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生物技術論文范文1
根據我國農業畜牧業的現有基礎以及對動物生物技術的實際需求，國家應該集中各種力量，著重對生物技術開展基礎性的研究，加大技術的投資力度，對一些利潤高的技術產品進行重點投資，根據我國農業動物生物技術的現有基礎和社會發展變化的主要形勢，預計農業生物技術將在以下幾個領域取得長足發展。
1.分子生物學技術
由于農業養殖日益呈現出規模化與集約化較高的特征，再加上人們對短期經濟效益的集中追求，所以我國傳統的畜禽品種資源將會遭遇越來越嚴重的破壞，其群體數量將日益降低，品種資源的破壞形勢會日益加深，根據這種現實情況，未來農業動物生物技術將在以下分子生物領域進行發展：對我國固定的優良品種或基因進行挖掘與定位；為畜禽的遺傳多樣性進行保護的分子監測技術；我國固有畜禽品種的起源與進化的比較基因組學研究；保存動物遺傳資源的生物技術研究。
2.分子育種技術
我國農業中的畜禽育種工作經過長時間的發展，逐漸由追求數量轉向追求質量，育種方法也逐漸由數量遺傳法轉向分子育種與常規育種相結合的方法，所以分子育種技術的改進將是未來階段我國農業動物生物技術的一個主攻方向，分子育種技術的研究將集中在標記輔助育種技術、數量性狀主基因的檢測和定位技術、動物功能和抗病基因的診斷技術以及試劑盒的研究，通過這些方面的技術研究提高動物產品的質量，實現其最大效益。
3.分子診斷技術
畜禽疫病是對我國畜牧業生產以及產品安全造成主要影響的關鍵因素，畜禽疾病的危害嚴重、流行面廣，潛在危險性較大，一旦發生就會造成較大的經濟損失，因此，利用免疫學、現代分子生物學以及病毒學的相關技術，對我國畜禽的重要疫病進行分子生物學研究是是農業動物生物技術的主要發展趨勢之一，主要包括：重要畜禽疫病的分子診斷、監測、重要畜禽疫病病原的大分子結構與功能研究以及試劑盒的研發。
4.轉基因動物技術轉基因動物是一種將胚胎工程與分子生物學有機結合而研究出來的一種基因工程動物，這種技術是克隆技術的突破性進展，影響動物發育過程中的基因表達，能夠促進遺傳學與發育生物學以及相關學科的發展，是加快動物育種進程、提高育種效率，為瀕危動物提供生存方式的有效方法。
二、結語
生物技術論文范文2
1苯丙氨酸解氨酶
苯丙氨酸解氨酶（Phenylalanineammonia－lyase，PAL）是苯丙烷途徑的第一個關鍵酶。PAL普遍存在于植物和某些真菌、細菌和藻類中，其功能是催化L－苯丙氨酸非氧化性脫氨生成反式肉桂酸（cinnamicacid，CA），而肉桂酸是苯丙烷類次生物質（如黃酮、香豆素、木質素及某些酚類）生物合成的通用前體，因此該酶在植物次生代謝中具有極其重要的位置［14］。多數被子植物中，PAL是一個多基因家族，在一組染色體中含有一到多個PAL基因。PAL亞基通常由小型基因家族編碼（一般2～5個成員），這些基因家族又圖1黃芩苷生物合成途徑Fig．1Biosyntheticpathwayofbaicalin186可分成2或3個亞族，隨植物不同而異。煙草（Nicoti－anatabacumL．）PAL由2～4個獨立基因編碼，而歐芹（Petroselinumcrispum）PAL至少包含4個編碼基因［15］，例外的是火炬松，僅有1個pal基因。Whetten等［16］采用多克隆抗體識別火炬松PAL亞基，獲得cDNA，經PCR擴增后測定pal基因序列，發現其與水稻、豆、甘薯等被子植物的編碼序列存在60％～62％同源性。歐芹中pal基因含有6個內含子，其上游含有一段富含CT的區段［17］。目前已在諸如馬鈴薯（SolanumtuberosumL．）、擬南芥、煙草、黃瓜（CucumissativusLinn．）和大麥（HordeumvulgareLinn．）等植物中，克隆到了編碼PAL酶的cDN段或基因組序列，其它多種植物的pal基因已測序并在GenBank注冊［18］。課題組也已分離獲得粘毛黃芩的pal編碼基因，并進行了相應的序列和表達分析，發現黃芩pal基因與其它植物pal基因具有很高的同源性，從而證實了該基因具有高度的遺傳保守性［9］。
