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化學滅活方法范文1
摘要：目的 探討全血經白細胞過濾器過濾和病毒滅活后血漿主要成分的變化。方法 留取未經白細胞濾除和病毒滅活的全血標本，經離心后取出血漿待用，然后留取經白細胞濾除和病毒滅活的血漿標本待用。使用START-4血凝儀測定血漿八因子（FⅧ）活性、纖維蛋白原（Fg）含量。結果 比較發現，經白細胞濾除和病毒滅活的血漿，其FⅧ和Fg的含量均有一定程度的降低，但仍然符合國家標準。結論 經白細胞濾除和病毒滅活的血漿，FⅧ和Fg的含量無顯著影響，其質量可靠，能夠確保臨床輸注安全有效。
關鍵詞：血漿；白細胞；濾器；病毒滅活；血液成分
白細胞可引起非溶血性發熱反應、同種免疫反應、血小板輸注無效、輸血相關性移植物抗宿主?。═A-GVHD）及病毒感染等輸血反應，用白細胞濾器濾除白細胞可有效避免或降低這些輸血反應的發生【1】；自MB/光化學法病毒滅活技術被逐步應用于血漿病毒的滅活以來，其有效性和安全性已被證實。因此，制備病毒滅活血漿，是進一步降低傳染病毒危險性的必要措施。為探討全血經白細胞過濾器過濾和病毒滅活后血漿主要成分的變化，隨對白細胞濾除和病毒滅活前后血漿中主要成分進行了檢測，并對結果進行比較。結果如下。
1 材料與方法
1.1 標本來源 聯袋常規采集血液（400ml/袋），隨機抽取60袋全血按標準操作規程要求濾除白細胞，然后分離血漿并進行病毒滅活，留取未經白細胞濾除和病毒滅活處理的全血標本，經離心后取出血漿10ml速凍備用（A組），然后留取經白細胞濾除和病毒滅活的血漿標本10ml速凍備用（B組）。
1.2 材料 CR-7型大容量低溫離心機，日本日立公司；HDME-1A型醫用病毒滅活箱，上海輸血技術有限公司；IMAGO-500型低溫血漿速凍機，盧森堡Dometic公司；DKB-2型電熱恒溫水浴箱，上海精宏醫療儀器廠；START-4型血凝儀，日本倍肯公司； FⅧ、Fg含量測定試劑盒，法國STAGO公司；一次性使用去白血袋，山東威高集團；一次性使用病毒滅活血袋，上海輸血技術有限公司。
1.3 方法 將留取的血漿樣品在37℃水浴中完全融化，立即無菌留樣，START-4血凝儀快速測定其FⅧ和Fg的含量。操作過程嚴格按儀器及試劑說明書進行。
1.4 統計學處理 計量資料以 ±s表示，采用t檢驗，P
2 結果 未經白細胞濾除及病毒滅活處理的血漿（A組）和經白細胞濾除的病毒滅活血漿（B組）中FⅧ和Fg含量的測定結果見表1。
3 討論
據資料顯示，在臨床輸血反應中，非溶血性輸血反應發生率高達15%一37%，這主要是由于多次輸注含有白細胞的血液成分產生人類白細胞抗原（HLA）同種免疫反應及粒細胞同種免疫反應所致” 【2】，輸注含白細胞的血液成分引起非溶血性發熱反應其中主要表現為兩方面：一是白細胞凝集素引起的發熱反應，在多次輸血的各種血液病患者中，白細胞凝集素陽性率較高，故輸血發熱反應的發生率也較高；二是受血者產生的同種白細胞、HLA抗體引起的發熱反應占大多數。不安全輸血除了免疫因素外，主要來源于病原微生物及其代謝產物的污染，特別是病毒的傳播已對輸血安全性構成了明確且后果嚴重的威脅，國內外研究報道均證實多數輸血后病毒感染是由窗口期問題引起的。更由于新的可通過輸血傳染的病毒不斷被發現，即使采用經目前最先進的核酸檢測（NAT）技術檢驗呈陰性的血漿，也仍然不是絕對安全的。自MB/光化學法病毒滅活技術被逐步應用于血漿病毒的滅活以來，其有效性和安全性已被證實。因此，制備經白細胞濾除的病毒滅活血漿，是進一步降低輸注血漿引起不良反應和傳染病毒危險性的必要措施。
從本實驗結果顯示，經白細胞濾除的病毒滅活血漿，FⅧ和Fg的含量均有—定程度的降低。分析其可能原因：一是在去白過程中白細胞過濾器有可能對凝血因子和血漿蛋白有一定的吸附【3】；二是病毒滅活延遲了血漿速凍的時間，使不穩定凝血因子FⅧ降低；三是血漿病毒滅活時用輸血過濾器吸附過濾亞甲藍過程中，會吸附一部分FⅧ和Fg，使其含量受損。再次證明在殺滅病毒的同時，會對血液有效成分產生不同程度的影響，使其活力和功能受到一定損傷【4，5】。但由上述原因引起FⅧ和Fg的含量變化無顯著性，仍然符合國家標準，不影響臨床輸注效果。因此，制備經白細胞濾除的病毒滅活血漿，雖然FⅧ和Fg的含量有一定程度的降低，但相對于輸注血漿帶來的風險而言是值得的。
參考文獻
[1]孫振秀，李秋華，許雷，等.白細胞濾除前后血漿多種成分變化研究.中國輸血雜志，2008，21：35.
