免疫學的作用范例6篇

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免疫學的作用

免疫學的作用范文1

【關鍵詞】 民族

摘要:目的實驗旨在應用中藥血清藥理學研究方法,研究民族藥余甘子對小鼠脾淋巴細胞增殖的影響,對小鼠S180腹水腫瘤細胞存活率的影響以及對小鼠腹腔巨噬細胞細胞活化作用的研究。方法余甘子采用鮮果榨汁經冷凍干燥凍干保存。小鼠隨機分6組,其中時效關系研究2組,量效關系研究4組。按0.2 ml/10 g體重用余甘子溶液灌胃。灌胃后30~180 min內不同時相無菌取血,利用中藥血清藥理學方法對實驗血清作時效關系研究及量效關系研究。結果與結論時效關系研究表明,用余甘子凍干粉溶液灌胃后30~180 min內不同時相含藥血清對小鼠脾淋巴細胞具有活化作用,并在給藥2 h時實驗血清活化作用明顯;量效關系研究表明,余甘子大劑量組實驗血清對促進小鼠脾淋巴細胞增殖,促進小鼠腹腔巨噬細胞細胞活化作用以及小劑量組實驗血清對小鼠S180腹水腫瘤細胞存活率的影響均具顯著差異性。

關鍵詞:余甘子; 含藥血清; 腹腔巨噬細胞; 淋巴細胞; S180腹水腫瘤細胞; 免疫調節

Study on the Immunoregulatory Effect of Phyuanthus Emblica in Mice

Abstract:ObjectiveThe experiment applies the traditional Chinese medicine Plasma Pharmacology. This experiment studies how Phyuanthus emblica Phyllanthus emblica, the traditional Chinese medicine,promotes the propagate of the spleen lymphocyte of small mice, how it influents the survival rate of the mouse S180 ascites tumor cell and how it activates the macrophage in the abdominal cavity.MethodsAdopt the fresh fruit juice of Phyuanthus emblica. Dry it and keep in freeze. The small mice are randomly pided in 6 groups. Among them, 2 groups are studied in time-efficacy relation, the other 4 are studied in quantity-efficacy relation. Infuse the solution of Phyuanthus emblica Phyllanthus emblica 0.2 ml per 10g weight into the stomach of the small mouse. Take the blood in sterile environments at different time after 30min but before 180min, then study the time-efficacy relation and the quantity-efficacy relation with the traditional Chinese medicine Plasma Pharmacology.Results and ConclusionThe study of time-efficacy relation expresses that after infusing the solution of Phyuanthus emblica Phyllanthus emblica, medicated serum in different time activates the spleen lymphocyte of small mice differently after the 30min but before 180min. During this period, on 2h the activation of the medicated serum is the most obvious. The quantity-efficacy relation research expresses that megadose promotes the propagate of the spleen lymphocyte of small mouse and activates the macrophage in the abdominal cavity more obviously. On the other hand, the small dosage influents the survival rate of the mouse S180 ascites tumor cell more obviously.

Key words:Phyuanthus emblica; Drugcontaining sera; Immunoregulation; S180 ascites tumor cell; Spleen lymphocyte

余甘子為大戟科植物余甘子Phyllanthus emblica L.的干燥成熟果實,余甘子首載于《南方草木狀》(為晉朝嵇含所著,是世界上最早的一部地方植物志)。余甘子在本草中首載于唐?蘇恭《新修本草》。作為民族藥最早被記載的是西藏帝瑪爾?丹增彭措著的《晶珠本草》。實驗研究證實,余甘子具有抗氧化、抗致畸、防腫瘤、抗病原微生物、降壓、抗愛滋病毒、降血糖及改善糖尿病并發癥、補益及降脂減肥等作用。證明其在提高機體免疫力方面具有很好的調節作用。中藥血清藥理實驗方法具有體外實驗條件可控性強,藥物效應易于檢測,可深入揭示藥物作用機理等優點,又能防止中藥粗制劑本身理化性質對實驗的干擾,還可反映出藥物中可吸收部分的直接作用。體現了體外和體內實驗較好的結合。實驗采用較先進的血清藥理學方法,用小鼠服藥后的含藥血清代替中藥煎劑進行體外實驗,對脾臟淋巴細胞增殖活性、對小鼠腹腔巨噬細胞細胞活化作用以及對小鼠S180腹水腫瘤細胞存活率的影響進行免疫功能檢測,通過時-效關系及量效關系對余甘子的藥理作用及免疫調節作用機理作進一步闡明。

1 材料

1.1 試劑RPMI1640培養基(日本株式制藥會社出品);10%新生小牛血清(美國Sigma公司);四甲基偶氮唑鹽(MTT)、刀豆蛋白-Ⅳ型(ConA-Ⅳ)、二甲基亞砜(DMSO)(美國Sigma公司);其余試劑均為分析純。

1.2 藥品余甘子為鮮果榨汁的冷凍干燥粉。

1.3 實驗動物昆明種健康小鼠,雌雄各半,體重(26±2)g,由江蘇省藥用植物生物技術重點實驗室動物房提供。

1.4 實驗儀器超凈工作臺;SHELATC2323型CO2孵育箱;日本產BIO-RED 550型酶標儀;96孔培養板;24孔培養板;數控恒溫水浴箱;血球記數板(上海醫用光學儀器廠 XB-K-25)。

2 方法

2.1 余甘子灌胃后不同時相含藥血清對小鼠脾淋巴細胞增殖的促進作用

2.1.1 含藥血清的制備參照文獻[1],小鼠用余甘子大劑量組(40.0 g鮮果/kg)灌胃,為成人日劑量的20倍。按0.2 ml/10 g體量灌胃給藥,于給藥后30,60,90,120,180 min分別用乙醚吸入麻醉,摘眼球無菌取血,37℃促凝,3 000 r/min離心10 min分離血清,血清呈透明、清亮、淡黃色、無沉淀、未溶血。56℃,30 min滅活(除去血清中的補體)。4℃保存備用(3 d之內有效)。

2.1.2 正常小鼠對照血清的制備小鼠用蒸餾水0.2 ml/10 g體重灌胃,30 min后摘眼球取血,37℃促凝,3 000 r/min離心10 min分離血清,4℃保存備用(3 d之內有效)。

2.1.3 脾淋巴細胞懸液制備參照文獻[2],正常小鼠脫頸椎處死,體積分數為0.75的酒精浸泡消毒,無菌取出脾臟,置盛有5~10 ml Hanks液平皿的100目銅網上,輕輕捻碎,使單個細胞經網進入Hanks液中,并移吸至刻度離心管中800 r/min離心10min,經Tris-NH4Cl除去紅細胞,Hanks液洗3遍,鏡下細胞記數,用RPMI1640培養液配成5×106/ml懸液。

2.1.4 余甘子不同時相含藥血清促進淋巴細胞增殖測定參照文獻[3],于96孔培養板中每孔加入100 μl脾淋巴細胞懸液,再加入100 μl,2 5 μg/ml ConA溶液及20 μl的實驗血清,4復孔;20 μl空白血清,4復孔,37℃、體積分數為0.05的CO2培養48~72 h。培養結束前4~6 h每孔加入MTT溶液10 μl,培養結束棄去上清,每孔加入DMSO溶液200 μl,充分震蕩后靜置20 min,酶標儀測定A490 nm值。

