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病毒實驗室范文1
關鍵詞 計算機實驗室;計算機病毒;防范策略
中圖分類號TP39 文獻標識碼A 文章編號 1674-6708(2010)26-0217-01
隨著個人計算機的普及與廣泛應用,計算機病毒也隨之走進千家萬戶。在計算機實驗室管理中,計算機病毒防范一直是一個非常重要的方面。其主要原因就是一旦機房計算機感染上病毒,輕則導致計算機運行速度變慢,干擾教師正常授課;重則令計算機無法使用,造成教學事故。因此,各實驗室管理員都對計算機病毒深惡痛絕,并做出諸多防范策略。本文就目前計算機病毒主要傳播途徑加以分析,并對其防范策略做出探討。
1 計算機病毒主要傳播途徑
1.1 通過網絡傳播
由于計算機實驗室中的計算機一般都是連接到校園網中,沒有直接連入Internet,故其受到黑客攻擊的概率相對較小,感染計算機病毒的機會主要是在瀏覽包含惡意代碼的網頁以及下載并打開未經安全檢測的文件(主要是可執行文件)時。
1.2 通過移動存儲器傳播
近幾年,隨著移動存儲器(U盤、MP3播放器、移動硬盤等)價格的下降,其逐漸成為了學生上課的必備物品。學生使用移動存儲設備來拷貝教師課件或者存儲個人作業,為教師教學帶來了極大的方便。但是,與此同時,移動存儲器也成了計算機病毒的藏匿地點與順風客船,將病毒四處傳播。
2 安裝安全軟件
安全軟件包括殺毒軟件、防火墻以及專門保護用戶上網安全的軟件,如:360安全衛士、金山衛士等。
鑒于一般計算機實驗室都裝有提供上網服務的服務器,為了保障上網安全,應在該服務器上安裝殺毒軟件以及防火墻,并開啟自動升級功能,使該服務器成為隔絕外部安全威脅的屏障,實現類似“堡壘主機”的功能。
對于普通客戶機,由于其已受到上網服務器的保護,且計算機實驗室經常會作一些網絡方面的實驗,故客戶機不建議再安裝防火墻軟件,只安裝殺毒軟件以及專門保護用戶上網安全的軟件即可。
3 禁用操作系統的“自動播放”功能
很多通過移動存儲器傳播的病毒都會磁盤根目錄釋放一個名為“Autorun.inf”的文件以達到用戶瀏覽該磁盤內容時自動運行病毒程序的目的。防止此種病毒自動執行的最好方法就是禁用操作系統的“自動播放”功能。對于WinXP系統,可以通過以下3步來徹底禁用該功能。
1)禁用系統的“Shell Hardware Detection”服務。
2)在系統“組策略”中,找到“計算機配置\管理模板\系統”分支,然后找到“關閉自動播放”項目,設置其屬性,在其屬性對話框中依次選擇“已啟用”和“所有驅動器”即可。
3)在注冊表編輯器中找到“HKEY_CURRENT_USER\Software\Microsoft\Windows\CurrentVersion\Explorer\MountPoints2”子鍵,刪除其子鍵,并將其權限設置為只讀。
4 安裝還原卡
計算機實驗室所用客戶機一般都帶有還原卡,它能自動或手動將客戶機的文件系統恢復到上個還原點時的狀態,是機房管理員防范病毒最有力的武器之一。因此,計算機實驗室中的每臺客戶機都應該安裝還原卡,即使不安裝硬件還原卡的情況下,也應該安裝還原軟件(比如:冰點還原)。
對于還原卡的還原策略設置,應該將教師計算機與學生計算機分開討論,兩種計算機分別應用不同的策略。
對于學生用的計算機,應該將還原卡的還原策略設置為全盤保護,并且在啟動計算機時自動還原。這么設置的原因主要在于:學生的安全意識相對于教師來說比較薄弱,而且學生的求知欲以及動手欲望比較強烈,容易給計算機系統造成未知的混亂,影響在他之后上機的學生正常使用計算機。而每次開機自動還原的還原策略可以避免這一點。
對于教師所用的計算機,建議將還原卡的還原策略設置為每天僅在第一次開機時還原,而且最好留出一個非系統分區不進行還原保護,或者還原間隔設置的長一些(比如一個月)。這樣做的原因是:一般教師都有比較強的安全意識,令計算機中毒的概率相對較低。而且教師在授課時,經常會往系統分區安裝教學軟件或者拷貝一些教學用的資料,如果遇到死機或者所安裝軟件需要重新啟動計算機方可完成安裝的情況,每次開機自動還原的還原策略將會導致教師之前所做工作前功盡棄,影響教學質量。而每天只進行一次還原的還原策略可以有效避免這一點。至于為教師預留一個不受還原保護(或還原間隔較長)的非系統分區的原因,主要是考慮到教師授課用的一些文件以及學生提交的作業可能數量較多、占用存儲空間教大,不方便使用U盤拷貝;而且有時候教師會由于趕班車等原因來不及拷貝這些資料。那么,有這樣一個分區可以給教師帶來極大地方便。不過,為了防止這個不受保護(或還原間隔較長)的分區受到病毒威脅,建議將該分區的文件系統設置為NTFS,并在建立幾個可供教師使用的文件夾后,將該分區根目錄(不包括子文件夾)的NTFS權限設置為只讀。這樣,可以有效避免依賴“Autorun.inf”文件傳播的病毒感染該分區。
