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液相色譜儀范文1
液相色譜儀是由輸液系統、進樣器、色譜柱（柱溫箱）、檢測器和數據記錄處理裝置等部分組成的分析儀器。液相色譜儀利用試樣中各組分在色譜柱內固定相和流動相間分配或吸附特性的差異，由流動相將試樣帶入色譜柱中進行分離，經檢測器檢測，依據組分的保留時間和響應值（峰面積或峰高）進行定性和定量分析。
1.測量依據：JJG705-2002《液相色譜儀檢定規程》
2.環境條件：溫度：（10-30）℃，濕度：（20-85）%RH
3.測量標準：液相色譜儀檢定裝置；測量范圍，標準物質：萘-甲醇溶液（1×10-4～1×10-7）g/mL； 溫度：（0-400）℃；不確定度：6%（k=2）。
3.測量對象：液相色譜儀（紫外可見光及二級管陣列、熒光和示差折光檢測器）
5.測量過程：用電子天平和秒表檢定流量設定值誤差和流量穩定性誤差；用數顯溫度計檢定柱箱溫度設定值誤差和溫度穩定性能；用微量進樣器和標準物質檢定儀器的檢測限、定性定量重復性。
二、數學模型
（1）
式中：CL-最小檢測濃度，g/mL
Nd-基線噪聲，mm（mV）
C-標準溶液的濃度，g/mL
H-標準溶液的色譜峰高，mm（mV）
V-進樣體積，μL
三、不確定度的來源和分析
根據不確定傳遞由（1）式得出
（2）
式中各不確定度分量比此獨立，靈敏系數為+1
1.不確定度來源
1.1 B類不確定度
1.1.1 標物的相對不確定度是檢定液相色譜儀的不確定度的主要來源，直接影響檢定結果。標準物質的相對不確定度通常由標準物質證書給出，國家標準物質目錄上列的檢定液相色譜儀的標準物質為GBW（E）130168，其定值不確定度為4%，包含因子k=2，所以：u1=0.04÷2=0.02。
1.1.2 游標卡尺的標準不確定度u2
游標卡尺經上級傳遞，符合其技術要求，其最大允許誤差為±0.02nm，半寬區間為0.02nm，在此區間認為均勻分布，故覆蓋因子k= ，由游標卡尺引起的標準不確定度為：
1.1.3微量注射器的標準不確定度u3
微量注射器經上級傳遞，符合其技術要求，相對標準偏差1%，所以：
1.2 A類不確定度
1.2.1峰面積或峰高測量值的相對不確定度u4
峰面積或峰高測量不確定度主要是儀器測量的重復性引起的，重復進樣6次，檢定規程規定定量重復性為3%，因此
1.2.2流動相流速測量的不確定度u5
流動相流速測量的不確定度是由流量的不穩定性，電子天平，使用電子天平引起的不確定度，可以通過對流速連續重復測量得到，采用A類方法進行評定。
以一臺北京東西電子研究所生產的高效液相色譜儀為例，用甲醇作流動相，設定流量1.0mL/min，進行重復測量，測量結果如下：
其標準偏差：
相對標準偏差：
流動相流速測量的不確定度
1.2.3 基線噪聲測量的不確定度u6
基線噪聲測量的不確定度主要來自游標卡尺的不確定度和用卡尺測量的不確定度，一般為0.02，如果用色譜工作站記錄基線噪聲，則其不確定度優于0.01。
2.不確定度分析
為標準物質的相對不確定度；
為標準高或峰面積測量的相對不確定度，還包括流動相流速測量的不確定度和游標卡尺的標準不確定度；
為微量注射器的標準不確定度。
四、不確定度的合成
五、擴展不確定度的評定
液相色譜儀范文2
[關鍵詞]液相色譜儀；應用；關鍵性評價方法
中圖分類號：TH833 文獻標識碼：A 文章編號：1009-914X（2017）14-0022-01
在今天，很多領域都得到了全面性和快速性的發展，并且已經研發出很多高科技產品，在很大程度促進了我國社會及科學技術的發展，液相色譜儀就是其中一項高科技技術，現在不但在醫藥分析領域得到了廣泛應用，還在食品分析領域、環境分析領域和生化分析領域得到了深入性、規范性及廣泛性應用，已經影響到我們生活的方方面面。液相色譜儀與其他分析性儀器相比，不但具有范圍廣和靈敏度高的優勢，還同時具備分析快速化、樣品量小化、使用方便化等優勢，因此成為各種實驗室最重要的儀器設備。所以本文作者根據自己對液相色譜儀的了解，結合自己相關實驗工作經驗，對液相色譜儀關鍵性能評價方法及其應用進行了深入分析。
1 液相色譜儀的簡單概述
1.1 液相色譜儀
利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異，對混合物進行先分離，而后分析鑒定的儀器。液相色譜儀根據固定相是液體或是固體，又分為液-液色譜（LLC）及液-固色譜（LSC）。現代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、信號記錄系統等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較，具有高效、快速、靈敏等特點。