2.2 余甘子含藥血清促進小鼠脾淋巴細胞增殖

2.2.1 含藥血清的制備參照文獻[4],小鼠隨機分4組,每組6只,生理鹽水組、余甘子大劑量組(40.0 g鮮果/kg)、余甘子中劑量組(20.0 g鮮果/kg)、余甘子小劑量組(10.0 g鮮果/kg)。按0.2 ml/10 g體重量灌胃給藥,1次/d,連續給藥7 d。于末次給藥120 min后,摘眼球取血,37℃促凝,3 000 r/min離心10 min分離血清,血清呈透明、清亮、淡黃色、無沉淀、未溶血。56℃,30 min滅活(除去血清中的補體)。4℃保存備用(3 d之內有效)。

2.2.2 正常小鼠對照血清的制備小鼠用蒸餾水0.2 ml/10 g體質量灌胃,30 min后摘眼球取血,37℃促凝,3 000 r/min離心10 min分離血清,4℃保存備用(3 d之內有效)。

2.2.3 脾淋巴細胞懸液制備正常小鼠脫頸椎處死,75%酒精浸泡消毒,無菌取出脾臟,置盛有5~10 ml Hanks液平皿的100目銅網上,輕輕捻碎,使單個細胞經網進入Hanks液中,并移吸至刻度離心管中800 r/min離心10 min,經Tris-NH4Cl除去紅細胞, Hanks液洗3遍,鏡下細胞記數,用RPMI1640培養液配成5×106/ml懸液。

2.2.4 余甘子含藥血清促進小鼠脾淋巴細胞增殖測定于96孔培養板中每孔加入100 μl脾淋巴細胞懸液,再加入100 μl,2 5 μg/ml ConA溶液及20 μl的實驗血清,4復孔;20 μl空白血清,4復孔,37℃、體積分數為0.05的CO2培養48~72 h。培養結束前4~6 h每孔加入MTT溶液10 μl,培養結束棄去上清,每孔加入DMSO溶液200 μl,充分震蕩后靜置20 min,酶標儀測定A490 nm值。

2.3 余甘子含藥血清對小鼠S180腹水腫瘤細胞存活率的影響

2.3.1 含藥血清的制備同上2.2.1。

2.3.2 正常小鼠對照血清的制備同上2.2.2。

2.3.3 S180腹水腫瘤細胞懸液的制備無菌條件下取S180腹水癌細胞,用基本1640液洗滌離心3次后,用完全1640液配成3×105個/ml備用。

2.3.4 S180腹水腫瘤細胞存活率的測定于96孔培養板中每孔加入100 μl S180腹水癌細胞懸液,再加入100 μl,25 μg/ml ConA溶液及20 μl的試驗血清,4復孔;20 μl空白血清,4復孔,37℃、體積分數為0.05的CO2培養48~72h。培養結束前4~6h每孔加入MTT溶液10 μl,培養結束棄去上清,每孔加入DMSO溶液200μl,充分震蕩后靜置20 min,酶標儀測定A490nm值。

2.4 余甘子含藥血清對小鼠腹腔巨噬細胞的活化作用

2.4.1 含藥血清的制備同上2.2.1。

2.4.2 正常小鼠對照血清的制備同上2.2.2。

2.4.3 小鼠腹腔巨噬細胞分離參考文獻[6],小鼠腹腔注射質量分數為3%的巰基乙醇酸鈉溶液2 ml,3 d后脫頸椎處死,腹部皮膚消毒處理,腹腔注射RPMI1640液8 ml,輕揉腹部60次,以使1640液充分洗腹腔,無菌取出腹腔液,1 000 r/min低速離心5 min,棄上清液,以RPMI1640液洗3次,調整細胞濃度為3.5×105/ml,4℃保存于完全RPMI1640培養液中備用。以上操作過程,細胞均置于0~4℃冰浴中。從殺死動物到將單個細胞懸液置入冰浴內的時間不宜超過30 min;而細胞懸液在冰浴中放置時間不宜超過3 h。

2.4.4 巨噬細胞活性測定將巨噬細胞分裝于96孔培養板中,每孔100 μl,分別加入含藥血清20 μl,4復孔,空白血清20 μl,4復孔,輕輕震蕩,37℃、體積分數為0.05的CO2孵育2 h,每孔加入MTT溶液10 μl,輕輕震蕩,37℃、體積分數為0.05的CO2繼續孵育2 h,取出,小心吸去上清液,每孔加入DMSO溶液200 μl,輕輕震蕩,酶標儀測定A490 nm值。

3 結果

3.1 余甘子灌胃后不同時相含藥血清對小鼠脾淋巴細胞增殖活性的促進作用。與正常對照組比較,余甘子溶液40.0 g鮮果/kg體重灌胃,其(60~120)min等不同時相的含藥血清對小鼠脾淋巴細胞增殖活性均具有促進作用(P<0.01),而30 min,(150~180)min的含藥血清對小鼠脾淋巴細胞增殖活性無明顯促進作用(P>0.05)。結果見表1。

表1 不同時相余甘子含藥血清對小鼠淋巴細胞增殖活性(略)

3.2 余甘子含藥血清對小鼠脾淋巴細胞增殖活性與正常對照組比較,余甘子溶液大、中、小3個劑量組灌胃,分別于末次給藥120 min后摘眼球取血,含藥血清對小鼠脾淋巴細胞增殖活性均具有促進作用。其中大、中劑量組含藥血清對小鼠脾淋巴細胞增殖活性具明顯促進作用(P<0.01),小劑量組對小鼠脾淋巴細胞增殖活性促進作用不顯著(P>0.05)。結果見表2。

表2 余甘子含藥血清對小鼠淋巴細胞增殖活性(略)

3.3 余甘子含藥血清對小鼠S180腹水腫瘤細胞存活率的影響與正常對照組比較,余甘子溶液大、中、小3個劑量組灌胃,分別于末次給藥120 min后摘眼球取血,含藥血清對小鼠S180腹水腫瘤細胞存活率均具有抑制作用。其中小、中、大劑量組含藥血清對小鼠S180腹水腫瘤細胞存活率具明顯抑制作用(P<0.01)。結果見表3。

表3 余甘子含藥血清對小鼠S180腹水腫瘤細胞的影響(略)

3.4 余甘子含藥血清對小鼠腹腔巨噬細胞的活化作用與正常對照組比較,余甘子溶液大、中、小3個劑量組均具有一定促進作用。其中大劑量組具明顯促進作用(P<0.01),中、小劑量組對小鼠腹腔巨噬細胞細胞增殖活性促進作用不顯著(P>0.05)。結果見表4。

表4 余甘子含藥血清對小鼠腹腔巨噬細胞的活化作用(略)

4 討論

本實驗旨在應用中藥血清藥理學研究方法,研究民族藥余甘子鮮果汁冷凍干燥粉促進小鼠脾淋巴細胞增殖,對小鼠S180腹水腫瘤細胞存活率的影響以及對小鼠腹腔巨噬細胞活化作用。在采用血清藥理學方法進行實驗前,進行余甘子時效關系研究是必要的,以便找出給藥后的最佳采血時間,這樣可以避免由于藥物被代謝或尚未吸收造成的假陰性結果,理想的采血時間應在血藥濃度的高峰期。由實驗結果可以看出,余甘子對免疫功能的藥效影響集中在服藥后60~120,180 min后藥效逐漸消失,這對臨床用藥可能有一定的指導意義。因此,首先通過考察時-效關系以確定余甘子含藥血清的最佳采血時間,在此基礎上進一步對余甘子免疫調節作用做量-效關系研究。采用中藥血清藥理學研究方法,中藥粗制劑經口服吸收后,用含有藥物成分的血清代替中藥粗制劑進行體外實驗則可排除中藥粗制劑直接加入離體反應體系中各種影響因素的干擾,更接近藥物在體內環境中產生藥理效應的真實過程,使實驗結果的可信度大大提高。另外,若能將血清藥理學與血清藥物化學有機的結合起來,將有助于中藥藥代動力學的研究和中藥藥效物質基礎的闡明。余甘子為民族傳統習用藥材,貴州又為產區之一,野生資源豐富。余甘子藥物制劑及保健品的開發,必將促進余甘子藥材資源開發,也將推動貴州地方經濟的發展。

參考文獻

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[2] 董子明,張義國. 樹突狀細胞的特性和功能[J].河南醫學研究,1999,8(1):77.