[2]張偉強，劉美芳.白細胞濾器在臨床輸血中的應用.臨床輸血與檢驗，2002，4：45-46.
[3]李小平，馮永生，段景斌，等.白細胞過濾器對凝血因子的影響.中圍輸血雜志，2003，16：388.
化學滅活方法范文2
【關鍵詞】 牙科手機；污染狀況；消毒效果
兒童口腔門診患者集中，治療頻繁，接觸治療手機機會多，特別是一些患有慢性疾病的患兒抵抗交叉感染的能力弱，因此兒童口腔門診治療手機的污染和消毒方法研究就顯得尤為重要。為了解兒童口腔門診治療手機的污染和消毒效果，預防院內交叉感染，現報告如下。
1 材料與方法
1．1 材料 污染樣本：本院臨床應用的奧地利生產的TC-95RM型號的渦輪機手機20只。消毒制劑：2%戊二醛、75%乙醇、1‰苯扎溴銨、2%碘伏。高溫消毒設備：德國產Vacuklav24-B 3次預真空全自動高壓蒸汽滅菌器。
1．2 方法
1．2．1 細菌檢測取樣方法 將當天剛使用過的15只渦輪手機用清水沖洗，再用生理鹽水沖洗，打開機頭,用無菌棉擦試機頭軸承，用乙醇燈消毒試管口及管塞，將擦拭后棉球放入含培養基的試管送檢。
1．2．2 病毒檢測取樣方法 采用PCR檢測方式。
1．2．3 化學消毒方法 將消毒前取樣的15只手機，先采用化學試劑消毒，2%戊二醛15 min,75%乙醇15 min,1‰苯扎溴銨30 min，2%碘伏15 min。取樣檢測滅菌效果和病毒失活效果。
1．2．4 消毒后取樣方法 將化學消毒制劑和高壓蒸汽消毒后的手機放在消毒盤上,戴消毒手套用消毒器械打開手機頭蓋,再用無菌棉拭蘸注射用水擦拭機頭表面及軸承3次,然后用乙醇燈消毒試管口及管塞,再將無菌棉放入檢測試管送檢。
1．2．5 高壓蒸汽消毒方法 將用化學消毒制劑浸泡過的15只手機，采用德國產-型高壓蒸汽消毒15 min，然后取樣進行病毒活性檢測，評價高壓蒸汽消毒的實際效果。
2 結果
2．1 化學消毒制劑滅菌效果評價 4種化學消毒制劑浸泡消毒效果顯示：2%的戊二醛的消毒效果為98．9%，75%的乙醇消毒效果為91．6%，2%的碘伏消毒效果為84．7%，1‰苯扎溴銨的消毒效果僅為61．2%。見表1。
2．2 化學消毒制劑對病毒滅活效果評價 15只使用后的治療手機經化學消毒制劑消毒浸泡后，利用PCR法檢測其病毒污染程度，結果顯示，其HbsAg抗原性以及HBV-DNA活性仍處于較高水平。HbsAg陽性檢出率為12%，HbeAg的陽性檢出率高達21．82%，HBV-DNA的陽性檢出率為14．5%，可見，化學消毒制劑對手機病毒污染的滅活效果十分有限，見表2。
2．3 高壓蒸汽對病毒滅活效果評價 為了進一步了解經化學消毒制劑浸泡的治療手機在高壓蒸汽爐中的病毒滅活情況，本研究將用化學消毒制劑浸泡過的5只手機，采用高壓蒸汽消毒15 min，然后取樣進行病毒活性檢測，評價高壓蒸汽消毒的實際效果。其消毒效果顯示，5只治療手機消毒前S/N值均＞2．1(12～21．82)，為陽性。消毒后其S/N值均＜2．1(0．001～0．023)，全部呈陰性反應。HBV-DNA定量PCR檢測，消毒前全部陽性，消毒后全部陰性?？梢姼邏赫羝緦σ倚透窝撞《镜氖Щ钚Ч@著，見表3。
3 討論
化學滅活方法范文3
