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化學發光免疫分析儀范文1
本文闡述在ARCHITECTi2000SR全自動化學發光免疫分析儀應用實踐中進行使用方法的改良，極大地方便了儀器操作者的使用，有效地避免了使用過程中的差錯的發生。解決故障的過程有助于思路的擴展，對使用其他的檢驗儀器有很好的啟發作用和較大的參考或應用價值。
關鍵詞：全自動化學發光免疫分析儀；標本容易加錯現象；標本識別移位故障；改良方案
【中圖分類號】
R249 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763（2014）07-0272-01
Architect i2000SR全自動免疫分析儀是由美國雅培公司研發的第三代大型全自動免疫分析儀，采用化學發光的原理進行檢測，具有較高的靈敏度、特異性和穩定性，具有檢測速度快，測量范圍寬廣等諸多優點，且可與生化模塊C8000相連。且檢測試劑穩定并易于進行室內與室間質量控制。然而全自動化儀器的高故障率亦對檢驗技術人員提出了更高標準的要求。本文即是作者在雅培i2000SR全自動化學發光免疫分析儀應用實踐中遇到的：容易出現加錯標本，和機器本身出現標本識別移位的故障現象，分析其原因、探討改造方案并付諸實踐成功解決故障的過程，以便應用到其他的現代化的檢驗設備使用中去。
1 標本容易加錯的改良方案
1.1 標本容易加錯的現象：
由于該機器的原來的設計是每個標本架只有5個孔，也就是每個標本架只能放置5個標本，這樣就使使用者放置標本時，必須要好好的記著所加標本的原來的編號，待放到架子上時要好好的計算出標本的位置是在第幾個架子、第幾號位置編號。譬如：手里拿著16號標本需要放置到標本架子上時，就必須計算出是第4個架子的第1號位置才是16號的位置。是非常的不方便吧？
1.2 標本容易加錯現象的解決方案：
因為我發現了這個非常不容易計算出所要加的標本位置，并且又很容易加錯標本，工作起來非常不方便的現象時，就一直在腦子里尋求一個解決這個問題的方案。
不久我就想出來了個解決的辦法：那就是在每個標本架的靠近1號位置端，設計出了一個不干膠貼，上端標明1、2、3、4……架子號順序號，下端標明該架子的5個標本號在該架子上的應有的順序范圍。詳見附圖1改造后的第一個托盤俯視圖
2 標本識別移位故障的改良方案
2.1 故障現象：
應用ARCHITECTi2000SR全自動化學發光免疫分析儀進行批量編程，每個標本架放置5個標本，每5個標本架為一組，每一組用一個托盤托起，即標本號依次為1-25、26-50、51-75、76-100四組。在全部標本儀器檢測完成后，對HBsAg陽性標本利用金標法復查時，偶然發現陰陽性結果極為不符合的現象。遂對每個標本對應的架號、位置、結果逐一排查，發現個別標本架上的標本并沒有消耗（即沒有被取樣），但卻賦上了數值。經逐一檢查儀器所加樣本與操作者編程的標本架號位置明顯不同，即發生了跳躍，如31號標本所賦值實為36號樣本測試值或其它樣本值。
2.2 故障分析：
經與使用ARCHITECTi2000SR全自動化學發光免疫分析儀的兄弟單位工作人員及雅培中國工程師溝通，了解其工作過程原理是：利用ARCHITECTi2000SR化學發光免疫分析儀批量編程1-25、26-50、51-75、76-100號標本架號位置后，儀器會首先會進行標本架條碼掃描，同時也給每個標本進行掃描。如果某個標本架的條碼沒有掃描到，則機器會自動順延一個標本架進行操作，這樣就會出現跳架移位現象，也就是我們上述的故障現象。譬如儀器在批量編程，31-35號標本架的條碼掃描過程中沒有掃到，儀器則默認該架子不存在，標本也不存在，跳過了該標本架，將36-40號標本架或及其它標本架上的標本默認為31-35號標本。以后的標本均以同樣的方法順延賦值，即后面的所有標本均順延了5個號碼，如不復查而直接報告傳輸的結果，必然出現張冠李戴的嚴重后果。上述現象并非偶然，隨著工作量的增加，出現的頻率越來越高，為日常檢驗工作帶來相當大的不便，工作人員往往會花費很大的時間和精力，去排查或復查標本與結果是否相符，一度認為此儀器的標本識別和處理軟件系統存在巨大缺陷。
3 標本識別移位故障的解決方案
通過細致的觀察分析、嚴密的科學探討和積極的創新實踐，我們對ARCHIT -ECT i2000SR全自動化學發光免疫分析儀的進樣系統，進行了簡單而合理的改良，使上述故障得以完全解決。具體方法如下：