5 對于偽裝成文件夾的病毒程序防范
近一段時間以來,很多依靠移動存儲器傳播的病毒改變了以往依靠“Autorun.inf”文件啟動的方式,而是將受感染的磁盤分區根目錄文件夾隱藏起來,將自身病毒程序改為文件夾的名稱,并將病毒程序的圖標設置成了WinXP系統默認文件夾圖標,誘使用戶去點擊以達到傳播病毒的目的。
對于此類病毒,除了靠安全軟件識別之外,只能依靠用戶自身提高安全意識,避免被病毒誤導來進行防范。不過,還是可以靠修改一些系統設置來輔助用戶識別病毒程序,避免被病毒誤導。
1)更改系統文件夾的默認圖標。此舉可方便用戶識別病毒文件。
病毒實驗室范文2
【摘要】 目的 對2001～2004年云南省各臨床實驗室甲型肝炎病毒IgM抗體測定的室間質量評價進行總結分析，以督促各實驗室提高該項檢測的質量。 方法 每年發放衛生部臨檢中心提供的甲型肝炎病毒IgM抗體質控血清10份，分兩次測定，對其回報的結果進行統計、分析。 結果 4年來云南省臨床實驗室甲型肝炎病毒IgM抗體40份質評樣本中有5份低值陽性樣本，其陽性檢出率分別為31.8%、62.4%、74.3%、59.2%和71.7%，陰性樣本17份，符合率均在94%以上;開展與不開展室內質控的實驗室PT成績差異有顯著性（P<0.05）;使用與不使用酶標儀的實驗室PT成績差異有顯著性（P<0.05）。 結論 使用酶標儀判讀，嚴格開展室內質控的實驗室質評成績明顯優于未使用儀器及未開展室內質控者。
關鍵詞 甲型肝炎病毒IgM抗體 室間質量評價
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【Abstract】 Objective To analyze the external quality assessment result of anti-HAV IgM testing in clinic lab in Yunnan Province during2001-2004，and improve the testing qulity in clinic lab.Methods The10control samples offered by CCCL were distributed to all laboratories participating the EQA scheme per year and detected twice.Then the data of laboratories were analyzed statistically.Results 40control samples were distributed to all lab-oratories during four year，there are five weak positive samples，and positive rate were31.8%，62.4%，74.3%，59.2%and71.7%，there are17negative samples，their according rate were all exceeded94%.There is difference（P<0.05）between developed internal quality control and non-developed.There is significant difference between us-ing instrument and no instrument（P<0.05）.Conclusion The PT score of lab using instrument and developed in-ternal quality control are better than lab of no instrument and non-developed internal quality control.