1.2 工作原理
相關儀器包括儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等，儲液器中液相色譜儀的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。
1.3 液相色譜儀的構成部分及特點
主要有由進樣系統、輸液系統和分離系統等組成，具有如下：①進樣系統及其特點：一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作，進樣量是恒定的。
②輸液系統及其特點：包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分，其中高壓泵壓強為l.47～4.4X10Pa，流速可調且穩定，這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。③分離系統及其特點：包括色譜柱、連接管和恒溫器等。色譜柱長度為10～50cm，內徑為2～5mm，由"優質不銹鋼或厚壁玻璃管等材料制成，有惰性、多孔性和比表面積大等特點。
2 液相色譜儀關鍵性能評價方法研究
2.1 輸液泵性能評價方法
2.1.1 輸液泵流量準確度與穩定性測量方法
在泵出口加一適當背壓，以二次蒸餾水或脫氣甲醇為流動相，設定合適流量，待輸液泵運行穩定后，用稱重過的稱量瓶收集一定時問內的流動相，根據流動相的密度，計算得出實際流量值。
2.1.2 輸液泵脈動測量方法
由于液壓泵流量脈動具有頻率高、流量大的特點，現有流量計無法測試頻率超過300Hz的流量脈動，因此測試高頻液壓泵流量脈動只能采用間接法測試。
2.1.3 微流量測量方法
主要通過以下幾種傳感器來實現，但要保證液相色譜流量
①差壓式流量傳感器：測量原理在于通過伯努利和連續性方程，來對流體壓差信號進行測量，最后將測量的流量情況反映出來。②科里奧利質量流量傳感器：測量原理在于在流體振動管中流動特定流體，產生科里奧利力，然后與質量流量形成正比關系，最后通過比例測出科里奧利力，得出質量流量大小。③流體振動型微流體流量傳感器：測量原理在于通過流體在流道里產生的流體振蕩頻率，對流量進行測量。④熱式微型流量傳感器：測量原理在于先進溫度傳感器（2個）放到流體中，然后通過加熱的方式使流體的溫度上升，以達到溫度傳感器能夠傳感的范圍內，使2個不同溫度傳感器之間形成溫度差，最后通過不同的溫度差比例測量出相應的流體流量。
2.2 紫外-可見光檢測器原理及主要性能評價方法
2.2.1 紫外-可見光檢測器檢測原理
其工作原理是基于光吸收定律――朗伯-比爾定律，其公式為式（1）：
其中A被表示為吸光度，Io被表示為入射光強度，I被表示為透射光強度，被表示為吸光系數，b被表示為液層厚度，c被表示為溶液濃度，值與檢測器的靈敏度呈正相關關系。
2.2.2 紫外-可見光檢測器靜態基線噪聲和漂移測試方法
將檢測器波長設置在254nm，采用檢測池為空池（充滿空氣或氮氣），ASTM中采用檢測池充滿甲醇，響應時間為1.0s。開機預熱90min后，記錄基線1h，取1h內平行包絡線的中心線的起點與終點的差值為檢測器基線漂移。
2.2.3 紫外-可見光檢測器波長準確度與重復性測試方法
采用0.05moUL硫酸溶液作為紫外波長標準溶液空白液，對紫外波長標準溶液0.06019/L重鉻酸鉀的0.05mol/L硫酸溶液在235nm、257nm、31lnm和350nm附近逐點測量吸光度或進行光譜掃描，針對有自動回零功能的可采取步進進樣方式。通過軟件計算光譜圖中波峰與波谷對應的波長示值，并計算與理論值的偏差。
3 液相色譜儀應用
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合，HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。
結語
綜上所述，不管是在化W領域，還是醫藥及食品等分析領域，液相色譜儀都已經在各項實驗中得到了廣泛應用，并在很大程度上推動了我國經濟及科學事業的發展，引來了各領域相關研究專家們的重視。對此，上文先對液相色譜儀及其特點及工作原理系統進行簡要概述，然后對液相色譜儀關鍵性能評價方法進行了詳細分析，最后對其應用進行了簡要分析，希望能夠給相關人士提供一定的參考價值。
參考文獻
[1] 鄒月利，徐雅琴，白靖文，趙李霞.實驗室高效液相色譜儀的管理與使用維護[J].實驗科學與技術，2014，02：214-217.
