許巍時光范例6篇

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許巍時光范文1

最愛的那一碗親情面

徐崢對吃貨的認知,是從孩童時期開始的。對于一個正宗的上海人來說,在吃上的講究,不在貧富,在于邊邊角角的周到殷實,絕不因環境而敷衍將就,也不會死撐面子讓肚里吃虧。

在徐崢的記憶中,媽媽的味道就是炸土豆餅,把土豆碾碎成泥,放一點點肉末和蔥花,捏成一個個小餅滑進油鍋里。以前小時候吃不到西餐,星期天家里就會弄一碗羅宋湯,一個土豆餅,再加一塊豬排,這就算是西餐了。在家里,說不上誰是主廚,誰有空閑誰就做飯。老爸的炒鱔絲,老媽的土豆餅,過后許多年,徐崢跟著記憶都能做出來。

隨著徐崢長大、求學、拍戲,能在家里吃頓飯成了奢望,更別說吃上爸媽做的飯菜了。大學一年級時,徐崢的父親與癌癥搏斗了一年,生命進入倒計時。有一天,父親回光返照似的精神出奇地好,他對徐崢說,想吃蔥油拌面。當時,徐崢的母親在國外,每天守在病床前的只有徐崢和那些叔叔。幾個大老爺們兒,哪兒會做拌面。難道連父親這點愿望都實現不了?徐崢二話不說,掉頭回了家。他一邊給媽媽打電話,一邊動起手來。蔥姜切碎,八角桂皮洗凈,放入鍋中炒香,加入調料和高湯煮成湯汁,將煮好的面條放入湯汁攪拌,再配上綠綠的黃瓜絲和蔥末。看似簡單的程序,但能做得地道可不容易。第一次下廚的徐崢,更是手忙腳亂。當他把這碗蔥油拌面端到病床前,父親只是嘗了一小口便咽不下去了,臉上卻露出了欣慰的笑容。那是父親吃的最后一碗飯,之后便含笑撒手人寰。

父親的去世,讓徐崢一下變得成熟起來。他唯一感到心安的是,至少完成了父親最后一個心愿。也是從那時候,他明白了一個道理,你最愿意做也最會做的,還是那些你爸爸媽媽會做的菜。直到現在,徐崢每次回上海,常常會在半夜去尋找一碗蔥油拌面吃。

徐崢看過一檔法國的美食節目,是講一個法國老頭到世界各地找一個當地的廚師教他做菜,比如在湄公河上弄條船開著讓廚師教做咖喱。那會兒徐崢剛大學畢業,一邊看一邊覺得:“哎呀好饞??!好羨慕他的職業啊!”去全世界旅游,吃很多好吃的東西,喝好喝的酒……自此,旅游和美食被徐崢固執地綁在了一起。每到一個地方游玩,或者是拍戲,他一定要吃到當地特色的小吃。

有一次去洛杉磯,他帶了個吃貨朋友去,每天晚上安排的精彩節目便是吃喝,好吃得叫人受不了。人家很多人從國外回來,都因水土不服要掉幾兩肉,徐崢的體重卻是一路飆升。

做有品位的養生達人

2003年,徐崢娶了個地道的北京媳婦陶虹,他們便開始了京滬雙城記的生活。在上海和北京都買了房,但裝修風格截然不同,就像徐崢對于這兩個城市的感情,有愛有恨,也同時敢愛敢恨。對不同城市有不同的感情,但是徐崢在雙城里都找到了同樣讓他喜歡的美食。他喜歡吃,從來不怎么考慮要注意身材,提起吃,總是津津樂道,在自己家住的上海定西路上就覓到了一堆好吃的;而在北京,各地風味大薈萃,干脆組成了一個志同道合的,輪番在各種不同飯館內聚會。

老婆陶虹也是個標準的吃貨,這點和徐崢真可謂志同道合。陶虹喜歡吃零食,徐崢就在客廳里放了一大筐的零食,老婆大人隨手可拿。經常在外面館子里吃,徐崢覺得麻煩。有一次,他準備在家里大開吃戒,自己動手當廚子。話說,愛吃的人都愛擺弄幾下,徐崢是個例外,除了老爸臨終前給他做過那碗面之后,徐崢是不怎么下廚的。