淋巴細胞的分離隨機選擇采集后6h內的ACD抗凝全血(200ml,上海市血液中心提供)并制備成濃縮白細胞,在無菌條件下用淋巴細胞分離液分離淋巴細胞,用PBS(含EDTA0.5mmol/L)洗滌2次,1640培養基洗滌1次,棄上清后重懸于1640完全培養基(含10%胎牛血清),置5%CO237℃孵箱中培養過夜;次日離心收集懸浮細胞,加入自體血漿重懸至106個細胞/mL。對照組和實驗組淋巴細胞樣本的制備在避光條件下,取5ml細胞懸浮液,加入終濃度100μmol/L的核黃素,混合均勻后,注入PVC光照袋中,編入實驗組;另取5ml細胞懸液加入上述核黃素等體積的PBS,混勻注入PVC袋,編入對照組。實驗組置于420nm的可見光光源下進行雙面照射,照射量為40J/cm2;對照組不接受光照。將各組淋巴細胞離心后,重懸于1640完全培養基(含10%胎牛血清)。各取2.5ml加入24孔板,每孔中加入終濃度0.5μg/mL的PHA;同時,以同等樣本量的不加PHA的細胞懸液作為平行對照。于5%CO237℃孵箱中培養。淋巴細胞增殖檢測對照組及實驗組細胞培養48h后,分別取各組淋巴細胞100μl加入96孔細胞培養板,加入BrdUlabelingreagent,混勻,置5%CO237℃孵箱中培養24h;用BrdU細胞增殖檢測試劑盒內相關試劑處理后,于450nm處讀取吸光度值。根據讀數計算實驗組淋巴細胞增殖抑制率:實驗組細胞增殖抑制率I=[1-(O.D.PHA+實驗組–O.D.PHA-實驗組)/(O.D.PHA+對照組–O.D.PHA-對照組)]×100%。淋巴細胞細胞因子分泌檢測對照組及實驗組細胞培養72h后,收集上述各組淋巴細胞各1ml,1600rpm離心5min,取上清,用細胞因子酶標檢測試劑盒檢測細胞因子IFN-γ、IL-10、IL-12、IL-4的含量。AnnexinV-PE/7-AAD細胞凋亡檢測收集培養24h的對照組和實驗組細胞各1ml,經1600rpm離心5min棄上清,用PBS洗滌2次,重懸于1×bindingbuffer中,加入3μlAnnexin-V:PE和3μl7-AAD,混勻,室溫避光放置15min,加入400μl1×bindingbuffer,混勻,流式細胞儀檢測。數據分析使用MicrosoftExcel軟件,所有量值數據均采用“均數±標準差(珋x±S)”表示,作配對t檢驗,P<0.05表示差異有統計學意義。
核黃素光化學法對PHA誘導后的淋巴細胞增殖的影響如表1所示,對照組接受PHA刺激的淋巴細胞較未接受PHA刺激的細胞O.D.值顯著升高,而實驗組淋巴細胞接受PHA刺激后O.D.值沒有明顯變化,核黃素光化學處理對淋巴細的增殖抑制率為(94.49±7.61)%。核黃素光化學法對淋巴細胞細胞因子分泌的影響因淋巴細胞樣本來自不同的捐獻者,對抗原刺激產生細胞因子的能力存在個體差異,因此不同淋巴細胞對同一細胞因子的分泌量存在很大差異,導致SD值比較高,但對同一份淋巴細胞樣本,接受PHA刺激后,對照組淋巴細胞和實驗組淋巴細胞同一細胞因子分泌量的比較仍具有統計學意義。PHA刺激后,與對照組淋巴細胞細胞因子相比較,實驗組淋巴細胞IFN-γIL-10和IL-12的分泌量分別降低了(89.54±22.75)%、(77.83±22.3)%和(88.57±15)%。AnnexinV-PE/7-AAD細胞凋亡檢測結果FSC-SSC散點圖(圖略)顯示,核黃素光化學處理之后的淋巴細胞前向角散射減少,表明處理后細胞大小發生改變;從AnnexinV-PE/7-AAD雙標圖(圖略)可以看出,實驗組絕大多數淋巴細胞位于Annexin陽性的兩個象限內,其中早期凋亡細胞和晚期凋亡或壞死細胞均高于對照組。,經核黃素處理后的實驗組淋巴細胞的早期凋亡率和晚期凋亡或壞死率較對照組有顯著性差異。