[2] 王冠杰，季士委，田利，曹守春，鄒健，楊洋.高效液相色譜儀自動進樣器校準方法及不確定度評定[J].化學分析計量，2013，05：69-71.
[3] 王冠杰，楊洋，肖鏡，田利，祁Z琨.WHO藥品預認證對液相色譜儀性能驗證的要求及比較分析[J].中國藥事，2013，05：504-507.
液相色譜儀范文3
【關鍵詞】 液相色譜儀 最小檢測濃度 不確定度
1 概述
（1）測量依據：JJG705-2002《液相色譜儀》檢定規程
（2）環境條件：溫度：（15～30）℃，濕度（20～85）%RH
（3）測量標準：的萘/甲醇溶液GBW（E）130167
（4）被測對象：Agilent1260液相色譜儀（配紫外-可見光檢測器）
（5）測量過程：用標準溶液萘/甲醇測量液相色譜儀最小檢測濃度，將20μl標準溶液注入儀器內，從工作站讀得相應量的峰高，根據公式直接計算出，分析標準溶液的濃度、峰高、進樣量及基線噪聲的不確定度便可求最小檢測濃度的不確定度。
（6）評定結果的使用：在符合上述條件下，實驗室通用液相色譜儀的紫外檢測器的最小檢測濃度的不確定度，一般可以直接使用本不確定度。
2 數學模型
（1）數學模型：
式中：——紫外檢測器的最小檢測濃度（g/ml）；——基線噪聲（μV）；
——標準溶液的進樣量體積（μl）；——標準溶液的進樣量濃度（g/ml）；
——標準溶液萘/甲醇峰高的算術平均值（μV）。
不確定度傳播率：=+++
本式中各不確定度皆為相對不確定度
（2）靈敏系數：上式中各分量彼此獨立，靈敏系數皆為1。
3 標準不確定度的評定
輸入量的不確定度主要有：峰高的不確定、進樣量體積的不確定度、標準樣濃度的不確定度及基線噪聲的不確定度。
3.1 輸入量H的不確定度的評定
主要來源于色譜儀的測量重復性，通過連續測量得到的測量數據列，采用A類方法評定。在上述條件下，連續10次測得的峰高數列分別為（單位：μV）：1270，1273，1265，1285，1257，1250，1272，1261，1258，1269，根據公式計算其相對標準偏差，。
3.2 輸入量C的標準不確定度的評定
證書GBW（E）130167給出的標準溶液的相對不確定度4%（擴展因子），則濃度為的標準溶液的相對標準不確定度為。
3.3 輸入量V的標準不確定度的評定
微量進樣器的標準不確定度1.4%，服從均勻分布，按B類方法評定，則=1.4%/=0.808%
3.4 輸入量N的標準不確定度的評定
基線噪聲的最小分度值為0.1μv，按均勻分布，用B類方法評定，故基線噪聲的相對標準不確定度。
3.5 標準不確定度匯總表（見表1）
3.6 合成不確定度的計算
3.7 擴展不確定度的評定
取包含因子，則擴展相對標準不確定度為：
4 測量不確定度報告
根據以上分析可知，對液相色譜儀最小檢測濃度不確定度影響最大的分量是標準溶液引入的不確定度分量。根據規程可知其使用的標液中，BW5022丙三醇水溶液帶來的相對標準不確定度最大，為，而GBW（E）130169硫酸奎寧高氯酸標液帶來的相對標準不確定度最小，為，其余分量參照奈/甲醇溶液評定執行，可得液相色譜儀最小檢測濃度的不確定度為
參考文獻：
[1]JJF 1059.1-2012測量不確定度評定與表示.國家質量監督檢驗檢疫總局，2012，12，03.