2查爾酮合成酶
包括黃芩苷在內的所有黃酮類化合物的直接通用前體物均是柚皮苷查爾酮，它是由1分子桂皮酰輔酶A與3分子丙二酸單酰輔酶A縮合而成，其中前者來自苯丙酸中間途徑，后者經醋酸經乙酰輔酶A羧化酶催化生成。這個重要的縮合反應就是由查爾酮合成酶（Chal－conesynthase，CHS）催化完成的，這是黃酮類化合物合成中第1個關鍵酶，具有限速作用［19］。自從第1個荷蘭芹的chs基因在1983年以來［20］，迄今已從多種植物中克隆了chs基因，如高粱（Sorghumbicolor）［21］、蘭花（OrchidBromheadiafinlay－soniana）［22］和擬南芥［23］等。chs基因在不同植物類群中保守性較高，一般都含有2個外顯子和1個內含子，而金魚草chs則含有2個內含子［24］。chs基因的外顯子1和2分別編碼60個和340個左右氨基酸殘基，但在序列長度和核苷酸組成方面外顯子2的保守性高于外顯子1，而作為活性位點的4個保守氨基酸殘基位于外顯子2中。chs基因內含子的大小及序列差異都較大。不同物種中查爾酮合酶在氨基酸水平上的一致性很高，約79％～91％，說明其具有高度的遺傳保守性［25］。chs基因啟動子具有多個對環境感受的特異性元件，如接受激發子誘導的ACE元件（ACGTele－ment）［26－27］和H區（H－box）［28］，富含AT元件區［29－30］、以及負調控的沉默子［31］和維持基因轉錄水平的P區［32］。大部分植物的CHS編碼基因是一個多基因家族，如矮牽牛、大豆和豌豆等，特別是雙子葉植物的chs家族基因數目較多，如菜豆中已發現8個chs基因［33］，矮牽牛的chs基因家族包括8～10個成員［34］。雖然chs基因家族中數目較多，但各成員基因編碼區的同源性較高。由于CHS在植物外源基因的表達、細胞的發育和分化、花色素的積累和抗菌、抗脅迫生理過程等起著重要的作用，因此chs基因家族的不同成員往往受植物不同發育時期和組織特異性調控，對不同外源刺激的敏感程度也不同，這個特點與黃酮類物質的功能多樣性相適應［35］。該課題組基于黃芩chs家族，利用同源性克隆方法，克隆獲得了粘毛黃芩chs基因，并從分子水平上驗證了所選植物的chs可能起源于同一個祖先，也反映出黃酮化合物為聚類指標的進化生物學意義，從而說明作為類黃酮代謝關鍵酶的CHS蛋白在自然演化進程中的遺傳保守性和功能穩定性［36－37］。chs基因具有顯著的時空差異性表達模式，如組織和發育時期的特異性表達，在一些植物發育的早期階段CHS在葉片中表達，而成熟植株中主要僅限于花組織中存在；chs基因接受誘導因子調控的特異性轉錄，在很多植物（如矮牽牛、菜豆等）中，外界刺激如脅迫、紫外線和病原體會誘導CHS的快速響應并表達，CHS的這種對外界刺激的敏感程度的差異特點與CHS編碼序列上游啟動子中含有的特異性順式作用元件有關［38］。此外，筆者也發現粘毛黃芩chs基因受到外源甲基茉莉酸的時間依賴性地調控，并建立了其誘導差異表達譜［37］。在基因工程領域，對chs基因調控作用的研究主要集中于植物花色表型和抗逆性狀的遺傳改良，而這種改變實質上也是基于細胞和組織內黃酮化合物的含量調節，例如通過對chs基因的反義或共抑制操作培育顏色變異的轉基因花卉［39］，也可以正調節馬鈴薯中的chs基因增加花色素苷等黃酮類化合物的積累，從而改善其抗氧化能力［40］，而基于煙草轉化系統的研究證實黃芩chs基因在驅動黃酮化合物生物合成的過程中發揮了重要作用［41］。