Key words anti-HAV IgM external quality assessment
2000～2004年，云南省參加甲型肝炎病毒IgM抗體測定室間質量評價的實驗室從最初的80家增加到132家，檢測質量也有很大提高，到2004年，10份質評樣本的符合率均在95%以上，但也還存在一些問題。本文總結了4年來我省甲型肝炎病毒IgM抗體測定室間質量評價的結果，并分析了對成績影響較大的幾個因素，希望對參評實驗室提高檢測質量有所幫助，共同提高我省甲型肝炎病毒IgM抗體的檢測水平。
1 材料與方法
1.1 質控樣本 均由衛生部臨床檢驗中心提供。
1.2 方法 將質控樣本分裝郵寄到各參評實驗室，全年分兩次進行，每次做5個樣本。參評實驗室按規定時間回報結果后，進行統計分析。評分方法為PT評分:每個樣本回報正確得100分，錯誤得0分。
2 結果
2.1 2001～2004年全省甲型肝炎病毒IgM抗體質評樣本預期結果與全省各臨床實驗室檢測結果符合率 見表1。
從表1看到，陰性樣本的符合率很高，均在94%以上。符合率較低的幾個樣本如014111、014112、024215、034113和034214都是低值弱陽性。
2.2 開展室內質控與未開展室內質控實驗室室間質評PT成績分析 見表2。
2.3 儀器判讀與肉眼目測實驗室室間質評PT成績分析 見表3。
3 討論
室間質量評價是由非本單位的機構采用一系列的辦法連續地、客觀地評價各實驗室的試驗結果，并發現實驗室本身不易發現的不準確性，了解各實驗室之間結果的差異，幫助其校正，使其結果具有可比性 ［1］ 。云南省臨床實驗室甲型肝炎病毒IgM抗體檢測室間質量評價工作是由云南省臨床檢驗中心組織的，參評實驗室從最初的80家增加到2004年的132家，檢測質量不斷提高的同時，也暴露出存在的一些問題。從表1的結果可看到，陰性樣本的符合率很高，但還是有少數實驗室出現假陽性，假陽性將給患者帶來不必要的精神壓力和經濟損失，必須引起重視。而低值陽性的漏檢問題就比較嚴重，如014111、014112、024215、034113和034214幾個樣本符合率均很低，說明大部分的實驗室對甲型肝炎病毒IgM抗體檢測的靈敏度還達不到要求，主要有以下原因:有少數實驗室未選擇合格的有批號的試劑盒，而采用快速金標測定試劑盒，其靈敏度低導致弱陽性標本漏檢;另外，從室間質評成績回報來看，幾個低值陽性漏檢的基本是偏遠的、經濟較落后的基層單位，他們大都沒有酶標儀，或者沒有正確使用酶標儀，肉眼目測無法正確判斷處于臨界值附近的結果;同時，不使用酶標儀判讀結果，便無法開展室內質控，室內質控精密與否直接影響室間質評的成績。從表2和表3可知，使用酶標儀且嚴格開展室內質控的實驗室PT成績明顯優于未使用者。
表1 2001～2004年全省質評樣本預期結果與檢測結果符合率（略）
表2 是否開展室內質控實驗室室間質評PT成績比較（略）注:經t檢驗比較，開展室內質控與未開展室內質控實驗室5個批號室間質評PT平均成績差異均有顯著性（P<0.05）
表3 儀器判讀與肉眼目測實驗室室間質評PT成績比較（略）注:經t檢驗比較，儀器判讀與肉眼目測每個批號檢測成績差異均有顯著性（P<0.05）
而就試劑盒的使用來看，用量較大的幾家試劑仍存在差異，試劑盒的選擇也是影響檢測質量的重要因素 ［2］ 。如何選擇高質量的試劑，首先看試劑盒有無國家相關部門的批文;其次要認真用定值血清檢測精密度，用衛生部考核血清盤檢測準確度;再者要選擇有效期相對長，保存條件許可的試劑盒。還有不同試劑廠家生產的甲型肝炎病毒IgM抗體試劑盒有差異，如有的廠家要求稀釋，有的廠家則用原血清檢測。為此希望大家加強室內質控，并且最好用稀釋血清的試劑盒，它可減少血清中其他IgM（尤其是類風濕因子）導致的假陽性?？傊?，影響室間質評成績的因素主要有:實驗室管理者的質量意識（是否愿意投資好的設備，是否使用高質量的試劑盒）;實驗室操作人員的素質（是否正確使用儀器，是否嚴格執行操作規程，是否認真開展室內質控）。還有其他，如是否按規定保存質控品，是否正確填寫檢測結果等。只有各個方面都認真重視，才能保證甲型肝炎病毒IgM抗體的檢測質量。
參考文獻
病毒實驗室范文3
該報告詳細解讀了偽裝類手機病毒的偽裝病毒原理、傳播途徑、典型偽裝病毒案例、病毒發展趨勢，同時還給手機用戶提供了有效防范手機偽裝病毒的辦法。分析認為，該報告在幫助用戶全方位了解手機偽裝類病毒的同時，對于爆炸式增長的偽裝類手機病毒的防范與治理有著很好的借鑒意義。
誘騙欺詐類病毒占四成以上