[3] 許化溪,劉龔植. 小鼠脾臟樹突狀細胞的分離與鑒定[J].上海免疫學雜志,1991,11(3):129.

[4] 王勇,王亞平,祝彼得. 人參總皂苷對小鼠造血細胞增殖的影響[J].解剖學雜志,1995,18:153.

免疫學的作用范文2

現代兒童教育明確指出:小學是一個非常重要的階段,是一個人一生當中學習的起點,在此階段學生若缺少動腦,動口,動手及缺少思考的機會,就不是真有效的學習,而教育則是失敗的。 “知之者不如好之者”“學習最大的動力來源于興趣”若教師能在課堂上綜合利用現代信息技術的光,色,聲,等特點以圖片,音樂,動畫等形式展現出來,創造一個立體的教育空間,讓學生能夠接受到多種多樣的感官刺激。為學生營造一個輕松愉悅的課堂氣氛,喚起學生的學習意識,引導學生產生情感上的共鳴,提高學生的學習興趣,改善學生的積極主動性和各方面能力。 作為一名教師要充分利用各種網絡資源為教育教學工作服務,把握好課堂40分鐘,讓學生扎實的掌握知識,培養系統的能力,同時使學生在學習的過程中有所收獲,增加課堂容量,提高教學效果。

一、信息技術在小學教育中的應用,按層次的不同分為以下幾個方面:

1.作為學習的對象:教會學生信息技術的知識和技能。信息社會的人至少應具有和信息社會接口的能力,如果你不會用計算機,不會用網絡,那么你就無法和這個社會相融。中小學校設置的信息技術課程應注意培養學生的信息素養。所謂信息素養,美國圖書館協會定義為“是指人能夠判斷何時需要信息,并且能夠對信息進行檢索、評價和有效利用的能力”。簡言之,通過學習要培養學生學習與應用信息技術的興趣和意識,幫助他們掌握計算機基礎知識和基本操作技能,教會學生如何檢索、評估、利用、交換、共享、制作、保護信息,使學生能適應信息社會中的學習、工作和生活方式。

2.與學科教學整合:所謂與學科教學整合,就是要把各種技術手段完美、恰當地融合到課程中,就像在教學中使用黑板和粉筆一樣自然、流暢。要達到整合的目標,老師不僅要熟練掌握技術手段,更重要的是要深刻了解教育的本質,了解本學科教學的根本目的,了解教學中的難點所在,了解傳統教學的優點和局限性,結合技術所提供的能力更好地進行教學活動。信息技術與學科教學整合,有利于建立新的教學結構以解決傳統課堂教學中存在的不適應現代教育的問題。目前學校教育中占統治地位的教學系統是由教師、學生、教學內容三個要素構成,三者相互聯系、相互作用形成有機整體,從而構成穩定的教學結構形式。在這種結構中,信息技術僅作為一種承載和傳輸的工具而存在,沒有真正成為結構中的一個要素。

3.構建新型的教學模式:創造現代信息技術支持下的信息化學習環境和教育環境,探討新的教學模式。這種教學模式應體現學生學習的主體性,強調探究式、問題解決式、合作式的學習方式,突出多樣化、個性化的個體學習行為。網絡上有了豐富的教學信息資源和多樣化的呈現形式,我們有條件采用全新的教學方式進行教學。例如,因材施教或個性化教學是我們不斷追求的一種教學狀態,但在傳統的班級授課中,教師不可能完全顧及幾十個學生的不同情況,即便人們探索出分層教學、差異教學等教學方式,也只是在一定程度上的改進,難以做到適合每一個學生。

二、信息技術與教學相結合,能調動學生的積極性,激發學習興趣,為學生創造良好的學習氛圍

教學活動中,教師是主導,學生是主體,教師要充分發揮主導的作用,設計好各個教學環節,真正做到“導”, 這就要了解學生的生理心理特點,讓設計的教學環節把學生導入到知識的氛圍中,自覺探索知識。由于小學生年齡小,注意力差,持續時間短,因此,教師要善于運用色彩鮮艷有一定動感,且較新穎的事物來吸引學生的注意,從而激發學生興趣,主動參與到學習過程中來獲取新知識,讓學生有一個良好的學習氛圍,這樣也會大大提高學習效率。

例如:在學習兩、三步計算的應用題時,做法是:課堂上,打開屏幕出現了熊貓奶奶熱鬧的小商店,來買東西的人較多,但熊貓奶奶年齡大了,腦筋不大靈活。在小貓買了 8串彩色燈泡,每串25個,每個3元時,竟算不清該付多少元錢,而其他顧客都著急的在旁邊等著,可熊貓奶奶越急越算不清。這時,教師抓住時機:“你們都是樂于助人的孩子,利用自己的聰明腦瓜幫幫熊貓奶奶吧,看看小貓該付多少錢?”這樣,為學生創設了學習環境,充分調動了學生的積極性和主動性,教師再加以引導,就喚起了學生的求知欲望,把學生導入到新課程當中去,讓學生走進探索知識、掌握知識的殿堂里。

三、信息技術與教學相結合,可以巧妙設計練習,節約時間,鞏固知識

在學生學習新知識之后,還要趁熱打鐵、及時做一些練習,加以鞏固,從而使學生真正的掌握。以往書本上的練習,學生自己獨做,老師巡視,比較枯燥,且耗時長,不易發現問題;教師的主導作用,學生的主體作用不能最大程度的發揮。計算機容量大可以巧妙設計生動的習題,讓學生“樂做想做”。同時,還能準確及時地發現知識掌握的反饋信息。因此教師在設計教學環節中應廣泛借助多媒體是非常必要的。

例如:在教學小數的加減法時,學生容易犯小數點對不齊的錯誤。這時,我們利用多媒體自制課件時,就可以把錯誤的格式搬到熒屏上,讓學生去尋找發現,這樣做印象比較深刻,在自己的知識領域中形成正確的概念,從而提高了學生的觀察力,抓住了解決問題的關鍵,提高了學生解決問題的能力,達到了教學的目的。

四、信息技術與教學相結合,能培養學生的思維能力

學習是一個從感性認識到理性認識的過程。在學習過程中,知識一般都是前人在實踐中長期積累的經驗,它們已不再是感性的東西。在教學過程中,這種直接經驗和間接經驗、理論與實際之間的矛盾通過信息技術可以有效解決,多媒體在教學中可以把聲像圖文并茂地表示出來,且形象生動,使學生的求知欲得到滿足,同時獲得豐富的知識。