這天,他發狠心說,要做幾道正宗的上海菜,犒勞一下老婆大人。煞有介事地進了廚房,做來做去,沒有翻出什么新鮮花樣,倒是把兒時父母做的那幾道菜手到擒來地做了出來,也沒有特意學過,根據記憶和想象便做了出來。什么炒鱔絲、炸土豆餅,還有一道是他最愛的紅燒荷包蛋。把荷包蛋雙面煎好,放一點點醬油,在鍋里頭燜一會兒,醬油碰上荷包蛋煎得有點焦黑的表皮,非常香。陶虹對他的這道荷包蛋情有獨鐘,贊不絕口。

有了女兒之后,陶虹淡出娛樂圈,在家里相夫教子,形成了男主外女主內的夫妻模式。偶爾徐崢下廚,還是會把這道徐式荷包蛋拿出手。這成了他的招牌菜,和俘虜母女二人的利器。

像許多上海男人一樣,心細的徐崢對家庭和家人的體貼照顧無可挑剔,他認為最好的方式就是讓她們吃好的。于是乎,大街小巷,國內海外,哪里有好吃的便少不了徐崢一家3口的影子。照此下去,陶虹不樂意了,女明星最看好的身材,在這些美食的攻擊下成了犧牲品。陶虹開始節食、減肥。這對吃貨來說可是艱巨的考驗。徐崢有時候故意拿美食在陶虹面前誘惑她,沒想到陶虹一旦狠下心來,還真是雷打不動。她還勸徐崢,也要適當調劑飯量。之前從不考慮肥與瘦的徐崢,終于吃出了問題。有次,他身體感到不舒服,到醫院一檢查,脂肪肝,高血壓,這些毛病都找上門來。看來光吃得好過了嘴癮也不行,徐崢這才開始注意養生之道。

人家都說紅酒能養生,徐崢也從之前的喝白酒改成喝紅酒。他發現在喝紅酒的時候,讓人感覺舒適,在有情調的環境下,能讓心安靜下來。

對于菜品,徐崢也一改之前大魚大肉的豪爽做派,清粥小菜這等家常菜成了他的最愛。有葷有素,粗細糧搭配,營養全面均衡。照此方法吃了一段時間,徐崢突感身體狀況改良不少,不但體重下降,渾身上下也輕松了許多。他還向朋友們推薦,要怎么吃才營養又美味。后來大家一起出去吃飯,菜單一般都在徐崢手上,吃什么都是他說了算。從一代吃貨到養生達人,看來徐崢在吃貨的道路上又向前跨越了一大步。

藏在煙火味中的溫暖

別看徐崢這么愛吃,但他的手機從來不裝任何美食點評之類的APP,因為他的選擇很精到,自己熟悉的館子、朋友的口碑推薦,再加上一點點好吃之徒的直覺。

有一天徐崢突發奇想,既然自己這么愛吃,為什么不開一家喜歡的飯店呢?他喜歡吃日餐和西班牙餐,便決定開這樣兩家館子。從選址到裝修,還有給飯店起名字,徐崢都親力親為。上海的兩家日本菜分別是龍海和奈良本,是他和朋友一起開的壽司店。前者在余姚路上,總共夠招待10個人,正是他最喜歡的館子的大小。年輕的壽司師傅用徐崢自己的話來說就是“很有素養”,手法細膩而有貴族氣。后者則是從東京銀座請來的師傅,“奈良本比較霸氣,雖然是一款款的壽司,但會滿足你的饕餮欲望,很合中國人的口味”。這兩個館子,就像商業性和文藝性結合得很好的片子。

開了這兩家館子,徐崢還不滿意,又在杭州的黃龍飯店一層,開了一家料理店。光看料理店的中文名字“真炙爐匠料理”,很難想象這是一家怎樣的日本料理,而看到它的英文名“salt and fire”就一目了然了,鹽與火這樣簡單的調料和烹飪手法,會給客人帶來一道不同尋常的盛宴。食材都是捕自北海道、長崎、九州或沖繩并取道上海運至杭州的超新鮮進口海鮮,所以要求客人提前預約,以保證食材的新鮮。每天下午2點左右,工作人員開始處理當日運抵的魚生,為晚餐做準備。根據時節變化,食材也有變化,但始終堅持選用品質最上乘的食材,如果當天沒有品質最好的,那寧可不上菜也不會退而求其次。這等精良的品質,征服了很多挑剔的食客。