液相色譜儀范文4
【關鍵詞】含量測定；高效液相
本藥物收載于中華人民共和國衛生部標準第十四冊，按照《藥品注冊管理辦法》、中藥、天然藥物分類及申報資料要求，已有國家標準的中成藥和天然藥物制劑的注冊申請，質量標準應當有所提高。為此，對本藥物質量標準進行了研究提高工作，除保留了原產品中華人民共和國衛生部所規定的檢驗項目外，又建立了蛇床子素的含量測定，并進行了方法學考察。
1.成分
蠶蛾渣、海龍、蛇床子等。
2.含量測定方法
2.1儀器與材料
2.1.1儀器
島津高效液相儀（泵LC-10ATVP 紫外檢測器SPD-10AVP）。
2.1.2材料
實驗樣品、蛇床子素對照品、其它試劑均為分析純。
2.2試驗的條件及方法
色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙晴-水（65：35）為流動相；檢測波長為322nm。理論板數按蛇床子素峰計算應不底于3000。
對照品溶液的制備：精密稱取蛇床子素對照品適量，加乙醇制成每1ml含1μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備：取本品適量，研細，取約2g精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇25ml。稱定重量，放置兩小時，超聲處理（功率300w，頻率50kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用無水乙醇補足減失的重量。精密量取上清液5ml，置10ml的量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖均，即得。
測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
2.3考察項目
2.3.1空白試驗
按處方組成份量，取蛇床子外的其余藥味按工藝要求制成缺蛇床子樣品，同供試品溶液制備方法制得空白對照溶液。
取空白對照溶液與供試品溶液及對照品溶液各10μl，依次注入液相色譜儀，測定?？瞻讓φ杖芤涸谂c對照品溶液相應的位置上不出峰，說明空白無干擾。
2.3.2線性關系考察
（1）相關系數及直線回歸方程：
相關系數：是表示兩個變量間直線關系親密程度和相關方向的統計指標，用γ表示。
直線回歸方程：在直線回歸分析得到一個直線方程，成為直線回歸方程.公式如下：
Y=b+aX
（2）分析方法：
分別取對照品溶液濃度為2μg/ml、4μg/ml、5μg/ml、6μg/ml、8μg/ml、10μg/ml各10μl注入液相色譜儀，測得峰面積，以點樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標作圖，得一直線。
2.3.3精密度試驗
同一供試品溶液依法測量8次，考察儀器的精密度。
2.3.4 重現性試驗
按擬定的含量測定方法，取同一批樣品6份，同一供試品溶液依法測量2次.計算相對標準偏差（RSD），檢驗方法的重現性。
2.3.5回收率試驗
取同一批樣品6份準確稱取蛇床子對照品適量加入已知含量的樣品（約為測定方法中樣品的半量）中，按正文含量測定方法測定，計算回收率。
3.結果
3.1空白試驗的結果
表1 空白試驗結果
按處方組成份量，取蛇床子外的其余藥味按工藝要求制成缺蛇床子樣品，注入液相色譜儀，測定。樣品溶液在與對照品溶液相應的位置上不出峰，說明空白無干擾。
3.2線性回歸方程與相關系數
表2 不同濃度對照品含量測定的試驗結果
根據上述濃度與峰面積的關系，得出：
γ=0.9999 b=20245.8737 a=-1677.5911
線性回歸方程：
y=-1677.5911+20245.8737x
3.3精密度試驗的結果
表3 樣品測量8次的試驗結果
同一供試品溶液依法測量8次， RSD=1.91%。說明儀器的精密度較好。
3.4重現性試驗結果
表4 重現性的試驗結果
取樣品6份，按正文含量測定法操作， RSD=1.50%。說明儀器的精密度較好。
3.5回收率試驗結果
表5 已知樣品含量的測定結果
表6 加入蛇床子對照品后樣品的試驗結果
表7 回收率測定結果
回收率平均值102.54%，RSD=1.81%。
4.結論
本品的含量測定使用高效液相色譜儀，有較好的線性。試驗測得精密度，重現性，回收率均符合規定。說明高效液相色譜儀能夠完成對本藥物的含量測定。
通過前述的空白、線性關系、精密度、重現性和回收率五項試驗，根據求得的RSD的結果可知，本次試驗的設計方法是可行的、結果是準確可靠的，對本藥物的含量測定方法做出有效的論證。建議今后藥品生產企業對本藥物的含量測定可根據上述方法進行。
【參考文獻】
[1]中華人民共和國國家藥典委員會?中國藥典（一部）[S].北京：化學工業出版社，2010.
