關于荷花詩句范例6篇

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關于荷花詩句

關于荷花詩句范文1

畢竟西湖六月中,風光不與四時同。接天蓮葉無窮碧,映日荷花別樣紅。

2、白蓮

素蘤多蒙別艷欺,此花端合在瑤池。無情有恨何人覺?月曉風清欲墮時。

3、荷花知

荷葉五寸荷花嬌,貼波不礙畫船搖;相到薰風四五月,也能遮卻美人腰。

4、蓮花

關于荷花詩句范文2

【關鍵詞】供電企業;組織績效;優化完善

1.引言

廣東電網公司下屬地市供電局自2009年全面推廣實施績效管理以來,經過近幾年的創先實踐,不斷改進,組織績效考核已發展成為推動創先工作持續深入開展,促進提升企業經營管理水平的重要管理工具,發揮了良好的激勵和導向作用。

2.存在問題

地市供電局組織績效管理工作雖然取得了一定成效,但也存在一些需要解決的問題,現梳理總結如下:

2.1地市供電局組織績效的考核項目還沒能全面有效承接網省公司中長期發展戰略和深化創先工作的部署,組織績效考核模式和項目設置尚待優化完善,確保組織績效考核手段作為實現年度創先目標的重要保障。

2.2組織績效考核對地市供電局經營效益考核力度尚待加強,隨著國資委對國有企業推行EVA指標考核,地市供電局需進一步提升價值創造能力,強化利潤經營指標考核,引導企業更加注重要注重投資效益,優化資源配置,確保國有資產保值增值。

2.3地市供電局組織績效考核對推動下屬分子公司協調發展的作用尚待增強。地市供電局下屬分子公司發展極不平衡,分公司與子公司管理水平差距很大,子公司電受網網架不牢固、電網設備殘舊、人員綜合素質較低、管理基礎薄弱等因素影響,需分公司對子公司發揮“傳、幫、帶”作用,推動全局管理水平整體提升。

2.4地市供電局組織績效合約指標和任務類考核項目尚有較大改進空間。指標類績效指標對主體責任部門進行了有效考核,但對關聯支持單位考核力度不夠;指標考核比較重視量化結果缺乏過程考核,任務類考核項目評分標準比較模糊、不夠明確,需進一步采取量化指標評價任務完成情況。

2.5地市供電局各級單位組織績效等級評定的合理性和公平性尚待提高。地市供電局各級單位(部門)專業特性和業務內容差異較大,以本部和分子公司兩級單位考核得分分列排序,擇優評選20%的績效A級單位的做法需進一步調整。同時組織績效考核在推動各部門打破部門壁壘,促進各級單位形成縱向貫通、橫向協同的內部運營機制方面尚待發揮積極作用。

2.6地市供電局組織績效扣減類項目尚待完善??梢詮牧臉I、法律風險、營銷紀律、農網改造、保密維穩、人資管理等方面引入更多扣減項目,強化企業經營生產紀律,營造安全生產、規范經營、廉潔從業的工作氛圍。

3.優化措施

為充分發揮組織績效的導向和激勵作用,進一步優化完善組織績效的考核模式,確保績效考核作為推進戰略落地的閉環手段,現建議對地市供電局組織績效管理和考核工作做如下幾方面改進:

3.1全面承接發展戰略和深化創先工作部署

地市供電局組織績效考核方案以網省公司中長期發展戰略為統領,貫徹落實“三個發展”工作要求,要以組織績效合約作為深入推進全局各項重點領域專項創先工作,全面承接省公司下達地市供電局年度績效合約考核內容,引導和激勵各級單位團結一致、積極進取,圓滿完成全年各項工作任務,努力實現年度績效考核目標。

3.2持續提升價值創造能力,更加注重經營效益考核

地市供電局績效考核工作需進一步落實“分公司體制、子公司考核”的模式,建立以模擬經濟增加值(S-EVA)為核心,模擬內部利潤總額(S-內部利潤總額)、可控供電成本節約率、萬元固定資產售電量為補充的經營業績考核指標體系。引導各級單位注重資產使用效益,提高資產管理水平;同時增加平均售電單價作為利潤的支撐指標,積極引導各單位調整售電結構,增加售電收入。

3.3引入“捆綁式”聯動機制,推動分子公司協調發展

建立分公司和子公司分組幫扶聯動機制,組建若干個結對幫扶小組,設置第三方客戶滿意度、用戶平均停電時間、綜合電壓合格率、當年電費回收率、線損率、單位供電成本六項聯動指標,實行分子公司“捆綁式”加分獎勵,指標得分采用目標法,根據下達給分子公司的基本值和滿分值進行評分,達到基本值得60分,達到或超過滿分值得100分,介于基本值和滿分值之間線性評分,到達先進值得105分或115分。幫扶小組得分=∑幫扶小組內分子公司該項指標得分×指標權重/該小組分子公司個數。年度考核時,排名第一幫扶小組內的分子公司可酌情予以加分,加分上限不超過1分。采取“捆綁式”聯動機制以推動分公司加大對子公司的幫扶支持力度,補齊子公司科學發展短板,加快子公司接軌分公司管理水平的步伐。