五、結束語

各種信息技術的出現對小學教育來說具有十分重要的現實意義,為小學教育的發展提供了全新的發展思路和發展空間,面對信息技術的快速發展,我們信息技術教師應該多學習、多鉆研,這樣才能在教學中更加得心應手,信息技術的教學一定會變得舉足輕重。

參考文獻:

免疫學的作用范文3

關鍵詞:工作室建設;教學改革;實踐教學

中圖分類號:J524-4 文獻標識碼:A 文章編號:1005-5312(2015)27-0189-02

據統計,目前為止全國800多所高校建立了藝術設計系,并建立了藝術設計各個專業方向的“工作室”,常見的有:服裝設計工作室、環境藝術工作室、裝飾藝術工作室、工業設計工作室、陶藝工作室等。這些工作室基本上都具有完善的硬件設施,能夠滿足各專業授課及實驗所需。但我們應該意識到的是――高校設計藝術教育的目的是培養具有“實踐能力的高級專門人才”。市場對設計人才提出的職業要求是“實踐能力”、“實戰經驗”,和“項目的參與能力和實際工作能力”。由此看,作為高校設計藝術畢業生的工作能力應該超過“授課展示及實驗”?!肮ぷ魇摇苯虒W應該是實現藝術設計各專業方向專業課與實踐教學有效結合,提升學生動手實踐能力的教學模式。工作室承擔著為學生提供實踐平臺,提升學生實踐能力的任務。工作室應該不僅僅具備硬件設施,還要具備有效的運行制度和模式。怎樣才能實現工作室對于學生實踐能力的培養和提升?――使工作室真正帶領學生進入市場運作。筆者通過走訪考察不同藝術設計工作室,提出關于高校服裝設計工作室有效培養和提升學生實踐能力的幾點思考。

一、工作室帶隊導師須具有設計項目實戰經驗

通過對許多高校內優秀設計工作室的考察,筆者發現,充滿活力的工作室都具有一個共同的特征――與市場結合密切,工作室經常參與一些設計項目。服裝設計專業由于自身的實踐學科特征,對于實際案例參與能力十分強調。因此,工作室帶隊教師須具有豐富的實際項目設計經驗,熟悉各類服裝設計開發的流程,并能夠積極參與到設計項目中。工作室帶隊老師應該能夠進行從效果圖繪制到面料、輔料選擇、色彩搭配、服裝板型、工藝制作、時裝攝影、時裝廣告、包裝設計、服裝展示等各個流程。當然,要求同一個人做到每一個設計環節都精到是有難度的,可以采用一個工作室由2-3人組成指導老師工作小組,這樣可以形成一個比較成熟完整的設計工作團隊,下面再與學生團隊銜接。由此形成以教師團隊為主,學生團隊為輔的工作室組織關系。工作室教師團隊只有具備了全面過硬的實戰素質才能根據設計項目以及學生的自身條件仔細評估并分配給學生不同設計任務,使學生在能力范圍內,以教師工作為向導,順利參與到設計項目中,在實際項目中將所學的零散知識融會貫通起來,從而訓練設計思維,提升設計實踐能力。而另一方面,工作室教師團隊也會在不同的設計項目中獲得鮮活的設計經驗,提升自己在業界中的影響力和活躍度。這些實戰經驗又會成為課堂教學的例證,引發學生學習專業的興趣和動力。同時,通過不斷地參與設計項目也會加大教師與市場緊密結合,便于高校教師把握最新的專業發展動向。教師參與設計項目有利于以設計理論指導設計實踐,以實際案例補充課堂教學,形成良性的教、學、研互動。

二、學生與工作室導師雙向選擇實現歸屬關系

學生通過2-3年的專業課學習,之后可以根據自身專業特點、興趣點以及市場對人才的需求,選擇進入不同的工作室。工作室教師則根據學生的選擇意向、專業素質、人員構成需要篩選學生,組建設計團隊。例如,服裝設計專業可以開設多個工作室:男裝設計工作室、女裝設計工作室、職業裝設計工作室、婚紗工作室、高級定制工作室、箱包工作室、首飾工作室、時尚攝影工作室、形象造型工作室等等,這些工作室各自有自己的業務側重點及不同的設計團隊。學生在進入大學四年級的學習后,可以向某個工作室提出加入申請(附帶自己的設計作),老師則根據同學們的申請及設計作 情況,篩選每年工作室的新鮮血液。通過雙向選擇,給教師和學生均等的機會尋找最舒適的合作關系。學生可以根據對老師及工作室認同程度,選擇自己理想的工作室,激發學生的學習熱情。老師也可以根據工作室及設計團隊人員構成選擇學生,方便對工作室人員構成和業務范圍做出適當調整,形成工作室良性發展。

另外,學生與工作室導師的雙向選擇還會對低年級的學生形成專業學習的凝聚力。學生會為以后進入自己理想中的工作室而在學習過程中更加努力,學習更有主動性。工作室則會因為其所參與的設計項目及工作表現,在學生群體、設計行業形成影響力,也會因為學生的選擇形成不同工作室之間的良性競爭關系。這種互動關系有利于工作室不斷完善業務能力,并向前發展。所以,學生與工作室雙向選擇對于學生和工作室成長都具有促進作用,有利于保持發揮工作室對于學生實踐能力 養以滿足社會對于設計人才專業素質需求的橋梁作用。

三、工作室應主動進入設計市場,實現課堂教學的經濟價值

“工作室”教學是實現藝術設計各專業方向專業課與實踐教學有效結合,提升學生動手實踐能力的教學模式。要真正實現工作室的作用,就必須使工作室真正投身到市場運作過程中。畢竟“紙上談兵終覺淺”,只有在實戰中學生的實踐能力、動手能力,團隊工作能力才能得到真實有效的鍛煉。工作室應該走出輔助課堂理論教學的現狀,真正進入設計市場的實戰環境,將課堂教學產生的設計方案帶入實際設計項目之中,幫助學生實現設計的經濟價值,提升學生的專業自信心。

從高校教育培養目的來看,學生“實踐能力”是設計藝術教育要解決的問題之一,而工作室則成為培養學生“實踐能力”的主要模塊。培養實踐能力,自然離不開真正的“實踐”,對于設計藝術來說,“實踐”是指作為設計師應該具有的實際案例參與和處理能力,而不僅僅是會制作一件作品。以服裝設計專業來說,能夠設計并制作一件服裝是遠遠達不到“實踐能力”這一要求的。對于一個服裝設計專業的畢業生來說“實踐能力”是指能夠勝任“服裝設計師”這一行業角色,這個角色需要具備:預測流行趨勢的能力、服裝號型制訂的能力、服裝造型與面料輔料配置的能力、成本預算及控制的能力、服裝陳列展覽策劃的能力、舉辦訂貨會的能力、與公司同事協同工作的能力、與銷售商溝通的能力、制訂服裝品牌企劃的能力等等,各種能夠令一個品牌生存及發展的能力。

