算各測試儀器相對參考比對儀器的變異百分率%=│測定值-正確值│正確值×100。
2 結果
2.1 從各儀器試驗期間室內質控結果可知CV%不大于5%，見表1，顯示各儀器在實驗期間性能穩定。
2.2 各儀器分析項目的批間精密度都在廠家規范范圍內，見表2。
2.3 比對儀器與其他2臺儀器相關分析見表3，回歸方程經方差分析推斷直線關系成立，P>0.05。
2.4 根據回歸方程Y=bx+a和設定的允許誤差范圍計算的有效測試范圍見表4。
2.5 兩臺測試儀器與對比儀器測定值間的變異百分率見表5。
3 討論
3.1 從各比對項目來看，我室ACT和F820兩臺測試儀器中，ACT和比對儀器有較好的符合性，一般在臨床應用上可以相互替換，但是在某些較低值時，見表4，WBC
3.2 F820的實驗結果就不盡人意了，可能是年代久遠的緣故（使用了8年），WBC在高于5.39×109/L時結果就會超過允許誤差，分區段計算的結果，見表5，也顯示在高值時的變異百分率8.87也超過5%，此外HCT和PLT也存在著較大偏差，需檢測一下F820的WBC、PLT、HCT的檢測系統，其中HCT有一定的影響，PLT在
3.3 在做相關分析時，相關系數R均大于0.99，見表3，但是利用回歸方程計算有效檢測范圍和高中低區段計算時仍有超出允許誤差的現象出現，此前有相關報道只利用相關系數來判定兩儀器的測定結果是否可以互換使用，這是不行的。所以在此次實驗中選用了這種方法來比較結果，可能會更準確一些。
血細胞分析儀范文4
血細胞分析儀具有快速、方便、重復性好、工作效率高等優點,但是由于自身檢測原理的限制以及血小板易于粘附、聚集、破壞等特點,血細胞分析儀測定血小板時常常會出現假性減少現象,這是臨床經常反映的問題。假性血小板減少如不及時糾正會給臨床醫生誤導,有時會引起醫療糾紛。因此,必須重視和糾正這樣的情況?，F就血細胞分析儀計數血小板假性減少原因,分析報告如下。
1 采集血液標本不順利造成
采血過程影響血小板計數的準確性,采血速度和出血是否順利是保證血小板數目準確的關鍵。手指采血時若方法掌握不當,如采血速度慢、出血不暢、擠壓采血部位等,都會造成假性血小板減少。靜脈經多次穿刺而引起的水腫及皮下出血時,因組織損傷,組織凝血因子混入血液標本中產生肉眼看不見的小凝塊,是造成血細胞分析儀計數血小板出現假性減少的常見原因之一,所以對血小板減少患者應注意閱片,必要時重新采血。
2 標本放置時間不足造成
在實際工作中,采取標本后立即進行檢測,有時會出現血小板計數假性減少現象。這是由于血小板離體后,其形態立即發生變化,其外膜形成的微小管游離端向外伸展,從而在血小板周圍形成絲狀偽足,數個這樣的血小板偽足相互纏繞,形成血小板可逆聚集體,其體積一般和淋巴細胞大小相似。由于這種血小板不被溶血劑溶解,故而使血小板計數暫時減少,隨著時間的延長,這種假性聚集發生一定程度的解聚,所以,為了提高準確性,建議在采血后放置15～20min再測定可得到準確結果。
3 計數血小板方法學的缺陷造成
自動化的血液分析儀,無論是阻抗法還是光散射法,對于血小板數及形態正常的標本,結果一般比較可靠,但是對于血小板明顯減少和/或形態異常者,所得結果誤差甚大,有時甚至難以計數。其原因是:這些方法基本上都是依據細胞的大小進行區分和計數的,而正常人的血小板體積相差甚大,可自2fl至20fl以上,其體積分布直方圖不是對稱的,而是明顯地向右延伸,即都存在一定數量的大血小板。在病理情況下,大血小板會更多地增加。由于大部分血液分析儀不能將大血小板與小紅細胞等分開,致使許多大血小板被當成紅細胞而未計入血小板總數中,從而使血小板計數結果偏低。