3.4優化績效指標和績效任務考核項目設置

地市供電局組織績效考核不僅落實關鍵指標主體單位管理責任,還促進關聯單位做好支持服務工作,進一步強化職能部門承接關鍵指標的管理責任,同時梳理關鍵指標的驅動因素和關聯關系,形成支撐指標和分工任務,層層分解落實到相關單位,按照關聯強弱程度設置不同考核權重,促使相關單位齊抓共管,形成合力,共同提升績效指標。指標類評分規則多樣化,加強考核導向激勵作用。在績效指標評分規則方面,根據不同管控要求,分別采用目標法、綜合貢獻度法、靶心法等評分方式,既注重指標完成情況,又能體現指標提升幅度和提升難度,對達到先進值的指標進行加分,增強發揮績效考核導向和激勵作用。專項任務指標數量化考核,關鍵指標任務具體化考核,進一步融合指標類和任務類考核方式的優點,一是將考核指標落實到指標成長過程的關鍵節點任務,加強指標成長過程管控;二是將考核指標分解為支撐指標進行考核,提高指標考核的精細化水平;三是將專項任務提煉設計出考核指標,用量化標準評價工作任務完成情況,通過指標考核驅動業務發展,通過業務發展提高指標水平。

3.5增強績效考核的導向作用,完善多維度測評機制

地市供電局績效考核方案根據各職能部門專業特性和業務差異,結合指標類和任務類權重設置情況,應對職能部門分組開展績效考核工作,旨在提高以往指標權重較低部門績效評級爭A的積極性,進一步提高績效考核的公平性和合理性,形成良好的競爭態勢,實現協調發展。同時建立多維度測評機制,推動企業一體化運作。引入多維度測評機制,發揮各級單位相互協調作用,一是在地市局層面考核職能部門落實上級單位和地市局各項重點工作完成情況;二是在職能部門層面加強協作,提高工作效率,打破部門壁壘,實現橫向協同;三是在基層單位層面促進職能部門落實對專業管理和指導責任,實現縱向貫通。

3.6強化扣減類項目考核力度,為企業科學發展保駕護航

地市供電局組織績效考核繼續增強安全生產與財經紀律考核,例如對“安全管理”扣減類別設定標準為“發生較大及以上人身事故、電力安全事故、設備事故,一次扣40分”,提高扣減分數。增加廉政從業、法律風險、營銷紀律、農網改造、保密維穩、人資管理等方面扣減項目,例如對“農網改造項目”扣減類別設定標準為“對于未能完成“應改未改”項目進行扣分,扣分值=(下達的“應改未改”計劃當年投產項目數-當年實際完成項目數)/下達的“應改未改”計劃當年投產項目數”。采取增設扣減項目手段進一步增強警示作用,杜絕違法、違規行為發生,為地市供電局科學發展創造良好氛圍。

4.結束語

地市供電局需堅持持續改進、優化完善的原則,繼續組織做好直屬各單位組織績效管理和考核工作,會同人力資源部等相關部門加強組織績效考核結果應用,研究建立組織績效獎勵機制,充分發揮考核導向作用和激勵作用,為有效推動中長期發展戰略落地,加快地市供電局科學發展提供有力保障。

參考文獻:

[1]付亞和 許玉林. 績效管理(第二版). 復旦大學出版社, 2008-4-1

關于荷花詩句范文3

2015年6月14日,第18屆上海國際電影節期間,國內娛樂巨頭華誼舉辦了一場華誼ELLE之夜。成龍、張震、宋承憲、楊冪等娛樂大咖悉數到場助陣,展示了這家娛樂巨頭在娛樂行業中深厚的人脈。

而對電競愛好者來說,他們更為關注另外一件事:EDG也來了!

剛剛獲得MSI世界冠軍的EDG衣冠楚楚,煥然一新。不過在這種鎂光燈聚焦、娛樂大咖云集的場合,即便是經歷過S總決賽大場面洗禮的廠長(Clearlove,原名明凱)也難以鎮定。在主持人詢問登上舞臺是什么感受時,他靦腆地笑道:“有點緊張……”

隨著EDG的到來,這次華誼ELLE之夜特意安排了一個電競環節。EDG的Meiko坐上了解說席,而其余四人分成紅藍兩隊,帶著娛樂明星進行友誼賽。與廠長、deft、pawn他們搭檔的有當時正在參加《跑男》的包貝爾,中國達人秀冠軍劉偉以及東方衛視主持人朱楨等娛樂人。

而在臺下,另外一位早就聞名遐邇的LOL娛樂大咖陳赫正在觀看他們的比賽。

這是一場歡樂的比賽,廠長說:“我的心情就是開心,不用關心勝負?!倍罱K他被強制使用錘石打野,然后打出1殺8死的毀滅性數據,慘敗給對方。

賽后,華誼兄弟副董事長兼總經理王中磊為勝利的一方頒發了獎品。

這是一份難得的禮遇,正如主持人朱楨所說:“在娛樂行業,他們可能永遠沒有機會獲得王中磊先生的頒獎,所以說今晚獲得的這份獎勵將成為他們的一份難得回憶?!?/p>

這是一次電競與娛樂行業頂尖人物的親密接觸。盡管從頭到尾,這次活動都充滿了歡樂祥和的氣氛,但某些細節仍然顯示出雙方的陌生。由于大多數到場的娛樂人并不知道何為電競,主持人朱楨不得不用類比的方式告訴大家EDG在中國電競行業的分量:“在電競行業的地位,EDG就相當于華誼在中國電影行業的地位。他們拿到了世界冠軍,就像是足球隊拿到了世界杯……”

EDG與華誼的牽手,要追溯到2015年3月19日。當時在“尚荒新文化盛典”活動現場中,華誼兄弟時尚與EDG正式建立合作關系。

實際上自2014年以來,電競俱樂部的觸角就開始向娛樂領域不斷延伸。

2014年,曾在S4中零封韓國隊、上演50血基地翻盤的OMG戰隊了一首單曲《星球之光》,由隊員演唱,也是OMG隊歌。這一隊歌讓OMG一度被網友們譽為“EXOMG”。2015年OMG還全隊參與了電影《前任攻略2》的拍攝。

2016年1月9日,EDG也與強視傳媒合作,推出電子競技題材青春偶像劇。這部電影以EDG隊員的故事為藍本,由影視人員擔綱表演。

隨著電競俱樂部娛樂化的加速,一個問題開始困擾俱樂部:如何在娛樂化的過程中,保證隊伍的競技性?競技和娛樂化,到底哪一個才是根本?