炭烤金吉魚、炭烤牛油果、雞肉漢堡,是徐崢最喜歡的料理,也是他每次到店的必點。另一個原因,娛樂圈明星都知道,這家店的老板是著名演員、導演徐崢。直到孫儷在微博上@徐崢,夸他日料店里的員工餐都不同凡響,并開玩笑說要求去打工時,娛樂圈外的大眾食客才知道,徐崢原來是這家日本料理的股東和老板。

飯店開得風生水起,徐崢又有想法了,什么時候拍部有關美食的電影該多好。他將這主意同朋友寧浩和黃渤一講,兩人都大贊。但聽徐崢描述電影里的美食場面,絕對是件考驗意志力的事兒。他的描述中有很多手勢、擬聲詞,興奮處眼睛冒光,嘖嘖連聲,有時精彩過實際效果?!斑@兩天看《紙牌屋》,政客主角跑到老黑人的店里去吃肋排,很小很破的餐館,他說我是某某地方出身的,吃肋排可以讓我回到過去――這一筆寫得……太好了。一個政治戲,用這一筆給這人留了一個念想。”他從鼻子中笑出聲來,“我們的電視劇里沒有吃,就是扒拉飯,沒有浸透到生活里頭去,吃這件事兒里頭,往大了說就是包含著對生命的感受啊。”

許巍時光范文2

所有我所知道關于消費者的一切,都是從“我自己”身上得來的。我就是騎著50cc Scooter的通勤OL;我就是一年消費不到兩次的健身房會員;我就是無車階級;我就是刷卡積點兌換贈品的婦女;我就是收聽午夜愛樂廣播的失眠者;我就是不知道送朋友什么生日禮物的人;我就是會在探聽小道消息的職員……我就是個體經濟。我就是總體經濟。我就是Globalization。

大量生產的東西一定是規格化的??鐕鴱V告公司訓練出來的在地廣告人也是如此。

我只想做一個自由獨立思考的人,完全不想被什么廣告思考訓練所污染,但畢竟這是廣告業—世界上最bitchy的行業之一,所以我不能說我不必對抗什么,但我寧可說它是一種抽象的戰爭。

創意就是現代文明,我們的民族基因還無法演化出高度進化的創意文化社會。

廣告并不只是什么寫copy、找明星……所謂“文化創意產業”的思維模式其實就是廣告。

我不能期待社會變得有品位,客戶變得很聰明,廣告人變得很專業,我只期待我自己。

我的廣告和別人的分別并不在于一般人所認為的,外顯的美學形式,意義層次或風格表現,而是形成我廣告觀的整個知識系譜傳統。因此廣告的創作能力并不是從一般人以單純技術區分去判斷,而是一種更radical的能力,就像禪修內觀那般,可以運用于無限可能的情境之中。

如果對整體廣告生態所形成的傳播語境沒有自覺及觀照,我不認為一個廣告創意的生產者他如何自稱他是專業的。

沒有標準答案。視對象不同而有所調整。

身為一個創作人,唯一的希望是拋棄希望。

就像任何一種創作一樣,理論是沒有意義的,廣告系的教授永遠做不好廣告,教你寫作的老師不一定寫得出好小說。

我始終對“廣告人”這種身份有一種茫然的陌生感,“這是在說我嗎?”

