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微生物培養基報告范文1
方法：在對微生物檢驗中，探討培養基的相關配制、滅菌、性能測試、無菌試驗和儲存等方面，探討微生物檢驗中培養基質量的控制對策。
結果：在微生物檢驗中，培養基配制所用的容器選用玻璃或者不銹鋼等制品較合適，采用離子交換水和蒸餾水；在對培養基進行滅菌的前后要對pH值進行測定；在自行對培養基進行配制的過程中，要嚴格按照標準規定，對每次的支配做好詳細記錄；用于配制培養基的電子天平或者酸度劑要每年都進行檢定。
結論：微生物檢驗中要保證對培養基治療的控制，采取相應的控制對策，才能夠保證微生物檢驗的可靠性和準確性。
關鍵詞：微生物檢驗培養基質量控制
【中圖分類號】R4【文獻標識碼】A【文章編號】1008-1879（2012）11-0026-02
培養基為微生物的生長繁殖或者積累代謝等提供了所需的營養基質，也是微生物檢驗工作的基礎，微生物檢驗中最重要的工作環節就是培養基的使用和配制。培養基的配制是否合格，對微生物的鑒定、分離、生長和檢驗的結果起到很重要的作用，因此對于培養基質量的控制是至關重要的。但是隨著商品化的發展，成品培養基和干燥培養基也在迅速發展，由于行業的設備和生產工藝較落后，對于培養基質量控制的方法不夠健全，加上市場的監管薄弱，這些因素都嚴重影響了培養基的質量。保證實驗室的環境能夠適應培養基的配制，讓培養基的質量得到有效控制?，F在對控制微生物檢驗中培養基的質量控制對策進行探討，報道如下。
1資料和方法
1.1一般資料。自制培養基要嚴格按照處方的要求，培養基的成分中大多數是生物制品，不同批次產品在質量上也存在差異性，因此要對處方的要求做好詳細的記錄，注意成分的添加順序，能夠保證分裝滅菌前各成分之間能夠互溶或者完全均勻。在對微生物檢驗中，探討培養基的相關配制、滅菌、性能測試、無菌試驗和儲存等方面，探討微生物檢驗中培養基質量的控制對策。
1.2方法。
1.2.1為了防止離子混入培養基，對微生物的生長造成影響，配制培養基的容器不適合選用鐵或者銅，培養基的含銅量不宜超過0.3mg，否則不利于細菌的生長；培養基中含鐵量不宜超過0.14mg，否則對細菌毒素的產生會起到妨礙作用。培養基配制所用的容器選用玻璃或者不銹鋼等制品較合適，玻璃器皿選擇中性硬料的玻璃，防止培養基酸堿度受到影響。
1.2.2對培養基的用水進行配制，應該選用離子交換水或者蒸餾水，因為二者不含雜質。自來水或者井水里面鈣和鎂等元素的含量較多，經過高壓滅菌之后易出現沉淀現象，不符合配制培養基的質量要求。對培養基的pH值進行校準，微生物正常的生長代謝離不開合適的pH值范圍。不同的微生物需要的pH值不同，因此在配制的過程中要注意對培養基的pH值進行校準。培養基要求的pH值是經過高壓滅菌后的值，經過滅菌后培養基的pH值會下降，能夠對pH值進行更好的掌握。
1.2.3培養基一般會采取高壓蒸汽式滅菌，按照廠家提供的要求進行滅菌，對已經配制的培養基要立即進行滅菌，避免微生物繁殖消耗養分，讓培養基的酸堿度得到改變。自行對培養基進行配制時要嚴格按照規定標準進行，對每次的支配做好詳細記錄，能夠在出現問題時，通過這些資料對問題原因進行追查。如果使用的是商品培養基，在購買的時候要向通過認證的廠家所要相關檢測報告。商品培養基的配制采用的標準要根據使用的目的進行選擇。
2結果
在微生物檢驗中，培養基配制所用的容器選用玻璃或者不銹鋼等制品較合適，采用離子交換水和蒸餾水；在對培養基進行滅菌的前后要對pH值進行測定；在自行對培養基進行配制的過程中，要嚴格對每次的支配做好詳細記錄；用于配制培養基的電子天平或者酸度劑要每年都進行檢定。
3討論
做好對培養基的滅菌和無菌試驗，對于容器較大的培養基，在滅菌時間上要進行適當的延長。對于特殊的培養基，要按照要求進行高壓滅菌，高壓后進行迅速冷卻，避免因為長時間保存影響到營養成分。對滅菌有不同要求的培養基不能夠集中滅菌，做好滅菌記錄，不能夠進行重復式的高溫滅菌。對于配制好的培養基，要進行無菌試驗，保證滅菌的效果。如果配制大量的培養基，可以采取抽樣的方法進行無菌試驗，對樣本進行觀察，沒有細菌生長的培養基才能被使用。即使之前做過無菌試驗，但是在接種樣本時，要對液體培養基的顏色、是否有長菌、有沒有脫水干裂的現象進行觀察。
對培養基的性能進行測試和貯存，基礎的培養基細菌的生長要發育良好，而且能夠充分體現出細菌的特征。在對培養基進行選擇上，應該選擇已知的陽性和陰性菌進行接種培養，保證應該有的一些生化反應的能力。對于商品培養基，沒有開封的保質期應該為2到3年，已經開封的保質期為6個月，商品培養基要貯存在陰涼干燥的環境下，避免有強烈的光直射，對于已經過期的培養基進行排除，成品培養基不適合放在冰箱里貯存，應該在保質期時間內使用。滅菌之后的培養基保存的有效期不同，不能夠做統一的規定。滅菌后不可以立即就使用，要避光，在干燥的環境下保存。