3黃烷酮3－羥化酶
黃烷酮3－羥化酶（flavanone3－hydroxylase，F3H）是黃烷酮分支點的一個核心酶，其作用是催化5，7，4－黃烷酮C3位的羥化，生成二氫山奈素（dihydrokaempferol，DHK），而該物質則是合成黃烷酮和花色素的重要中間產物［42］。因此F3H也是黃酮化合物生物合成途徑中的關鍵酶，是控制黃酮合成與花青素苷積累的分流節點，被認為是整個類黃酮代謝途徑的中樞。1991年，人們首次獲得f3h基因序列，是從金魚草中克隆出來［43］。目前已經在擬南芥［44］、苜蓿［45］和玉米（Zeamays）［46］中被陸續分離鑒定，且是以單拷貝形式存在，但在甘藍型油菜和紫蘇中則是以多基因家族形式存在，分別含有5～7個和2～3個成員。在這些植物中，f3h基因一般具有3個外顯子和2個內含子［45］。筆者首次克隆了粘毛黃芩的f3h基因，通過系統進化樹分析，從分子水平上驗證了所選植物的f3h可能起源于同一個祖先，也反映出植物間的植物黃酮醇類化合物的含量與植物間親緣關系有一定關系。f3h基因在一些植物中是獨立表達的，如矮牽牛中的f3h基因，而在大多數的情況下，f3h則是和其上游的chs、chi（查爾酮異構酶）基因以及下游的dfr（二氫黃酮醇還原酶）基因協同表達的，這在擬南芥和金魚草中都有相關的報道。此外，矮牽牛和金魚草中f3h基因突變失活則可在阻斷花色素的合成通路，獲得白花的矮牽?；蚪痿~草［43，47］。近期研究表明，通過調控f3h基因的表達能夠有效改變植物花卉或種皮的顏色，基于該基因的遺傳操作已成為花卉育種研究的重要手段［44，48］；而旨在高產黃酮和異黃酮的藥物代謝工程領域，通過反義抑制f3h基因阻斷花青素合成途徑能夠使通用前體柚皮苷更多地流向黃酮和異黃酮，從而獲得促進目標產物的積累，該方式證明F3H是黃酮代謝工程的重要靶點［49］。由此可見，f3h是黃酮生物合成途徑上關鍵的限速基因，其催化反應是黃酮合成調控的的重要步驟。
4小結
生物技術論文范文3
1需要培養建設一支高素質的教師隊伍高校教師的業務水平如何決定培養學生能力的高低。通過教師攻讀在職學位、到高校進修，開展各方面的交流活動，教研室所有教師都要參與實驗、實習、課程設計、大學生科技創新等實踐教學環節，不斷提高教師的業務素質和工作能力，將成為人才培養的保障。
2需要建立科學合理的實踐教學計劃根據具體培養要求，在培養計劃中建立一個基本完整的實踐教學模式。按照實踐教學目標體系，整合實踐項目和內容。在學生入學后的不同學習階段，分別在各個實驗室進行學習，按照循序漸進的教學原則，設置各個課程的驗證型，綜合型實驗，另設置基礎和專業課的實習和實訓，雖然這些課程都有專門的培養方案和教學安排，但如何科學安排好各個課程的銜接，還需深入研究。
3需要研究實踐教學體系的組成按照專業實踐能力培養的自身規律性，首先針對本專業的培養目標，體現理論教學與實踐教學相互聯系，建立符合實際、具有科學性和操作性的實踐教學體系，分別包括了實踐教學基礎訓練（課程教學實驗、專業教學實驗）、實踐教學的依托訓練（畢業實習、科研訓練）、實踐教學核心訓練（各種設計性實驗、畢業論文實驗）、實踐教學補充訓練（社會實踐），這四個訓練貫穿整個學程，構成培訓學生基本能力、綜合能力和創新能力的平臺。教學實踐環節可分為四大類進行：認知實踐：結合基礎階段所學理論，激發學生對本專業后續課程的求知欲望，為學習專業基礎課和專業課提供感性認識；課程實踐：選擇一些專業主干課程，根據每門課程的授課內容和教學進度，安排學生實習，加深學生對授課內容的理解；專業實踐：使學生系統參與專業課的具體實踐，培養應用與創新能力，團隊協作和交流能力。落實到各個專業課程的實踐中；綜合實踐：按本科培養方案的要求，撰寫畢業論文，組織答辯。實驗考核的效果能夠反映平時實驗課的成績，考試的目的是為了促進學習，從而進一步保證實踐教學質量的不斷提高。