娛樂化是錦上添花,競技才是根本

EDG新任俱樂部經理阿布說:“無論怎么娛樂化,成績和冠軍才是它競爭力的核心。”在他看來,EDG之所以能得到華誼的青睞參加華誼ELLE之夜,并不是因為隊員長的帥、老板多有錢,而是因為這支有足夠影響力的隊伍在足夠有影響力的賽場上取得了足夠驕人的成績。

EDG俱樂部2013年9月在廣州成立,主要項目是LOL,后來也涉獵了風暴英雄和爐石傳說等項目。在中國電競產業中,EDG屬于后起之秀,他們比不上WE、EHOME那么輝煌的歷史,也沒有LGD那樣長久的底蘊。之所以能在短短一兩年內名聲大噪,完全是靠成績拼殺出來的。

為了組建一支高水平隊伍,他們引入了國內外多位具有高水平的電競明星。包括前WE主力廠長clearlove,以及來自世界冠軍三星戰隊的韓國人deft和小pawn。兵強馬壯的他們連續獲得2014年LPL春季賽和夏季賽雙料冠軍,2015年又獲得MSI季中賽世界冠軍,成長為國內首屈一指的LOL俱樂部。

獲得MSI世界冠軍后,EDG將名氣擴散到了與電競一墻之隔的娛樂行業。這也讓他們踏上了華誼ELLE這個娛樂夢工場。

3月19日的會上,雙方都談到過合作目標。華誼時尚董事長趙磊表示:“華誼時尚要探索全新路線,將時尚注入電子競技,衍生出時尚產品,并成為影響未來年輕人的主流文化?!倍敃r的俱樂部經理三少則表示:“希望可以將EDG提升一個新高度,在接下來的國際大賽中讓世人眼前一亮!”

然而,或許是因為娛樂動作影響了訓練時間,在接下來的LPL夏季賽季后賽中,他們0比3慘敗給LGD未能奪冠,失去直接晉級S5的資格。盡管最后通過選拔賽搭上了S5末班車,但在S5上他們止步于八強,未能再現MSI的輝煌。

由于成績下滑,這一時期的EDG受到了極大壓力。阿布表示:“2015年下半年,EDG的商業、娛樂、公益活動參加的比較多,確實給選手訓練造成了困擾?!碑敃r廠長也曾在EDG的app上談到過這個問題。

不過在阿布看來,保證訓練并不等于完全杜絕參加娛樂活動:“最重要的是合理安排時間。選手也是人,枯燥的訓練會降低他們的訓練效率,也影響心態,他們需要休整。悶頭死練很難出成績,勞逸結合才是王道。參加娛樂活動換換腦筋,對調節選手心態有好處?!?/p>

從2015年底開始,EDG根據娛樂活動的性質做出了調整。

“娛樂行業的活動數量多,但如果提高效率,每一次活動占據的時間并不長。我們之前處理這方面的事情沒有經驗,后來注意了時間的合理安排,把活動都放到休賽期集中進行。這樣就避免了類似問題?!卑⒉颊f道。

2016年春季賽,在pawn帶著腰傷上陣的情況下,他們仍然獲得亞軍。目前正在進行的夏季賽,他們也是5連勝高居A組第一,仍然是中國LOL最頂尖的幾支戰隊之一。

說起娛樂化對競技的影響,OMG也許能作為一個前車之鑒。2014年獲得成績后,他們進行了一連串的娛樂化動作,包括拍宣傳片、拍電影、拍MV等。最終由于長期參加娛樂活動,嚴重影響競技狀態,隊伍成績一落千丈,沒能參加S5總決賽。最后俱樂部費勁心理包裝的五人天團,有四人選擇退役。直到2016年,OMG仍在LPL保級的路上苦苦掙扎。今年的夏季賽中,5輪過去仍然一分未拿。

遠遠稱不上成熟的娛樂化

由于競技和成績的限制,電子競技俱樂部的娛樂化空間實際上相當有限,相關的模式也還遠遠談不上成熟。

目前俱樂部的娛樂化,有以下兩種模式。

第一種是向娛樂行業學習,用娛樂模式包裝隊員,發掘和提升本戰隊的商業價值。第二種則是與娛樂行業的人或機構合作,做出非電競的文化產品。

第一種模式非常簡單,也非常普遍。

早年的電競選手大多是不修邊幅的,而從2013年以來,越來越多的電競俱樂部意識到了選手形象的重要性。如今的LOL戰隊選手出席正規場合,永遠是西裝革履、溫文爾雅、風度翩翩。LPL賽場上,甚至對文明用語都做出了規定。這些方面娛樂行業已經有幾十年的成熟經驗,是電競俱樂部取經的最好對象。