微生物檢驗工作的基礎就是控制好培養基的質量，關系到檢驗工作的可靠性和準確性。每年請專業的機構對配制培養基所用的酸度計和電子天平進行檢定，對培養箱、高壓滅菌器和無菌室紫外線的等進行定期的檢查，預防因為忽視環節而導致培養基出現質量問題，讓微生物的檢驗偏離了科學性和客觀性。培養基的質量問題能夠直接影響到微生物的檢驗結果，因此要保證對培養基質量的控制，避免出現檢驗誤差。采取相應的控制對策，才能夠保證微生物檢驗的可靠性和準確性。
參考文獻
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微生物培養基報告范文2
[關鍵詞] 微生物學檢驗；方法學驗證；中國藥典；食品安全
[中圖分類號] R446.5 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2012）33-0069-02
目前我國食品衛生在保證保?。üδ埽┦称返陌踩矫?，普遍采用的是微生物學檢驗，按照我國目前的食品衛生管理條例[1]，我國保健食品衛生應該采用微生物學檢驗，因此，為了全面了解國標（GB/T4789—2003）[2]方法驗證食品衛生微生物學檢驗是否具有合理性，研究人員依照《中國藥典》（2005年版）[3]微生物學驗證的相關要求入手研究，采用大腸桿菌和枯草桿菌在培養基里培養實驗并且采取微生物檢驗方法，對我國生產的一些保健食品進行驗證，其中包括各種型號的口服液、藥丸、沖劑等等，來探討保?。üδ埽┦称沸l生微生物學檢驗方法的重要性。通過幾種實驗的方法，有力地說明采用我國醫藥國家標準存在不完善的地方，同時對此提出一些合理的建議。
1 實驗材料
1.1 實驗樣品
牙周康膠囊、感冒軟膠囊、紳寧寶膠囊、天丹通絡膠囊、斯達舒膠囊、白伺丸膠囊、天然培旦陛牌70無蠟蜂膠液、復方蘆薈膠囊、清熱暗瘡膠囊、消炎靈膠囊、獨一味膠囊、糖尿樂膠囊、植物降糖膠囊、蝮蛇木瓜膠囊、坤復康膠囊、京都念慈庵靈芝蜜、頭孢地尼膠囊。
1.2 實驗用培養基
實驗用培養基包括酵母膏、葡萄糖培養基、高氏合成一號瓊脂、酵母膏、蛋白胨瓊脂、醋酸菌培養基、營養肉汁瓊脂、固氮菌培養基、玉米粉培養基、乳酸菌培養基Ⅱ、蛋白胨。
1.3 實驗用菌種
實驗用菌種包括大腸桿菌、沙門氏菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、福氏志賀氏和乙型溶血性鏈球菌。
2 實驗方法及結果
2.1 制備實驗用菌液
①先取在36℃環境中培養過的大腸桿菌、枯草桿菌、黑曲霉菌、福氏志賀氏肉湯培養物各3 mL，適當加鹽水20 mL，以20倍稀釋至（100～200）cfu/mL，用作活菌計數使用[4]。②在26℃環境溫度培養19～23 h的白色念珠菌，再取其改良馬丁培養液2 mL，緩慢加鹽水20 mL，20倍稀釋到（100～200） cfu/mL，用作活菌計數使用。③在26℃環境溫度培養黑曲霉菌培養物1周左右，然后緩慢加鹽水4～5 mL，吸取出黑曲霉菌的菌液，用標準比濁管比濁，當菌液濁度一定時，再取2 mL適當加鹽水20 mL逐管20倍稀釋至（100～200）cfu/mL，用作活菌計數來使用。
2.2 制備實驗用供試液
標準稱取樣品26 g，適當添加0.15%的氯化鈉稀釋到230 mL，制成1∶10供試液。
2.3 驗證酵母菌和霉菌數計數方法
①采用常規法 取先前配好的1∶10的供試液2 mL，在培養基上分別接種6株菌株60～80 cfu，然后再加16～22 mL的瓊脂培養基，等供試液凝固后再放置到規定的條件下培養，然后記錄實驗結果并且計算菌株的回收率，回收率的計算公式為：S=（W-H）/D*100%。S為加菌回收率，W為實驗組的平均菌落數，H為供試品對照組的菌落數，D為液組的平均菌落數。②采用培養基稀釋法 每個容器加入供試液0.3 mL，然后接種試驗菌株60～80 cfu，過30 min再加上瓊脂培養基18～22 mL，等培養液凝固后將其放置在規定的環境下培養。然后記錄實驗結果并且計算菌株的回收率，菌株的回收率計算公式跟上面采用常規的方法一樣[5，6]。
2.4 驗證控制菌檢查方法
保健類食品通用標準（GB-16740）中明確規定：保健菌應對大腸桿菌[CMCC（B）44102-22]、金黃色葡萄球菌[CMCC（B）26003-22]、溶血性鏈球菌[CMCC（B）32210-20]、志賀氏菌和沙門氏菌[CMCC（B）50094]等進行檢驗。分別取≤100 cfu/mL的菌懸液1 mL加入相應的檢驗對象的培養基中進行陽性對照，同時應設立不加有陽性菌的菌培養基作為實驗對照組與陰性菌作為對照，特別注意的是要對供試品進行驗證檢驗，確保其對檢驗結果無任何影響[7]。
2.5 實驗結果分析
鑒于我國的保健食品微生物污染問題比較突出，而植物降糖膠囊按國標的方法檢驗菌落數為0，但是采用薄膜稀釋卻為6000，檢測結果千差萬別，所以有些保健產品在控制菌檢查過程中存在漏檢、誤檢。這就充分說明了我國目前采用的方法驗證是不完善的。
2.6 實驗的注意事項