由此看“工作室”在高校設計教育中承擔的角色絕不僅僅是同學們在課堂上的“實驗室”,它所起的作用應該是學生理論知識與市場生存所需要的“實踐經驗”相融合貫通的橋梁的作用。如何能夠實現這種橋梁作用?就是工作室有能力將學生的設計帶入實際設計案例,即為學生提供真正參與到市場運作中來的機會。讓學生的設計思維能夠在老師的帶領下進入市場銷售中,并能迅速得到市場的反饋。教師則在這個工程中進行具體狀況的指導和解決問題。換句話說,工作室能夠真正起到培養學生“實踐能力”的作用,就應該建立將在校學生和設計市場需求之間的鏈接關系。讓學生在校期間就可以跟隨工作室導師進行設計實戰,積累真正具有價值的設計經驗。

工作室積極進入設計市場的另外一個渠道就是,建立將學生在校期間的設計作 推向消費市場的傳播渠道。例如:學生設計的服裝經過選拔后,進入工作室正軌的服裝制作流程,成衣會與訂貨會或者網絡銷售的渠道推向目標消費市場。但是目前為止,在這個方面各高校的“工作室”缺乏作為。其實學生在校期間不乏優秀的設計作品,但是這些設計作品由于沒有渠道與消費者見面,最終只能是停留在了課堂上。在這方面,四川美術學院的做法非常值得參考:學校學生工作處每年會定期舉行幾場“文化藝術節”,這些藝術節為在校學生提供了場地,讓學生們將課堂上制作的小工藝進行自由買賣和交流。雖然規模有限,但是每次藝術節都會吸引很高的人氣,買主不僅有學生群體,還有很多是慕名而來的大眾消費者。能夠實現作 的經濟價值,也大大提高了學生的創作熱情??梢妼W生在課堂上的創作帶入消費市場,對于學生來說具有重要意義。作為主要提高"實踐能力"的高校工作室應該自覺擔當起這個責任。一種方式,可采用定期舉辦小型訂貨會的形式,借助教師在服裝行業的影響力,將學生在?;蛘咴诠ぷ魇覍W習期間的優秀設計作品呈現在買家面前,為學生提供進入市場的渠道。另一種方式,則可采用電商平臺,例如在淘寶上開工作室形象店、借助微信平臺進行微信營銷等等。一旦這些銷售渠道建立并運作起來,學生的設計能夠快速進入消費市場,并能夠在老師的指導下對市場反饋信息做出正確處理,那么對于學生的實踐能力提升必定會有較大的積極影響。

但不幸的是,目前國內高校設計工作室在積極投入設計市場和建立銷售推廣渠道方面都遠遠不夠。由于缺少這兩個方面,高校藝術教育所謂的“工作室”并沒有真正發揮對于培養學生作為設計師“實踐能力”的作用。

四、結語

就業形勢越來越嚴峻,一方面藝術類畢業生就業難,另一方面設計公司人才缺口大,兩者之間的矛盾就在于學生的“實踐能力”。面對這樣的形式,國家教育部提出了高校向培養“應用型人才”轉變,也就是說要提高高校畢業生的“實踐能力”。對于藝術設計來說,擔當起提高學生“實踐能力”的應該是各個專業的“工作室”。充分發揮工作室的作用就必須讓工作室進入設計市場,工作室帶隊教師帶領學生團隊參與實際設計項目,工作室真正承擔起學生作 走出象牙塔進入消費市場的引領者和筑路者。工作室肩負著鏈接課堂和市場的作用,只有這個充分發揮了這個作用,藝術設計專業畢業生的“實踐能力”才會得到比較全面而迅速的提升。

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免疫學的作用范文4

【摘要】 目的:探討補腎活血中藥對小鼠自身免疫性卵巢功能早衰(premature ovarian failure, POF)的防治作用。方法:以BALB/c雌性小鼠卵巢組織制備卵巢抗原,皮下和兩后腳掌多點注射免疫同種雌性小鼠建立卵巢早衰模型。分別在第1次免疫以及第3次免疫后給予補腎活血中藥,灌服中藥后分析陰道脫落細胞涂片,酶聯免疫法檢測外周血雌二醇(estradiol, E2)、卵泡刺激素(folliclestimulating hormone, FSH)以及黃體生成素(luteinizing hormone, LH)濃度。結果:POF小鼠卵巢間質可見淋巴細胞浸潤,外周血FSH和LH升高,E2下降明顯(P

【關鍵詞】 卵巢功能早衰; 中草藥制劑; 小鼠

Objective: To investigate the preventive effect of Bushen Huoxue Recipe (BSHXR), a compound traditional Chinese herbal medicine, on autoimmune premature ovarian failure (POF) in mice.

Methods: Ovarian antigen was prepared with the ovarian tissue of female BALB/c mice. A mouse model of POF was established by immunization injection of the ovarian antigen of isotype female mice on multiple subcutaneous sites and two posterior soles. The POF mice were treated with BSHXR after the first and third immunization. The levels of folliclestimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH) and estradiol (E2) in peripheral blood were detected by enzyme linked immunosorbent assay.

Results: Lymphocyte infiltration was appeared in ovarian stroma of POF mice. The levels of FSH and LH were evaluated and the E2 level was decreased significantly (P

Conclusion: BSHXR can recover ovarian function in POF mice mainly by regulating the indiscriminate hormone level, and BSHXR has preventive effect on autoimmune POF in mice.

Keywords: ovarian failure, premature; herbal preparations; mice

卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)是一類嚴重影響婦女生殖健康及身心健康的疾病?;颊哂?0歲前出現閉經,伴烘熱、汗出、煩躁等低雌激素癥狀,并常伴隨其他內分泌自身免疫疾患,故其治療比較困難。POF的發病率為1%~3%,占繼發性閉經的10%~20%[13]。由于病因不明,治療頗為棘手,尚無有效措施,尤其對于特發性或自身免疫性卵巢功能衰竭的患者而言,如何減緩卵巢功能衰退的速度以恢復卵巢功能,提高生活質量,是目前生殖內分泌臨床研究的一項重要課題。

本研究用BALB/c雌性小鼠卵巢組織制備卵巢抗原,皮下和兩后腳掌多點注射免疫同種雌性小鼠建立卵巢早衰模型。分別在第1次免疫以及第3次免疫后給予補腎活血中藥,檢測生殖內分泌及卵巢形態學改變,探討補腎活血方(Bushen Huoxue Recipe,BSHXR)防治POF的作用機制,為臨床運用中藥治療POF提供理論及實驗依據。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 SPF級BALB/c雌性小鼠200只,體質量15~20 g,由上海中醫藥大學實驗動物中心提供。動物合格證號為SYXK(滬)20042005。

1.1.2 藥物及試劑 補腎活血方由仙靈脾15 g、巴戟天15 g、覆盆子15 g、菟絲子15 g、蛇床子10 g、石楠葉10 g、枸杞子15 g、黨參15 g、黃芪20 g、當歸15 g、川芎10 g等組成,由上海中醫藥大學岳陽醫院制劑室采用醇提法制作成合劑(相當于含生藥2.5 g/ml)。卵泡刺激素(folliclestimulating hormone, FSH)、黃體生成素(luteinizing hormone, LH)及雌二醇(estradiol, E2)小鼠ELISA試劑盒為美國R&B公司生產。弗氏完全佐劑(complete Freund's adjuvant, CFA)和弗氏不完全佐劑(incomplete Freund's adjuvant, IFA)購自美國Sigma公司。