液相色譜儀范文5
關鍵詞：恩替卡韋 對映異構體測定 高效液相色譜法
Enantiomers of Entecavir by HPLC
Zhao Hai-qiao Wu Shuang-jun Fu Jian Su Gui-yong
（Shandong Fangming Pharmaceutical Group CO.，LTD.，Dongming 274500 ，China）
Abstract：Objective To establish a method for the enantiomers of Entecavirby HPLC.Methods The determination was carried out on CHIRALPAK AD-H，with Hexane - Isopropanol -ethanol - trifluoroacetic acid （70：10：：30： 0.5） as the mobile phase at the flow rate of 0.8ml？min-1 .The detection wavelength was 254nm. Results The method showed good linearity with a correlation coefficient （r） of 0.9999； the precision and stability were satisfactory with all RSDs below 2%. Conclusion This method is an accurate，fast and simple method for the enantiomers of Entecavirtablets.
Key word： entecavir Enantiomers HPLC
恩替卡韋（Entecavir）為最新抗乙肝病毒的一線藥物，恩替卡韋是環戊酰鳥苷類似物。II/III期臨床研究表明，成人每日口服0.5mg能有效抑制HBV-DNA復制，療效優于拉米夫定；III期臨床研究表明，對發生YMDD變異者將劑量提高至每日1mg能有效抑制HBVDNA復制。對初治患者治療1年時的耐藥發生率為0，但對已發生YMDD變異患者治療1年時的耐藥發生率為5.8%。我國SFDA也已批準用于治療慢性乙型肝炎患者。恩替卡韋對映異構體測定目前還未有報道，本文建立的方法，方法簡便，結果可靠。
一、儀器與試藥
1.儀器 日本島津 SPD-20A高效液相色譜儀。
2.試藥 恩替卡韋對照品（山東方明藥業集團股份有限公司，1301001）；正己烷、三氟乙酸、無水乙醇為色譜純；對映異構體對照品（山東方明藥業集團股份有限公司，1205001）；恩替卡韋（山東方明藥業集團股份有限公司；批號：1310001、1310002、1310003）
二、方法與結果
1.色譜條件
色譜柱為CHIRALPAK AD-H （250mm×4.6mm，5μm），以正己烷-無水乙醇-三氟乙酸（70：30：0.5）為流動相，流速為0.8ml﹒min-1，檢測波長為254nm，柱溫為30℃，進樣量為20μl。
2.供試品溶液的制備
取恩替卡韋對照品約20mg，精密稱定，置20ml容量瓶中，加稀釋劑（正己烷：無水乙醇=1：1）溶解并稀釋至刻度，作為供試品溶液。
3.對照溶液的制備
精密量取恩替卡韋供試品溶液0.1ml，置100ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液。
4.專屬性試驗
為考察空白溶劑對本品異構體檢測的影響，進行專屬性試驗。取恩替卡韋對映異構體及恩替卡韋對照品各約5mg，分別置兩個100ml量瓶中，加稀釋劑適量超聲使溶解，放冷至室溫，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。精密量取分離度試驗溶液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。試驗結果表明，空白溶劑不干擾本品異構體的檢測。恩替卡韋與其對映異構體能有效分離。
5.線性關系考察