TA-GvHD的發生率與輸入的具有免疫活性的淋巴細胞數量呈正相關,輸入的供血者的淋巴細胞數量越多,發病的可能愈高,病情愈嚴重,死亡率也愈高。因此血液制品中淋巴細胞的滅活是預防TA-GvHD的最有效的辦法。利用γ射線照射可以有效抑制血液制品中淋巴細胞的增殖活性,射線產生的電離輻射會對淋巴細胞的DNA造成不可逆的損傷,使其失去增殖和分化能力。因此,該方法是目前國際上公認的預防TA-GVHD的有效方法。由于輻照對紅細胞的代謝及功能可造成不同程度的影響,所需儀器設備昂貴,對操作人員存在輻射危害等原因,該方法在臨床實踐中的使用受到了一定的限制[10]。核黃素是一種自然存在于哺乳動物體內的多環平面結構的芳香族化合物,可穿越細胞膜、病毒脂薄膜以及核膜與核酸結合,在接受了UVA或可見光提供的能量后,發生電子轉移,使鳥嘌呤堿基氧化并形成共價加成化合物,阻止核酸的轉錄、復制,進一步的反應甚至可使核酸骨架鏈斷裂,達到滅活淋巴細胞和病原體的目的。由于核黃素(即維生素B2),是人體必需的一種維生素,對人體無任何毒性,在這一點上核黃素光化學法明顯優于其他血液病原體滅活方法[11]。核黃素光化學法成為近年來血液制品病原體滅活技術領域研究的熱點,已有研究證明該方法可以用于血漿、血小板等血液成分的病原微生物的滅活[12]。為了研究核黃素光化學對人外周血淋巴細胞的滅活作用,本實驗將淋巴細胞懸浮于自體血漿,所得結果能夠真實反映血液中淋巴細胞的滅活效果。實驗中使用PHA誘導實驗組和對照組淋巴細胞的增殖,觀察核黃素光化學法對淋巴細胞增殖活性的抑制作用和效果。結果顯示,對照組淋巴細胞經PHA刺激后細胞增殖明顯,而經核黃素光化學法處理的實驗組淋巴細胞接受PHA刺激后幾乎沒有增殖,表明核黃素光化學法可有效抑制淋巴細胞增殖活性,增殖抑制率為(94.69±7.61)%。TA-GvHD發生的“細胞因子風暴學說”認為,活化的供者T細胞釋放大量IFN-γ等細胞因子,這些細胞因子又能夠進一步活化供者T細胞使其擴增,這種逐級放大形成惡性循環的細胞因子網絡系統能夠促進TA-GvHD時的組織和細胞損傷[13];臨床研究發現IL-12在臨床急性移植物抗宿主病(aGvHD)發生中起重要的正向調節作用[14];IL-10在aGvHD的發病過程中的重要作用也已得到證實[15,16];Mur-phy等研究發現以IL-4基因剔除小鼠作為骨髓移植供體,移植后aGvHD的發生率降低,提示供體來源的IL-4在aGvHD中可能起正調控作用[17]。鑒于細胞因子在GvHD的發生發展過程中起著重要作用,研究核黃素光化學處理對供血者淋巴細胞相關細胞因子的分泌能力的影響,有利于進一步探討利用核黃素光化學法預防TA-GvHD的可行性。實驗結果顯示,在PHA刺激條件下,核黃素光化學處理的淋巴細胞IFN-γ、IL-10和IL-12的分泌量較對照組均有明顯降低。對照組和實驗組淋巴細胞分泌IL-4的量較少,2組分泌量無明顯差異。這一結果表明,核黃素光化學法可明顯抑制人外周血淋巴細胞分泌IFN-γ、IL-10和IL-12的活性,這與我們之前將淋巴細胞懸浮于PBS中進行光化學處理的結果一致[18]。另外,由于TA-GvHD一般發生于輸血后1~30d內[19],為了更準確地描述核黃素光化學處理對淋巴細胞分泌細胞因子的影響,有必要延長培養時間進行繼續檢測。