4 抗凝劑EDTA的影響造成
有極少數人的血小板在用EDTA抗凝時,反而會出現血小板聚集,這種EDTA依賴性假性血小板減少可能與血漿中存在的抗血小板抗體和/或抗心磷脂抗體等自身抗體有關,但無任何病理、生理意義,也與特殊藥物使用無關,多發生在腫瘤患者、自身免疫病、肺心病、晚期孕婦、肝病、毒血癥等疾病,此現象是其他疾病發生的伴隨現象。
5 藥物的影響
長期使用某些藥物如:地高辛、雙氫克尿塞、甲基多巴、青霉素等,引起血小板減少;使用促凝藥物后如:VK、VK3、止血敏等,當藥物過量或某些患者對這類藥物較為敏感時,也可發生血小板聚集。這些藥源性的血小板減少常要在停藥15～20天后可恢復。
6 輸血的影響
大量的輸入血液制品時會引起血小板減少。這種情況多在4～6天后恢復正常;此外,某些患者在輸血后一周左右,出現血小板計數明顯減少,這是因為患者對外源性血小板抗原產生同種免疫,再次輸入相應的血小板后產生血小板特異性抗原―抗體復合物,使輸入的血小板受到破壞,也使患者自身血小板破壞,引起血小板的明顯降低[1]。
7 治療方法的影響
有些治療方法對血小板的計數也會產生較大影響如血液經光量子血療儀照射后,血小板計數明顯減少,經電鏡觀察發現,照射后的血小板形態不完整,形成大量的偽足及血小板碎片[2];此外,腫瘤患者化療前后血小板數量有顯著差異,呈現先低后逐漸增高至化療前水平。
8 疾病的影響
高膽固醇和高三酰甘油血癥時,血小板聚集性增高,部分患者可以引起假性血小板減少;老年人由于動脈粥樣硬化而導致的血管壁粗糙及血液粘稠度較高,出現血小板聚集,部分患者引起假性血小板減少;部分肺部疾病及產婦或待產婦、燒傷患者等均可出現血小板聚集,尤其是慢性肺心病患者,其體內的血小板被激活,使血小板黏附、聚集、稀釋等功能增強。
綜上所述,血細胞分析儀計數血小板具有快速、簡便、重復性好等優點,然而,血小板易于粘附、聚集、破壞等諸多因素,常常造成血小板計數假性減少,從而給臨床準確診斷疾病帶來困難。針對此種情況,在實際工作中,要排除一些干擾因素,以便準確測定混有大血小板、血小板聚集等異常血液標本的血小板數,進一步保證異常血液標本中血小板檢測結果的準確性,為臨床提供可靠的診療依據。
【參考文獻】
血細胞分析儀范文5
[關鍵詞]血細胞分析儀；血小板計數；影響因素
[中圖分類號]R446[文獻標識碼]B[文章編號]1673-7210（2007）02（b）-068-02
COULTER STKS系列血細胞分析儀是利用電阻抗原理計數血小板，其臨界值為2.0～20.0 fl，而對其臨界值以外的血小板則根據正常人血小板體積正態分布的理論，通過0～70 fl的電子擬合曲線，將這些異常大小的血小板估計計入。由于具有快速、方便、重復性好、工作效率高等特點，COULTER STKS系列血細胞分析儀已被醫院檢驗科廣泛使用。但由于各種原因造成血小板檢測結果假性減少的情況時有發生。本文將對工作中造成血小板計數假性減少的原因進行探討。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 儀器COULTER STKS 全自動五分類血細胞分析儀，Olympus雙目顯微鏡，EDTA-K2真空抗凝管。