2.6.1 對檢驗人員的素質要求 保健功能的食品微生物檢測的工作中充滿了實驗性，食品微生物檢驗工作中對儀器和設備的標準也是非常多的，同時儀器和設備的正常運行也是檢驗工作能夠順利完成的必備條件。因此工作人員在實驗室中的儀器設備進行安裝、調試、檢驗和使用過程中都應嚴格按照規章制度執行，并確保所處環境符合要求。良好運行儀器和設備的同時還應注意對其進行保養，檢驗人員應定期進行檢查和維修，并在使用的過程中應做好監測、維修記錄，尤其要注意對儀器和設備的使用年期。
2.6.2 對儀器設備的要求 在食品微生物檢驗的過程中要保證所有藥品、試劑、培養基等符合要求，其藥品和試劑的純度必須在AR級以上，同時藥品和試劑的提供廠家必須具備專業素質，確保藥品和試劑等符合相關的質量標準，同時在儲存過程中應注意防潮、防結塊等。
溶劑使用過程中應注意：①溶劑的選取必須符合相關標準。②根據不同試劑的性質不同，應選擇不同的盛裝容器，對易揮發的試劑選擇的試劑瓶必須要帶塞，具有易分解性的試劑應選用深色試劑瓶，其中棕色瓶最佳。③對變質溶液應立即停止使用。培養基在配制過程中應注意：①必須在指定的容器中完成培養基制備工作。②培養基的配制過程中應嚴格按照檢驗項目的規定進行，不得隨意更改藥物的劑量。③配制培養基的水使用蒸餾水最佳。④配制培養基時應注意對pH值的調整，不同微生物的pH值情況不同。⑤注意培養基的存放工作，溫室條件下的有效期為2周。⑥為了確保使用的培養基符合要求，在使用之前應做無菌培養試驗和效果實驗。
3 保健食品微生物檢驗質量及意義
目前，致命菌和微生物引起的安全問題被認為是最重要的食品安全問題。據了解每年發生食物中毒的多達200萬人，主要由于食物不干凈或者食物中有害的微生物所導致的，因此對食品進行微生物檢驗是十分必要的。
3.1 食品微生物檢驗內容
食品微生物的檢驗主要是指對食品污染程度指示菌檢驗和食品中致病菌的檢測。其中污染程度的檢測主要是指食品及生活飲用水的污染程度，方法有兩種：①在一定條件下培養食品及飲用水的樣本，檢驗其含細菌菌落個數。②根據人類或畜生的糞便中的大腸桿菌在一定的存活環境，它能發酵乳糖、產配、氧氣的革蘭染色陰性無芽孢桿菌，根據糞便污染指標來評定生活食品及飲用水的衛生質量。食品中的致病菌包括金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和志賀氏菌等，因此也應明確該類微生物的數量[8]。
3.2 實驗設施及環境
無菌實驗室的建設應符合GB19489的規定，特殊設備應放置在特殊環境下，應符合無回路的原則，在時間和空間上有效隔離各種檢測活動，確保檢測樣品的完整性，同時按操作規定程序應采取預處理措施。
通過以下方法可以有效地減少污染：①紫外線消毒法：用220 V、30 W的紫外線燈垂直照射在1 m高度處，輻射強度應高于70 μW/cm2，確保每立方米不少于1.5 W的紫外線光。②臭氧消毒法：在無人條件下，采用20 mg/m3濃度的臭氧作用30 min以上，使無菌室保持封閉狀態，在臭氧濃度≤0.2 mg/m2時再恢復作業。③物理方法：無菌室內應具有光滑的墻面、防滑地面并且墻、地、天花板間應有弧度連接；避免人為差錯的出現；防止異物或有毒害物質及微生物污染食品，實行全過程質量監控管理方式[9]。
3.3 生產過程中食品質量的控制措施
①在食品生產過程中應明確控制點、控制限值、監控對象、錯誤補救措施，不斷摸索生產過程中的質量和衛生關鍵，將關鍵點做好記錄。②生產人員和機械設施應具備對生產環境的適應能力，準確地控制生產過程中關鍵的環境溫、濕度和空氣凈化程度等指標，適時進行檢測并提供報告。③做好審核工作，產品質量監管部門應對產品進行抽查審核，對審核不合格的產品返工重新生產等。同時在生產過程中出現的異常情況應及時做好記錄并報告產品監管部門，產品管理部門應對不同的情況進行必要的調查并記錄等處理。
3.4 保健食品微生物檢驗的意義
目前我國保健食品微生物中存在的污染問題日益顯著，我們曾經對22中品種的保健品按照GB/T4789-2003食品衛生微生物學檢驗方法進行檢驗，發現不合格率已經達到了10%以上。檢驗結果顯示出我國保健食品安全存在很大的問題，檢測過程中統計檢測結果發現，主要存在菌數超標、致病菌檢測不合格的現象。由此可知對保健食品產品的方法驗證是十分必要的[10]。
4 總結
通過以上實驗，采用傳統方法對菌株在培養基中培養模擬保健食品的受微生物污染計數，可以得到以下結論：依據國家建議的保健食品衛生微生物檢驗方法，與采用培養基稀釋法來對保健食品受微生物污染的檢測存在很大差別，這就是說目前我國采用的國家標準存在缺陷，從保健食品的安全考慮，應該在食品生產最后階段添加一項確認保健食品衛生微生物檢驗方法的有效性工作，確保保健食品沒有受微生物污染，以此提高保健食品的質量級別。
[參考文獻]
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微生物培養基報告范文3
全自動菌落計數／分析儀激發微生物快檢全新創新應用