位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸(phosphatidyl-serine,PS)外翻,是細胞凋亡早期的1項重要標志,而AnnexinV作為一種Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與PS發生特異性結合。用熒光素PE標記An-nexinV作為熒光探針,利用流式細胞儀可以檢測細胞凋亡的發生,而將AnnexinV與非侵入性染料7-氨基放線菌素D(7-Amino-ActinomytinD,7-AAD)聯合使用則可以區分凋亡細胞和壞死細胞。本次研究結果顯示,在經核黃素光化學處理24h之后,絕大多數細胞發生死亡,其中凋亡和壞死細胞的比例均明顯高于對照組,這一結果表明核黃素光化學處理可能是通過誘導淋巴細胞發生凋亡,達到滅活的目的,這一點還有待從其他方面進行驗證。核黃素光化學法作為血液制品病原體滅活的新方法,其有效性及安全性已經得到證實[20,21],本次研究則表明核黃素光化學法可以有效滅活人外周血淋巴細胞。由此可以推測,核黃素光化學法可以在滅活血液制品中病原體的同時,達到滅活淋巴細胞,預防TA-GvHD的目的。這樣可以簡化血液安全處理的程序,降低因反復處理對血制品造成的影響,因此核黃素光化學法是1種非常有潛力的血液安全處理方法。
化學滅活方法范文4
【關鍵詞】 手術治療；軟骨瘤；內生性
選取醫院2010年至今收治的內生性軟骨瘤病例17例，行手術刮除，并采用碘伏滅活腫瘤髓腔壁，4例合并骨折患者采用交叉克氏針對填塞好的自體骨植骨進行固定，13例未合并骨折患者采用異種異體進行填塞[1]。經過2年的隨訪，患者關節功能基本恢復，骨折均已愈合，無復發病例。對17例內生性軟骨瘤病例行早期手術刮除，并行植骨填塞治療，療效顯著[2]。內生性軟骨瘤應盡量在早期行手術刮除，同時進行碘伏滅活，植骨填塞等相應治療措施?，F將結果報告如下。
1 資料與方法
11 一般資料 醫院收治的患內生性軟骨瘤患者17例，男6例，女11例。年齡19～40歲，全部患者均為手指單發內生軟骨瘤。其中，合并骨折4例，7例中節指骨，10例中近節指骨。4例合并骨折沒有明顯移位，一側骨皮質產生斷裂。通過X片可以看出變薄、膨脹的骨皮質于骨干內。骨透亮區出現點狀或間隔密度增高影，或伴有礦粒狀顆粒，或呈現出云霧狀。
12 方法 手指側方背側切口可在骨皮質隆起較薄或骨皮質斷裂一側。將皮下組織切開，同時注意將側鍵束保護好，在骨皮質較薄側或骨折部位開窗，將骨膜分離，將骨皮質用刀片切開，這時，可采用微型刮匙將軟骨瘤組織取出，并使用碘伏滅活腫瘤髓腔壁，用交叉克氏針對合并骨折處進行固定。植骨填塞取自體髂骨。用異體骨植骨對未合并骨折進行填塞，最后原位復回窗蓋。將皮膚、皮下組織、骨膜由里至外逐層縫合，固定功能鋁板。經過2～3周后，可將外固定去除，恢復鍛煉功能。
2 結果
17例內生性軟骨瘤患者術后均愈合，且無復發病例。X線片未見骨質酥松，均顯示骨折愈合。17例病例中，4例合并骨折患者屈曲80°，但不影響正常伸直。13例未合并骨折患者能夠正常屈伸手指。
3 討論