通過試驗考察本品對照溶液濃度與峰面積在一定范圍內是否呈線性關系。①線性儲備液的配制：取恩替卡韋對照品約25mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加稀釋劑超聲使溶解并稀釋至刻度；精密量取1.0ml，置100ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得。②樣品溶液的配制：精密量取線性儲備液0.1、0.2、0.5、1.0、2.0ml，分別置10ml量瓶中，加稀釋劑稀釋至刻度，搖勻，即得系列線性溶液。③測定方法：精密量取上述樣品溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，采用最小二乘法，以恩替卡韋峰面積（A）為縱坐標，其濃度（C）為橫坐標，進行線性回歸。結果顯示本品在濃度為0.10μg /ml～2.00μg /ml的范圍內與峰面積具有良好的線性關系，回歸方程為y=74478x-3302.1，相關系數r=0.9999。
6.精密度試驗
以在相同條件下，由同一分析人員對同一樣品重復進樣6次峰面積的偏差為考察目的，配制本品0.1%對照溶液進行精密度試驗。結果顯示RSD為0.51%，小于2%，表明進樣精密度良好。
7.穩定性試驗
樣品檢測過程中可能會將樣品溶液在室溫里放置數小時，為考察樣品溶液在室溫放置的穩定性，進行溶液穩定性考察。試驗結果顯示，供試品溶液室溫放置8小時，主峰峰面積的RSD為0.75%，小于2.0%，結果表明，樣品溶液在8小時內穩定性良好。
8.樣品測定
對批號為1310001，1310002，1310003的恩替卡韋樣品，按照“2.2及2.3”項下方法制備供試品及對照溶液，結果均未檢出。
三、結果與討論
1.流動相的選擇
剛開始選正己烷-無水乙醇（1：1），結果發現主峰出峰時間太長，改用正己烷-無水乙醇-三氟乙酸（60：40：0.1）分離效果好，且峰形比較好，故選擇該流動相。
2.檢測波長的選擇
以無水乙醇為溶劑，配置 0.05 mg·mL的溶液，在 200～400nm 范圍內掃描，結果表明，在 254nm 波長有最大吸收，故將 254nm 作為檢測波長。
參考文獻
液相色譜儀范文6
摘要：目的采用高效液相色譜法測定舒冠顆粒中二苯乙烯苷的含量。方法十八烷基硅烷鍵合硅膠柱（Alltima，5 μm，4.6 mm×250 mm）；流動相：甲醇水（32∶68），檢測波長320 nm。結果二苯乙烯苷進樣量在0.165～1.650 μg范圍內線性關系良好r=0.999 9（n=6），平均加樣回收率為99.56%(n=6); 精密度RSD=0.95%(n=6)。結論 該方法操作簡便、快速、準確。
關鍵詞：高效液相色譜法； 舒冠顆粒； 二苯乙烯苷
Determination of 2，3，5，4′ teterahydroxystibene 2 O βD Glucoside in Shuguan Granule by HPLC
Abstract：ObjectiveTo establish an HPLC for determination of 2，3，5，4′teterahydroxystibene 2 O βD glucoside in Shuguan Granule.MethodsIt was carried out on an ODS column(Alltima，5μm，4.6 mm×250 mm) using mobile phase of Methanolwater(32∶68)，and detection wavelength was 320nm.ResultsThe 2，3，5，4′teterahydroxystibene 2O β D glucoside sample showed a good linear relationship at the range of 0.165～1.650μg (r=0.999 9; n=6)，the average recovery of the added sample was 99.56%(n=6)and method precision RSD was 0.95%(n=6).ConclusionThe method was simple， available and accurate.
