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免疫學分析方法范文1
關鍵詞:化學發光免疫法;免疫放射法;促甲狀腺激素
促甲狀腺激素(thyrotropin,thyroid stimulating hormone,TSH)是腺垂體分泌的促進甲狀腺的生長和機能的激素。TSH多以游離的形式存在于血液中,其含量很低,是性質穩定的糖蛋白激素。TSH受下丘腦一腦垂體一甲狀腺軸線控制,當人體的甲狀腺功能發生變化時,血清TSH的水平出現波動。甲狀腺機能低下即甲減者的表現,多為血清中的TSH水平增高,甲狀腺功能亢進即甲亢者,多為血清中TSH的降低。臨床上,因此,TSH是判斷甲狀腺功能和下丘腦垂體甲狀腺軸功能是否正常的一線指標[1-2]。作者采用化學發光免疫法(CLIA)與免疫放射法(IRMA)兩種方法同時測定正常人及患者血清TSH,對其結果比較分析,從不同角度探討兩種檢查方法在甲狀腺功能疾病中的臨床診斷價值,現將結果報告如下。
1資料與方法
1.1一般資料 所有人員均為來我單位健康查體或就診的人員,見表1。
1.2儀器與試劑 CLIA采用美國雅培公司Axsym免疫化學發光儀,IRMA采用西安262廠F5-20089γ-放射免疫計數器。免疫化學發光測定試劑盒,由美國雅培公司提供,IRMA采用中國原子能科學研究院提供的試劑盒。
1.3方法
1.3.1樣品采集 于每天上午采集研究對象空腹血清3 ml,然后分離血清,立即進行檢測或-20℃冷凍保存,1 w內檢測。
1.3.2 TSH的檢測
1.3.2.1批內變異 分高、中、低三份質控樣本,所有質控樣本分別用CLIA和IRMA測定血清TSH含量,重復測定10次,計算批內變異系數。
1.3.2.2批間變異 將高、中、低三份血清樣品,分別置于20只試管中,密封后置-20℃冰凍保存,于20個測定日復融后檢測其含量,計算其變異系數。
1.3.2.3結果比較 將三組試驗人員共213份血清樣品同時采用CLIA和IRMA測定其TSH含量,對得出的結果進行比較。
1.4統計學處理 數據采用(x±s)的形式表示,對兩種方法測得的結果行相關性分析,甲亢、甲減組和正常組比較采用T檢驗。
2結果
2.1批內變異和批間變異,見表2。
結果表明,CLIA的重復性和精密度優于IRMA。
2.2三組受試人員TSH測定結果比較,見表3。
2.3三組受試者診斷符合率比較,見表4。
TSH對甲亢組患者與甲減組患者的診斷符合率均較高,尤其是對于甲減的診斷,CLIA法檢測TSH幾乎是最為靈敏的考察指標。
2.4相關性比較 用CLIA和IRMA法分別對受檢血清標本進行定量分析,結果表明,兩法測定結果相關系數為0.995,提示兩法相關性良好。
3討論
TSH 是腺垂體分泌的一種糖蛋白激素,主要功能是調節甲狀腺激素分泌,臨床上是反映甲狀腺功能非常敏感的指標[3]。目前,常用的測定血清TSH 的方法有免疫放射分析法(IRMA)和化學發光法(CLIA)。化學發光法(CLIA)測定是根據化學反應產生的輻射光的強度來檢測物質含量的一種有效的痕量和微量分析方法[4]。
本報告數據顯示,CLIA和IRMA法檢測血清TSH相關性好。但比較兩種檢查方法,化學發光法具有以下優點:①無污染:CLIA 法檢測以化學發光劑作為標記物,試劑穩定且無放射性,對周圍環境無污染,工作人員也不會損害;IRMA通常以125 I標記,125 I半衰期僅為1個月左右,放射性碘對環境有污染,對工作人員也有傷害。②線性范圍寬:有報道顯示,低濃度時化學發光免疫分析法區線性范圍較寬,在低濃度范圍測定較免疫放射分析法更為準確[5]。③自動化程度高:化學發光免疫分析法自動化操作,這就排除了人為的誤差,使操作更加簡便,明顯優于放射免疫法。④本組結果顯示, CLIA的重復性和精密度優于IRMA。
綜上,CLIA在檢測血清TSH方面有著IRMA無法比擬優勢,建議有條件的實驗室采用。
參考文獻:
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免疫學分析方法范文2
關鍵詞 骨髓細胞學 免疫學分型 血液病 診斷
中圖分類號:R733.2; R730.4 文獻標識碼:A 文章編號:1006-1533(2016)23-0059-03
Value of MICM classification in the diagnosis of leukemia*
PENG Yongquan**
(Department of Laboratory, Ji-an central hospital, Ji’an 34300, China)
ABSTRACT Objective: To investigate the value of MICM (morphology, immunology and cell genetics) classification in the diagnosis of leukemia. Methods: One hundred and three cases of leukemia patients treated in our hospital from February, 2015 to January, 2016 were selected as subjects, and the coincidence rates to the diagnosis of leukemia were compared among three detective methods including single bone marrow cytology classification, single cell immunology classification and MICM classification. Results: The coincidence rates to the diagnosis of leukemia were higher by bone marrow cytology classification combined with immunology classification than by single bone marrow cytology classification and single cell immunology classification (94.17% vs 76.69% and 78.64%) (P0.05). Conclusion: The MICM classification has a higher value in the diagnosis of leukemia and is worthy of further clinical practice.