內生性軟骨瘤多發于青年，是手部常見腫瘤之一，常以近節指骨為多發。發病原因目前不明，但可確定發生機制與軟骨細胞錯構有密切聯系。因手部關節軟骨面多，且手部小關節多，生長腫瘤后容易引起病理性骨折，而患處骨皮質多呈現膨脹或變薄。腫瘤主要成分為透明軟骨，其呈現分葉狀，并有纖維包膜，軟骨在經過退化后，形成骨化或者鈣化之軟骨以及膠狀假囊腫。內生性軟骨瘤在早期較小，不易被察覺[3]。而X線片顯示畸形、腫脹、疼痛局部為病理性骨折。內生軟骨瘤能夠長期無癥狀顯示，因此，在受傷后，有些患者才因疼痛明顯而進行治療，而這時再進行檢查，鈣化區已呈現增多趨勢。內生軟骨其生長速度較緩慢，實際情況往往是腫瘤已經生出后，內生軟骨瘤癥狀才會表現出來，并且大多數情況是在損傷之后，癥狀才會突顯。若長管狀骨的內生軟骨瘤無明顯的損傷，卻在初期就發生疼痛，應注意惡性病變的發生。骨干一側若存在病損時，可變薄皮質，并突顯膨脹。而骨干中央存在病損時，骨皮質膨脹不顯著。骨化病灶和鈣化使內生性軟骨瘤得到確診。腫瘤對軟組織的侵犯以及腫瘤內部的骨皮質有無穿破、病灶范圍、非鈣化軟骨等癥狀可通過MRI進行顯示。腫瘤內部骨皮質的不規則或不明確性可采用CT進行診斷。而軟骨瘤一般可結合臨床表現，采用X線片來進行病理診斷。通過X線診斷，手指近節指骨或者中節指骨存在病損，則可切確診斷為良性內生軟骨瘤，因孤立性內生性軟瘤發生部位主要在指骨。
綜上所述，內生性軟骨瘤患者應注意盡早接受手術治療，手術刮除軟骨瘤組織，病采用碘伏滅活腫瘤髓腔壁，并進行反復滅活、沖洗，最終使腫瘤管壁組織脫落，填塞異種異體骨，該手術方法療效顯著，不易復發。
參 考 文 獻
[1] 石衛東，何春年，王朝夫，趙煥芬，李萍，陳琛，Maffucci綜合征伴右腓骨內生性軟骨瘤惡變1例報道并文獻復習.臨床與實驗病理學雜志，2011，27（2）：198200.
[2] 劉飆，桑秋凌，許則民，等.手部內生性軟骨瘤的非植骨手術治療.實用手外科雜志，2010，24（3）：178179.
化學滅活方法范文5
文/ 李宏
畜禽疫苗接種動物后可使動物獲得
針對某種傳染病的特異抵抗力，防
止動物發病和感染。在動物傳染病
防治中，用疫苗免疫動物是提高動
物機體免疫力、預防動物疫病發生
和流行的關鍵措施。好的疫苗免疫
保護率可達95%以上，當然疫苗保
護率還受到免疫時機、動物健康狀
況、免疫方法、免疫劑量和免疫程
序等因素的影響。
1 疫苗的種類和特點
目前，市場上的疫苗可以分為活疫苗、
滅活疫苗、多肽疫苗、基因工程疫苗等四大
類。
1.1 活疫苗即稱弱毒疫苗，是利用從自然界
分離到的天然弱毒株或經過人工致弱的毒株
制造的疫苗，弱毒疫苗的毒力已經不能引起
動物發病，但仍然保持著原有的免疫原性，
并能在體內繁殖。因此，可用較少的免疫劑
量誘導動物產生較強的免疫力，具有免疫期
長、不影響動物產品品質等優點?；钜呙缧?/p>
要低溫保存，為了延長保存期，常采取凍干
保存又稱凍干疫苗。目前，我國用于預防重
大動物的活疫苗有豬瘟、新城疫、炭疽、布
魯氏菌病等弱毒疫苗。
1.2 滅活疫苗是把病原微生物經理化方法滅
活后制造的疫苗，滅活后的病原微生物仍然
保持免疫原性，接種后使動物產生特異性免
疫力，這種疫苗又稱為死疫苗。通常采用白
油佐劑，又稱油佐劑疫苗。目前，我國用于
預防重大動物疫病的滅活疫苗有高致病性禽
流感、口蹄疫、高致病性豬藍耳病等滅活疫
苗。
1.3 合成多肽疫苗是通過化學合成法人工合
成病原微生物的保護性多肽，再加入佐劑制
成的疫苗。
1.4 基因工程疫苗基因工程疫苗是用分子生
物學技術對病原微生物的基因組進行改造，
以降低其致病性，提高其免疫原性，或者將
病原微生物基因組中的一個或多個對預防疫
病有用的基因克隆到無毒的原核或真核表達