2015年與華誼達成合作后,EDG隊員的宣傳照和個人形象開始由華誼幫忙設計。

“他們非常專業。從造型、攝影、包裝、設計到后期的宣傳推廣,他們都有專門的團隊負責,而且非常專業。這一點很值得我們學習?!卑⒉颊f道。

這種模式增加了俱樂部的人氣,以此為基礎,增加戰隊的出場身價。通過娛樂的手法去積聚電競粉絲,然后再用娛樂行業的模式去變現,比如拍攝廣告、參加表演賽、參加公益活動等。在傳統體育如足球、籃球等領域,C羅、科比等人早就這么干了。

為了配合這種娛樂化,EDG甚至開發了一個專屬APP。該APP是一個類似于微博微信的平臺,玩家可以在上面與EDG隊員隨時互動。值得一提的是,EDG隊員很少在新浪微博上發聲,大多數時候都通過APP向粉絲展示最新狀態。

阿布表示,APP相當于一個過濾器,把熱愛EDG的粉絲全都聚集到了一起。和微博相比,這個APP上的粉絲更為理智,其消費熱情也更高。微博用戶可能是任何一家俱樂部的粉絲,但EDG APP上幾乎全是EDG粉絲。這讓EDG在APP后續的商務開發中擁有無可比擬的用戶精準性。據悉EDG的APP目前有100多萬用戶,其變現潛力值得關注。

第二種模式則近兩年才開始有俱樂部嘗試,方式則各不相同。

2016年,EDG與強視傳媒合拍青春偶像劇。和當年的OMG全員出鏡不同,為了不影響隊員狀態,EDG隊員并沒有出演電視劇。

“電視劇制作公司會來EDG基地采風,許多鏡頭拍攝都是以基地為背景的。他們還會對我們的隊員進行采訪考察,并以隊員們的故事為藍本創作劇本。通過EDG選手的故事,來反應我們的隊員健康、競技、積極向上的精神特質?!卑⒉歼@樣闡述這部青春偶像劇中的EDG元素。

2016年3月,騰訊影業宣布旗下電影《電競狂潮》正在拍攝中,參演人包括了Sky、Moon和目前的OMG戰隊。這是一部紀錄片性質的電影,選手們只需要本色演出即可。而電影題材也是相當小眾的純電競,可復制性不高。當然它也算是一種寶貴嘗試,可以檢驗電競電影的號召力。電影將于9月公映,如果取得票房成功,相信會有更多投資人愿意與電競俱樂部聯合拍片。

不過考慮到OMG戰隊目前糟糕的戰績,又有多少頂尖戰隊愿意冒成績下滑的危險,讓旗下隊員參與電影拍攝呢?

正因為有“競技”的根子,注定了電競俱樂部無法進行徹底的娛樂化。

電競職業發展到現在,競爭已經相當殘酷。日復一日的訓練才能保持狀態,要不然隨時有可能被打下神壇。

在娛樂化方面花費多少時間和精力?電競戰隊面臨艱難的取舍。

另外阿布也坦承,電競選手畢竟不是娛樂藝人,并沒有受過相關專業訓練。讓他們自己來進行娛樂化創作,產出電影、歌曲、才藝等產品,這種可能性不大。拍電影需要外形條件好,還需要演技出眾;出唱片需要聲音好,會唱會跳??紤]到絕大部分電競選手性格內向、學歷不高,他們這方面的技能儲備明顯是不夠的。

無論是參與拍攝還是提供隊伍知識產權,都能直接帶來收入,但對具體的方式,目前各大俱樂部也都在嘗試和摸索中。

“目前在EDG戰隊內,也沒有哪位隊員特別適合娛樂行業。他們把一切精力都奉獻給了電競,其他方面的特長沒有得到鍛煉?,F在可以想見的方向是參加綜藝節目,比如脫口秀或真人秀之類?,F在NiceTV和戰旗TV都在進行真人秀方面的嘗試,未來俱樂部可以從這方面進行娛樂化?!闭f完,阿布又補充道,“在可預見的未來,電競俱樂部在娛樂化方向上的營收,最多只能占據到俱樂部的50%,我們還需要更多探索?!?/p>

總得來說,第一種模式容易進行,對戰隊成績的影響在可控范圍內。但其不具備直接變現能力,見效較慢。而第二種模式能很快得到娛樂化產品,可以直接變現,其弱點則是電競選手很難成為好的娛樂產品創作者。而且俱樂部很難在時間和精力上取得平衡,一旦在娛樂化上投入的精力過多,影響了戰隊成績,戰隊的商業價值就會迅速降低。

關于荷花詩句范文4

開展宣傳教育,與婚育新風進萬家活動相結合

一是制作、發放宣傳品到戶,使廣大計生家庭了解關愛女孩的具體措施。二是實施新型生育文化建設工程,規劃建設伏羲婚育文化公園。我們將新樂伏羲文化與現代婚育文化有機融合,以家庭為切入點,依托新型家庭人口文化,投資20余萬元,規劃建設了伏羲婚育文化公園。以群眾喜聞樂見的形式宣傳當前的人口計生政策、優生優育、生殖保健知識。三是精心策劃開展各種宣傳活動。舉辦“關愛女孩成長、爭創文明家庭”經驗交流會:開展“關愛女孩行動”進校園;開展“婚育文明村、婚育文明家庭”等各具特色的宣傳活動。四是組織開展了一系列影響廣泛、效果良好的宣傳活動,在全市營造了“生男生女一樣好、女兒也是傳后人”的科學文明的生育觀念氛圍,有效遏制了重男輕女的不良傳統習俗。