KEY WORDS bone marrow cytology; immunology classification; blood disease; diagnosis
血液病是指造血系統發生的生理或病理性疾病,臨床表現為貧血、出血、發熱等癥狀,常見的血液病有白血病(acute leukemia, AL)、再生障礙性貧血等[1]。白血病是常見的血液病,在造血系統疾病患者中占首位[2]。目前對白血病的分型診斷標準是根據細胞形態學進行分型,但該分型方法常因白血病細胞形態不典型而出現誤診,診斷符合率有待提升[3]。本文探討MICM(形態學、免疫學與細胞遺傳學)分型在白血病診斷中的應用價值,報道如下。
1 資料和方法
1.1 一般資料
選取2015年2月―2016年1月我院治療的白血病患者103例,所有患者均經病理學檢查初診為白血病。納入標準:①符合WTO關于白血病的診斷標準[4];②患者對本研究知情同意且簽署知情同意書。排除標準:不同意納入本研究的患者。其中男53例,女50例,年齡5~72歲,平均年齡(41.21±4.57)歲。
1.2 方法
1)樣本收集 采集骨髓標本2~3 ml于抗凝管,置于15~25 ℃保存,制備樣本待測,所有樣本在獲取6 h 內處理。
2) 骨髓細胞形態學檢查 常規使用瑞氏過氧化物酶(POX)染色,光學顯微鏡下對血細胞進行細胞形態學分型診斷。
3) 細胞免疫學檢查 取抗凝骨髓液2 ml,常規分離單個骨髓核細胞,采用熒光顯微鏡間接免疫熒光法測定,單克隆抗體購自美國貝克曼公司和BD公司,流式細胞儀由BD公司生產,嚴格按說明書操作。 判斷標準:淋系抗陽性細胞>30%, 髓系及干組系抗原>20%,非系列特異性抗原及其干組抗原>20%為陽性,分型判斷標準根據國際白血病歐洲協作組 (EGIL)標準[5]。
4)檢測方法 根據檢查結果,比較分析單一的骨髓細胞形態學分型,單一細胞免疫學分型與MICM分型這3種檢查方法對白血病診斷的符合率。
1.3 統計學方法
采用SPSS 17.0軟件,計數資料比較采用卡方檢驗,以P
2 結果
2.1 分型結果
檢測結果顯示,急性髓細胞性白血?。ˋML)檢出率最高,其次是急性淋巴細胞性白血?。ˋLL)和慢性粒細胞性白血?。–ML),急性白血?。ˋL)最低(表1)。
2.2 單一骨髓細胞學分型、單一細胞免疫學分型與MICM分型診斷比較
MICM分型診斷白血病的靈敏度、特異度、陰性預測值和陽性預測值均較單一骨髓細胞學分型、單一細胞免疫學分型診斷高,差異有統計學意義(P
3 討論
白血病是造血干細胞異常克隆性疾病,至今仍有40%左右為難治性病癥,且其發生機制目前尚未明了?;颊叩呐R床表現、細胞形態、對化療藥物的敏感性各不相同,因而正確識別和診斷不同特征的白血病患者,對于指導治療具有十分重要的意義[6]。骨髓細胞形態學分型是白血病分型的基礎[7],它可以按不同的血液病的細胞形態學特征,結合臨床表現做出肯定性診斷,有利于各種血液系統疾病的早期診斷,尤其是對各型白血病,多發性骨髓瘤等,為治療方案提供客觀依據[8]。作為基礎的診斷方法,它常由于細胞形態不典型而難以明確診斷。細胞免疫分型應用多種熒光標記單克隆抗體對細胞行標記檢測,由于其對某些形態特征不典型、單克隆抗體反應特異性不靈敏的白血病的診斷確診有困難,故單獨使用符合率不高[9]。
本文通過研究單一骨髓細胞學分型、單一細胞免疫學分型與MICM診斷白血病,比較這3種方法診斷白血病的價值。結果顯示,在如M2等某些特定的白血病分型中,形態學和免疫學診斷各有優劣,然而總體診斷的準確性,特異性均較低,故目前臨床上很少單一使用。相比之下,MICM分型在白血病各類分型中診斷的價值較高,診斷結果符合率因而也較高,因此成為目前臨床上常用的診斷白血病的方法。本文通過研究MICM分型臨床應用現狀再次驗證其應用效果,明確其廣為推廣對于患者臨床分型的重要指導意義。MICM檢測,可供的標本種類有骨髓外周血腦脊液及其他體液,既克服了傳統形態學和細胞學分型方法上的缺點,又具有簡單快速計數細胞量大靈敏度高及結果準確度高的特點,對提高白血病診斷的靈敏度及分型的準確性起到極大的作用[10]。隨著近年該檢測技術的推廣,操作技術日益嫻熟,MICM分型為白血病患者的診斷提供了準確的結果,對深入研究其發病機理,進行個體化治療起到了很好的輔助作用。