準備100個改造過的與架同高的平口空試管（以合適放置加樣杯為宜），利用條碼機打印1-100編號號碼的條碼，分別貼在每個試管上條碼器能夠掃描到的位置。將這些貼有條碼的試管按順序放置在標本架上，并保持條碼向外，易于條碼系統識別判讀；實驗操作時只需將加樣杯放置在對應貼有條碼的試管上即可。請注意：只需更換加樣杯加病人血清標本。更多的標本亦可用類似方法粘貼上1-100或更多的試管條碼。
詳見附圖1 圖2所改造的H540試管架俯視圖和側視圖
經過如此改良，儀器在進行標本架條碼掃描時，同時也會給每個試管條碼進行掃描，如果其中某個標本架條碼漏掃，但仍會掃描到試管上的條碼號，機器則自動的默認標本架的存在，就不會出現跳架移位的現象。
4 思路擴展與推廣應用
標本容易加錯的解決方案：就是以較小的改造或改良，而改變了原來的設計的不足，避免了工作中容易出現的錯誤。像這種小的改造可以用到大多數的試管架子是5個試管位置的大型生化分析儀、放免分析儀等的儀器上。
標本識別移位故障的解決方案：類似的跳架移位故障，不僅出現在ARCHIT -ECTi2000SR全自動化學發光免疫分析儀上，在其它設備上，譬如ARCHITEC -Ti4000SR等儀器亦會出現，亦可采用此法進行改造或改良。兄弟單位同類儀器或不同品牌的儀器，出現類似的因為批編程而出現的跳架移位故障亦可借鑒此方法一試，以避免出現數據移位錯誤，為臨床提供準確的檢驗信息。
化學發光免疫分析儀范文2
呋喃它酮是一種人工合成的硝基呋喃類抗生素，主要用于畜禽和水產動物的各種腸道感染性疾病的治療及促進生長的添加劑，曾經在畜禽水產養殖中廣泛應用。有關研究證明，呋喃它酮及其代謝物5-嗎啉甲基-3-氨基-2-惡唑烷基酮（AMOZ）具有相當大的毒性和副作用，能誘導有機體基因突變及致畸胎，且能誘發癌癥[1，2]。美國、加拿大、中國和歐盟的很多國家都已規定動物源性食品中呋喃它酮及其代謝物AMOZ殘留為不得檢出。但是因為其價格低廉、療效好，目前違法使用現象在很多國家仍然存在，故有必要對動物源性食品中呋喃它酮及其代謝物AMOZ加強監控[3]。由于呋喃它酮原藥不穩定， 進入動物體內后會被迅速代謝和分解，對原藥的檢測難度很大，但其代謝物AMOZ可以蛋白結合物的形式長期、穩定存在組織內，在適當的酸性條件下，這些結合殘留物可以從蛋白質中釋放出來，因此通常將AMOZ作為監測呋喃它酮的靶化合物[1，4，5]。
目前，AMOZ 檢測方法主要有色譜法[6～9]、免疫分析法[10] 等。色譜法準確、靈敏，但操作復雜、設備昂貴、檢測速度慢，需要專業技術人員。而免疫分析法具有簡單、快速、靈敏度較高、特異性強和高通量等優點。免疫分析法的關鍵是高親和力和特異性的抗體的制備，其中基因工程重組單鏈抗體是將天然抗體的重鏈可變區VH和輕鏈可變區VL通過一條柔軟的連接肽連接成的單鏈分子，不僅具有高親和力和特異性，而且還可以通過工程菌發酵快速大量制備，極大地降低了抗體生產成本，縮短了抗體生產周期?；瘜W發光免疫分析是近十年來發展起來的一項將高靈敏度的化學發光與高特異的免疫分析相結合的新興的免疫檢測技術，具有檢測特異性好、檢測范圍寬、操作簡單自動化程度高等優點，能顯著提高檢測的靈敏度，并且比常用的其他免疫分析法的靈敏度都高[11～14]。迄今為止，文獻報道的AMOZ免疫分析法都是建立在傳統的多克隆或單克隆抗體基礎上的ELISA法，利用重組單鏈抗體建立的AMOZ化學發光酶免疫分析方法還未見報道。本研究利用重組抗AMOZ衍生物單鏈抗體，建立了測定蝦肉中AMOZ殘留的間接競爭化學發光酶免疫分析新方法。本方法簡便、快速、準確、儀器設備簡單，靈敏度高于ELISA法，測定結果和HPLC-MS/MS法測定結果呈現良好的相關性。
2 實驗部分
2.1 儀器與試劑
化學發光免疫分析儀范文3
化學發光免疫分析包括三大類型: 即標記化學發光物質的化學發光免疫分析、 標記熒光物質的熒光化學發光免疫分析和標記酶的化學發光酶聯免疫分析?；瘜W發光免疫分析技術可測定內分泌激素、 腫瘤標志物、 血藥濃度、 傳染病和心血管疾病標志物、 貧血及過敏原等項目［1］。目前對運動員血清睪酮的檢測， 大多采用放射免疫法， 由于其自動化程度低， 不適用于快速檢測， 又有放射污染。美國Beckman．Coulter公司和法國Pasture研究院合作生產的Access全自動微粒子化學發光免疫分析儀， 其方法學具有高靈敏性、 高精確性、 高穩定性等特點， 無需對樣本進行測前處理， 簡便的自動化操作， 全程僅需15～20 min， 且無放射污染。本室引進Access免疫分析系統對運動員血清T進行定量測定， 現對該方法的臨床應用評價如下。