1.1.2 試劑儀器進口配套試劑，草酸銨稀釋液（按《全國臨床檢驗操作規程》配制）。
1.1.3 標本2006年3月~5月本院住院患者血常規檢驗標本120例，門診標本80例。
1.2 方法
對200例病人標本分別于0、15、30、60、120 min進行機測，觀察結果的變化；根據血小板直方圖電子擬合曲線的情況，分別進行手工計數作比較。
2 結果
正常情況下，血小板計數儀器法與手工法結果一致[1]。
但在不同混勻時間的情況下，血小板兩種方法測定的結果有所差異，且在0、15 min儀器法與手工法比較差異明顯；另外，0、15、120 min儀器測定的結果與30、60 min測定的結果亦有顯著性差異（表1）。
表1直方圖出現電子擬合曲線的標本不同混勻時間兩種方法測定結果
儀器測定血小板時，血小板直方圖通常情況下會出現一條擬合曲線。當血液中血小板形態異常時，直方圖中并未出現擬合曲線，此時血小板計數儀器法與手工法比較有明顯差異（表2）。
表2直方圖未出現電子擬合曲線的標本不同混勻時間兩種方法測定結果
3 討論
3.1 一定濃度的EDTA-K2作抗凝劑絡合了血液中的鈣，使血液抗凝。血液標本與抗凝劑混勻時間對結果影響很大。EDTA-K2會使血小板形態發生變化，其外膜形成的微小管游離端向外伸展，從而在血小板周圍形成絲狀偽足，數個這樣的血小板偽足相互纏繞，形成血小板可逆聚集體，由于儀器只識別顆粒大小而不區分顆粒性質，且血小板與紅細胞計數在同一通道進行，致使這些血小板被誤認為是小紅細胞而不納入血小板計數范圍，這就是血小板混勻時間在0、15 min儀器法較手工法顯著偏低的原因。隨著時間延長，EDTA能使血小板由盤狀變為球狀，血小板偽足回縮到胞質內，相互纏繞的血小板解散[2]，血小板的計數較0、15 min的測定值高。實際操作中，由于急需報告而使待測時間縮短，往往導致血小板結果偏低。而血標本混勻超過60 min后，血小板會因離體時間太長，發生變形、自溶、體積變小，或黏附聚集和破壞，致使計數減少。所以，血小板測定的最佳時間為抽血后30～60 min，而且最遲應在120 min內完成，以避免由于混勻時間過短或過長導致血小板假性減少的情況發生。
3.2 表1與表2比較結果顯示，171例標本儀器法與手工計數結果大致相符，血小板直方圖形狀正常，有明顯的主峰；29例結果儀器法與手工計數結果則有明顯差異，血小板直方圖有多峰出現，分布低而寬，部分圖形尾巴上翹。這是因為采用電阻抗原理計數血小板的COULTER STKS系列的血球儀，為防止20 fl的小紅細胞及其他細胞干擾，僅將2.0～20.0 fl血小板直接計入，而對其臨界值以外的血小板則無法通過直接計數計入，只能根據健康人血小板體積符合正態分布的理論，通過0～70.0 fl的電子擬合曲線，將這些異常大小的血小板估計計入，由于儀器受此原理的限制，僅能對體積呈正態分布的血小板進行計數[3]。當樣本中以大型或小型血小板為主時，由于臨界值的限制，直方圖均未出現擬合曲線，檢測過程中漏掉了部分異常大或異常小的血小板，造成儀器計數血小板準確度差，血小板假性減少。因此，需進行手工計數復查。
血小板為多功能的細胞，易于黏附、聚集和破壞，測定時受諸多因素影響，正確掌握測定時間和觀察直方圖，必要時以手工復查，這樣才能得到可靠的數據，指導臨床的正常診斷與治療。
[參考文獻]
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血細胞分析儀范文6