綜上所述,MICM分型在白血病的診斷中具有較高的診斷價值,可為白血病的診斷提供準確結果,值得臨床進一步實踐。
參考文獻
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免疫學分析方法范文3
關鍵詞 病原生物學 課程編排 整合教學 醫院感染
中圖分類號:G424 文獻標識碼:A
On the Problems in Pathogen Biology Curriculum
and Teaching Content Choreography
GAO Jian, HOU Qiulian, Rebiya oNuli, MA Wenjing
(Department of Human Parasitology, Basic Medical College, Xinjiang Medical University, Urumqi, Xinjiang 830011)
Abstract Combined with the current status of pathogen biology courses at medical schools and to set the basis of the relationship between medical teaching courses in other disciplines as well as their course schedule, analyze pathogen biology curriculum and teaching content scheduling problems on the proposal will Pathogen Biology after all basic medical courses were taught, while paying attention to microbiology and parasitology section of content integration in choreography and join hospital infection-related content.
Key words pathogen biology; curriculum; integration of teaching; hospital infection
病原生物學是研究人類疾病生物性病因或病原體生物學的科學,是一門基礎醫學課程。但由于其主要研究內容包括各類病原生物的生物學特性、與宿主及外界因素的相互關系、 致病因子及其作用、致病機理、實驗室診斷方法、所致疾病的傳播和流行特點,以及預防和控制原則。①因此既是基礎課,又是主要橋梁課和應用課學科,是臨床醫學和預防醫學的基礎。隨著醫學課程的整合和縮緊,合理編排課程對病原生物學等橋梁學科的教學效果非常重要,現結合病原生物學課程編排現況淺談病原生物學課程編排中存在的主要問題。
1 病原生物學與其他基礎醫學課程教學順序的問題
1.1 病原生物學應放在所有基礎醫學課程之后進行學習
病原生物學是臨床醫學、檢驗醫學、醫學影像、醫學護理、藥學及預防等專業的一門主干課程,不僅與各基礎課程之間密切聯系,而且與臨床課程密切相關。其內容豐富,信息承載量大,是知識更新和發展最為迅速的課程之一。②以病原生物學課程中的醫學寄生蟲學部分為例,首先介紹各種寄生蟲的形態和結構特點外,隨之是對寄生蟲生活史、致病、診斷、流行和防治內容的講解。在各種寄生蟲生活史的學習中首先要明確醫學蠕蟲成蟲和幼蟲以及各種醫學原蟲的寄生部位,醫學蠕蟲幼蟲在宿主體內的移行過程,這就要求學生必須對系統解剖學、組織胚胎學、細胞生物學有很好的掌握基礎,而關于蟲體的生活習性,生長代謝特點,又牽涉到生化與分子生物學方面的知識。在寄生蟲的致病中,牽涉到病理生理學和病理等多門基礎醫學學科的知識,在寄生蟲病的診斷中,除了病原學檢查方法,還需要向學生介紹臨床常用的免疫學診斷方法,分子生物學診斷方法,各種寄生蟲致病的醫學影像學表現,不僅需要各門基礎醫學知識的融會貫通,還牽涉到診斷學、醫學影像學等多門臨床學科,而對于預防醫學專業的學生,對于人體寄生蟲病的流行現況和特點的學習,又牽涉到流行病學的基本概念和知識。同時在寄生蟲病防治措施中,還涉及大量藥學和護理的相關知識。