落實優先優惠政策,抓好獎勵扶助,與利益導向機制相結合

進一步加強利益導向機制建設,幫助實行計劃生育的獨女戶和雙女戶家庭脫貧致富,建立和完善有利于女孩成長的利益導向機制和社會保障體制,落實優先優惠政策,開展幫扶救助活動。婦聯結合“春蕾計劃”幫助貧困女童上學,團委借助“希望工程”向計生女孩家庭傾斜政策,教育部門對獨生女在中高考時加10分,農行、科技、藥監等部門在職工中開展救助貧困女孩家庭活動。鄉村兩級把計生女孩戶作為“三結合”戶的首選條件,通過小額貸款、扶貧項目、減免義務工、發放愛心幫扶卡等優惠待遇促進群眾婚育觀念的轉變。在開展的結對幫扶活動中,結對干部要為被幫扶戶出點子、想辦法,提供物資幫助等,解決女孩戶在生產、生活、學習等方面的困難。

今年,新確認獎扶對象64人,獎扶對象達到786人;新增特扶對象4人,特扶對象達到28人。嚴格落實獨生子女獎勵政策,獨生子女父母獎金兌現率100%。獨生子女父母退休時3000元一次性獎勵全部落實到位。為102名中考、80名高考的農村獨生子女辦理了加分。由市財政為全市農村獨生子女家庭繳納了新農合參合費。按照Vl視覺識別系統要求,建成了計劃生育家庭關懷扶助中心,抽調專人專職負責此項工作。

依法行政,與治理出生人口性別比相結合

關于荷花詩句范文5

【關鍵詞】 巨噬細胞

關鍵詞: 巨噬細胞;視網膜色素上皮細胞;單核細胞趨化蛋白-1;地塞米松;道諾霉素

摘 要:目的 評價巨噬細胞調理液(MCM)對視網膜色素上皮(RPE)細胞合成單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)的作用. 方法 在培養的人RPE細胞的培養液中加入200mL?L-1 培養人巨噬細胞調理液(MCM),培養2,4,8,16,24和48h后,對培養的細胞進行免疫組化和原位雜交,用Western blot檢測培養的上清液中MCP-1的含量.同時在培養液中加入地塞米松(10-8 ,10-7 和10-6 mol?L-1 )和道諾霉素(2,20和200mg?L-1 )重復上述實驗,觀察在此條件下MCM對MCP-1合成的作用. 結果 200mL?L-1 MCM培養條件下RPE細胞2h時已檢測出分泌的MCP-1并在16h達到較高水平.同時原位雜交和免疫組化在細胞中檢測到MCP-1的表達.加入地塞米松(P

Keywords:monocyte chemotactic protein-1;macrophages;retinal pigment epithelial cell;dexamethasone;daunorubicin

Abstract:AIM To examine the effects of cultured macrophage conditioned media(MCM)on production and gene expression of monocyte chemotactic protein-1(MCP-1)of human retinal pigment epithelial(HRPE)cell.METHODS HRPE were cultured with200mL?L-1 macrophage condi-tioned media(MCM)for2,4,8,24or48h,and with addi-tional dexamethasone(10-8 ,10-7 ,10-6 mol?L-1 )or daunorubicin(2,20,200mg?L-1 ).Secreted MCP-1in the supernatant of cultured RPE was measured using Western blot assay,and intracellular MCP-1was detected by in situ hybridization and immunohistochemistry.RESULTS Secret-ed MCP-1was detected with200mL?L-1 MCM for2hours after incubation,and reached the most intensity at16hours.MCP-1in cytoplasm was noted during the same time.The levels of MCP-1in cultures with Dexamethasone(P

0 引言

視網膜脫離后發生的一個重要變化就是血-視網膜屏障的破壞,血漿成分和炎癥細胞可以借此進入視網膜下腔參與視網膜脫離后的炎癥過程[1] .對新鮮視網膜脫離后視網膜下液中的細胞成分進行分析,發現其中的主要成分是巨噬細胞和淋巴細胞[2] .巨噬細胞在增殖性玻璃體視網膜病變(PVR)中有重要作用[3] ,但巨噬細胞參與PVR形成中的作用機制還沒有詳細地得到揭示.單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)是參與炎癥過程的一種重要炎癥細胞趨化因子,其靶細胞是巨噬細胞和淋巴細胞,在臨床和實驗研究中,發現PVR的前膜組織中存在這種因子[4] .本實驗的目的是研究巨噬細胞的培養調理液對視網膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)細胞合成MCP-1的作用,以及地塞米松和道諾霉素對這一過程的影響.

1 材料和方法

1.1 材料 細胞系為原代培養人RPE細胞.由本院王雨生副教授惠贈4個不同人來源的第四代RPE細胞作為實驗細胞.

1.2 方法

1.2.1 巨噬細胞調理液(MCM)的制備 取肝硬化患者的腹水200mL,1000r?min-1 離心5min,制成細胞懸液,孵育,24h后用Hank’s液沖洗未附壁細胞,48h用胰蛋白酶消化去除成纖維細胞.1mL?L-1 利多卡因Hank’s液孵育解除附壁;制成(3.8~5)×1010 ?L-1 細胞懸液孵育36h后,取細胞培養液,針頭濾器過濾,-20℃保存備用.