騰訊移動安全實驗室相繼在Symbian、Android手機平臺上率先截獲多款偽裝類手機病毒，比如，偽殺毒、偽完美鬧鐘、偽懶人看書、偽OVI商店、偽Google框架等。熱門安全軟件、工具軟件、系統進程都是該類病毒常用的偽裝形式，通過與熱門應用相近甚至相同的圖標和名稱欺騙用戶下載安裝，一旦成功安裝便會惡意吸費、偷窺隱私、偷偷聯網、下載惡意程序等，給用戶造成嚴重的經濟損失。
該報告指出，截至到2011年10月9日為止，騰訊移動安全實驗室最新的病毒數據分析顯示：在Symbian平臺發高達13000多個手機病毒，其中誘騙欺詐類病毒所占比例為46%，在所有類別中占據第一的位置；在Android平臺發現高達6000多個手機病毒，其中誘騙欺詐類病毒所占比例為18%，在所有類別中也占據到前三的位置。
Android將成手機偽裝病毒重災區
報告指出，騰訊移動安全實驗室針對大部分的偽裝類病毒進行研究發現，其偽裝類別可以分為三大類：捆綁應用式偽裝類、獨立封裝式偽裝類和篡改應用式偽裝類。并且對三個類別的偽裝病毒工作原理都做了詳盡的分析。
該報告還預測，由于Android系統的開放性，應用越來越多，軟件市場魚龍混雜，將成為偽裝類手機病毒重災區。偽裝病毒技術含量層次不齊，SP仍然是病毒利益驅動者，手機病毒產業鏈日趨完善，同時云端技術被應用到手機病毒中，可以隨時通過云端遙控用戶手機，更換SP端口，導致手機病毒的治理難度進一步加大。
專家支招應對手機偽裝類病毒
面對越來越多、越來越隱蔽的手機吸費病毒，騰訊移動安全實驗室專家給出了詳細解決方案：
1）安裝手機安全軟件。為手機安裝專業的手機安全軟件，比如，QQ手機管家。
2）到安全可靠的站點下載軟件。一定不要輕易從手機論壇、不知名的應用市場中下載手機軟件，而是要到經過安全認證，有品牌知名度的手機應用下載站下載手機軟件，比如，手機騰訊網應用中心、QQ手機管家的“人氣推薦”“裝機必備”。
3）不要輕易打開陌生人短信中的網址鏈接，以防下載木馬。
病毒實驗室范文4
關鍵詞：老年人 甲型病毒性肝炎 實驗診斷
中圖分類號：R512.61 文獻標識碼：B 文章編號：1004-7484(2011)16-0013-02
甲型病毒性肝炎是我國法定的乙類傳染病，是由一種腸道性病毒引起的，主要以肝實質細胞的炎性損傷為主[1]，具有傳染性較強、流行面廣泛、傳播途徑復雜以及發病率高等特點[2]，除了對肝臟損傷之外，還會對身體的心臟、腎臟以及神經系統等其他器官產生損害，可逐漸演變成慢性肝炎[3]，與再生障礙性貧血也有密切的聯系，嚴重者可發展為肝硬化或者原發性肝細胞癌。其傳播途徑主要是通過日常生活接觸經口傳染，多呈散發性，老年人機體比較衰弱，臟器功能和免疫力已經下降，臨床特點與其他年齡段不同，目前臨床上甲型病毒性肝炎確定診斷主要還是要靠實驗室檢查，尤其是靠特異性血清學檢查。我院2005年5月~2011年5月收診的172例老年甲型病毒性肝炎患者分別進行實驗室檢測，為臨床上甲型病毒性肝炎的治療提供了參考依據，現將具體診斷過程報道如下。
1 研究對象與方法
1.1研究對象
選取自2005年5月~2011年5月來我院就診的172例甲型病毒性肝炎患者為研究對象，判斷標準參考1995年中國傳染病寄生蟲病學術論壇制定的病毒性肝炎的診斷標準和中國2000年病毒性肝炎防治方案的診斷標準。其中男性83例，女性89例，年齡在60~75歲之間，平均年齡為65.72歲。
1.2研究方法
1.2.1 對每個老年人甲型病毒性肝炎患者進行血液采集，并從中分離出血清，采用ELISA技術檢測血清中的抗-HAV IgM、抗-HAV IgG。
1.2.2采集每個老年人甲型病毒性肝炎患者的糞便標本，采用ELISA技術檢測糞便中的HAVAg。
2 結果
2.1患者主要臨床表現總結（見表1）
表1. 患者主要臨床表現
臨床癥狀
疾病 食欲
減退 乏力 腹脹腹
痛腹瀉 肝脾
腫大 黃疸
甲型病毒性肝炎患者人數（例） 152 149 97 93 147
2.2患者主要臨床并發癥總結（見表2）
表2. 患者主要臨床并發癥
臨床并發癥
疾病 電解質
紊亂 肝細
胞癌 肺部
感染 肝腎
綜合征 原發性
腹膜炎
甲型病毒性肝炎患者人數（例） 82 1 87 5 7
2.3血清特異性檢驗結果（見表3）
表3.血清特異性檢驗結果
檢驗項目 抗-HAV IgM 抗-HAV IgG
陽性患者人數（例） 168 159
2.4糞便檢驗結果（見表4）
表4.糞便檢驗結果
檢驗項目 HAVAg
陽性患者人數（例） 146
3 討論