中國廣告工業在某種程度上,反映了中國文化在全球場景中的邊陲性,以及從此一困境推溯所見的文化貧困:沒有資本,因此沒有累積;沒有養成,因而沒有觀念;沒有核心,因為沒有共識。

“廣告”不只是一種狹義的、物理性的工具,也不只是形式的、美學的呈現。背后的“廣告思維”所代表的創意資本才是重點。

我能繼續做這個工作的原因很簡單—那就是因為我總是不斷在redefine或reinvent廣告。

本環節通關秘籍:有效率地,做對的事

員工首先要堅定可以不加班的信念,而這一推動過程將是艱辛復雜的。如威營銷傳播集團用了將近4個月的時間,在公司內部規定早上9點半上班,讓廣告人建立起“早開工”的習慣。日本黛安芬公司前任社長吉越浩一郎則更是花了幾年時間才完成公司“零加班”的轉變。他認為,首先要讓員工認定:加班是件不光彩的事情?!坝袝r間思考優先級、制定工作表,不如把每件事情都規定出完成期限。時間一旦受限,效率自然提升?!?/p>

學習分析問題的本質 看似單純的問題,實際可能是好幾個小問題的集合體。問題分得越細,處理起來就越簡單。

不要耗時間,爭取兩分鐘內做出結論 職場中我們經常要參加極為冗長的會議,花好幾個小時解決一項議題。但實際上,如果沒有充分的信息作為儲備,時間拉長也無濟于事。吉越浩一郎的做法是決定每項議題由誰負責,要求他們備妥“附有審查意見的原案”。

所謂原案,是針對現狀如何、有什么問題、應如何處理、要花多少時間與費用等,要求每項議題的負責人都要事先整理好解決對策,這樣就能讓所有參會人都分享到必要的信息,參與討論時,也能更貼近問題本質。吉越浩一郎說,有時間做漂亮的數據,不如專心做好分內工作。

有效率地做對的事 臺積電創始人張忠謀在從業50多年來,無論是擔任基層工程師,還是總經理、董事長,工作時間一星期從不超過50小時。他稱自己對工作的理念,就是有效率地做對的事。這包含了兩部分:“效率”及“做對的事”。

在職場上由誰來決定什么是“對的事”?主管有70%以上的責任,員工自己則占30%的責任及權力?!皺嗔Α笔侵讣偃缰鞴芤獑T工做的事,員工認為不對,他有權適時反映?!柏熑巍眲t是指員工認為該做的事,不必等主管建議,自己可以主動放手去做。

“效率”則剛好相反,個人要負起70%以上的責任。每個人都應該有效率地去做對的事。有的人會說,我工作缺乏效率是因為“主管要我整天開會?!睆堉抑\會回答:“假如你覺得開會對你沒有幫助,應該跟主管反映。”每個人在工作上都應該展現自主管理的能力。

善用管理工具 員工也可以自己從公司角度找到一些時間管理、效率管理的工具,從內部提升工作效率、增加默契度,減少加班時長,幫大家實現工作生活的平衡。比如在愛德曼公司,可用的工具有如下幾類:

許巍時光范文3

因何正名

兒童虛擬社區的概念由來已久,這個概念提出本身就是為了回避“網游”這一敏感詞匯,只是某些企業假兒童虛擬社區之名,行網絡游戲之實,導致兒童虛擬社區“名不正,言不順”。  IT行業著名營銷專家、贏道營銷顧問機構總策劃鄧超明認為: “一款真正的兒童虛擬社區產品對孩子成長是有益的。因為相對于電視或者兒童玩具,兒童虛擬社區在增進兒童之間的交流、提高兒童智力、增強兒童對社會的適應能力方面都有顯著的作用,因此有必要為兒童虛擬社區正名。”

然而從父母本身來講,虛擬社區與網絡游戲的差別并不是那么顯而易見,因為在表現形式上,兩者共同點很多,例如都是網絡產品,都有角色扮演內容,都充滿卡通形象,都含有游戲內容。這種相似性使得很多家長將“兒童虛擬社區”等同于“兒童網游”,對其加以抵制。  浙江博卡思教育軟件有限公司三大創始人之一、杭州博采廣告有限公司創意總監李煉告訴《廣告主》記者: “兒童虛擬社區重點應放在‘社區’,而非‘游戲’上。盒子世界是一款真正意義上的兒童虛擬社區產品,廣告訴求也集中在這一點。”

如何正名

許巍時光范文4

在貴州省遵義市金鼎山鎮大山深處的一條蜿蜒山路上,每天都能看到一位騎著馬的中年人日出上山日落下山,來回往返從不間斷,他就是扇子林小學校長徐德光,當地群眾都稱他為“馬背上的校長”。