[關鍵詞] 全自動血細胞分析儀;鏡檢;復查
[中圖分類號] R197.39[文獻標識碼] B[文章編號] 1673-7210(2010)04(b)-109-03
全自動血細胞分析儀目前已是國內外臨床檢驗最常用的篩檢儀器之一,與傳統方法相比,有著精度高,速度快,易操作,功能強的強勁優勢,尤其是現有先進血細胞分析儀(如Sysmex XE2100和貝克曼庫爾特LH755)不僅應用多項檢測原理對各項血細胞檢測參數進行分析檢測,而且可與血涂片制備和染色儀有效結合,進而為臨床不同層次需求提供更有效、精確的血細胞檢測參數,對疾病的診斷與治療有著重要的臨床意義。但是,即使再先進的血細胞分析儀也存在著自身無法彌補的缺陷,因此血細胞鏡檢和其他手工復檢還是有必要的。只有全自動血球分析儀和血細胞鏡檢有效結合才能達到更完美的目的,進而使全自動血細胞分析儀的檢測結果更有臨床實用價值。
1 全自動血細胞分析儀在臨床應用中的優點
1.1 全自動血細胞分析儀的功能
現代血細胞分析儀除擁有一般三大功能(①全血細胞計數功能;②白細胞分類計數功能;③血細胞計數和分類功能的拓展功能,包括:有核紅細胞計數;網織紅細胞計數及其相關參數檢測;未成熟粒細胞,幼稚粒細胞,造血干細胞計數;未成熟血小板比率;淋巴細胞亞型計數;血細胞免疫表型檢測等)外,其還可得知以往手工常規檢查無法檢測的參數,進而為臨床診療提供更有價值的實驗依據。
1.2 全自動血細胞分析儀的優點
在正常生理狀態下,血常規檢查時,現代血細胞分析儀各項性能評價均在可接受范圍內,且其檢測速度快、精度高、準度夠,所以現代血細胞分析儀(儀器法)是目前國內外公認的血常規篩查手段。
1.2.1有學者報道,其以手工鏡檢結果為準,利用雅培CD3700型全血細胞分析儀對醫院常規標本進行測定并對檢測結果進行統計分析,研究表明 CD3700 分析儀對形態異常細胞檢測功能的特異性為77%、敏感性為100%,檢出有效率高達83.7%。CD3700型全自動血細胞分析儀是應用多種原理、多角度對各血細胞參數進行分析的五分類血細胞分析儀,其對血細胞的檢測具有良好的技術性能,對形態異常細胞提示的敏感性高,重復性好。適用于常規標本的血細胞分析篩查。
1.2.2有資料表明,貝克曼庫爾特(BECKMAN COULTER)全自動5分類血球分析儀(5DF)可用于一般標本常規檢查的篩查方法。研究者通過其與瑞氏染色鏡檢相比較研究,得出5DF血細胞分析儀對中性粒細胞、嗜酸、嗜堿性粒細胞和淋巴細胞分類計數無明顯差異(均P>0.05),僅單核細胞分類計數儀器法比鏡檢法結果偏高(P
1.2.3有學者用邁瑞BC-5500全血細胞分析儀與現代先進Sysmex XE2100全自動血細胞分析儀作對比分析表明,二者各參數相關性良好,即二者性能相當。同時,邁瑞BC-5500全血細胞分析儀的批內、批間精密度及總精密度變異系數(CV)值均在可接受范圍內;且各分析參數的攜帶污染率小于0.5%。經試驗表明,邁瑞BC-5500全血細胞分析儀可用于日常標本篩查檢查。
1.2.4目前,血細胞分析儀有三分群和五分群之分,不僅五分群血細胞分析儀性能良好,三分群血細胞分析儀的性能也很優良。相對而言,三分群血細胞分析儀標本用量少,尤其適用于兒童末梢血的檢測分析。相關資料表明,三分類雅培CELL-DYN1800全自動血細胞分析儀各種參數性能評價良好,測定參數快速,線性范圍寬,準確度,精密度良好,各參數的攜帶污染率小于1%,線性范圍相關系數(r2)>0.99,準確性的偏離指數(DI)