1.2.2 RPE細胞爬片制備和培養上清液的收集 RPE培養于蓋玻片上至細胞鋪滿.次日加入含200mL?L-1 MCM的DMEM,另設地塞米松條件組(DEX,10-8 ,10-7 ,10-6 mol?L-1 )和道諾霉素條件組(2,20,200mg?L

-1 )重復上述實驗.分別于加藥后2,4,8,16,24和48h取出細胞爬片,PBS漂洗,多聚甲醛固定,空氣干燥,-20℃保存備用.不加處理因素的作為正常對照組.在75mL培養瓶中,待RPE細胞生長滿瓶底后,重復上述刺激條件,并在相應時間點收集細胞培養的上清液,-80℃保存待用.

1.2.3 原位雜交染色 地高辛標記MCP-1的DNA探針(大連寶生物公司,中國)序列為5’-TTG-GGT-TTG-CTT-GTC-CAG-GTG-GTC-CAT-GGA-3’.原位雜交試劑盒購自博士德公司(中國).細胞爬片滅活內源性過氧化物酶,1∶200蛋白酶K消化10min,滴加含探針的原位雜交液,雜交24h,洗滌,封閉,滴加小鼠抗地高辛抗體、生物素抗羊化小鼠IgG,加入顯色劑后顯微鏡下控制顯色.水溶性封片劑封片,鏡檢.

1.2.4 免疫組織化學染色 試劑盒購自中國博士德公司.細胞爬片用正常羊血清封閉,滴加小鼠特異性抗體(抗人MCP-1抗體,美國PharMingen公司),4℃過夜,漂洗后順序滴加生物素化羊抗小鼠IgG和SABC復合劑,加入顯色劑后顯微鏡下控制顯色.水溶性封片劑封片,鏡檢.

1.2.5 Western blot分析 RPE細胞培養上清液樣品100μL,陽性對照用重組人MCP-1(美國Promega公司)10μg?L-1 .用SDS-PAGE分離蛋白后,放入電轉移裝置中,使膠上的蛋白轉移至硝酸纖維素膜上,4℃轉移過夜,麗春紅S蛋白染色,脫色,照相,將分子量標準染色.將濾膜放在塑料袋中,封閉1h,加入稀釋的第一抗體,PBS漂洗,加入辣根過 氧化物酶標記的第二抗體,加入DAB顯色2~3min,水洗中止反應,照相.

結果分析:分析處理組陽性(顯色)條帶的蛋白表達量.用HP IAS-1000高清晰度彩色病理計算機圖像分析系統根據信號的強弱分析蛋白的表達量,以灰度表示強弱(灰度值愈大表示愈強,分級256).陽性對照條帶的灰度值設為100%,其他條帶的灰度經測量后,以對照條帶比對的百分數表示.

統計學處理:對不同培養條件下,RPE上清Western blot條帶的灰度值進行t檢驗.

2 結果

2.1 原位雜交 MCP-1的mRNA表現為細胞胞質中濃淡不一的紫藍色著色,其中在巨噬細胞調理液刺激下,2h組表現為較淺的著色,4h組開始出現明顯的著色,隨著時間的延長,細胞質中的著色逐漸加深(Fig1).

2.2 免疫組化 細胞內的MCP-1表現為胞質中濃淡不一的棕色著色.4h組開始有明顯的著色,隨著時間的延長,細胞質中的著色逐漸加深(Fig2).

圖1 - 圖2 略

2.3 Western blot檢測 表明培養的人RPE細胞在未無刺激的條件下,MCP-1的表達為陰性,200mL?L-1 MCM培養條件下,2h時已檢測到MCP-1,而且隨著時間延長而增多,并在16h達到較高水平(Fig3A).加入DEX后,MCP-1分泌的高峰值明顯下降(P

轉貼于

圖3 略

3 討論

本研究結果表明20%MCM條件下可以促進RPE細胞合成MCP-1,并呈現時間依賴性.地塞米松和道諾霉素可以抑制MCM的這種作用,地塞米松的作用明顯而持久,并呈現劑量依賴性;而道諾霉素可以輕度降低MCP-1的合成.二者均可使MCP-1分泌的時限后延.以往PVR病理證實,在PVR的視網膜前膜中有RPE細胞、神經膠質細胞、成纖維細胞樣細胞、巨噬細胞樣細胞、巨噬細胞和淋巴細胞等多種細胞成分[5] .巨噬細胞在PVR的發病過程中有一定的作用:首先它是普通炎癥反應中較早出現在炎癥部位的炎細胞,它主要負責吞噬細胞的碎片.同時培養的巨噬細胞可以產生許多炎前性因子,如:TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-8等[6] .

MCP-1作為一種趨化因子,可以特異地趨化巨噬細胞和淋巴細胞到炎癥部位,而參與炎癥反應.在臨床和實驗研究中,發現PVR的前膜組織中存在這種因子[4] ,同時在PVR和視網膜脫離后的玻璃體中可以檢測到,而患者的血液中為陰性,說明其產生是 一種局部的反應.眼內細胞包括RPE細胞和膠質細胞在TNF-α和IL-1β的刺激下,可以產生MCP-1,IL-8和某些生長因子如轉化生長因子-β(TGF-β)等[7] .而這些生長因子又可以促進RPE細胞的增殖.在這樣的一個循環過程中,由巨噬細胞游走向炎癥部位聚集開始,自分泌炎前性因子TNF-α和IL-1β,這些因子又可以刺激眼內細胞產生MCP-1,從而有更多的巨噬細胞向炎癥部位聚集,從而進一步放大了炎癥過程,同時產生的生長因子又可以刺激RPE細胞和膠質細胞的增殖.由于我們實驗中取材于肝硬化腹水患者腹水中的巨噬細胞,取材的數量有限,而且巨噬細胞是一種終末細胞,本身不能繁殖,所以定量測量MCP-1mRNA的表達方法如:Northern Blot較困難.我們通過Western blot方法檢測培養RPE細胞上清中MCP-1并對條帶的濃度進行比對,發現在200mL?L-1 作用下,RPE細胞分泌的MCP-1呈時間依賴性,這個作用通過原位雜交和免疫組化的結果得到驗證.