4改革實習環節，以社會實踐為補充,充實第二課堂內容學生要能夠綜合運用所學知識了解實際問題、能夠獨立分析和解決實際問題的最好途徑是實習。生物技術專業的課程包括教學綜合實習、專業實習和社會實踐三個方面。實踐性較強的課程都加強了課程教學綜合實習。按照專業培養目標的要求，有計劃有組織地參與社會活動，了解現實社會、認識當今的國情、增強年輕人的學習使命感和社會責任意識，在實踐中進一步完善知識體系，使學生增強適應社會的能力。第二課堂在培養學生綜合素質等方面發揮著重要的作用，如組織課題組活動，參與大學生科技創新項目，到實踐基地參觀實習。在教學實踐環節中實驗考核的效果能夠反映學生對待實驗課的態度，進一步保證實踐教學質量的不斷提高。
生物技術論文范文4
獲得足夠多的微生物種類和數量是有效篩選產油微生物的前提。那么，從外界環境中高效分離純化微生物顯得非常重要，但有同學不能有效地進行實施。就分離產油真菌而言，透氣性好、富含有機質的偏酸性土壤中真菌較多，而有的學生卻隨意從校園一角采土樣進行菌株分離，影響分離所得微生物種類和數量;也有學生在分離過程中，選用的培養基中不添加抗生素(如鏈霉素或氯霉素等)和孟加拉紅，致使細菌、放線菌和真菌交織生長在一起，不利于后續菌株純化。此外，還有學生在篩選到菌株后，僅從菌落形態方面簡單判斷后就將類似菌株丟棄，人為地降低了所得微生物的豐度。
2產油菌株篩選
學生通過查閱文獻不難發現產油微生物篩選常用的方法是脂肪粒計數法。該方法是使用70%蘇丹黑乙醇溶液將細胞內的脂肪粒氧化成藍黑色，細胞質經過0．5%蕃紅復染后成紅色，顯微鏡下統計脂肪粒數而進行初篩［4］。但有學生在實驗前期沒有篩選到產油微生物，了解得知學生初篩時間存在問題。初篩時間過早，會造成一些油脂積累緩慢的微生物漏篩，但菌株培養時間過長也會造成產油優勢菌株細胞內的脂肪粒重疊而產生誤差。
3產油菌株鑒定
當前微生物一般采用多相分類鑒定。為了保證畢業論文質量，開闊學生視野，要求學生同時利用形態學觀察與生理生化特征等經典方法和現代分子生物學手段對所分離得到的產油微生物進行分類鑒定。經典鑒定方法中，產油霉菌以形態特征為主要指標，產油酵母則形態特征和生理生化指標兼用;分子生物學方法采用通用引物ITS1和ITS4擴增其ITS1-5．8S-ITS4保守序列，后擴增產物送上海生工生物工程有限公司進行純化測序;測序結果提交到NCBIGenBank中Blast，獲得同源性較高菌株ITS序列，先利用ClustalX進行多重比對，再用Mega5．0構建NJ系統進化樹，綜合形態和生理生化特征，確定產油菌株的分類地位。4期馬博:生物技術專業本科畢業論文實驗的探索與實踐111實踐證明，經典鑒定方法繁瑣耗時，而分子生物學方法簡單便捷，但實驗技能要求較高，其關鍵步驟是高質量基因組制備和PCR擴增條件優化。微生物基因組質量好壞直接影響后續PCR擴增實驗。雖然多數學生提取的基因組能夠滿足PCR擴增要求，但瓊脂糖凝膠電泳的結果顯示都存在不同程度的彌散拖尾現象，表明制備的基因組有降解或含有RNA、多糖及蛋白質等雜質。那么，基因組DNA提取過程中應該注意哪些呢?一是在水浴保溫期間，搖動不能太劇烈，以防基因組DNA斷裂;二是用等體積氯仿/異戊醇抽提時，上清液應無色，且EP管中的有機相與水相交界處無明顯的雜質，否則應重復抽提。另外，還應在DNA提取溶液中加入1μg/LRNase，以除去RNA，提高基因組質量。PCR擴增實驗精微，需要格外細心。如微量移液器的使用方法和PCR體系中各種藥品的添加順序都會對實驗結果產生重要影響，應及時對學生進行指導。此外，退火溫度是PCR擴增實驗關鍵反應條件之一。退火溫度過低會導致PCR產物雜帶過度，退火溫度過高又擴增不到目的片段。指導教師詳細講解PCR擴增實驗原理之后，學生掌握了PCR擴增實驗方法和注意事項。通過多次實驗，最終確定了所使用引物的退火溫度，產油霉菌和產油酵母分別為56℃和54℃。