扇子林小學地處大山深處,海拔在1500米以上。學校覆蓋區域地廣人稀、交通不便,最少時只有8個學生,最多時也只有30多個學生。1975年,剛高中畢業年僅17歲的徐德光便自告奮勇到扇子林小學任教,從此他的人生便與深山中的孩子們連在了一起。

由于到學校的路有七八公里長,學生們往返要5個多小時,山路灌木叢生,十分難行,為了方便孩子們上學,剛任教一年的徐德光用了整整一年的時間砍出了一條5公里長的羊腸小道,又用黃土、竹篾夯起3間土屋,孩子們才開始有了讀書的地方。

不僅如此。為了方便運送學校的課本、教具,也為了保障孩子們上學路上的安全,徐老師賣了家里僅有的一頭豬,又借錢買了一匹馬作為交通工具,碰上雨天他便騎著馬到學生家里接孩子上學。山路難行,每次接孩子的途中,徐老師都死死地拉住韁繩,生怕會摔著孩子。九年前,為了保護學生,他從馬上摔下來,斷了兩根肋骨,家人心疼,便勸他放棄,他淡然一笑:“為了深山里的孩子們將來有出息,就算豁出這條命也值?!?/p>

多年來,隨著山民逐漸往山下搬遷,學校規模不斷縮小,山上的老師也陸續下了山,但徐德光堅持了下來,從來沒有離開過扇子林小學,校長一當就是20年。他說,他留下來是為了讓更多的孩子走出大山,看看外面的世界。37年來,他就一直這樣,用自己的艱辛托起了大山的希望:從這里走出去的畢業生有200多人,其中4人考上了大學,20多人考上中專,100多人讀完了高中。

作為一名鄉村教師,他給學生悉心傳授的不僅僅是知識,更教育著學生們做人與處世的原則與方式。學校里的另外一名代課教師陳道坤,已經在這里工作了20年,他正是徐老師第一屆學生中的一個。在外面打工一定比現在800多元的工資高很多,而且現在也轉不了正。但是陳道坤說自己不會走,因為他知道孩子們是多么需要負責的老師。他的另外一個學生陳仁賢捐助了一百萬來為家鄉修繕公路,他說徐老師永遠是自己的人生的老師,他讓自己知道了什么叫“我們”。

而對于徐德光這位年近五旬的“馬背校長”,最讓他開心的事情不是曾連續獲評優秀教師,甚至被特邀參加建國60周年慶典現場觀禮,也不是今年被評為“最美鄉村教師”,而是這條剛剛修好的、可以連通教學點的水泥硬化公路。

熱議銳評

尋找是為發現,發現是為踐行。每一個最美鄉村教師都是一個道德標桿,也是社會學習的榜樣。在整個民族都陷入集體的道德焦慮、道德追問之時,個體以及群體的“最美”,所產生的示范效應,能喚醒真善美的人性,凝聚真善美的力量,提振全社會的“道德信心”。最美鄉村教師們鮮活的形象,必將深入人心,引領社會向前;而他們生動感人的事跡,必將因為發現而轉化為傳遞、傳承、弘揚和踐行的源動力。(堂吉偉德《中國文明網》)

話題拓展

許巍時光范文5

以前這種情況也許是天方夜譚,而現在,它將實實在在地發生在我們的現實生活中。

11月8日,大連高新區管委會、上海宇光科技發展有限公司就投資合作設立大連宇光虛擬網絡技術股份有限公司,成立宇光全球計算機遠程維護中心舉行簽字儀式。虛擬網絡技術將從實驗室走近我們的生活。

神奇的虛擬化技術

電腦不能上網了,怎么還能通過互聯網對電腦進行遠程修復?