以人體寄生蟲學中對日本血吸蟲內容的講解為例,如果沒有系統解剖學的知識做鋪墊,學生不可能對日本血吸蟲的寄生部位――門脈腸系膜靜脈系統有清晰的認識,從而也就無法就“日本血吸蟲成蟲寄生于宿主門脈系統,為什么卻能在宿主糞便中發現蟲卵?”這一問題進行理解;系統解剖學的知識同時影響學生對日本血吸蟲的生活史中,尾蚴進入人體后的發育和移行過程的清楚認識,甚至進而影響學生對蟲卵主要沉積部位和致病的理解;而在血吸蟲的致病中,幾個重要的知識點會聯系到其他多門學科,如“血吸蟲蟲卵肉芽腫的形成機制”涉及免疫學中Ⅳ型超敏反應的知識,而晚期血吸蟲病致門脈高壓的臨床表現,需要學生熟知病理生理學中“門脈高壓”的形成機制。目前各高?;A醫學課程編排一般都將病原生物學課程和免疫學課程、病理學、病理生理學等課程安排在二年級進行同期講授,無法對病原生物學的學習起到知識奠定作用。以人體寄生蟲學的臨床診斷為例,由于包蟲病嚴禁穿刺性診斷,主要以影像學診斷為主,肝包蟲病在B超中表現為肝部的液性暗區,而蛔蟲成蟲寄生于宿主腸道可通過腸道鋇劑X線透視發現條索狀暗影獲得診斷依據,但目前高校主要將醫學影像學課程安排在三年級與臨床醫學各專業課程進行平行教學,影響學生對病原生物學中影像學診斷相關知識點的理解。
1.2 病原生物學至少應放在免疫學課程之后進行學習
在基礎醫學課程中,免疫學與病原生物學其實是“己”與“彼”、“我”與“敵”的關系,免疫應答過程本身就是發生于機體內部的一場戰爭。病原生物學為現代醫學微生物學與人體寄生蟲學的整合課程,在中專、大專、高職類教材中,通常把免疫學、醫學微生物學、人體寄生蟲學三門學科整合為《病原生物學與免疫學基礎》一門整體課程進行學習,③而本科及本碩連讀班級的教學中,采取醫學微生物學和人體寄生蟲學分段式教學、綜合考核的方法整合為一門課程進行教學,免疫學常作為另外一門必修課程平行講授。從教材內容看,醫學微生物學和人體寄生蟲學中都涉及病原生物的抗原性質、機體應對不同病原生物抗感染免疫的特點以及免疫結果、病原生物疫苗研發的進展等內容,針對上述內容的領會和學習,離不開對免疫學課程的整體掌握。在病原生物學與免疫學平行教學的現狀下,學生在學習病原生物學時聽到的免疫學相關名詞在他們的免疫學課程進度中還沒有涉及到,課堂講授中陌生專業名詞的引入會增加對學習的疲憊感,從而極大影響學生對病原生物學的學習積極性。
高校的課程編排要立足于學生學習效率的提高,考慮學生的身心規律以取得最好的教學效果,要注重遵循學生的認知規律,考慮學生學習注意力和大腦調節功能的生理及心理特點, 實現課程的合理搭配和負擔平衡。④結合上述要求,要想達到好的教學效果,病原生物學應該設置在所有基礎醫學課程之后進行講解,通過之前課程的學習加強對病原生物學相關知識點的領悟,同時對一、二年級所學的基礎醫學知識進行回憶和鞏固,方能保證基礎醫學課程學習的遞進次序和學習效果。而在病原生物學與免疫學的課程編排順序上,建議將病原生物學放在免疫學之后進行講授,從而保障學生對病原生物學中所涉及到的免疫學相關內容的理解與領會。
2 病原生物學自身課程內容編排的問題
2.1 生物學分類與臨床知識實踐之間的矛盾