1 材料和方法
1.1 檢測對象 無錫市體育管理中心運動員122人， 年齡≥15歲， 其中男64人， 女58人。對照組為來我院正常體檢的中學生， 男、 女各30人。采運動員清晨靜脈血2 mL， 分離血清后進行檢測。
1.2 材料 血清睪酮的檢測采用Access磁微?；瘜W發光免疫分析系統。Access免疫分析系統及配套的T試劑盒， 沖洗緩沖液， 堿性液， 酸性液， 定標液， 基質液(Substrste)， 反應杯(RV管)由BeckmanCoulter公司提供。
1.3 方法
1.3.1 標準曲線 分別取0、 1.7、 5.2、 13.9、 27.8、 55.5 nmol/L T標準液， 在Access免疫分析系統中執行自動定標程序。以2次測定結果的均值， 進行數學邏輯處理， 繪制標準曲線。
1.3.2 統計學分析 兩組間數據采用t檢驗。
2 結果
2.1 精密度測試 取低、 中、 高值的混合血清分別重復測定20次， 計算變異系數CV， 反映批內精密度。每天對不同濃度的質控血清測定1次， 連續20 d， 評價批間精密度。低、 中、 高值批內CV分別為4.1、 2.7、 1.6; 批間CV 分別為4.4、 3.2、 2.6。
2.2 血清睪酮檢測結果及統計分析 運動員血清睪酮檢測結果顯示， 男女運動員與各自相同性別正常人對照組之間無統計學意義（P>0.05）。 表1 運動員血清睪酮檢測
3 討論
Access免疫分析通過在RV管中加入包被單克隆抗體的磁性微粒、 血清樣品、 堿性磷酸酶(ALP)標記的抗原， 經37℃孵育后， 形成競爭法抗原抗體結合成的復合物。再加入底物 AMPDD(一種金剛基二螺［4， 4］二氧乙烷的磷酸脂)發光劑。AMPDD經ALP水解， 生成一種不穩定的陰離子， 該陰離子分解時持續發光， 且與ALP量成正比， 通過測定相對發光單位(relative light unit， RLU)定量檢測血清中物質的濃度［2］。
對運動員血清T檢測結果表明， CV％值較小， 說明儀器重復性較好， 測定結果穩定。 T的測定濃度范圍在0～55.5 nmol/L之間， 能夠滿足運動員正常測試的需要。自動化的Access免疫分析系統， 既具有化學發光檢測的高靈敏度， 又具有免疫分析的高特異性， 準確性、 穩定性， 能夠快速及時的為運動員訓練監控提供可靠的依據。另外， 它是用化學試劑來標記抗原或抗體， 避免了因使用放射性核素而帶來的對人體和環境的危害。
但由于試劑成本的原因， Access免疫分析系統仍未廣泛應用于臨床。隨著臨床需求的進一步擴展， 高靈敏度、 寬線性Access免疫分析系統的將得到廣泛應用。
參考文獻
化學發光免疫分析儀范文4
【關鍵詞】化學發光免疫法；放射免疫法；AFP；分析性能；實驗方法
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.01.672文章編號：1004-7484（2014）-01-0556-02
化學發光免疫分析是一種新型的標記免疫分析技術，是繼放射免疫、酶免疫、熒光免疫分析等分析方法之后的新一代標記免疫分析技術，是將免疫測定與化學發光相結合的新型技術。整個過程均在全封閉的反應體系中進行，且能夠全自動操作，儀器具有反應迅速，靈敏度高，檢測限低等優點，總的來說包括抗原抗體特異性結合與化學發光兩部分過程[1]。甲胎蛋白（AFP）是原是胚胎的肝細胞，嬰兒兩個月便逐漸消失，但近些年發現AFP在部分成人體內出現，并發現它是原發性肝癌最靈敏，也是最特異的腫瘤標志物。為了進一步考察該儀器對AFP生物檢測限和AFP功能靈敏度的測量，我院參照IUPAC（國際純粹和應用化學聯合會）的規定評價方案，現將60例臨床送檢血清標本的臨床資料進行報道如下：
1材料與實驗方法
1.1應用材料與儀器檢測樣選用我院2013年1月至2013年3月的60例臨床送檢血清標本。
儀器采用美國Bayer Centaur 240全自動化學發光儀，并配套相關檢測試液（包括標記的抗原抗體、含磁性的固相顆粒、稀釋液、AFP清洗液、發光試劑等），均采用拜耳公司提供的試劑。放射免疫法采用上海產的γ計數儀（SN-682 型），并配套運用 AFP 試劑盒（中國原子能科學研究所研制）。
1.2方法檢測時運用AFP稀釋液作為空白樣品，取一新鮮的血清作為試樣，做重復性實驗，記錄每次檢測的濃度值和光強度值。核實兩者的精密度、靈敏度與檢出限等，數據處理采用線性回歸處理。