1.1.3 儀器 JY922Ⅱ型超聲波細胞粉碎機(寧波新藝科器研究所),Sigma Diagnosis酶標儀(美國Sigma公司生產)。

1.2 實驗方法

1.2.1 卵巢抗原制備 收集BALB/c雌性小鼠卵巢組織,稱質量、洗凈,于TrisHCl緩沖液中剪碎并研磨成勻漿,低溫下超聲粉碎5 min,低溫離心(4 000 r/ min,15 min;10 000 r/min,5 min),取上清液。調整濃度,使每0.1 ml含卵巢組織20 mg。

1.2.2 造模方法 參考文獻[4]制作POF模型,按每只小鼠10 mg(0.05 ml)卵巢抗原皮下多點注射免疫BALB/c雌性小鼠,建立POF模型。連續3次,每2周1次,第1次免疫加入等量CFA,第2、3次免疫加入等量IFA。

1.2.3 動物分組及給藥 小鼠常規喂養標準顆粒飼料,采用隨機數字表將80只小鼠分為正常組、模型組、預防組和治療組,每組20只。預防組于第1次免疫后開始給藥,共給藥7周。治療組于第3次免疫后開始給藥,共給藥3周。正常組及模型組均灌胃等量生理鹽水,每周休息1 d。藥物劑量按小鼠與人體表面積轉換系數計算后,每只小鼠每天灌胃0.5 ml。所有動物在造模后7周(動物處死時)取材,正常組也于此時取材。

1.2.4 陰道脫落細胞檢測 每天下午4時各組固定取3只小鼠陰道脫落細胞做涂片,置光學顯微鏡下觀察其動情周期變化。

1.2.5 血清FSH、LH及E2檢測 小鼠摘眼球采血,離心,取血清,按試劑盒說明書操作要求,采用酶聯免疫測定法測定FSH、LH和E2含量。

1.2.6 卵巢組織形態學觀察 稱取卵巢質量后,福爾馬林固定,梯度酒精脫水,石蠟包埋,切片,脫蠟,常規HE染色,置光學顯微鏡下觀察。

1.3 統計學方法 采用SPSS 10.0軟件進行統計學分析,計量資料均數用x±s表示,多組間比較采用單因素方差分析q檢驗,即NewmanKueuls法。

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2 結果

2.1 陰道脫落細胞涂片 小鼠性周期一般為4~5 d,包括動情前期、動情期、動情后期和動情間期。在第1次免疫后,除正常組外,各組小鼠周期均不規則,表現為動情期和動情間期延長。第3次免疫后,模型組小鼠表現為動情間期延長,漸至無動情周期,動情間期有白細胞,可見上皮細胞相混雜。中藥治療組表現為動情周期紊亂,動情間期明顯延長。預防組仍有動情周期性變化,但動情期角化細胞數減少,動情周期延長8~10 d。

2.2 卵巢形態學變化 光鏡下模型組見發育卵泡及成熟卵泡數明顯減少,顆粒細胞排列紊亂,卵巢間質可見淋巴細胞浸潤。中藥治療組發育卵泡數較之略多,而預防組可見到較多的生長卵泡及成熟卵泡。見圖1。

2.3 補腎活血方對POF小鼠FSH、LH和E2含量的影響 模型組小鼠E2含量明顯低于正常組,差異有統計學意義(P

圖1 卵巢組織形態學特征(光學顯微鏡,×40)(略)

Figure 1 Morphology characteristics of ovarian tissue (Light microscope, ×40)

A: Normal group; B: Untreated group; C: Prevention group; D: BSHXRtreated group.

表1 各組小鼠FSH、LH和E2含量(略)

Table 1 Levels of FSH, LH and E2 in mice in different groups

*P

3 討論

POF究其臨床癥狀與“月水先閉”、“經水早斷”等相類,歸屬于中醫閉經、早發絕經、經斷前后諸癥及不孕癥等范疇。中醫辨證屬于腎虧血瘀。故本研究采用補腎活血作為治療原則,仙靈脾、巴戟天、蛇床子取其溫補腎陽之效,覆盆子、菟絲子、枸杞子取其補腎填精之義,黨參、黃芪、川芎、當歸、石楠葉共奏健脾養血活血之功?,F代藥理研究表明,溫腎陽中藥有類雌激素樣作用,通過調節下丘腦垂體卵巢軸,促進卵泡、子宮發育,使子宮、卵巢重量增加。仙靈脾、巴戟天等均有促卵泡發育,提高雌激素水平,增加子宮內膜雌、孕激素受體含量等作用。而當歸、枸杞子、黨參含有多糖、多種氨基酸及人體必須的多種微量元素,可增強機體免疫力。菟絲子、覆盆子等補腎中藥能使不孕大鼠垂體降低過高的LH含量,提高垂體的反應性[57]。

本研究采用BALB/c雌性小鼠卵巢組織制備卵巢抗原,皮下和兩后腳掌多點注射免疫同種雌性小鼠建立POF模型。我們分別在建模過程中(第1次免疫后)灌服中藥,以及建模后(第3次免疫后)給予中藥,旨在觀察中藥對POF小鼠的預防及治療作用。我們發現中藥治療后,小鼠動情周期紊亂,動情間期明顯延長,預防組動情周期延長,動情期角化細胞數減少,但仍有動情周期性變化。卵巢形態學顯示預防組卵巢大體正常,可見到較多的生長卵泡及成熟卵泡,而中藥治療組卵巢稍有萎縮,卵巢間質可見淋巴細胞浸潤。從生殖內分泌激素來看,預防組血清E2含量增高(P

參考文獻

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免疫學的作用范文5

中圖分類號:R246.7 文獻標識碼:A

[摘要] 目的:探討穴位注射卡介菌多糖核酸(BCG―PSN)治療尖銳濕疣(CA)的臨床療效及免疫學機制。方法:將200例患者隨機分為4組,運用激光消除疣體后,治療組(A組)用BCG-PSN穴位注射;對照1組(B組)用BCC-PSN肌肉注射;對照2組(C組)用干擾素肌肉注射;空白對照組(D組)未行其他治療。治療前及治療6個月以后檢測患者細胞免疫功能,并記錄其復況。結果:A組治愈率為94.3%,B組為78.0%,C組為80.4%,D組為78.2%,A組與其他各組比較,治愈率均高于其他各組,差異有顯著性意義(P

[主題詞] 尖銳濕疣/穴位療法;水針;免疫性/針灸效應;卡介苗/投藥和劑量

尖銳濕疣(cA)是由人類瘤病毒(HPV)引起的一種性傳播性疾病(STD),以發生于生殖器、外陰及等處的贅生物為主要臨床表現,主要通過直接性接觸傳染。應用物理、藥物及手術等方法去除CA局部病變后,其復發率高達40%,首次治療后復發率高達60%以上,且CA與、宮頸等生殖器癌的發生密切相關。如何防止CA的復發,則是一個難以徹底解決的問題。筆者從事男科學臨床與科研多年來,運用穴位注射卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)治療CA,能顯著減少尖銳濕疣的復發率。對CA患者進行外周血T淋巴細胞亞群、自然殺傷(NK)細胞活性的檢測,了解CA患者細胞免疫功能的變化,探討細胞免疫對CA復發的影響,現報告如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料