迅數自動菌落計數儀／分析儀(圖1)結合常規微生物培養基，只需操作PC，一臺儀器即可實現8大創新應用。
菌落總數的自動計數
在菌落自動計數方面，儀器可以處理傳統的傾注法平板，涂布法平板，也可以處理螺旋接種平板和濾膜法平板；這項功能可以促進環境衛生、食品安全檢驗中“菌落總數”測定項目的自動化實施。自動計數菌落的速度高于500個菌落／秒，最小可以分辨的菌落直徑可達0.01mm：可構建專用計數模板以適應復雜實驗室環境，計數誤差控制在10％以內?！把笖怠笔遣捎米疃嗟淖詣泳溆嫈祪x品牌。
顯色培養基致病菌菌落自動計數
2010年國家頒布了新標準GB4789.3-2010《食品衛生微生物學檢驗大腸菌群計數》。標準中的第2法――大腸菌群平板計數法，最少只需42小時即可得大腸菌群數。新標準中的大腸菌群平板計數法分兩步：VRBA平板計數和BGLB肉湯管復發酵證實。第一步：VRBA培養基培養后，對平板上大腸菌群的典型菌落進行計數，計數的要求是：選取菌落數在30～150的平板，計數典型大腸菌群菌落――“紫紅色，有沉淀環，且直徑不小于0.5毫米”的菌落。第二步：證實實驗，然后將證實實驗中的陽性管比例數乘以上一步計數的菌落數，再乘以稀釋倍數，即得每克(或毫升)樣品中大腸菌群數。
迅數全自動菌落分析儀在GB 4789.3-2010上的快速計數應用：迅數儀器的自動菌落計數能力可幫助實驗人員快速準確選取“菌落數在30～150的VRBA平板”；利用彩色高像素CCD成像及Colonfast圖象智能識別軟件，迅數菌落儀能迅速識別“紫紅色，有沉淀環，且直徑不小于0.5毫米”的大腸菌群菌落，只需1秒就計算出大腸菌群典型菌落數，實現大腸菌群計數的快速檢驗。
螺旋接種螺旋平板自動計數
螺旋接種平板計數方法是美國FDA從上世紀80年代開始采用，中國SN行業標準“食品和化妝品中的菌落計數檢驗方法――螺旋平板法”，于2009年2月1日正式在全國實施。儀器“螺旋接種平板分析模塊”根據美國FDA螺旋計數法則和中國SN標準指導進行螺旋平板的自動分析計數。如果企業購置螺旋接種儀，將不必再重復購置螺旋菌落分析儀。
培養基質控檢驗／菌落形態分析
儀器的菌落形態分析功能可以自動完成對平板上所有菌落的形態分析(直徑、面積、圓度等)和直徑分布統計，幫助微生物實驗室進行培養基質量控制的生物評價(如生長率實驗、菌落平均直徑／標準偏差計算等)。中國藥品生物制品檢定所培養基室從2004年底就開始使用迅數菌落儀做培養基質量控制。3M Petrifilm細菌總數測試片自動分析計數
3M Petrifilm測試片法是2008年進入國家標準的菌落總數測定新方法，受到基層食品微生物實驗室的極大歡迎。迅數G型菌落分析儀一機多用，支持最新食品衛生微生物學檢驗國家標準GB4789-2008中“3M Petrifilm細菌總數測試片”的自動分析。
微生物限度檢查濾膜平板自動計數
自動完成限度檢查實驗中濾膜法平板和培養法平板的菌落計數工作，并保留原始實驗圖象作為最完整的實驗記錄保存。
管碟法／紙片法抑菌圈自動測量
對管碟法／紙片法平板上的任意位置、多個抑菌圈的自動測量，準確、客觀、重現性高。
效價測定：儀器在完成抑菌圈自動測量的基礎上進行抗生素的二劑量法生物效價測定。
抗生素殘留測定：在抑菌圈自動測量的基礎上進行抗生素殘留量測定。
藥敏分析：儀器在完成抑菌圈自動測量的基礎上與自帶內置美國CLSl的紙片擴散法(KB法)抗微生物藥物敏感性判別標準數據庫進行比對，自動完成待測菌的藥敏特性判斷。
β-內酰胺酶類藥物(金玉蘭酶)檢驗：迅數“抑菌圈測量”模塊對單碟(每碟含4-12個抑菌圈)測量時間小于1秒，可在自動完成平板上多個抑菌圈準確測量的基礎上結合報告“β-內酰胺酶類藥物檢驗結果陽性或陰性”的衛生部新標準規定，輕松實現舒巴坦敏感β-內酰胺酶類物質是否存在的自動化分析。
環境和測試用水質量控制
環境監測：空氣、水，實驗臺表面等的細菌數量定量和實驗平板圖片保存；
消毒監測：檢驗手和高壓消毒物品的消毒滅菌效果的細菌定量；
測試用水質量控制：支持對含低量微生物的水樣進行微生物定量的濾膜法平板計數。
菌落計數器的應用缺點分析
目前，大多數實驗室仍采用傳統的肉眼結合菌落計數器的計數方法，即借助放大鏡的觀察，用計數筆點擊每一個菌落，計數器計數每一個點擊產生的壓力電子脈沖得出總數。該方法有以下幾大缺點：
識別和記數錯漏：所有的計數都依靠對壓力脈沖產生次數的記錄，不同人員的操作產生的壓力不同就難免產生漏記，而且計數的結果也因操作人員對菌落的識別經驗不同而產生差異，系統偏差較大。
標記和修正不便：肉眼計數和菌落計數器計數都依靠計數筆在被統計的菌落上留下墨水筆跡來進行標記，因此在存在密集菌落的情況下就標記不便，而且發現誤統計時需擦去墨水痕跡導致修正不便。
效率低下：肉眼計數和菌落計數器計數都需要人工用肉眼識別每一個菌落，因此一旦樣品較多就會耗費大量的時間，影響研究或是結果報告的效率。
原始結果無法保存：在做完統計后，留下了一個統計數字，而對記錄和驗證實驗結果很重要的培養平板表面菌落生長狀況卻因為平板的洗掉而無法保存。