1.3統計學方法根據SPSS13.0軟件對提供的數據進行統計學的分析，計量資料為t檢驗，對所有統計結果采用均數±標準差（χ±s）的形式表示，運用軟件進行處理（檢驗水準α=0.05，雙側檢驗）作為統計學的評定標準具有統計學的差異。
2結果
2.1線性試驗以AFP稀釋液作為空白試劑，再根據要求將標準溶液稀釋成不同濃度的溶液，放射免疫法取5ppb、10ppb、50ppb、200ppb、400ppb為標準濃度測定標準曲線，化學發光免疫法取5ppb、10ppb、50ppb、200ppb、400ppb、800ppb為標準濃度測定標準曲線，結果兩組數據均有較好的線性關系。
2.2重復性試驗取一新鮮的血清作為試樣，兩種方法均進樣10次，查看兩者的重復性差別，兩組儀器均能滿足RSD
2.3相關性試驗采用2.2中的方法用上述兩種檢測法對受檢血清標本進行適當定量分析。結果顯示，兩種方法無顯著差異（P>0.05），且相關系數r=0.995，回歸方程為y=-1.059+0.921x，兩組方法所得數據的相關性良好。
2.4回收率試驗取混合血清后，再加不同濃度的標準定值血清，用兩組方法分別對其進行平均回歸率實驗，實驗得出，放射免疫法的回收率為91.2-108.1%，化學發光免疫法的回收率為92.0-107.8%?；瘜W發光免疫法略優于放射免疫法。
2.5檢出限以每次做的空白RLUs為基值，以該空白的RLUs值的3倍作為樣品中具有的AFP量，或稱本法的檢測低限。分別對兩種方法進行檢出限測量，得出化學發光免疫法的檢出限為0.95ppb，放射免疫法的檢出限為5ppb。化學免疫法在檢出限上明顯優于放射免疫法[2]。
2.6精密度試驗取三個梯度濃度（分為低、中、高三個梯度）的試劑分別進行精密度實驗，并運用兩種方法進行整理對比，見表1。
3討論
化學發光免疫技術作為一種新型的分析技術，既具有運用發光檢測時的高度敏感性，也同時具有免疫分析時的高度特異性。其原理為將激發態分子回到基態時所釋放而產生的發光現象，再運用化學發光系統來為抗原抗體的結合反應做指示系統，從而進行定量檢測抗原或抗體的濃度方法，是一種直接的運用發光劑標記抗體的免疫分析方法。由于運用丫啶酯發光劑的優點可以很好的減少非特異性干擾，反應較為簡單且迅速，反應靈敏度高，據有關資料顯示，該發光劑也很穩定（有效期可長達1年以上）。
放射免疫法是目前臨床上較為常用的分析方法，其原理是放射性標記的抗原和非標記抗原全部同時與限量的特異性抗體進行競爭性可逆的結合反應，反應的靈敏度較低，標記物的有效期也較短（一般只有1個月左右）。從工作人員角度來說，也會對他們的身體健康帶來很多負面影響。從以上的結論可以看出，兩種方法的檢測結果無顯著性差異，且相關性較好。但從檢出限、靈敏度、精密度等方面進行比較，化學發光免疫法就明顯優于放射免疫法，而且其試劑穩定性高、毒性小，對環境無過大污染，方便、易操作且安全。
本實驗采用的全自動化學發光儀可以很好地對血清標本進行很好地采樣，處理和檢測，基本上能夠達到樣品隨到隨測，檢測迅速，很快可以得到檢測結果，大大縮短了檢測所用的時間，能滿足臨床上的檢驗需求[3]。從上述數據可以確認，該方法的檢測結果均可以達到臨床運用水平，又基于其高度特異性、靈敏度高、重復性好等優勢，值得臨床進一步廣泛應用。
參考文獻
[1]張紅祥.化學發光免疫法與放射免疫法檢測血清AFP臨床分析[J].中國現代藥學應用，2010，4（7）：41-42.
化學發光免疫分析儀范文5
【摘要】 目的 探討早發冠心病血瘀證、痰濁證面部光電血流容積特征及與一氧化氮(NO)、內皮素(ET)含量的關系。方法 早發冠心病血瘀證36例，痰濁證35例，健康對照組31例，采用GD-3型光電血流容積面診儀檢測光電血流容積參數，硝酸還原酶法測定NO，放射免疫分析法測定ET。結果 血瘀證患者Hb、He、Hf、Hb/Tab、Hf/Hb較正常組顯著降低(P＜0.01)，痰濁證患者Hb、He、Hf及Hf/Hb較正常組顯著降低(P＜0.01)，血瘀證患者與痰濁證患者比較，Hb、Hb/Tab顯著降低(P＜0.01)。3組間Hb、ET、NO比較：血瘀證組Hb最小，痰濁證組次之，正常組最高；而ET含量各組間無統計學意義；NO含量血瘀證組低于正常組(P＜0.01)；隨著光電血流容積主波幅的增高，ET均數值逐漸下降，NO均數值逐漸上升，低波幅組與高波幅組差異有統計學意義。ET與Hb成負相關，NO則呈正相關關系。結論 心臟功能減退與大動脈順應性降低是本證基本病理改變之一。血流容積主波幅與NO、ET含量具備相關關系，從而準確反映血管的舒縮狀態及體內生物活性物質的變化，三者可作為早發冠心病血瘀證、痰濁證輔助診斷指標之一。