地塞米松和道諾霉素對抑制眼內炎癥[8] 和PVR[9] 的作用已經在實驗和臨床上得到證實[10] ,我們的結果表明二者對炎癥早期趨化因子的合成有抑制作用,其作用機制可能是通過抑制MCP-1的mR-NA合成[11] 和抑制細胞的生長起作用.地塞米松對培養RPE細胞的毒性較小,而且作用呈劑量依賴性增強.大劑量的道諾霉素對培養的RPE細胞有一定的毒性作用.臨床上將二者合用可能對抑制眼內炎癥和PVR發生的早期過程有較好的治療作用.

參考文獻

[1]Campochiaro PA,Bryan JA III,Conway BP,Jaccoma EH.Intravitreal chemotactic and mitogenic activity:Implication of blood-retinal barrier breakdown [J].Arch Ophthalmol,1986;104(10):1685-1687.

[2]Bakunowicz,Lazarczyk A,Sulkowski S,Moniuszko T.Com-parative studies of morphological changes and interleukin con-centration in subretinal fluid of patients with retinal detachment [J].Ophthalmologica,1999;213(1):25-29.

[3]Hui YN,Goodnight R,Sorgente N,Ryan SY.Fibrovascular proliferation and retinal detachment after intravitreal injection of activated macrophages in the rabbit eye [J].Am J Ophthal-mol,1989;108(8):1762-1784.

[4]Abu EI,Asrar AM,Van-Damme J,Put W,Veckeneer M,Dralands L,Billiau A,Missotten L.Monocyte chemotactic protein-1in proliferative vitreoretinal disorders [J].Am J Oph-thalmol,1997;123(5):599-606.

[5]Baudouin C,Fredj-Reygrobellet D,Gordon WC,Dralands L.Immunohistologic study of epiretinal membranes in proliferative vitreoretinopathy [J].Am J Ophthalmol,1990;110(5):593-598.

[6]Hui YN,Shi YN,Zhang XH,Yang K,Yu CH.Proinflamma-tory cytokines in macrophages induced proliferative vitreo-retinopathy modle of rabbit [J].Zhonghua Yanke Zazhi(Chin J Ophthalmol),1999;35(2):140-143.

[7]Elner VM,Burnstine MA,Strieter RM,Kunkel SL,Elner SG.Cell-associated human retinal pigment interleukin-8and mono-cyte chemotactic protein-1:Immunochemical and in-situ hybridization analyses [J].Exp Eye Res,1997;65(4):781-789.

[8]Polansky JR,Weinreb R.Steroids as anti-inflammatory agents [J].Ocular Pharmacol,1984;69(4):461-538.

[9]Wiedemann P,Sorgente N,Bekhor C,Heimann K.Dauno-mycin in the treatment of experimental proliferative vireo-retinopathy [J].Invest Ophthalmol Vis Sci,1985;26(3):719-724.

關于荷花詩句范文6

    為了加強2001年春運期間組織民工有序流動工作的領導與組織工作,維護廣大民工的合法權益,保證首都社會秩序的穩定,現將勞動和社會保障部《關于印發2001年春運期間組織民工有序流動工作計劃的通知》(勞社廳發〔2000〕17號)轉發給你們,同時結合我市實際情況,提出如下幾點要求,請一并貫徹執行。

    一、提高認識,加強領導。一年一度的春運工作關系到廣大民工的切身利益,關系到首都的社會秩序的穩定。各部門、各單位要進一步提高認識,將春運工作作為開年一項利國利民的首要任務抓緊抓好。各區(縣)勞動和社會保障局均要成立春運工作領導小組,主管領導要親自掛帥,要設立辦公機構,派專人負責,通過制定工作方案,建立春運值班、帶班制度,設立值班電話等方式,加強春運工作的領導組織,做到各司其職、各盡其責。同時負責協調有關科室做好各項任務措施的落實。

    二、開展廣泛的政策宣傳活動。春節前,各區(縣)勞動和社會保障局、企業主管部門要認真貫徹執行國務院、勞動和社會保障部有關文件規定,并及時將政策下發宣傳到轄區或所屬各用人單位。同時,要選擇本地區1~2處民工流動頻繁的火車站、長途站開展宣傳日活動。通過設立標語宣傳欄、散發《致外地務工人員一封信》、咨詢解答等形式進一步做好春運有關政策法規的宣傳教育。

    三、1月9日至3月17日春運期間及春運過后1個月內,本市將暫停用人單位招用新民工,市、區縣勞動和社會保障部門暫停辦理《外地來京人員就業證》等有關手續。企業在此期間因生產、經營特殊需要,需招用外地務工人員的,必須提前15天向市勞動和社會保障局提出用工申請。經批準后,方可招用,并依據有關規定辦理招用手續。