1.3 全自動血細胞分析儀的拓展應用
現代先進血細胞分析儀擁有幼稚細胞檢測通道,在一定范圍(1~1 600)×106/L內,可精確地對造血干細胞計數,且其檢測結果與流式細胞術檢測無明顯差異。有資料表明,某些先進血細胞分析儀(Sysmex XE2100)能快速、高效地檢測出外周血、臍血和采集物中的造血干細胞,且具有方便快捷、標本用量少(約60 μl)、檢測時間短(75 s)、花費少等優點。所以,應用自動全血細胞分析儀來檢測造血干細胞,在外周血造血干細胞最佳采集時機的快速判斷、干細胞成功采集的預測和白血病患者造血功能恢復觀察等方面,具有良好的臨床應用價值。
2 全自動血細胞分析儀在臨床應用中的缺點
雖然,全自動血細胞分析儀擁有眾多的優勢,但是在實際工作中,其也存在著致命的弱點。
2.1全自動血細胞分析儀的白細胞分類
因為三分群血細胞分析儀主要利用電阻抗法對血細胞參數進行檢測分析,所以其存在著分類不精準的缺點,尤其是對中間型細胞群異常時的檢測及結果有所出入。有眾多資料表明,三分群ABX MRCRO S60 血液分析儀和三分群CD1800型全血細胞分析儀對兒童血標本進行檢測,并同時用手工染色鏡檢進行對比分析,研究表明,當血細胞分析儀(三分群)檢測的白細胞分類(中間型細胞群)為10%以上時,均應做瑞特染色的人工鏡檢復查,以防止幼稚細胞,異型淋巴細胞,嗜酸性粒細胞等病理性細胞漏檢。
2.2全自動血細胞分析儀的復檢體會
即使再先進的五分群血細胞分析儀也存在著一定的假陽性率和假陰性率,尤其是隨著醫學檢驗的崛起和發展,血液學和血液學檢驗創建了一個理論-檢驗-疾病相互結合,緊密聯系的新體系,且在實踐過程中不斷發展完善和提高。所以對臨床血液學常規篩查也提出更高的要求。
2.2.1實驗室數據表明,根據實際情況制訂血細胞分析儀復檢規則,則可在保證工作量適宜的情況下,提高其檢測準確率。在一定程度上可降低漏診率和誤診率。有學者報道,根據Sysmex XE2100血細胞分析復檢制定協作組的23條復檢規則和涂片陽性規則,對檢測結果進行統計分析表明,復檢率為15.27%,假陽性率6.70%,假陰性率1.86%。Sysmex XE2100血細胞分析儀白細胞復檢規則能有效提高檢測準確率,防止漏診和誤診。因此各血常規室根據實際情況制訂自己相應的復檢規則,可有效降低漏診率和誤診率。
2.2.2有些學者,將Sysmex 1800i與血涂片檢查進行對比分析,參照國際血細胞復檢相關條款,并對檢測結果進行分析,得到復檢率25%,假陽性率為20.4%,假陰性率為1.1%。說明雖然Sysmex 1800i及類似五分群機型,血細胞形態血檢查,在血常規分析中具有十分重要的意義,但是儀器法檢測的方法學具有局限性,對于形態結構異常的細胞不能作出準確的判斷和定位。一旦儀器檢查提示異常應及時涂片復查,以保證檢驗結果的準確性和可靠性。
2.3全自動血細胞分析儀的局限
無論三分群血細胞分析儀還是五分群血細胞分析儀都存在著一定的局限性(不能對血細胞形態學改變做出準確檢測)。所以在臨床工作中,由于忽視了血細胞的形態學分析,就已造成漏診,甚至誤診的現象。有學者利用臨床實例證實:儀器分類法不能將患者外周血形態異常的特征表達出來,故若將儀器的分類計數結果報告臨床,則易漏掉重要的診斷信息。對于血象有變化的病例,有其是血細胞分析儀提示異常的病例,若不做鏡檢復查,則會漏診、漏檢的現象。