甲型病毒性肝炎是一種傳染性的肝炎，主要是經過糞便-口的途徑進行傳播，過去大部分人們認為是一種良性的自限性疾病，不可能引發慢性肝炎，更不可能導致重癥肝炎。近年來醫學對甲型病毒性有了新的發現，認為此病有一個慢性過程，并且容易復發，其所引發的重癥肝炎占有相當大的比例。
甲型肝炎病毒(HAV)存在于患者的血清、糞便、膽汁以及肝細胞中，HAV侵入人的身體以后，機體將主要產生lgM抗-HAV 和IgG抗-HAV兩種抗體，兩者的臨床意義完全不同。
抗-HAV lgM出現的時間比較早，一般在患者發病7日之內，患者的血液中就可以檢測到了，只有極少數的少數病人在發病前血液中可以檢側到?？?HAv lgM出現以后，大約在出現臨床癥狀之后，其在血液中濃度已經迅速達到高峰，一般高峰濃度維持2~3周后開始下降，發病3~4月后大多數病人血液中便檢測不到，可持續殘留1年以上的只是極個別患者，且濃度很低。因此IgM抗-HAV可以作為甲型病毒性肝炎早期診斷的可靠、理想檢測指標。目前檢測防方法多采用ELISA或SP-RIA。此兩種方法都有較好的靈敏性、重復性，且操作方法簡單，用血量很少，出結果快。大多數醫院均可開展此項檢測工作。本文中有一部分患者 的血清中沒有檢測出IgM抗-HAV，可能是因為患者處于發病后4個月之后，血液中的IgM抗-HAV已經完全消失。IgG抗-HAV在感染HAV之后的3~12周在血清內即可出現，故有一部分之后濃度逐漸升高，在6個月時達到高峰后緩慢下降，其可在患者血清內殘存十年以上甚至終生。在甲型病毒性肝炎患者發病1周后，大多數在其糞便中便可檢測出HAAg，可作為該病的最基本實驗檢查。
老年人是人群中比較特殊的一組人群，由于年齡處在老齡階段，機體的組織結構以及生理功能均發生很多變化，體質衰弱，免疫力逐漸降低[4]，老年病毒性肝炎患者也逐年增多，僅根據臨床癥狀無法確診，應相應采用一些實驗檢測來幫助診斷，并根據各個患者的情況采取治療措施，以提高該疾病的治愈率。
參考文獻
[1] 任軍，王建軍，許明德.甲型病毒性肝炎的免疫預防研究進展[J].安徽預防醫學雜志，2001,7（1）：75~77.
[2] 戴孟陽，王萍，孫百軍.等甲型病毒性肝炎預警指標的探討[J].2005,6（1）：64~65.
病毒實驗室范文5
【關鍵詞】化濕解毒方/治療應用;輪狀病毒性腸炎/中醫藥療法； 電解質
【中圖分類號】R285.6 【文獻標識碼】A 【文章編號】1008-6455（2011）12-0349-01
2009年11月-2011年03月，應用中藥化濕解毒方灌腸治療輪狀病毒性腸炎60例，觀察其對輪狀病毒性腸炎患兒電解質的影響，現報告如下。
1 臨床資料
1.1 一般資料:120例均為本院門診及住院腹瀉伴脫水的患兒，隨機分為2組。治療組60例，男32例，女28例，年齡6個月-2歲，平均年齡11.56+2.72月。對照組60例，男29例，女31例，年齡6個月-2歲，平均年齡12.12±4.15月。兩組患兒一般資料經統計學處理無顯著性差異（p
表1 臨床癥狀及體征 例
表2 大便檢查 例
1.2 診斷標準:參照中國衛生部頒布的“中國腹瀉病診斷治療方案”（1）急性起??； （2）大便呈水樣或蛋花湯樣；（3）可伴發熱、嘔吐、脫水、電解質紊亂；（4）大便常規白細胞，＜5個/hp；（5）大便輪狀病毒檢測呈陽性。
2 治療方法
常規治療：靜脈或口服補液糾正脫水、電解質紊亂及酸堿失衡，調節飲食。治療組: 加上自擬化濕解毒方灌腸。藥物組成：白花蛇舌草30g,葛根10g,蘆根20g,附子1.5g。功效：清利濕熱、安腸止瀉、溫陽利濕。用涼水500ml浸泡藥物30分鐘，先武火后文火，煎煮30分鐘即可，取藥液300ml備用。灌腸時藥液溫度30-40℃, 6個月至18個月的患兒每次50ml，18個月至28個月的患兒每次75ml，早晚各一次。使藥液在結腸內保留1h左右為宜。3天為一療程。對照組: 加用靜點病毒唑10-15mg./kg/d。3天為一療程。
3 觀察指標
臨床癥狀和體征：急性起??；大便呈水樣或蛋花湯樣；可伴發熱、嘔吐、脫水、電解質紊亂；實驗室檢查：大便常規白細胞，
4 結果
兩組療效比較,見表3。
表3結果經Ridit分析p＜0.05有顯著性差異，化濕解毒方治療組明顯優于病毒唑對照組。
兩組治療后觀察指標比較 （ x±s，d） ,見表4。表3
表4
表4結果顯示，治療組治療后癥狀體征消失時間、住院天數等方面均優于對照組，經統計學處理，有顯著性差異，提示化濕解毒方,可快速緩解病情、縮短療程、提高療效，是治療輪狀病毒性腸炎的有效方劑。
治療前后電解質情況見表5。
表5