4結論
生物技術論文范文5
1選取合適的教材
發酵工程優秀教材很多，像《微生物工程工藝原理》、《微生物工程》、《發酵工藝原理與技術》、《生物工藝學》、《現代工業發酵調控學》、《發酵工藝學》等，我們在前些年的教學過程中也選用了多個版本的《微生物工程》，結合我校生物技術專業學生的知識體系和培養方向，目前我們選用全國高等學校發酵工程專用教材、教育部普通高等教育“十一五”國家級規劃教材華南理工大學姚汝華教授編寫的《微生物工程工藝原理》，此書按照發酵工藝操作單元的先后順序排布各章，脈絡清晰，系統性好，該書在難易程度上很適合我們的學生，但是該書側重于發酵機制的講授，發酵工藝和設備沒有涉及。因此，在前期教學積累的基礎上，我們授課團隊正在努力編寫一本適合于我們自己的教材，增添發酵工藝及設備，以及基因工程產品的發酵工藝。同時為提高學習的廣度和深度，為學生推薦了《發酵工藝原理》、《發酵設備》、《發酵工程實驗技術》等參考書。
2開展發酵工程實驗，提高學生綜合素質
發酵工程是利用工業微生物的特定性狀和功能，通過發酵過程來生產目的產物或將生物直接用于工業化生產的技術體系，是建立在發酵工業基礎上，與化學工程緊密結合的一門學科，它是連接生命科學研究與應用的橋梁[7]。在基因工程和細胞工程的應用中，要想把定向改造的物種轉化成產品，也需用到發酵工程技術。發酵工程實驗開展的場所是發酵罐，這是發酵工業獨有的特點，同時有一套嚴密的工藝流程讓發酵原料通過菌種吸收轉化成我們所需要的發酵產品，發酵周期長，步驟繁多。通過發酵工程實驗課程的學習，培養學生實際動手操作能力，讓學生親自動手操作發酵罐，開展發酵罐空消和實消操作，以及常規發酵產品如酒精、檸檬酸、青霉素的發酵，使學生真正的達到學以致用，同時又鍛煉了學生的自主性、創作性和責任心。師范院校的理科學生，普遍缺乏工藝概念，但他們又非?？释私庹嬲纳a過程。我們針對發酵工程的主要內容，組織學生到啤酒廠、白酒廠、制藥企業開展生產實習，使學生親自到白酒、啤酒和藥物的生產線上了解工藝流程，切切實實的把課堂上學到的理論知識與生產工藝聯系起來，學生反映收獲很大?？傊?，發酵工程實驗集成度較高，牽涉到生物化學、微生物學、分析化學、有機化學、發酵工藝學、化學原理等學科的實驗內容，有別于普通實驗課程的是工廠生產實習，真正做到理論實踐相結合，最終達到學以致用的培養目的。
3改進教學方法，切實提高學生創新能力
教學方法的改革，首先取決于教師本身的學術水平和綜合素質的提高，教學方法改革服從人才素質培養，以大面積提高教學質量為目標，和教學內容的改革密不可分。生動、豐富的教材，有價值的有說服力的理論，以培養學生學習和實踐的態度、思維以及能力的開放式教學，無疑會激發學生的學習興趣。從某種意義上說教學的目的是教會學生“學會學習”，“授人以魚，不如授人以漁”。
3.1案例教學
發酵工程是一門實驗實踐極強的學科，知識的歸納和總結是建立于具體的發酵機制和工藝案例的基礎上。在授課過程中，典型的案例不僅使課堂生動形象，而且使學生容易理解和記憶，觸類旁通，達到知識遷移的目的。例如在講青霉素的發酵這部分內容時，通過詳細講解青霉素的發現，引出偉大的科學家弗萊明，進而講解青霉素發酵的發酵機制、過程控制、提取及純化相關內容，學生被激起興趣，學起來也容易接受。學習之后，可以引導學生進行討論，如抗生素的種類、我們生小病的時候用到了哪些抗生素、抗生素對能治療那些疾病、濫用抗生素有何危害等等問題，使學生從思想上真正理解“抗生素是一把雙刃劍”，從而在以后的生活中學以致用，進而影響身邊的人及下一代合理利用抗生素，為社會進步做出貢獻。