Key words：HPLC; Shuguan Granule; 2，3，5，4′teterahydroxystibene 2 O β D glucoside
舒冠顆粒是由部頒標準中藥成方制劑收載品種舒冠片經改劑型而成的品種，全方由制何首烏、川芎、制黃精、紅花、羊藿、丹參等7味藥組成，具有養陰活血、益氣溫陽等功效。用于防治冠心病、心絞痛、動脈粥樣硬化、高脂血癥及抗血栓形成等。方中制何首烏為君藥，并且用量最大，加上本制劑的提取工藝為水提醇沉工藝，所以可以采用高效液相色譜法測定舒冠顆粒中2，3，5，4′四羥基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷的含量以控制該產品的質量。
1 儀器與試藥
高效液相色譜儀：Waters 2996 PDA檢測器，Waters 600 pump、Millennium 32色譜數據工作站；島津CTO10ASCVP柱溫箱、紫外分光光度計：PERKIN ELMER Lambda12。甲醇為色譜純，其它試劑均為分析純，水為重蒸水。二苯乙烯苷對照品：購自中國藥品生物制品檢定所（084420003，供含量測定用）。舒冠顆粒：自制。
2 方法
2.1 色譜條件色譜柱：Alltima C18（5μm，4.6 mm×250 mm）；流動相：甲醇水（32∶68），流速1.2 ml/min；柱溫：25℃；檢測波長320 nm，進樣量：20μl。
2.2 實驗液的制備
2.2.1 對照品溶液的制備精密稱取2，3，5，4′四羥基二苯乙烯2OβD葡萄糖苷對照品適量，加50%的乙醇制成每毫升中含60μg的溶液，即得［1］。
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2.2.2 供試品溶液的制備取裝量差異項下的內容物，研細，精密稱取適量（約1.5 g），加入50%的乙醇溶液50 ml，稱定重量，水浴回流1 h，取出，放冷至室溫，用50%的乙醇溶液補足減失的重量，搖勻，過濾，再過0.45 μm微孔濾膜，取續濾液置棕色瓶中，避光保存，即得。
2.2.3 陰性對照實驗 取按處方及工藝制備的不含制何首烏原藥材的樣品，按供試品溶液的制備實驗，結果在二苯乙烯苷的峰位上未出現色譜峰，說明陰性對照無干擾。結果見圖1。
2.3 線性關系的考察精密稱取二苯乙烯苷對照品0.8 mg置10 ml量瓶中，加50%乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，從中分別精密吸取2，4，8，12，16，20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以二苯乙烯苷的濃度（mg/ml）為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程為：Y=5 394 199X＋654，r=0.999 9（n=6），結果表明二苯乙烯苷進樣量在0.165～1.650 μg范圍內線性關系良好。
2.4 精密度實驗精密吸取同一對照品溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖，連續進樣6次，測定峰面積值，結果RSD=0.95%，表明該儀器和方法精密度良好。
2.5 重復性實驗取同一批號樣品，按上述測定方法重復測定6次，得其平均含量為1.147 2 mg/g，RSD為1.12%。
2.6 回收率實驗精密稱取已知含量的舒冠顆粒（二苯乙烯苷含量1.147 2 mg/g）適量，精密加入一定量的二苯乙烯苷對照品，按上述測定方法測定，計算回收率。結果見表1。表1 二苯乙烯苷回收率實驗結果（略）
2.7 樣品測定實驗按上述測定方法分別測定10批樣品。結果見表2。表2 舒冠顆粒中二苯乙烯苷的含量（略）
3 討論
關于何首烏中的二苯乙烯苷的含量測定已經有了很多的報道［2］，測定條件各異，但是對于在該品種的質量控制中建立以何首烏中二苯乙烯苷為含量測定指標的研究，還未有報道，我們針對目前許多企業大力開發該產品的情況特研究了舒冠顆粒中的二苯乙烯苷的含量測定方法。經方法學研究表明該方法簡便、快速、準確。可以作為舒冠顆粒的質量控制指標。在本次研究中我們發現文獻報道的流動相針對本項目不能達到很好的分離效果，最后確定以甲醇水（32∶68），流速1.2 ml/min時，主峰與其他成分峰能較好的分離。在樣品處理方面，我們考察了用甲醇回流提取，稀乙醇回流等方法，結果發現甲醇處理的樣品不穩定，在8 h內峰面積降低很快，但是選用稀乙醇回流處理的樣品溶液在8 h內穩定。故我們選擇用50%的乙醇溶液水浴回流1 h作為供試品溶液的制備方法。
參考文獻：