【關鍵詞】 早發冠心病；血瘀證；痰濁證；光電血流容積；一氧化氮；內皮素
Abstract：Objective To research photoelectric facial blood flow volume characteristic of premature coronary heart disease of heart blood stasis syndrome (HBSS) and phlegm syndrome (PS)， and its relation with NO and ET. Methods Patients of premature coronary heart disease of HBSS (36 cases) and PS (35 cases) were selected， with 31 health people as control. The parameter of photoelectric facial blood flow volume was detected with GD-3 photoelectric blood stream plethysm (PBSP) of the facial color-diagnosis. NO was determined by nitrate reductase method and ET was determined by RIA. Results Hb， He， Hf， Hb/Tab and Hf/Hb of HBSS decreased obviously compared with the control (P＜0.01). Hb， He， Hf and Hf/Hb of PS decreased obviously compared with the control (P＜0.01). Hb， Hb/Tab of HBSS decreased obviously compared with PS (P＜0.01). Comparison of Hb， ET， NO among the three groups was as follows：Hb of HBSS was the lowest， followed by PS， the highest was the control. There was no significance in the content of ET among the three groups， the content of NO in HBSS was lower than the control (P＜0.01). With the main volume of PBSP flow increased， ET values gradually declined， NO values gradually rose， there was significantly different between low amplitude group and high amplitude group. ET and Hb correlated negatively， NO and Hb correlated positively. Conclusion It is one of the basic pathological changes of the syndrome that cardiac function and artery compliance reduced. There were correlationship between the main volume of PBSP and content of NO and ET， so the systolic and diastolic blood vessels in the body and the state of bio-active substances can be accurally responsed. All those can be used as the auxiliary diagnostic indexes of premature coronary heart disease HBSS and PS.