宇光科技執行董事兼副總經理顏華解釋道:“我們采用的虛擬網絡技術,已經突破很多舊觀念。就像孫悟空拔下身上的毫毛可以變出好幾個和他一模一樣的孫悟空一樣,通過虛擬技術,我們可以在前端復制出好幾臺虛擬計算機,分別進行上網、辦公、網銀支付等應用。因為各個應用之間是隔絕的,所以這樣本身就減少了病毒侵害的影響。即便病毒入侵系統,也只能損害這些‘毫毛’,真正的‘孫悟空’躲在操作系統的最底層,不可能受到病毒侵害。我們也非常容易對系統進行修復?!?/p>

顯然,這項說起來簡單的技術,需要開發人員對操作系統的內核有精深的研究。

據悉,宇光科技的董事長吉立人早年留學美國,1992年底就職于IBM公司位于美國佛羅里達州Boca Raton市的OS/2操作系統研發中心,并擔任技術經理,曾帶領虛擬技術研發團隊于1994年成功研制出基于OS/2內核的Windows虛擬機。1997年,他大膽提出虛擬網絡(VNS)理論。經過10年發展,宇光科技已經研發成功基于虛擬網絡技術的計算機遠程維護平臺。至此,虛擬網絡技術開始從實驗室研發走入大規模應用階段。

破解市場推廣難題

用戶只要通過互聯網下載一個十幾兆字節的客戶端軟件,就可以享受這種遠程維護服務。整個軟件安裝過程只需要兩分鐘左右。這種嶄新的電腦維護服務模式引起了業界廣泛關注。吉立人表示,大連市政府以及大連高新區管委會的各級領導對這個項目都非常重視,在資金、場地、人員、服務等方面提供了一系列支持,并將此項目納入“吸引海外學子尖端人才歸國創業工程”,給予特別關注。

許巍時光范文6

關鍵詞 光纖傳感 硫化氫 微順序注射-閥上實驗室 熒光素汞 熒光猝滅

1 引 言

硫化氫(H2S)是一種具有臭雞蛋氣味的有毒氣體,是空氣和水源的污染物之一。近研究發現,H2S是繼NO和CO之后又一種新型信號分子,作為一種活性神經調節物質廣泛存在于動物體內,參與并調節動物體諸多的生理病理活動[1]。目前,H2S的測定方法大多局限于傳統方法,如亞甲基藍法[2]、硝酸銀比色法[3]、氣相色譜法[4]等。這些傳統的方法檢出限和靈敏度無法滿足生物樣品中極微量甚至痕量H2S測定要求。而熒光法的靈敏度更高,測定H2S數量級達到10 Symbolm@@ 6 mol/L。熒光素汞具有很強熒光,H2S中S2 Symbolm@@ 與熒光素汞結合,使熒光素汞熒光猝滅,H2S含量與熒光素汞的熒光強度具有良好的相關性。

微順序注射-閥上實驗室(MicroSIA Lab-on-valve,μSIA-LOV)是第三代流動注射分析技術[5],在μSIA-LOV分析系統中,所有的單元操作,如樣品稀釋、試劑試樣的加入、混合以及多種連用技術的結合,使得整個實驗測定過程能夠可控、高效地進行。該系統能將試劑及樣品消耗降低至微升水平,減少了試劑的使用量,適用于長時間監測和試劑比較昂貴、樣品來源受限的分析。LOV系統不僅可以與光纖傳感結合,也可以靈活與電化學[6]、色譜[7]、化學發光[8]、固相萃取[9]、原子熒光[10]等方法聯用。

本研究將光纖傳感技術與微量順序注射-閥上實驗室(μSIA-LOV)結合,以光纖作為傳導介質,將光纖光譜儀、微順序注射分析儀八通閥和氙燈光源連接,用計算機控制,利用該系統自動介觀流控特征與光纖傳感的實時監測相連,可以實現樣品的在線監測。本研究以Na2S為供體,建立光纖傳感-微量順序注射-閥上實驗室檢測腸灌流液中H2S的分析方法,為進一步進行動物在體腸灌流H2S或H2S供體藥物的腸吸收特性研究奠定分析基礎。