菌落計數／分析儀的應用優勢
菌落計數／分析儀器的原理是將獲取的菌落圖片數碼化，根據菌落目標和培養基背景間的偏差(顏色和亮度差異)所顯示出的數學表達不同，將目標從背景中智能識別出來。
“人工計數模式”保留了菌落計數器的工作原理和工作方式：替代菌落計數器的放大鏡軟件可以對獲取圖象做任意比率放大，觀察更輕松；替代菌落計數器的壓力脈沖計數筆儀器可以讓我們用鼠標點擊留下標記來替代脈沖筆點擊留下墨水點，計數更輕松更準確更衛生；儀器計數完畢自動生成報告。
微生物培養基報告范文4
[關鍵詞] 純化水；微生物限度檢查；薄膜過濾法；檢驗量
[中圖分類號] R927 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）06（c）-0004-03
[Abstract] Objective To establish a more scientific and reasonable purified water microbial limit test method. Methods Membrane filtration method （sample quantity： 1 mL and 10 mL） were used to do the test， and nutrient agar， rose bengal agar medium， plate count agar and R2A medium were used to demonstrate the microbiology separately. Results Membrane filtration method （sample quantity： 10 mL） and R2A were better than the routine method and the other medium with a much higher occurrence of total aerobic plate count. The detection rate was 1-2 times higher than the rate of other method and medium. Conclusion The selected testing sample quantity and culture medium are optimal， and the optimized test method will reflect the real quality of the purified water. The study will provide support for the testing improvement and quality control level.
[Key words] Purified water； Microbial limit test； Membrane filtration method； Sample quantity
《中國藥典》2010版、2015版純化水微生物限度檢查中要求使用薄膜過濾法進行檢查[1-2]，但未對薄膜過濾法的檢測量等進行明確規定。目前常被采用薄膜過濾法檢驗量1 mL。已有研究表明，薄膜過濾法1 mL和平板計數法1 mL兩種方法的檢測結果一致，無明顯差異[3]，可見采用1 mL檢驗量并不能體現薄膜過濾法的優勢。故薄膜過濾法1 mL的檢測方法符合性、嚴謹性不夠。
《歐洲藥典》[4-5]、《美國藥典》[6-7]和《英國藥典》[8-9]對純化水檢測方法有不同的規定和側重點。目前，大部分出口歐美市場的制藥企業，均會按照目標出口國的國家藥典要求進行純化水檢測，但對于這些檢測方法的樣品檢驗量，國內未見研究[10]。
本試驗在分析2010～2012年三個年度純化水微生物限度檢測報告的基礎上，擬以自制純化水為研究對象，基于中國和歐美藥典的方法，對比研究了不同方法和培養基的檢測效果，明確了最佳檢驗量，同時明確了更靈敏的培養基，建立了更科學的純化水檢測方法。該方法的建立對于提高純化水微生物限度檢查的有效性、真實性和簡便性具有重要的現實意義，并與國際標準接軌。
1 材料和設備
1.1 材料
純化水（石家莊以嶺藥業股份有限公司）。
1.2 試劑及培養基
氯化鈉（天津大茂化學試劑廠）；磷酸二氫鉀（天津科密歐化學試劑有限公司）；磷酸氫二鈉（天津博迪化學試劑廠）；蛋白胨培養基（北京三藥科技開發公司）；營養瓊脂培養基（縮寫NA，北京三藥科技開發公司）；玫瑰紅鈉瓊脂培養基（縮寫RBA，北京三藥科技開發公司）；平板計數瓊脂培養基（縮寫PCA，青島海博生物技g公司）；酵母蛋白胨葡萄糖瓊脂培養基（縮寫R2A，青島海博生物技術公司，德國默克）。
1.3 設備