Key words：premature coronary heart disease；heart blood stasis syndrome；phlegm syndrome；photoelectric blood stream plethysm；nitrogen monoxide；endothelin
血管內皮細胞釋放的主要內分泌因子內皮素(ET)與一氧化氮(NO)是一對具有拮抗效應的血管活性物質。ET是內源性收縮因子中研究最多、且是最強的血管收縮劑之一[1]，而NO作為內皮源性舒張因子[2]，具有極強的舒張血管的作用。在生理情況下，NO/ET水平保持動態平衡；病理情況下，其平衡遭到破壞，導致血管舒縮功能紊亂，血管內皮受損及通透性改變，血液流變學異常，引發痰濁閉塞、瘀阻血絡，最終導致冠心病。因此，通過檢測早發冠心病血瘀證與痰濁證的光電血流容積指標，探討其與NO、ET含量的相關性及臨床診斷價值，具有重要意義[3]。
1 資料與方法
1.1 觀察對象
健康對照組31例，參照WHO確定健康的定義與10項標準[4]，平均年齡(55.07±7.19)歲；其中男11例，女20例，經病史調查、體格檢查和必要的理化檢查，皆證實為健康人。冠心病血瘀證36例，痰濁證35例，冠心病診斷參照1979年國際心臟病學會和WHO臨床命名標準化聯合專題報告[5]及第一屆全國內科學術會議心血管病專業組(1980年12月，廣州)關于冠心病命名及診斷標準的建議[6]；中醫辨證分型標準參照2002年國家中醫藥管理局醫政司胸痹急癥組、中國中醫藥學會內科學會心病專業委員會《中醫心病診斷療效標準與用藥規范》[7]。血瘀證患者平均年齡(56.32±7.35)歲，男20例，女16例；痰濁證患者平均年齡(57.24±7.46)歲，男21例，女14例。3組觀察對象男性年齡均＜55歲，女性年齡均＜65歲。經病史調查、心電圖、實驗室相關檢查、臨床病癥舌脈象，均確診為早發冠心病血瘀證與痰濁證患者。組間性別、年齡比較，差異無統計學意義(P＞0.05)。
1.2 檢測指標及方法
1.2.1 面部光電血流容積圖檢測
應用湖南中醫藥大學中醫診斷研究所研制的GD-3型光電血流容積面診儀，與Pclab生物機能信號采集系統匹配，Pclab系統采用動物心電(mV)、三通道(CH3、壓縮比為20)、低通濾波(10 Hz)，記錄面頰部光電血流容積圖。被檢者采取仰臥位，自然放松，用95%的酒精棉球在檢測部位脫脂后，將光電換能器探頭緊貼檢測部位，中等壓力，以不漏光為佳。按步驟在計算機Pclab軟件中測量波形時間指標(Tag、Tab、Tae、Teg、Tw)、波幅指標(Hb、Hd、He、Hf)，再計算比值指標(Hb/Tab、Hd/Hb、He/Hb、Hf/Hb等)[8]。
1.2.2 血漿一氧化氮和內皮素測定
采用北京普爾偉業生物科技有限公司血漿ET放射免疫藥盒(放射免疫分析法)測定ET，采用南京建成生物工程研究所NO試劑盒(硝酸還原酶法)測定NO。按試劑盒說明書操作。
1.3 統計學方法
檢測值用x±s表示，3組間兩兩比較用單因素方差分析，各因素之間關系用直線相關分析。所有資料用SPSS 14.0版統計軟件在計算機上完成。
2 結果
2.1 3組間光電血流容積主波幅、內皮素、一氧化氮的比較
在不同的證型之間，光電血流容積主波幅(Hb)比較差異具有統計學意義，其中血瘀證組波幅最小，痰濁證組次之，正常組最高；而ET含量變化各組間無統計學意義，NO含量血瘀證組低于正常組，二者差異有統計學意義，血瘀證組與痰濁證組比較差異無統計學意義。見表1。表1 3組間ET、NO含量與光電血流容積Hb的比較(略)注：與血瘀證比較，*P＜0.01；與痰濁證比較，#P＜0.01；與正常組
比較，P＜0.01
2.2 不同光電血流容積主波幅組內皮素和一氧化氮含量的變化