    四、加強民工流動的監測和監控工作。為了加強春運期間民工有序流動的管理,及時準確把握民工離京、返崗的時間人數,各區(縣)勞動和社會保障局要選擇10家使用外地務工人員百人以上的用人單位進行重點動態監測,重點了解離京、返崗的時間人員安排。并將有關情況分析整理后于1月9日至2月17日期間每周五將情況上報市勞動保障局就業處。市建工集團、市城建集團、市政工程局、市二商局等重點監控企業也要將所屬企業使用外地務工人員的變動情況按上述時間進行上報。勞動和社會保障部設在本市崇文、海淀兩區的民工流動監控點要按照部里的工作要求,認真做好春運期間百名民工流動的監控工作,并將監控信息按時上報勞動和社會保障部。

    五、組織開展勞動用工大檢查工作。為了維護春運期間本市勞動力市場正常秩序,各區(縣)勞動和社會保障局要在春運期間組織開展勞動用工大檢查,重點對私招亂雇、拖欠克扣民工工資、非法職業中介行為等違法問題進行有針對性、有重點的勞動監察。

    六、在春運期間,各級勞動和社會保障部門要加強對民工流動的動態信息的收集、信息上報工作,對出現的重大突發事件要及時上報市勞動和社會保障局就業處。各企業主管單位要加強工作中的指導協調,統籌安排所屬企業務工人員的休假、返崗工作。企業對于留京工作的務工人員要做好工作、生活的安排,開展多種形式的慰問、文化娛樂活動,豐富務工人員的節日生活。

    七、各區(縣)勞動和社會保障局及重點監控企業要認真做好春運期間組織民工有序流動的工作總結,并于2月15日前將總結上報市勞動和社會保障局就業處。

    附件:勞動和社會保障部辦公廳關于印發2001年春運期間組織民工有序流動工作計劃的通知

各省、自治區、直轄市勞動和社會保障廳(局):

    為做好2001年春運期間組織民工有序流動各項工作,現將《2001年春運期間組織民工有序流動工作計劃》印發你們。請結合本地實際情況,貫徹執行。

    請于2001年1月5日前將你廳(局)春運期間組織民工有序流動工作負責人、工作人員的姓名、聯系電話(手機)和傳真號碼傳報我部。

    聯系人:賈麗、黃華波

    聯系電話:(010)84201056,84201656

    傳  真:(010)84227798

    2001年春運期間組織民工有序流動工作計劃

    2001年春運期間組織民工有序流動工作,要繼續認真貫徹國務院春運期間組織民工有序流動和農村勞動力就地安置的各項方針政策,充分運用近年來取得的成功經驗,加強地區間、部門間合作,確保春運期間民工流動安全有序。具體安排如下:

    一、2000年12月~2001年1月上旬

    1.制定上報工作方案。分析預測本地農村勞動力流動數量、方向及趨勢,協調有關部門,制定春運期間組織民工有序流動工作方案和應對突發事件的工作預案。2001年1月5日前各地將工作方案報勞動保障部。

    2.部署春運期間重點監控工作。指導和督促重點監控地區按照勞動保障部要求,做好檢查網點設置,開展人員培訓,制定必要的調控預案等項準備工作。2001年1月9日開始,上報春運期間民工流動信息。

    3.開展流動就業工作檢查。檢查內容為:春運期間組織民工有序流動工作準備情況;農村勞動力就地安置和有序流動政策措施落實情況;重點監控工作準備和進展情況;清理整頓勞動力市場,以及保障民工權益情況等。檢查方式:以各?。▍^、市)自查為主,1月中旬勞動保障部派出檢查組到有關地區督查。

    二、2001年1月中旬-2月中旬

    1.開展宣傳工作。輸出、輸入地要根據本地實際,開展多種形式宣傳活動。宣傳內容:城鄉就業形勢,農村勞動力流動就業和就地安置政策等。宣傳工作要開展到農村勞動力流動量較大的鄉村、企業和車站碼頭。

    2.配合有關部門做好返鄉民工疏運工作。輸入地要調查了解企業春節期間放假安排和民工返鄉情況,并通報相關輸出地,協助有關部門搞好民工返鄉運輸組織;輸出地要了解民工返崗時間及數量,做好本籍返鄉民工的輸運接應工作;中轉地要積極開展疏導分流工作。

    3.做好春運期間信息調查預測。重點開展春節期間百名民工抽樣調查,指導重點監控地區開展信息監測和通報。隨時上報民工流動動態。

    4.協助有關部門搞好返崗民工輸送工作。輸出地與鐵道、交通部門配合,采取組織專車(列)、預訂團體票等措施,組織好民工返崗工作;輸入地與有關部門配合,幫助返崗民工及時安全到崗。要集中力量做好正月初一后和正月十五后的民工返崗工作。

    5.開展疏導分流和調控,勸阻勸返盲目外出人員。輸出地要發揮基層勞動就業服務機構的作用,加大政策宣傳力度,動員返崗民工不攜帶新民工外出,勸阻盲目外出人員;輸入地、中轉地與民政、公安部門配合,做好盲目外出人員的疏導分流、勸阻勸返和收容遣送工作。重點監控地區要開展對外出民工流動的調控。

    6.整頓勞動力市場秩序。輸入地要加強勞動監察,對勞動力市場和企業用工情況進行專項監察,嚴厲查處私招亂雇、非法職業中介行為。

    7.做好春運期間值班工作。各主要農村勞動力輸出、輸入地建立春節期間值班、帶班制度,搞好值班工作安排,保證春節期間信息暢通。

    三、2001年2月下旬-3月中旬

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