治療組治療后36h電解質的變化與治療前比較均有顯著性差異（p＜0.01）。對照組治療后36h電解質的變化與治療前比較也有所改變，但與治療前比較差異 不顯著（p＞0.05）。2組治療后比較：治療組治療36h電解質變化明顯優于對照組,提示化濕解毒方是治療輪狀病毒性腸炎的有效方劑。
5 討論
輪狀病毒性腸炎多發生于秋冬季節,以2歲以下的嬰幼兒多見,常呈流行性,抗生素治療無效.我們采用化濕解毒方灌腸治療效果顯著,方中大量白花蛇舌草本身對脾細胞具有絲裂原作用,能有效控制熱勢，迅速改善炎癥病理狀態，抑制體內細菌生長。葛根有明顯的罌粟樣松馳平滑肌的作用，使腸道正常動力恢復，大大減少大便次數；煨葛根所含的淀粉遇水有較強的吸附作用，吸于腸壁，消除有害物質的腸粘膜刺激，降低腸痙攣，葛根素有退熱作用；葛根煎劑能增強白細胞的吞噬能力，有抑制病原微生物的作用1。蘆根具有解熱、鎮痛 、提高免疫力等作用。附子的作用抗炎、興奮腦垂體、腎上腺皮質系統。諸藥同用，能增強機體的細胞免疫功能，抑制人輪狀病毒的復制，對大腸粘膜有保護作用，對胃腸的推進有明顯的抑制作用以抗腹瀉，從而達到治療本病的目的。
化濕解毒方灌腸治療輪狀病毒性腸炎3天后，治療組電解質變化明顯優于對照組,提示化濕解毒方是治療輪狀病毒性腸炎的有效方劑。
病毒實驗室范文6
【摘要】 目的 觀察綿馬貫眾水、乙醇兩種提取物的抗病毒作用。方法 (1)離體實驗：采用致細胞病變法觀察綿馬貫眾水、乙醇兩種提取物對流感病毒(FM1株)、呼吸道合胞病毒(Long)、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、腺病毒(AD3)的抑制作用，計算藥物半數有效濃度(EC50)、治療指數(TI);(2)在體實驗：綿馬貫眾提取物按25%、12.5%、6.25%原液的濃度設高、中、低3個劑量給藥，并設立正常對照組和病毒對照組，觀察綿馬貫眾水、乙醇兩種提取物對滴鼻感染FM1株流感病毒的昆明種小鼠肺指數的影響。結果 綿馬貫眾水、乙醇兩種提取物對流感病毒(FM1株)、呼吸道合胞病毒(Long)、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、腺病毒(AD3)均具有一定的抗病毒作用，綿馬貫眾水提取物對上述病毒的EC50分別為110.58、141.72、126.21、152.66、182.55 ng/L;TI分別為34.94，14.21，30.62，25.31，21.17。綿馬貫眾乙醇提取物對上述病毒的EC50分別為152.08、168.27、132.28、135.26、156.38 ng/L;TI分別為14.24，11.12，16.37，16.01，13.84。綿馬貫眾水提物高、中劑量組、乙醇提取物高劑量組降低感染FM1株的小鼠肺指數，與病毒對照組比較差異有統計學意義(P
【關鍵詞】 貫眾/分離和提純; 流感病毒/藥物作用; 呼吸道合胞病毒/藥物作用; 腺病毒/藥物作用; 動物，實驗
【Abstract】 Objective To investigate the antiviral effects of the water and alcohol extracts of Dryopteris Crassirhizoma.Methods (1)The cytopathic method was used to observe the antiviral effects in vitro of the water and alcohol extracts of Dryopteris Crassirhizoma on influenza virus(FM1)，respiratory syncyntial virus(Long)，para influenza virus(Ⅰ，Ⅲ)，adenovirus(AD3);(2)Mice were randomly pided into treated group(25%，12.5%，6.25% extract as high，middle and low dose respectively)，normal control group and model group，the in vivo antiviral effects of them were studied in mice infected with influenza virus(FM1) on induced lung index.Results Both the water and alcohol extracts of Dryopteris Crassirhizoma had the antiviral