3.2啟發、討論式教學
講課的過程中首先講授難點、重點，善于提出問題，讓學生跟著老師的思路走，隨著一個又一個的問題啟發學生思考、歸納、總結。比如在講授發酵過程的控制這部分內容開始時，引入酸奶的發酵。酸奶在生活中很普遍，同學們也不陌生，有的同學家做過酸奶，因此對酸奶的發酵還有一點常識，接受起來更容易一些。首先提出問題，酸奶發酵的原料和菌種從哪里來？酸奶發酵是好氧發酵還是厭氧發酵？發酵多長時間合適，夏天和冬天發酵時間一樣嗎？通過這些問題，啟發學生思考討論，最終引出酸奶的發酵工藝及注意事項，隨后在實驗課時讓每位同學親自動手做一款自己喜歡的酸奶，鞏固和吸收理論學習。
3.3比較歸納教學法
比較式教學法通過對不同知識點的對比分析，找到其相同和不同處，在比較的過程中對知識點歸納概括，有助于從本質上理解和記憶知識。比如在講授培養基的制備過程中，讓學生比較種子培養基與發酵培養基的相同點和不同點，說出兩種培養基C/N比有何不同及不同的原因是什么。又比如在講培養基的滅菌時，在講述了分批滅菌和三種常見的連續滅菌流程連消塔——噴淋冷卻流程、噴射加熱——真空冷卻流程、薄板熱交換器連續滅菌流程之后，讓學生對分批滅菌和連續滅菌進行對比總結，學生就容易理清楚，弄懂復雜的內容。
4優化考試模式，重在平時學習的思考與探討
在發酵工程實驗及理論教學考核方法中，一是包括到課情況。在開課之前詳細向學生講述發酵工程課程在生物技術專業的應用及其重要性，課程的講授和考核方式，通過到課率來約束學生學習及實驗的自覺性。二是考核內容和考核方式多樣化，加強課堂考核、作業考核，平時考核與期末考核成績的比例由原來的3∶7加大到6∶4，綜合反映發酵工程課程實踐性強的特色。三是實踐教學實施“以考促訓，以賽促練”，強化技能培養，規定技能考試不過關，不允許參加理論考試。四是在教學中注重因材施教和個性化培養。
5小結
生物技術論文范文6
摘 要： 畢業論文是高等學校本科教學的重要環節，考查本科生專業理論知識和基本操作技能的綜合運用能力，其質量是高校辦學水
>> 生物技術專業本科畢業論文教育的新思考 美術學專業本科畢業論文指導課程面臨的現狀問題分析 英語專業本科畢業論文寫作問題的調查與分析 淺談改革本科畢業論文的教學實踐――以生物技術專業為例 生物專業本科畢業論文質量提升的改革探索 美術專業本科畢業論文寫作常見問題分析 英語專業本科畢業論文寫作問題分析及對策 理科專業本科畢業論文出現的問題及其解決措施 國貿專業本科畢業論文選題與寫作問題的剖析 數學專業本科畢業論文存在的問題與對策研究 國際貿易專業本科畢業論文寫作存在的問題與對策分析 濰坊醫學院藥學專業本科畢業論文存在問題的分析和對策 英語專業本科畢業論文寫作的現狀分析 物流管理專業本科畢業論文主要問題及對策研究 教育技術專業本科畢業論文寫作分類指導探究 英語專業本科畢業論文質量分析與對策 理工類專業本科畢業論文寫作現狀調查與分析 會計學專業本科畢業論文教學中的問題及對策 開放教育英語教育專業本科畢業論文存在的問題與措施 獨立學院英語專業本科畢業論文存在的問題及對策 常見問題解答 當前所在位置：l.
[2]曹運長，文紅波，喬新惠.提高生物技術專業本科畢業論文質量初探[J].西北醫學教育，2015，23（1）：33-35.
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