在不考慮證的前提下，根據光電容積主波幅的高低將其分為6組(A、B、C、D、E、F組)，可以看出，隨著光電血流容積主波幅的增高，ET均數值逐漸下降，NO均數值逐漸上升，低波幅組與高波幅組差異有統計學意義。NO的變化與ET相反，各組間差異有統計學意義。見表2。表2 不同光電血流容積主波幅組內ET和NO含量的變化(略)注：與A組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與B組比較，#P＜0.05；
與C組比較，P＜0.05；與D組比較，P＜0.05
2.3 面部光電血流容積波幅與比值指標的比較
血瘀證患者與正常組比較，Hb、He、Hf、Hb/Tab、Hf/Hb均有顯著降低(P＜0.01)；痰濁證患者與正常組比較，Hb、He、Hf及Hf/Hb均有顯著降低(P＜0.01)；血瘀證患者與痰濁證患者比較，Hb、Hb/Tab有顯著降低(P＜0.01)。見表3。表3 早發冠心病患者及健康人面部光電血流容積指標比較(略)注：與血瘀證比較，*P＜0.01；與正常組比較，#P＜0.01
3 討論
NO和ET是由血管內皮細胞合成、釋放的一對血管舒縮因子。ET是已知的最有力的內源性血管收縮因子，主要由血管內皮產生的一種作用強烈且持久的血管收縮肽，過量釋放可引起冠狀動脈痙攣，促進心肌收縮，加重心肌缺血和心肌再灌注損傷[9-12]。NO是血管內皮細胞分泌的作用極強的舒血管因子，是維持血管舒張的主要來源，具有舒張血管平滑肌的作用，并對抗內皮源性收縮因子。NO為ET的生理拮抗劑， 持續基礎釋放對維持心血管系統恒定的舒張、調節冠狀動脈基本張力、保持心肌血流灌注有著重要作用[13]。正常情況下，機體中NO和ET都有少量分泌，以維持機體正常需要，二者含量相對穩定，達到一種平衡狀態。但缺血后，由于血塊對血管的刺激、血管內壓增高及炎癥反應，使內皮素mRNA表達增加，內皮素合成及釋放增加，引起動脈的強烈收縮，進而使局部腦組織缺血缺氧，導致腦缺血，尤其是側枝循環不良的組織；而由內皮素引發的白細胞粘附血管壁以及其激活的炎性因子均可加強腦血管痙攣、組織缺血，并且損傷組織細胞及內皮細胞，使得內皮源性NO合成減少或者拮抗了其舒張作用；另一方面，紅細胞裂解釋放出的氧合血紅蛋白可使NO滅活，ET/NO之間的平衡被打破，從而破壞了正常的血管舒張功能。Sakowitz[12]認為，血管痙攣與可利用的NO減少以及繼發的血管收縮因子和血管舒張因子失衡有關。
在本研究中，將血瘀證組、痰濁證組和正常組進行比較時，我們發現光電血流容積主波幅在這3組中差異有統計學意義，其中在血瘀證組波幅最低，痰濁證組次之，而正常組最高[14]。這與中醫理論中有形之邪或有形的病理產物阻塞脈絡，氣血運行不暢而致痰阻血瘀，脈來不暢的理論相一致。同時，NO血瘀證組的含量明顯低于正常組，而痰濁證組與血瘀證組及正常組無差異，ET各組間無差異，考慮為光電血流容積主波幅能夠敏感、及時、直接地反映血流容積的變化，側重于血管功能的反應，而作為血管擴張的物質基礎的NO和ET則反應沒有那么敏感。說明光電血流容積主波幅能夠及時反映血流的變化，敏感于生物活性物質的釋放，能為臨床及科研提供及時的資料。
在按光電血流容積主波幅的高低對NO及ET進行觀察，我們發現，隨著光電血流容積主波幅的增加，NO值逐漸增加，與之呈正相關；而ET值逐漸下降，與光電血流容積主波幅呈負相關，并且在高波幅組和低波幅組差異有統計學意義。說明隨著NO/ET值逐漸增大，血管舒張功能加強而處于擴張狀態，血流容積增大，所以光電容積主波幅增高。可見，光電血流容積主波幅的變化與NO及ET的變化關聯性很好，可以準確反映血管的擴張狀態及血管擴張時體內生物活性物質的變化，為科研及臨床提供可靠的證據。
參考文獻
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906.