200例CA患者均為2003年12月-2005年12月來本院男科、婦科、皮膚科就診的患者,初發病者136例,復發病者64例,按隨機數字表法分為4組。在男性患者中,皮損分布于單一部位者82例(各分布于包皮、冠狀溝、、尿道口、肛周等),皮損位于多個部位者54例;女性患者中,皮損分布于單一部位者38例(各分布于小、陰道口、、等),皮損位于多個部位者26例。經統計學分析,各組患者的年齡、病程、疣體分布比較,差異無顯著性意義(P>0.05),各組之間具有齊同可比性(見表1)。健康對照組40人,男30人,女10人;年齡18~60歲,平均35.1歲,均為體檢健康者。

1.2 診斷標準

根據衛生部疾病控制司、全國性病麻風病控制中心2000年制定的《最新頒布性病診療規范和性病治療推薦方案?尖銳濕疣診療規范(試行)》。

(1)接觸史:有非婚性接觸史、配偶感染史或間接感染史。

(2)臨床表現:①男性及女性在生殖器、會陰或周圍,偶見口腔、等處出現多個粉紅色、灰白色或灰褐色丘疹或狀、雞冠狀或菜花狀高起的贅生物,少數呈瘤樣增殖的巨大型尖銳濕疣,即Buschke-Loewenstein巨大型尖銳濕疣;②自覺有癢感、異物感、壓迫感或疼痛,常因皮損脆性增加而出血,女性可有白帶增多;③女性患尖銳濕疣應與假性濕疣(絨毛狀小)、男性應與珍珠樣丘疹相區別,還要與扁平濕疣、鮑溫樣丘疹病、生殖器汗管瘤等相鑒別;④用5%醋酸液涂抹皮損處,3~5分鐘后變白。

(3)實驗室檢查:①皮損活檢:有HPV感染的特征性凹空細胞的組織病理學變化特點;②必要時在皮損活檢中用抗原或核酸檢測顯示有HPV。常見的是HPV 6、11型,HPV 16、18型少見。

1.3 納入標準 具備診斷標準(1)、(2)及(3)中的任何一項指標可確診,在接受本研究方法期間停用其他療法。

1.4 排除標準 ①年齡在16歲以下或60歲以上者,妊娠及哺乳期婦女;②對治療方案有嚴重不良反應者,精神病患者,肝腎功能不全者,免疫功能有缺陷者;③治療前曾用過免疫調節劑者;④不符合診斷標準、未能嚴格執行治療方案、無法判斷療效或資料不全等影響療效或安全性判斷者。

1.5 中止剔除臨床試驗標準 ①療程未結束而出現過敏反應或嚴重不良反應者,根據醫生判斷應停止者,即中止該病例臨床試驗,但已超過1/2療程者應統計療效;②試驗期間有不潔史者。

1.6 試驗藥品

BCG-PSN(長沙九芝堂藥業集團生產,規格:0.5mg/支),干擾素a-2b(上海華新藥業生產,規格:100萬IU/支)。

1.7 儀器與試劑

檢測外周血T淋巴細胞亞群、NK細胞,采用美國BD公司FACSCalibur型流式細胞儀,試劑采用美國BD pharmingen公司試劑,由本院中心實驗室專業人員嚴格按照說明書進行檢測。

2 治療方法

所有患者治療前均作外周血T淋巴細胞亞群、NK細胞檢測。先用激光治療皮損,局部1‰新潔爾滅常規消毒,再以1%利多卡因局部浸潤麻醉,將激光頭對準疣體,垂直于病損部位掃描,使其氣化,巨大疣體則使用切割法。傷口以1/4000呋喃西林溶液濕敷,防止感染。待上述方法消除疣體后,再分組治療。各組治療結束3個月后統計療效。治療后3~6個月復發者繼續激光治療。

2.1 A組

取穴:①曲池、三陰交;②陽陵泉、太沖。任選一側穴位,兩組穴位交替使用。操作:穴位常規消毒,用5號針頭5mL注射器抽取BCG-PSN注射液2mL,針頭對穴位捻轉提插,得氣后每穴注入藥物1mL,每周2次,連用12周。

2.2 B組

取BCG-PSN注射液肌肉注射,每次2mL,每周2次,連用12周。

2.3 C組

取干擾素100萬IU,以2mL生理鹽水稀釋后肌肉注射,每周2次,連用12周。

2.4 D組

激光治療后不作其他處理。

3 療效觀察

3.1 療效標準

依據國家中醫藥管理局1994年頒布的《中醫病證診斷療效標準》。痊愈:皮損消失,疣體脫落,半年以上無復發;顯效:疣體縮小≥50%,無新生疣體;有效:疣體縮小

3.2 免疫學及復況觀察指標

(1)所有患者治療前及6個月以后檢測外周血T淋巴細胞亞群(CD、CD、CD、CD/CD)、NK細胞水平。

(2)復況:復發標準判斷以激光去除疣體后,隨訪期間在原處或鄰近部位出現新疣體為復發,

未出現新疣體為無復發。于3個月內、3個月后至6個月內、6個月后分別隨訪,觀察并記錄復況。

3.3 統計學分析

數據庫的錄入及統計分析均在SPSS 12.0軟件包上進行。其中等級計數資料、計數資料、計量資料分別采用Ridit分析檢驗、£檢驗進行統計學分析。

3.4 治療結果

(1)各組CA患者療效比較。

所有病例于試驗及隨訪期間均沒有脫落。A組與其他各組比較,治愈率均高于其他各組,差異有顯著性意義(P

(2)治療后各組CA患者復況。

治療期間3個月內,A組與B、C、D組比較,差異無顯著性意義,隨訪3個月到6個月期問及6個月以上各組的復發率出現明顯變化,A組與B、C、D組相比,差異有顯著性意義(P

(3)治療前CA患者外周血T淋巴細胞亞群、NK細胞活性的檢測。

治療前CA患者分別與健康人對照組相比,CD}T淋巴細胞的百分率差異無統計學意義,T淋巴細胞的百分率降低,而CD聲T淋巴細胞的百分率升高,CD/CD產比值降低,NK細胞活性降低,差異有顯著性或非常顯著性意義(P

(4)治療前后各組CA患者外周血T淋巴細胞亞群、NK細胞活性的檢測。

A組治療前后對比,患者接受治療后,CDT淋巴細胞的百分率差異無統計學意義,CDT淋巴細胞的百分率升高,而CDT淋巴細胞的百分率降低,CD/CD比值升高,NK細胞活性升高,差異均有非常顯著性意義(均P

(5)A組6個月后復發與未復發CA患者外周血T淋巴細胞亞群、NK細胞活性的檢測。

經治療后,未復發CA患者外周血T淋巴細胞亞群、NK細胞活性明顯改善,與復發者比較差異有顯著性或非常顯著性意義(P

4 討論

CA是一種病毒感染性疾病,采用適當的外治法均可較快消除局部病變,但復發率很高。自20世紀80年代以來,外治法仍是最主要的方法,可見目前臨床上存在重視近期療效、忽視遠期療效的弊端。