2.3.1白細胞形態的改變:外周血出現幼稚粒細胞,核左移(中性桿狀核粒細胞比例增高),核右移(中性分葉核比例增高)嗜酸或嗜堿性粒細胞增高,中性粒細胞毒性病變,異型淋巴細胞等。
2.3.2紅細胞形態的改變:外周血出現有核紅細胞,成熟紅細胞大小不等(RDW增高)中心淡染,點彩紅細胞,球形紅細胞,淚滴樣紅細胞,紅細胞呈緡錢樣排列。
2.3.3血小板形態改變:EDTA依賴性假性血小板減少,血小板大小不等(PDW增高),血小板聚集、堆積和發生衛星現象使全自動血分析儀不能確認血小板而使血小板計數減低。
2.3.4 其他:腫瘤細胞及寄生蟲等。
總之,在臨床實際工作中不能只為了達標而提高鏡檢率,鏡檢標本的確定一定要依據臨床實際情況和血細胞分析的提示,兩者結合起來考慮,不能僅依賴于血細胞分析的提示作為鏡檢標本的篩選條件,部分異常形態,比如異常紅細胞形態,粒細胞中毒改變,血小板的形態異常等都是儀器無法提示的。
3 討論
現代血細胞分析儀主要綜合應用了電學(電阻抗法及射頻電導法)和光學(激光散射法及分光光度法)兩大原理,用以測定血液有形成分(細胞)和無形成分(血紅蛋白)。目前電阻抗法是三分群血液分析儀的主要原理?，F在市面上的血細胞分析儀有很多種,但其檢測原理不盡相同:白細胞系列參數檢測原理主要有5種方法,即:①體積、電導和光散射(VCS)法。②流式細胞術、電阻抗、射頻和特殊細胞染色法,其有3個檢測通道(4DIFF通道、WBC/BASO通道和未成熟粒細胞信息IMI通道)。③鎢光源、激光散射法,其有過氧化物酶(Pero)通道、嗜堿性粒細胞/核分葉性通道和未染色大細胞計數(LUC)檢測通道。④多角度偏振光散射法(MAPSS)應用固體激光流式細胞熒光技術多角度檢測白細胞和分類。⑤雙流體(雙鞘流)動力連續系統(DHSS),其有白細胞計數通道、嗜堿性粒細胞通道和白細胞分類通道來檢測白細胞和白細胞分類;成熟紅細胞系列檢測原理主要有4種方法,即:①電阻抗法。②流式細胞術、鞘流電阻抗法。③流式細胞術激光散射法。④電阻抗法和光散射法。血小板系列參數檢測原理有4種方法,即:①電阻抗法。②流式細胞激光核酸熒光染色和電阻抗法。③激光散射法。④固體激光散射法、電阻抗法和單克隆抗體熒光染色散射法。血紅蛋白濃度測定檢測原理主要有2種方法,即改良氰化高鐵血紅蛋白法和非氰化高鐵血紅蛋白法。網織紅細胞系列參數檢測原理主要有2種,即非熒光染料染色法和熒光染料染色法。有核紅細胞系列參數檢測原理主要有4種,即:①VCS法。②流式激光/熒光染色法。③白細胞計數和分類通道衍生法。④阻抗法和噻唑橙熒光染色流式細胞術。
雖然現代血細胞分析儀的功能及檢測原理都在不斷完善和提高。但是,我們必需強調在臨床工作中復檢的重要性。因為不同地理環境、不同檢測人群間,存在個體及群體差異,所以每個血常規室應根據自己實驗室的具體情況制訂相應的血細胞分析儀復檢原則,但是在臨床實際工作中,我們不能只為了達標而一味提高鏡檢符合率。鏡檢復查標本的確定一定要依據臨床實際情況和血細胞分析儀的提示,兩者結合起來考慮。
隨著循證醫學的不斷完善,根據循證醫學原則,我們應該用當前最好的檢測技術、質量控制體系和臨床實踐成果,對血液分析儀檢測結果進行嚴格評價,才能使血液分析儀為臨床提供最有價值的檢測證據。
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