2 實驗部分

2.1 實驗裝置

微量順序注射儀(美國FIAlab Instruments公司);光纖光譜儀(QE65000-FL,CCD)、連續氙燈光源(HPX-2000)、200 μm×1 m光纖兩根均為美國Ocean optics公司產品。PB-10型pH計(德國Sartorius公司);實驗流路所用連接管道采用PTFE管(0.75 mm,I.D.)。分別采用安裝有FIAlab for Windows和SpectraSuite 軟件的Windows XP系統臺式電腦對微量順序注射分析儀和光纖光譜儀進行控制。光纖傳感-微順序注射-閥上實驗室儀器裝置:包含一個1000 μL高精密度注射泵、一個棕色濾光8通道的多位閥模塊(LOV),在該模塊上集成了一個中心控制通道、多個工作通道及一個多功能流通池等操作單元;通過軟件調節控制中心通道一端與8位閥上聯通位置,使中心通道與工作通道準確連接,另一端與高精度注射泵相連而構成流動分析系統。一根光纖與光譜儀相連,另一根光纖與氙燈光源相連,兩根光纖探頭插入LOV流通池接口,光路垂直組成熒光測定模式。

2.2 試劑及溶液配制

熒光素汞(優級純, 美國化學服務公司);Na2S?9H2O(分析純, 天津市福晨化學試劑廠);其余試劑均為分析純。實驗用水為二次蒸餾水。

準確稱取0.0159 g熒光素汞,用0.1 mol/L NaOH定容到100 mL棕色容量瓶中,濃度為1.874×10 Symbolm@@ 4 mol/L,冷藏備用,使用時稀釋到所需濃度。準確稱取0.240 g Na2S?9H2O,用水溶解并定容到100 mL,濃度為0.01 mol/L, 4 ℃密封保存備用,使用時用水稀釋到所需濃度。

Kreb-Ringer′s(KR)營養液:準確稱取NaCl 7.8 g,KCl 0.35 g,CaCl2 0.37 g,NaHCO3 1.37 g,NaH2PO4 0.32 g,MgCl2 0.02 g,葡萄糖1.4 g于1000 mL容量瓶中,用水定容,4 ℃保存備用。

系列濃度H2S腸灌流液的配制:將0.01 mol/L Na2S溶液用KR營養液稀釋10倍(1.0 mmol/L),再分別取稀釋液0, 0.05, 0.1, 0.15, 0.2和0.25 mL于5 mL容量瓶中,用KR營養液定容。

供試品溶液:由KR營養液配制的Na2S溶液(5.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L),健康大鼠麻醉后,將KR營養液由活體空腸灌流(蠕動泵流速0.2 mL/min) 30 min,接取供試品溶液于5 mL EP管中,封口4 ℃保存,待測。

2.3 操作流程

實驗流路如圖1所示,在注射泵的驅動下,首先由多位閥的6號口吸入適量載液(0.1 mol/L NaOH),7號口以50 μL/s的速度先后從中心通道吸入50 μL熒光素汞溶液,再以50 μL/s由5號口吸入適量樣品溶液,

再通過6號口以50 μL/s吸入100 μL載液。在注射泵的驅動下,被吸入儲液線圈中的載液推動試劑和樣品迅速混合,形成混合區帶,并充分反應,然后再反向以25 μL/s的流速將混合區帶從連接有光纖的多功能流通池(Flow cell)流出,通過光纖光譜儀讀取反應后溶液的熒光強度。每次測定結束后,用水以300 μL/s流速沖洗整個流路。所有實驗操作均由FIAlab軟件自動完成,上述程序操作分6步,見表1。

3 結果與討論

3.1 熒光素汞熒光光譜

由通道5吸入200 μL熒光素汞(1.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L),得到光譜圖(圖2),結果表明,熒光素汞最大發射波長位于521 nm。

3.2 熒光素汞濃度的選擇及體積

考察熒光素汞濃度(1.0×10 Symbolm@@ 4 mol/L , 1.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L, 5.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L, 1.0×10 Symbolm@@ 6 mol/L)的影響,由于LOV為封閉的管道系統,管徑很小,熒光素汞濃度過大, 會粘附在管道內,清洗使用試劑多、時間長,影響測定效率;熒光素汞濃度過低, 會影響測定靈敏度,故本實驗選擇熒光素汞的濃度為5.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L。 溶液體積越大,混合程度越低,為了確保充分混合、反應完全,本實驗選擇熒光素汞溶液體積為50 μL。