4.1 中醫對尖銳濕疣的認識

尖銳濕疣,祖國醫學稱之為“臊瘊”“枯筋箭”“疣目”等。對于本病的病因病機,《靈樞?經脈》謂之“虛則生疣”;《諸病源候論?疣目篇》謂之“此乃風邪搏于肌肉而變生也”;《薛氏醫案》謂之“疣屬肝膽少陽經,風熱血燥,或怒動肝火,或肝客氣所致”。中醫學認為本病主要由于機體正氣不足,肝腎虧損,氣血失和,衛外不足,穢濁毒邪凝結于肌膚,循經內注,聚久化熱釀毒,致氣滯血瘀下注陰器而發。而濕毒內結、瘀阻脈絡、穢濁纏綿為其主要病機特點。由于濕毒為陰邪,其性黏滯,纏綿難去,容易耗傷正氣,正虛邪戀以致易復發,故難以根治。

4.2 CA反復發作與免疫調節關系的探討

現代免疫學認為,在正常機體內各T淋巴細胞亞群相互作用并維持一定的平衡,以確保免疫功能的正常,CD淋巴細胞與CD淋巴細胞的比值是衡量細胞免疫功能的一個很重要的指標。因為CD/CD下降導致外周血T淋巴細胞對抗原刺激的增生能力降低,引起細胞免疫狀態失調。通過檢測正常人和CA患者外周血T淋巴細胞亞群,發現初發CA和復發CA患者外周血CDT淋巴細胞的百分率和CD/CD比值降低,而CDT淋巴細胞的百分率升高,且復發性CA患者表現更明顯。人體內NK細胞具有識別正常和異常組織細胞的能力,在體內具有重要的免疫監視功能,NK細胞活性下降可導致體內清除瘤細胞和清除病毒等免疫復合物的能力下降。對尖銳濕疣患者外周血NK細胞的研究結果呈一致性下降,如NK細胞活性下降越明顯,則尖銳濕疣損害越多。CA患者的NK細胞活性降低,特別是復發CA患者和治療后仍復發者(病程>6個月)活性明顯降低。說明CA的發病與細胞免疫密切相關,CA患者存在細胞免疫異常,且復發CA患者尤其明顯。BCG-PSN穴位注射療法和BCG-PSN肌肉注射、干擾素肌肉注射對CD、CD、CD/CD比值與NK細胞均有明顯的調節作用(P

4.3 BCG-PSN穴位注射治療CA的穴位組方分析與作用機理

免疫學的作用范文6

[關鍵詞] 羥基喜樹堿;空泡化;免疫細胞化學法;金屬蛋白酶組織抑制劑—3

[中圖分類號] R392—33 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674—4721(2012)09(a)—0007—02

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一,據資料統計,發病率占全身各種惡性腫瘤的7%~10%。它的發病常與遺傳有關,以及40~60歲、絕經期前后的婦女發病率較高。迄今為止,乳腺癌的病因及其惡性進展的具體機制尚未完全闡明,隨著分子生物學的快速發展,從基因角度尋找乳腺癌治療中的潛在新靶點對改善患者病情具有非常重要的意義。

羥基喜樹堿(hydroxycamptothecin,HCPT)是所有天然喜樹堿同類物或合成喜樹堿中活性最大的天然衍生物,是一種純天然的抗癌藥物[1],其可通過激活NF—κB誘導人促進乳腺癌Bcap—37細胞凋亡[2],亦可依賴Caspase3途徑促進細胞凋亡[3]。Liu W等[4]發現HCPT可促進p21WAF1/CIP1表達上調,并通過p53依賴/非依賴途徑誘導人乳腺癌MCF—7細胞凋亡,達到殺傷癌細胞的目的。TIMP—3則作為MMP的抑制劑之一[5],故其TIMP—3表達上調有利于抑制腫瘤細胞增殖并促進其凋亡[6]。然而,迄今有關羥基喜樹堿與人乳癌細胞的作用機制尚不明確,有待進一步的研究和探討。本實驗運用免疫細胞化學法檢測羥基喜樹堿對乳腺癌乳腺癌MCF—7細胞的影響,探討羥基喜樹堿在乳腺癌治療中的潛在新靶點,以期為臨床治療乳腺癌提供新思路。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

人乳腺癌細胞株MCF—7,購自重慶醫科大學生命科學研究院。HCPT注射液購自吉林省長春天誠藥業有限公司,胎牛血清購自杭州四季青公司,RPMI—1640培養基、胰蛋白酶、Hepes、二甲基亞砜(DMSO)均購于Gibco公司。Transwell小室購自CORNING公司,Matrigel膠購于BD Biosciences公司,引物由上海生工有限公司合成。

1.2 方法

1.2.1 細胞的藥物處理 人乳腺癌細胞株MCF—7由重慶醫科大學生命科學研究院提供。MCF—7細胞常規培養于RPMI—1640培養基(含10%新生胎牛血清,20 mmol/L Hepes,2.0 g/L碳酸氫鈉,100 U/mL青霉素和 100 U/mL鏈霉素),置37℃、5%CO2細胞培養箱中培養,2~3 d傳代1次。PBS空白對照組加入20 μL PBS緩沖液,HCPT誘導組施加TCPT,使其終濃度分別為10、40、80 mg/L細胞培養液,顯微鏡下顯色為陰性者陰性對照組。

1.2.2 細胞組化檢測TIMP—3在細胞中的表達 取MCF—7細胞經消化離心后以5×107個/L的密度接種于預置蓋玻片的6孔板中,待細胞貼壁、基本長滿蓋玻片后,更換無血清培養基饑餓24 h,24 h后分別向各孔中施加TCPT,使其終濃度分別為10、40、80 mg/L,24 h后吸出細胞培養液,取出細胞爬片,0.01 mol/L PBS沖洗3次,每次3 min,用4 g/L多聚甲醛固定,每一濃度組制備16張標本。對細胞爬片進行TIMP—3免疫組化SP法染色,染色結果在顯微鏡下觀察并攝影。

1.3 數據統計

采用SAS 8.2統計軟件對數據進行分析處理,mRNA相對表達量以均數±標準差表示,組間均數比較采用t檢驗,以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

免疫細胞組化結果顯示,TIMP—3在MCF—7細胞內均有表達,僅從表觀上看,HCPT對其誘導表達作用差異不明顯,但HCPT處理組細胞呈現明顯的空泡化,見圖1。

3 討論

近年來有研究表明,HCPT及其衍生物可通過作用于DNA拓撲異構酶Ⅰ來抑制DNA復制、轉錄和有絲分裂,達到抗腫瘤作用。HCPT衍生物7—乙基羥基喜樹堿可以募集S期細胞,促進吉西他濱(抗腫瘤藥物)代謝物的聚集,減少關卡蛋白激酶1的合成,即7—乙基羥基喜樹堿有助于腫瘤細胞敏化,促進其他化療藥物的效應[7]。HCPT的抑癌機制的研究深入將有助于進一步對其進行結構改造和臨床應用。以往的研究發現,HCPT對乳腺癌細胞株MCF—7細胞的增殖起抑制作用。基因表達譜研究發現,HCPT誘導后,共獲得了差異表達信號轉導相關基因55個,涉及6個信號通路[8]。

本實驗利用免疫細胞化學法檢測了羥基喜樹堿(HCPT)對乳腺癌MCF—7細胞的空泡化作用。HCPT對TIMP—3誘導表達作用差異不明顯,但HCPT處理組細胞呈現明顯的空泡化,因此,HCPT可誘導乳腺癌MCF—7細胞空泡化作用,希望本研究對尋找羥基喜樹堿在乳腺癌治療中的潛在新靶點有所幫助,并為臨床治療乳腺癌提供新思路。

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