TW-STV3A型薄膜過濾器（瑞安市圖班生物技術設備），XGL.GWX-0.36B型脈動真空蒸汽滅菌器（山東新華醫療器械），FD240型干熱滅菌烘箱（德國賓德），S20K型pH計（梅特勒-托利多儀器），PL202-S型電子天平（梅特勒-托利多儀器），AVC-4A1型垂直凈化工作臺（安斯克生物技術設備公司，ESCO），BD240型恒溫培養箱（德國賓德）。
2 實驗方法
2.1 檢驗量的對比研究
分別取1 mL和10 mL的純化水，采用《中國藥典》2015年版（CP2015）四部中的薄膜過濾法進行其微生物限度檢查[2]。
取少量pH 7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液注入過濾杯中，以濕潤濾膜。濕潤濾膜后取10 mL或1 mL純化水樣及20～30 mL的pH 7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，過濾，取出濾膜，薄膜菌面朝上，分別置于營養瓊脂培養基和玫瑰紅鈉營養瓊脂培養基表面，細菌35℃，培養3 d，霉菌/酵母菌23℃，培養5 d[2]（作者已按照企業操作規程對該方法進行方法學驗證）。菌落計數器計數。
2.2 培養基檢測效力的對比研究
采用《美國藥典》USP-38（USP38）、《歐洲藥典》EP7.0（EP7.0）、《英國藥典》BP2015（BP2015）和CP2015中規定的薄膜過濾法[4，6，8]，設定檢測量為10 mL，分別使用營養瓊脂培養基、玫瑰紅鈉瓊脂培養基、平板計數瓊脂培養基PCA和R2A培養基進行檢測培養。具體操作方法同“2.1”項下方法，取濾過后薄膜，分別置于營養瓊脂培養基、玫瑰紅鈉營養瓊脂培養基、平板計數培養基和R2A瓊脂培養基的平板表面進行培養，計數。
3 實驗結果
3.1 檢驗量對比研究的實驗結果
不同檢測量的純化水微生物檢測結果見表1。通過實驗可以看出，對于1 mL檢驗量的薄膜過濾法，19個水點的微生物限度質量均良好，只有2個水點檢測出微生物污染，且菌落數少，檢出率低（2/19），未發現任何不良趨勢。對于10 mL檢驗量的薄膜過濾法，菌體檢出率較高（7/19），是1 mL檢驗量時菌體檢出率的3.5倍，5、10、15、18和19號水點均反映輕微微生物侵染，能夠更好地反映純化水的微生物限度情況。13號水點微生物污染程度接近警戒線，便于發現不良趨勢，及時采取針對純化水系統清潔維護的整改措施。可見，薄膜過濾法具有較好的集菌效果，10 mL的純化水檢測量適合于純化水的微生物限度檢查，樣本代表性較好，菌體檢出率高，能夠更加準確和真實地反映純化水質量，保證純化水系統的持續、穩定、有效運行。
3.2 培養基培養效力對比研究的實驗結果
使用不同培養基進行微生物限度檢測的實驗結果，見表2。通過以上實驗可以看出，對于相同樣本，使用營養瓊脂和玫瑰紅鈉瓊脂培養基平板檢測和使用PCA培養基平板檢測的微生物檢出率較低（前者共有21個水點未檢出菌體，后者共有18個水點未檢出菌體），檢出情況基本一致，差異量均≤1 cfu/10 mL。并且使用營養瓊脂與玫瑰紅鈉瓊脂培養基檢測需要制備兩張濾膜，工作量較大。而采用R2A瓊脂進行菌落計數，操作相對簡單，每個水點只需要制備一張濾膜即可，并且菌體檢出率較高，共計14個水點微生物限度檢出（結果均
4 討論
USP、EP、BP和CP中均規定采用薄膜過濾法進行純化水微生物限度檢查，但對于純化水的檢驗量都未明確規定，要求各單位根據實際用水情況和所安裝純水系統性能自定檢驗量[10]。純化水水質是決定檢驗量的基礎，通過本文的系統實驗表明當前大多企業為追求操作簡單只選定1 mL作為檢驗量是有所局限的，這個量并不能真實反映純化水的質量，也不利于純化水系統的監測和維護。
純化水微生物限度年度質量回顧和趨勢分析是確定檢驗量的重要依據，本研究基于石家莊以嶺藥業股份有限公司3年來大量的純化水分析數據，找到了較合適的檢驗量，供讀者參考應用。
實驗中發現使用營養瓊脂和玫瑰紅鈉瓊脂培養基的培養效果與使用PCA培養基的培養效果基本一致，可能只檢出了水樣含菌總數的一部分，未能完全反映水樣中微生物的存在情況，這與顧孔珍等[11]的報道一致。R2A培養基屬于低營養類培養基，其營養成分較廣泛，能促進受損細菌的恢復性再生長，更適用于純化水的檢測。這將避免由于培養基靈敏度不夠而造成的純化水質量不良趨勢無法被發現的情況，能夠及時準確地反映純化水系統運行情況，及時維護，延長系統壽命。
本文研究所確定的方法可大大提高純化水微生物限度檢測的有效性，有利于生產和檢驗中純化水質量的控制。同時，也為其他制藥企業建立合適的純化水微生物限度法提供參考和指導。
[參考文獻]
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[6] 美國藥典委員會.美國藥典38[S].2015：1231.
[7] 美國藥典委員會.美國藥典39[S].2016：1231.
[8] 英國藥典委員會.英國藥典2015[S].2015：各論0008.
[9] 英國藥典委員會.英國藥典2016[S].2016：各論0008.