化學發光免疫分析儀范文6
【關鍵詞】 人絨毛膜促性腺激素；定量檢測；方法評價
人絨毛膜促性腺激素（HCG）是糖蛋白激素家族中的一員， 一旦妊娠后絨毛生成， 即可在血循環中檢測到。因此測定HCG的水平可用于診斷早孕及宮外孕， 進行先兆性流產的動態觀察及判斷預后， 還可作為孕期的監護觀察指標。此外， 也可用于絨毛膜癌、惡性葡萄胎等作為輔助診斷及治療后隨訪的觀察指標。因為血中HCG變化較快， 能及時反映出絨毛的分泌活動[1， 2]。HCG檢測方法多種多樣， 現對江蘇省泰州市第二人民醫院兩種檢測HCG方法的重復性、穩定性等指標進行評價。
1 材料與方法
1. 1 儀器與試劑
1. 1. 1 化學發光免疫法 采用美國貝克曼公司UniCel DXI 800免疫分析儀及其配套檢測試劑。
1. 1. 2 酶聯熒光免疫法 采用法國生物梅里埃MINI VIDAS和配套檢測HCG試劑。
1. 2 標本
1. 2. 1 質控品 美國貝克曼公司提供的質控品。
1. 2. 2 血樣 隨機抽取住院及門診患者共100例。
1. 3 試驗原理
1. 3. 1 化學發光免疫法檢測HCG原理 UniCel DXI 800免疫分析系統采用化學發光技術和磁性微粒分離技術相結合的測定方法， HCG測定原理為雙抗體夾心法。
1. 3. 2 MINI VIDAS檢測 HCG原理 是一種定量全自動ELISA（酶聯免疫吸附劑測定）法， 將兩步的免疫夾心法與最后的熒光檢測結合起來， 利用現成的單劑量試劑和分析儀中儲存的校準系統， 對單份樣品進行檢測。
1. 4 方法
1. 4. 1 重復性實驗（批內精密度） 根據CLSI的EP5-A2文獻[3]對于精密度評價的要求， 分別在UniCel DXI 800免疫分析儀和MINI VIDAS測定三個水平質控HCG含量， 3 h內各水平測試20次， 計算均值（x-）、標準差（s）、變異系數（CV）。
1. 4. 2 穩定性實驗（日間精密度） 按上述方法分別測定三個水平質控HCG含量， 1次/d， 連續測定20 d， 計算均值（x-）、標準差（s）、變異系數（CV）。
1. 4. 3 比對實驗 根據CLSI EP9-A2文獻[4]， 選取隨機的住院及門診患者新鮮血樣標本100例， 采用上述兩種方法平行檢測HCG含量， 最后對檢測結果進行相關性分析。
1. 5 統計學方法 用SPSS17.0統計軟件進行相關性分析。
2 結果
2. 1 重復性與穩定性 化學發光免疫法和酶聯熒光免疫法的重復性結果， 見表1， 穩定性結果， 見表2。
2. 2 比對實驗 將檢測結果作回歸曲線， 得到化學發光免疫法和酶聯熒光免疫法比對結果的回歸方程：y=0.885x+31.24，相關系數r=0.985。根據CLSI文獻要求（r>0.975）， 可見兩種方法相關性理想。
3 討論
HCG是孕卵著床后由人體滋養層細胞分泌的一種糖蛋白激素， 在正常與異常妊娠期有一定的分泌規律， 滋養細胞的數量和活力與HCG的分泌密切相關， 因此， 血清HCG測定能夠在臨床上診斷早孕、異位妊娠、先兆流產、葡萄胎及妊娠滋養細胞腫瘤等， 并在治療中和治療后的隨診中成為重要檢測指標。
根據上述實驗結果， 兩種定量檢測方法均有穩定性、重復性較好的特點， 對比實驗結果顯示， 兩種方法相關性較好。另外， 兩種方法有各自的優點， 實驗室可根據具體情況選擇。UniCel DXI 800免疫分析儀：①磁性微粒子/超聲波清洗分離技術， 使攜帶污染率
參考文獻
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