effect on influenza virus(FM1)，respiratory syncyntial virus(Long)，para influenza virus(Ⅰ，Ⅲ)，adenovirus(AD3).EC50 of the water extract was 110.58，141.72，126.21，152.66 and 182.55 ng/L，TI was 34.94，14.21，30.62，25.31 and 21.17.EC50 of the alcohol extract was 152.08，168.27，132.28，135.26 and 156.38 ng/L，TI was 14.24，11.12，16.37，16.01 and 13.84.The water extract 250 mg/L(P
【Key words】 Dryopteris Crassirhizoma/separation and purification; Influenza virus/action of drugs; Respiratory syncyntial virus/action of drugs; Adenovirus/action of drugs; Animal，experiment
綿馬貫眾為常用中藥，又名東北貫眾，其來源為鱗毛蕨科植物粗莖鱗毛蕨Dryopteris crassirhizoma Nakai的干燥根莖及葉柄殘基，主產于東北。始載于《神農本草經》，有驅蟲、止血、清熱解毒的功能，臨床上用于風熱感冒、蟲積腹痛、熱毒瘡瘍、痄腮腫痛、崩漏等。本實驗采用離體和在體實驗的方法評價綿馬貫眾兩種提取物抗流感病毒(FM1株)、呼吸道合胞病毒(Long)、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、腺病毒(AD3)的作用。
1 材料與方法
1.1 實驗動物 昆明種小鼠108只，雌雄各半，體質量18～22 g，由吉林大學實驗動物中心提供，動物合格證號：SCXK(吉)20030002。
1.2 藥品 綿馬貫眾水、乙醇提取物由遼寧中醫藥大學提供(每毫升含生藥1 g)。陽性對照藥利巴韋林注射液(湖北制藥有限公司，批號：091022)。
1.3 試劑 MTT(3(4，5二甲基噻唑2)2，5二苯基四氮唑溴鹽)為Hyclone公司產品，MTT以磷酸鹽緩沖液配制成5 g/L溶液，過濾除菌后置4 ℃冰箱保存備用。二甲基亞砜為上海菲達有限公司產品。1%雞血由來亨公雞翅下靜脈取血，按1∶4加入Alserver液后4 ℃保存，使用時用生理鹽水配成1%雞紅細胞懸液。
1.4 細胞 犬腎傳代細胞(MadinDarby canine kidney，MDCK)、人宮頸癌傳代細胞(Hela)由吉林市防疫站提供。DMEM(Dulbecco′s modified eagle′s mediurn)培養基由美國Gibco公司提供。MDCK細胞生長液中含有10%胎牛血清、1×105 U/L青霉素、100 mg/L鏈霉素;MDCK細胞維持液中除含有2%胎牛血清，并加入2 g/mL胰蛋白酶外，其他含量均同細胞生長液。
1.5 病毒株 流感病毒(FM1株)、呼吸道合胞病毒(Long)、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、腺病毒(AD3)均購于中國預防科學院病毒學研究所，用于體外抗病毒實驗。流感病毒使用前在10日齡雞胚尿囊腔接種傳代3～4次，收集尿囊液，以3 000 r/min離心15 min，取上清液進行血凝實驗，將血凝滴度大于1∶320且細菌培養陰性的病毒液分裝，置-80 ℃保存備用。FM1株由吉林省疾病預防控制中心提供，用于體內抗病毒實驗。
1.6 實驗儀器 Model680型酶標儀(美國伯樂公司);二級生物安全柜(305040195，France Thermo);CKX41型倒置顯微鏡(日本奧林巴斯);MCO175型CO2培養箱(日本三洋);AL204型分析天平(MetterThermo Group);LD42A型離心機(上海安亭);Human up 900型超純水機(韓國Human)。
1.7 實驗方法