微生物培養基報告范文5
目的：對比改善實驗室質量管理前后臨床微生物分析結果，探討分析實驗室質量管理的重要性。方法：回顧分析臨床實驗室質量管理前50例臨床微生物檢驗結果作為對照組，實行實驗室質量管理措施后的50例臨床微生物檢驗結果作為觀察組，兩組結果進行對比，記錄分析數據。結果：實施實驗室質量管理措施前，臨床微生物檢驗分析準確率86.00%。實施實驗室質量管理措施后，臨床微生物檢驗分析準確率為90.00%，兩組檢測結果差異具有統計學意義（P
關鍵詞：微生物檢測；質量管理；結果分析
【中圖分類號】
R249 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763（2014）08-0102-02
近年來，醫院不斷有新的耐藥菌株出現[1]，感染病例也不斷增加，這對醫院的臨床微生物實驗室不斷提出新的挑戰和要求。臨床微生物檢驗分析的結果能夠為醫師臨床提供可靠的治療依據，同時還能提供合理使用抗生素和及時檢測醫院感染流行情況的依據。因此做好實驗室質量管理工作，提高臨床微生物檢測分析準確性是提高患者治療效果、降低患者治療風險的有效途徑。具體報告如下：
1 資料和方法
1.1 基本資料：
隨機選取本院實行實驗室質量管理措施前的50例臨床微生物檢測分析報告作為對照組，選取實行實驗室質量管理措施后的50例臨床微生物分析報告作為觀察組。
1.2 實驗室質量管理措施
1.2.1 形成科學合理的質量管理體系[2]：
參考ISO或國家制定的相關實驗室管理的要求和標準，并與實際情況相結合，形成科學合理的質量管理體系，并形成文件，制定相應的程序文件、質量手冊和操作手冊等，提供給所有參與檢驗工作者參照和學習。
1.2.2 認真詳細編寫管理文件[3]：
SOP作為檢驗工作人員參照的主要指南和依據，它能保證所有檢驗工作人員的檢驗操作更標準規范和統一。SOP文件在編寫時應當包含微生物標本的采集步驟、采集方法、使用試劑、培養基的制備方法、操作注意事項和相關參考文獻。SOP文件編寫完成后須有責任科室主任簽字生效，不得隨意更改。
1.2.3 標本采集方法：
明確采集標本的最佳時機，如應在發熱時抽血培養標本，根據不同樣本的采集要求明確適當的采集方法、所需要的培養器皿、培養溫度、運送時間等，送檢標本如不合格，應立即要求檢驗人員與臨床進行聯系。
1.2.4 檢驗人員素質培養[4]：
微生物實驗室檢驗人員在上崗前應經過嚴格的培訓，每一位檢驗工作人員都必須經過專業知識和實際操作兩項測試的考核，考核通過才能從事微生物檢驗工作。除此之外，每年還應對檢驗人員進行培訓再教育，不斷提高檢驗人員的職業素質。
1.2.5 檢驗儀器校準：
所有檢驗儀器必須建立相應的制定校準程序和操作程序，定期對檢驗儀器進行校準，校準程序應包括校準的方法、可接受范圍和期限。每做一次儀器維修和保養都要做好記錄，并且在之后做好校準工作。更換過的鑒定板每更換一塊都要標準菌株進行質量控制，細菌鑒定儀每次鑒定前都應該進行自動校準，采用化學試劑紙片對高壓濕熱滅菌器進行滅菌效果監測。
1.2.6 檢驗試劑及培養基：
所有用于檢驗的培養基和試劑都應該想進行登記記錄，無論是商品化采購，每一樣試劑都應該有明確清晰的產品信息，包括品名、批號、有效日期、濃度等。同時試劑在使用前都應該經過仔細的觀察和檢查，通過試劑顏色、厚度、是否有細菌污染現象、是否存在溶血、是否存在過多氣泡等方面來檢測試劑的質量。而檢驗所用的培養基和細菌鑒定板在石永強都應該觀察包裝是否破裂，是否在使用有效期內。試劑盒染色液的容器上應該明確表明相關信息，過期的試劑和染色劑絕對不能在繼續使用。
1.2.7 加強與臨床的溝通與配合：
與臨床及時有效的溝通，向臨床宣傳正確的采集標本和運送標本的正確方法，以減少實驗前的誤差，提高檢驗分析結果的質量。
1.2.8 準確的檢驗報告[5]：
患者的檢驗結果在公布之前必須進行雙責任人簽字確認，包括檢測分析操作者和復核主管簽字確認。復核主管必須對檢測報告的合理性、準確定進行審核和判斷，要杜絕錯誤報告的產生 ，當出現嚴重威脅患者生命安全的檢驗結果時，復核人員要立即通知臨床醫生注意。
1.3 試驗數據處理：
兩組微生物檢測分析結果采用統計學處理軟件SSPS19.0處理，計數數據采用卡方檢驗，當P
2 結果
對照組50例微生物檢測報告中有43例檢測報告準確性有效，占總檢測報告數量的86%；觀察組準確性有效的檢測報告為45例，占總檢測報告數量的90%。觀察組檢測報告有效率明顯高于對照組檢測報告有效率，兩組結果差異具有統計學意義（P
3 討論
一所疾病防疫控制機構的檢驗水平、管理水平、科研水平的重要標志是實驗室的管理和建設狀況，這在很大程度上反應了疾病防疫控制機構的綜合實力。隨著各種關于實驗室管理技術規范、管理法規的頒布實施，實驗室的設計、建造、驗收、檢測過程等逐漸走向了規范化、法制化的軌道，這些措施的頒布和實施有效的提高了實驗室的實施條件和環境質量，而嚴格的實驗室質量管理體系使得檢測試驗操作更加規范化，這些因素都直接影響了微生物檢測報告的質量結果，最終影響醫師對患者的診斷治療，影響國民的身體健康和生命安全，所以要在臨床推廣實施實驗室管理措施體系。
參考文獻
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[2] 何夢林. 探討臨床微生物檢驗中質量控制存在的問題與對策[J]. 中國醫藥導刊，2013，S1：347-348.
[3] 韓淑娥，孟芝君. 臨床微生物實驗室培養標本不合格的原因分析及解決對策[J]. 山西醫藥雜志，2013，12：1433-1434.