載體上制成的疫苗。
2 疫苗的保存和運輸
2.1 疫苗的保存疫苗種類不同，要求的保存
條件也不一樣。嚴格按照要求保存疫苗。活
疫苗在冷凍室-20℃以下保存，滅活疫苗在
冷藏室2～8℃保存。
2.2 凍干疫苗大量運輸時應采用冷藏車運
輸，少量運送時可以采用冷藏箱（包）或保
溫桶加冰塊。滅活疫苗大量運輸時應采用恒
溫車運輸，冬季要防凍，夏季要防陽光照
射。少量運輸時可以使用冷藏箱（包）。
3 免疫接種前的準備工作
3.1 免疫物品的準備：注射器、連續注射
器、針頭、鑷子、搪瓷盤、疫苗、疫苗稀
釋液、疫苗冷藏箱、冰塊、牛鼻鉗、保定
架、免疫登記表、免疫戶口冊、耳標及耳標
鉗等。消毒藥品：75%酒精、2%～5%碘酊
等。
3.2 注射器、針頭的清洗與消毒沖洗。滅菌
（即紗布包好的注射器、針頭放入高壓滅菌
器中，121℃高壓滅菌15分鐘）或煮沸消毒，
放入鋼精鍋或鋁鍋內，加水淹沒物品2厘米以
上，煮沸15～30分鐘，禁止使用化學藥品消
毒。
4 疫苗的準備
4.1 檢查疫苗，凍干疫苗凡發現疫苗瓶裂、
瓶蓋松動、失真空、超過有效期或標簽不完
整一律不得使用。油佐劑滅活疫苗除檢查有
效期外，還需檢查色澤是否正常，有無沉
淀、破乳等變化。
4.2 滅活疫苗的預溫與震蕩，使用前，從冰
箱中取出疫苗，置于室溫(25℃左右)2小時左
右，平衡疫苗溫度。使用前輕輕震搖。
4.3 吸取疫苗，輕輕震搖，使疫苗混合均
勻；用75%酒精棉球消毒疫苗瓶瓶塞；將注
射器針頭刺入疫苗瓶，抽取疫苗；排除針管
中的空氣，排氣時用棉球包裹針頭，以防疫
苗溢出，污染環境；使用連續注射器時，不
需抽取疫苗，把注射器軟管連接的長針插至
疫苗瓶底即可，同時插入另一針頭供通氣
用。
5 免疫接種方法
為保證動物在接種疫苗后產生預期的免
疫效果，應在使用疫苗時，掌握疫苗的正確
接種方法。每種疫苗都有其特定免疫程序和
最佳的接種途徑，如弱毒疫苗應盡量模仿自
然感染途徑接種，滅活疫苗均應皮下或肌肉
注射接種。
5.1 家禽免疫接種方法，家禽接種的主要途
徑有飲水、滴鼻點眼、氣霧、刺種、涂肛、
皮下注射和肌肉注射等。
飲水免疫法根據禽群的飲水量計算用水
量，將可供口服的疫苗3倍劑量溶于水中，裝
入飲水器或供水桶內，供禽群自由飲用，2小
時內飲完。飲水免疫應注意：疫苗劑量要加
大，一般2～4倍為宜。因為禽類飲水時，會
損失一部分；稀釋疫苗不能用金屬容器，稀
釋疫苗的飲水不能用自來水，自來水含有消
毒劑，會使疫苗失活，可用蒸餾水、無離子
水或深井水，為了保護疫苗，也可在飲水中
添加0.1%的脫脂奶粉；飲水器要充足，以保
證禽只在短時間內飲到足夠的疫苗；服用疫
苗前應停止飲水2～4小時（時間長短視天氣
而定）以便使禽只能盡快而又一致地飲用疫
苗，飲水時間應控制在2小時以內；稀釋疫苗
的用水量要適當（約為飲水量的120%）；免
疫前后3天內，飲水中不能用消毒藥。滴鼻
點眼免疫法使疫苗從呼吸道進入體內，對于
幼雛禽可避免或減少疫苗病毒被母原抗體中
和，可刺激其產生局部免疫，效果好，是最
好的免疫方法之一，適用于新城疫Ⅱ系、Ⅳ
系、CL30疫苗等疫苗的免疫，新城疫首免一
般應用此法。皮下注射皮下注射宜在頸背部
后1/3處。肌肉注射家禽肌肉注射免疫一般
將疫苗注射到胸部、腿部肌肉或翅根肌肉。
5.2 家畜免疫接種方法家畜接種的途徑有皮
下注射和肌肉注射等，每種疫苗均有其最佳
的接種途徑。
一是皮下注射法，宜選擇皮薄、被毛