3.3 載流NaOH溶液濃度及體積

根據文獻 [11],熒光素汞在堿性條件下熒光較強增加實驗的靈敏度,本研究考察不同濃度的NaOH溶液(0.01, 0.05, 0.1, 0.2和0.5 mol/L)以及水作為載液對熒光素汞(1.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L)與1.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L Na2S熒光強度的影響(圖3),綜合考慮,本實驗選擇0.1 mol/L NaOH作為載液。NaOH溶液為整個體系提供堿性環境,沖洗管路并推動反應后,溶液全部流過流通池,本實驗采用100 μL的0.1 mol/L NaOH作為載液,即達到上述目的。

3.4 流通池檢測流速

0.1 mol/L NaOH溶液中熒光素汞與1.0×10 Symbolm@@ 5mol/L Na2S反應后,考察通過流通池流速分別為10, 15, 20, 25, 30, 35和40 μL/s時的信號強度。結果表明,流速過慢,會加大對供試品的稀釋效應;流速過快,信號穩定,重現性降低。在流速為25 μL/s時,檢測信號最強且穩定(圖4)。

3.5 干擾物質測定

據文獻[12]報道,含巰基氨基酸可能是內源性H2S的供體,故本實驗在最佳實驗條件下,以5%的最大允許誤差進行干擾測定,考察了L-半胱氨酸、蒜氨酸、高半胱氨酸、胱氨酸、蛋氨酸及大蒜辣素對H2S測定造成的干擾,結果如表2所示。

3.6 性能分析

熒光素汞濃度為5.0×10 Symbolm@@ 5mol/L, 0.1 mol/L NaOH溶液為載液,檢測流速為25 μL/s,檢測波長為521 nm,供試品進樣量50 μL,測定系列濃度硫化氫腸灌流液,獲得在521 nm處的熒光強度,將熒光強度與濃度進行線性回歸,在5.0×10 Symbolm@@ 6~8.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L范圍內,線性方程為y= Symbolm@@ 262.13x+26182(圖5),相關系數r=0.997。

4 結 論

本實驗將微量順序注射-閥上實驗室(μSIA-LOV)系統與光纖傳感技術結合,建立了熒光素汞二元體系熒光猝滅法測定生物樣品中H2S含量的方法。H2S作為一種信號分子,本身是內源性物質,參與和調節動物體多種生理及病理活動,目前對H2S的測定方法大多采用需取樣分析,需要經過多步樣品前處理。本實驗則是在LOV模塊上以熒光測定模式進行樣品測定,簡化了操作步驟,每一步操作采用程序化控制,提高了實驗可重復性和規范性;整個系統微升級的進樣量大大降低了試劑和樣品的消耗,顯著提高分析速度。本方法與光纖傳感相連可實現生物體內H2S的在線監測。

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Fluorescein Mercury Combined with Optical Sensing Micro

Sequential Injection Lab-on-Valve for Determination of

H2S in Intestinal Perfusate

HOU Jun-Feng1, GUAN-Ming1, LI Xin-Xia*2

1(Laboratory on Pollution Monitoring and Control, College of Chemistry and Chemical Engineering,

Xinjiang Normal University, Urumqi 830054, China)

2(College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830000, China)

Abstract A fluorescence quenching method was established for the determination of H2S in intestinal perfusate by optical fiber sensing technology combined with micro sequential injection lab-on-valve (μSIA-lov). In the experiment, 100 μL of 0.1 mol/L NaOH was used as the carrier, and 50 μL of 5.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L fluorescein mercury and 50 μL of sample were selected for the determination. The detection flow rate at the flowcell was 25 μL/s. According to H2S quenching fluorescence at 521 nm, the concentration of H2S in the sample was determined. The detected concentration range of H2S was 5.0×10 Symbolm@@ 6-8.0×10 Symbolm@@ 5 mol/L, and the detection limit was 5.4×10 Symbolm@@ 7 mol/L. Detection result of H2S in intestinal perfusion was 3.8×10 Symbolm@@ 5 mol/L with 3.1% RSD (n=3). This method can be used for the determination of H2S effectively in the samples, which lay the foundation for real-time online measurement of H2S in biological samples.

Keywords Fiber sensing; Hydrogen sulfide; Micro sequential injection lab-on-valve; Fluorescein mercury; Fluorescence quenching

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