微生物培養基報告范文6
關鍵詞：水質微生物；實驗室；質量控制
隨著經濟的飛速發展及產業規模的急劇擴大，環境污染問題也隨之而來，這也促使社會各界開始關注其生活質量。在飲用水方面，人們也在不斷強調水質的標準及水質檢測，這就要求必須要確立一個質量保證流程，以便及時獲取有效信息，保證水質安全。
環境質量檢測質量保證是保證檢測數據準確可靠的實施方法之一，現已得到社會各界的認可[1]。環境檢測質量控制是環境檢測質量保證的重要部分，它主要包括實驗室內部質量控制和實驗室外部質量控制。實驗室的內部控制，是實驗室實現自我協調控制的常規程序，它能夠及時發現異常情況，并分析其造成的原因，然后采取正確的校正措施，確保實際工作的有序進行，確保其質量檢測的準確性及穩定性。
水質微生物實驗室由于其特殊性，它需要更專業的人士的熟練操作及分析判斷，從采樣報告到記錄數據的整個過程都要保證其準確性和可靠性，因而做好水質微生物實驗室的質量控制尤為重要。實驗室的質量控制主要包括以下幾個方面。
1 對從事檢測工作的專業技術人員的質量控制
1.1要求參加檢驗的人必須接受過充分的理論知識教育，具備熟練的實際操作經驗和準確的分析判斷能力，加強其理論知識的學習，不斷提高自己的檢驗能力。
1.2要有良好的職業道德操守和強烈的責任感，能夠很好的承擔微生物檢測工作，完成上級交給的檢驗任務，并確保檢測結果的真實性和準確性。
1.3實驗室應該制定規范的檢驗標準，統一檢驗方法，按照國家標準實施，制定科學的規章制度，規范各級人員的職責。
2 對培養基的質量控制
2.1培養基的配置和使用時微生物檢驗中最關鍵的部分，優質的培養基能夠促使細菌快速生長繁殖，有利于對細菌進行分離和準確的判斷，在配置培養基時的一般質量要求包括：①培養基應該明確標記和正確的配置日期，培養基要在有效期限內使用，使用時要注意觀察培養基是否變質，優質的培養基，其液體應該是清澈的。有倒管時，倒管內的液體應該清澈無氣泡；而固體的培養基應該有一定的硬度，在接種前要保持無菌落；②要妥善安放無菌分裝的培養基，要置放在36℃的培養箱例，要保持無菌生長，這樣才能被使用；③要隨機抽查PH值，控制PH值在標準范圍內，有指示劑的培養基要隨時觀察顏色的變化；④傾注瓊脂平板的體積要達到要求，一般控制在15ml。
2.2對培養基的質量控制方法有以下幾種情況：①要選擇信譽度好的產品，購買的時候要根據日常工作的需求量有計劃的使用，針對用量少的，盡量少購買，以免造成不必要的浪費；②對購回的培養基按照品名、生產日期、保質期等認真登記，并科學存放；③對每批制成培養基要用標準菌株對其進行質量檢測與控制，保障培養基的質量。
3 對標本檢驗的質量控制
3.1在標本的采集方面，要注意以下幾個方面：①選擇合適的采集時間，一般選在疾病的早期、急性其或癥狀突出期前采樣；②選在正確的采樣方法，根據不同的微生物種類，需選擇不同的方法；③要用無菌容器進行盛裝樣本，取樣的容器要用自來水進行徹底的沖洗，然后用10%的鹽酸溶液進行浸泡，從而保持容器的無菌性；④要注意控制標本量，水樣在容器中應控制在80%以內，采取不同水樣的時候不能隨意攪動水底的沉積物，并注意容器瓶口的完好性。
3.2在標本的運輸方面，要注意以下幾個方面：①要保證及時送檢，如果現場與實驗室的距離很遠，要對樣本進行冷藏、保溫等妥善保存；②標本運輸應有專業人士負責，運輸過程中藥盡量避免晃動，以免瓶子破損。
4 對實驗室內環境的質量控制
4.1要保持實驗室內良好的通風狀態和無塵狀態，這樣能夠減少雜菌的污染，也能夠保障培養箱的穩定操作。
4.2要對實驗室內的紫外線消毒燈進行定期的檢測和擦拭，確保使用的紫外燈的亮度在最初的70%以上。
4.3要保持高標準的空氣質量，可以用細菌密度平皿或者拭抹法來檢測空氣質量及操作臺的潔凈，并定期對工作臺做空白試驗，保證臺面良好的防止透水性和抗腐蝕性，確保其正常工作。
4.4要用光滑的漆來覆蓋實驗室的墻壁，這樣有利于清洗和消毒，地面材料要保證光滑、易于清潔。
5 對實驗室主要使用儀器的質量控制
5.1要保證其溫度計處于正常的工作狀態，確保培養箱、冷凍箱和干燥箱能夠準確的報告操作溫度，以便將其控制在最佳狀態。
5.2正確使用顯微鏡和天平，并保持其清潔。
5.3所使用的容器都要保障其完好無損，并在清潔完畢之后進行徹底的檢查。5.4經常保持冰箱的清潔，電熱滅菌箱和高壓滅菌器也要定期采用孢子試跳或孢予懸浮液保障其滅菌的最佳狀態。
6 對操作過程的質量控制
要認真落實操作的無菌化，認真記錄操作的整個過程，并對空白和平行樣品進行認真對比，另外，還要對實驗室的環境標準進行控制，保障檢測結果的準確性[2]。
7 結束語
對于水質微生物的檢查，要把握好各個環節的準確性，實現對實驗室內部各個環節的有效控制，才能夠確保水質微生物檢測結果的準確性和真實性，保障檢驗工作的質量，才能得到領導的肯定和社會的認可。
參考文獻：