少、皮膚松弛、皮下血管少的部位。牛、羊
宜在頸側中1/3部位，豬宜在耳根后或股內
側，犬宜在股內側。左手拇指與食指捏取頸
側下或肩胛骨的后方皮膚，使其產生褶皺，
右手持注射器針管在褶皺底部傾斜、快速刺
入，緩緩推藥，注射完畢，將針拔出，立即
以藥棉揉擦，使藥液散開。二是皮下注射
時，平行皺折插針，以防刺穿皮膚，注射到
皮外。三是肌肉注射法注射部位應選擇肌肉
豐滿，血管少，遠離神經干的的部位。牛、
羊宜在頸部或臀部，豬宜在耳后頸部或臀
部，犬宜在頸部。肌肉注射時，進針方向要
與注射部位的皮膚。
參考文獻
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化學滅活方法范文6
雖然血源性乙肝疫苗在控制乙肝方面發揮了重要作用，但它并非十全十美，應用之初，就顯露了其本身的一些缺點。其一，來源有限，無法大規模穩定生產；其二，在HBsAg 陽性血漿采集、運輸和加工過程中，有可能造成環境污染及乙肝病病毒傳播；其三，盡管疫苗生產過程中采用三步滅活工藝，應用后至今未發展1人因注射疫苗而發病，但極難確保所有潛在性致病因子（特別是未知的致病因子）均被滅活；其四，生產中需要較高的純化抗原技術及滅活要求，成本較高，并影響疫苗的免疫原性。有鑒于此，并影響疫苗的免疫原性。有鑒于此，血源性乙肝疫苗只能作為一種過度性疫苗，尚需開發新型疫苗。
70年代末期，在乙肝病毒的基因序列已基本弄清的基礎上，不少國家開始研究基因工程疫苗。1986年，美國一家公司用酵母表達的HBsAg基因工程疫苗投產。此后，重組細胞疫苗、多肽疫苗等。也相繼問世。上述疫苗的制備不需要合適的血漿，也不需要采取針對致病因子的滅活措施，因而可以高效穩定地大規模工業化生產，且安全性更高，價格較便宜。從實際接種的效果看，基因工程疫苗的保護率與血源性疫苗相同，其抗體陽轉率在95%以上，母嬰傳播阻斷率在85%以上，能夠顯著降低乙肝病毒的感染率和攜帶率，且無嚴重不良反應，是安全而有效的免疫制劑。
與此同時，國內外對乙肝疫苗的接種方法進行了大量研究，目前各國的接種方案就是根據這些研究成果制定的。1991年我國頌布了乙肝免疫方案：
1. 接種對象：
對乙肝的深入研究證實，感染乙肝病毒的年齡越小，成為慢性持續性感染的可能性越大。如果在1歲以內感染，將導致70-90%的嬰兒成為乙肝病毒攜帶者；如果在2-3歲感染，將有40-70%的兒童成為攜帶者；如果在4-6歲時感染，有10-40%的兒童成為攜帶者；如果在7歲以上感染，只有6-10%變成攜帶者。也就是說，新生兒時期預防乙肝效果最好。
因此，我國的乙肝免疫方案要求全體新生兒接種乙肝疫苗，在條件許可的情況下擴大到學齡前兒童。
2. 免疫途徑：
乙肝疫苗的接種途徑包括肌肉、皮下和皮內注射數種；肌肉注射又分上臂三角肌和臀部兩種。目前多采用肌肉注射方法，注射部位以上臂三角肌為宜。
3. 免疫程序與劑量：
我國的乙肝免疫方案規定，接種程序為0、1、6月三針間隔接種。"0"指新生兒出生后24小時內的第一針，對其他兒童或成年人則為第一針起始時間；"1"為間隔1個月接種第三針；"6"指第一針后的6個月接種第三針。應當強調，三針疫苗必須按時注射，特別是第一針一定要及時注射，應用越早，效果越好；第二針如果因故未能按規定時間注射，略晚幾天也可以，但不得超過8周；第三針為加強免疫，也應按時接種，因故提前1個月或延后1-2個月亦可，但最遲不能超過10個月。
4.加強接種問題：