1.7.1 藥物對MDCK和Hela細胞毒性測定 實驗于長春中醫藥大學中藥藥理實驗室完成。將樣品分別配成0.1 g/mL混懸液，0.22 μm微孔濾膜濾過除菌，分裝備用。將96孔板每孔加入2×105個/mL密度的MDCK細胞或Hela細胞0.1 mL，培養至細胞長成單層后，棄去原培養液，換含不同濃度的含藥維持液，每孔200 μL。藥物的終濃度分別為10、20、40、80、160、320、640、800、1 600 μg/L，置于37 ℃ 5% CO2培養箱培養。每日于倒置顯微鏡下觀察細胞變化，培養72 h后計算細胞存活率，每一藥物濃度均重復4孔，同時設正常細胞對照和病毒對照。以Probit回歸方法計算藥物對MDCK細胞的半數毒性濃度(TC50)。
1.7.2 藥物對抗病毒作用 先用10TCID50的流感病毒(FM1株)感染MDCK細胞，用呼吸道合胞病毒(Long)、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、腺病毒(AD3)感染Hela細胞，每孔0.1 mL，置于35 ℃ 5% CO2培養箱孵育2 h后，吸去病毒液，加入不同濃度的含藥維持液，在35 ℃ 5% CO2培養箱繼續培養，每天于倒置顯微鏡下觀察細胞變化;采用致細胞病變法進行試驗，待病毒對照孔細胞病變呈+++～++++，且細胞對照正常時，計算細胞存活率，每一藥物濃度重復4孔，同時設正常細胞對照和病毒對照，以Probit回歸方法計算藥物半數有效濃度(EC50)。治療指數(TI)=藥物半數毒性濃度(TC50)/藥物半數有效濃度(EC50)[1]。
1.7.3 綿馬貫眾水、乙醇提取物體內抗病毒試驗 取昆明種小鼠108只，用抓鬮法隨機分為9組，正常對照組、陽性對照組(利巴韋林)、病毒對照組及試驗藥物高、中、低劑量組，每組12只。在乙醚輕度麻醉下，用已滴定的FM1株流感病毒液(以無菌鹽水稀釋成每0.05 mL含15個LD50)滴鼻感染，每鼠4滴，約0.05 mL。貫眾提取物按25%、12.5%、6.25%原液的濃度設高、中、低3個劑量給藥，分別為250、125、62.5 mg/kg;陽性對照藥利巴韋林劑量為70 mg/kg。以上藥物均在病毒攻擊后2 h開始灌胃給藥，共給藥4 d，每日1次。感染后4 d禁食禁水4 h以上，稱小鼠體質量，麻醉后處死取出鼠肺，記錄病變程度，將肺置于生理鹽水的平碟中洗滌2次，用吸水紙吸干表面水分，稱出肺濕質量。按以下公式計算肺指數與抑制率：肺指數=小鼠肺濕質量(g)/小鼠體質量(g)×100%;肺指數抑制率=(病毒對照組平均肺指數-實驗組平均肺指數)/病毒對照組平均肺指數×100%[2]。
1.8 統計學方法 采用SPSS 11.5統計軟件進行統計學處理，數據以±s表示，計量資料行t檢驗。
2 結果
2.1 綿馬貫眾水、乙醇提取物對MDCK細胞和Hela細胞的半數毒性濃度(TC50)比較 見表1。表1 綿馬貫眾水、乙醇提取物對MDCK和Hela細胞的半數毒性濃度(TC50)(ng/L)
2.2 綿馬貫眾水、乙醇提取物的抗病毒作用比較 見表2。表2 綿馬貫眾水、乙醇提取物的抗病毒作用注：EC50：藥物半數有效濃度，TI：治療指數。
表2結果表明，綿馬貫眾水、乙醇提取物對呼吸道合胞病毒(Long)、流感病毒(FM1株)、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、腺病毒(AD3)均具有一定的抑制作用。
2.3 綿馬貫眾水、乙醇提取物的體內抗病毒作用 見表3。表3 綿馬貫眾水、乙醇提取物的體內抗病毒作用(n=12)注：與正常對照組比較，at=7.235，P
表3結果表明，綿馬貫眾水提物高、中劑量組、乙醇提取物高劑量組對滴鼻感染FM1株的小鼠均有保護作用，可降低流感病毒感染小鼠的肺指數，減輕病區引起的炎癥反應，具有一定的抗病毒作用。
3 討論
綿馬貫眾是中藥貫眾的主流品種，現代研究表明其具有抗腫瘤、抗瘧、抗病毒等活性[3]。本課題組利用雞胚試驗進行了抗病毒中藥的篩選工作，發現綿馬貫眾提取物對流感病毒具有顯著抑制作用;通過離體試驗發現綿馬貫眾提取物對流感病毒(FM1株)、呼吸道合胞病毒(Long)、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、腺病毒(AD3)均具有一定的抗病毒作用;并通過在體實驗，觀察到綿馬貫眾提取物降低感染FM1株流感病毒的昆明種小鼠的肺指數，可減低病毒引起的肺損傷。同時通過實驗，觀察到綿馬貫眾水提取物對MDCK細胞、Hela細胞的毒性比乙醇提取物稍大;但是從離體、在體實驗結果看到，綿馬貫眾水提取物的抗病毒活性略好于乙醇提取物，對于水提取物和乙醇提取物抗病毒的活性性成分需要進一步的研究。
參考文獻
[1] 柳曉琳，何雅慧，金艷書，等.苦碟子抗呼吸道病毒的實驗研究[J].中國現代中藥，2006，8(1):1113.