病原生物學教材以七版人衛教材為主要代表在各醫科高校中應用,其中《人體寄生蟲學》和《醫學微生物學》是獨立發行的。當然也有一些學校用整合后的《病原生物學》教材,但其實質內容依然是寄生蟲學部分與微生物學部分獨立編排的。從生物學分類角度,不可能實現寄生蟲學和微生物學的整合教學,然而在兩部分病原生物各自的章節編排中,醫學微生物學的章節編排優于人體寄生蟲學。以細菌學部分和病毒學部分為例,長期以來的《醫學微生物學》教材都實現了通過感染部位來編排細菌和病毒部分的各論章節,從而能與臨床醫學的分科教學有所銜接,而《人體寄生蟲學》依然采用傳統的生物學分類法,在教學意義上沒有微生物學教材的實踐意義大?!度梭w寄生蟲學》之所以無法通過感染部位來編排章節,是因為一種寄生蟲幼蟲和成蟲的寄生部位以及相應的致病都不一樣,以鉤蟲為例,成蟲寄生部位為消化系統,但在致病上從幼蟲經皮進入人體就開始了,幼蟲穿刺入皮膚時引起鉤蚴性皮炎,幼蟲在宿主肺部移行時引起鉤蟲性肺炎,成蟲寄生于人體小腸,則引起貧血為主的臨床表現。其實醫學中寄生蟲學與微生物學最具有相似性的分類依據不是生物學分類,也不是感染部位分類,而是傳播途徑分類,如果能將所有的病原生物按照傳播途徑進行編排,例如經口感染的病原生物有寄生蟲學中蠕蟲部分的蛔蟲、鉤蟲、鞭蟲、蟯蟲、旋毛蟲、肝吸蟲、肺吸蟲、帶絳蟲、棘球絳蟲等;原蟲部分的溶組織內阿米巴、藍氏賈第鞭毛蟲等;細菌學部分的埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬等;病毒學部分的脊髓灰質炎病毒、柯薩奇病毒、輪狀病毒等,將這些病原生物放在一起講授,不僅能夠增加學生對不同病原生物引起的消化道癥狀的辨識程度,而且能夠真正實現病原生物學的整合教學。
2.2 建議在病原生物學課程中增加醫院感染控制相關章節
病原生物學作為基礎醫學與臨床醫學之間的橋梁學科,有臨床專業技巧的直接服務意義。作為醫學生未來工作的大環境,醫院感染因其特殊的病因學和感染對象而備受關注。任何感染都是病原生物與宿主在一定條件下相互作用而發生的一種病理過程,醫院感染也不例外。有資料表明,目前中國高等醫學院校教材中有關醫院感染的內容只在流行病學課程中提及,僅占3~4個學時,使臨床實習生在進入臨床實習前對醫院感染相關知識學習課時少。⑤醫院感染的教學內容更貼近病原生物學的學科內容,在學習了各種病原生物的生物學性狀和致病后,如果加入醫院感染的相關章節,可強化病原生物的臨床應用,課程設置更為合理。
綜上所述,作為基礎醫學和臨床醫學之間的橋梁學科,課程編排對病原生物學的授課效果非常重要。其中主要體現于病原生物學與其他基礎醫學學科的教學安排順序,尤其是免疫學與病原生物學的授課順序。此外,應當注重病原生物學與臨床醫學相關知識的銜接與應用,提倡病原生物學各論內容以傳播途徑對所學病原生物進行章節編排,實現真正意義上的病原生物學整合教學,同時建議將醫院感染相關內容編排入病原生物學課程進行講授,增強本學科的臨床意義。
基金項目:新疆醫科大學博士科研項目啟動基金;新疆醫科大學科研創新基金(XJC201222)
*通訊作者:高劍
注釋
① 張浩.病原生物學課程改革的探索與實踐[J].齊齊哈爾醫學院學報,2010.31(22) :3626-3627.
② 邵世和,張文,申紅星,等.病原生物學課程建設與教學改革的探索[J].中國病原生物學雜志,2010.5(4):317-318.
③ 劉榮臻,馬愛新.病原生物學與免疫學[M].北京:人民衛生出版社,2006.1.
免疫學分析方法范文4
[關鍵詞]蛋白多肽類藥物 藥物動力學 測定方法
[中圖分類號]R96 [文獻標識碼]A [文章編號]1009―6019―[2010]06―31―02
蛋白多肽類藥物具有生物活性強、相對成本高、作用靶點專一的特點,近些年來廣泛應用于各種疾病診療,在治療疾病地位日趨重要。但是蛋白多肽類藥物劑量小、各種內源性蛋白含量高,建立準確、靈敏、專一的測定方法是藥動學研究的重點,為此,筆者就近些年蛋白多肽類藥物的動力學研究分析、綜述如下。
1 生物檢定法
蛋白多肽類藥物的分子量為數千至幾十萬,具有二維、三維結構,其復雜的結構決定生物活性的特殊性,一般非注射給藥的生物利用度很低,幾乎在百分之幾。生物檢定法能夠定性測試某種物質是否具有活性,定量測定適量的藥量,因此,用于蛋白多肽類藥物分析。如Wei等利用兩種新的治療用重組促紅細胞生成蛋白(EPl和EP2)刺激SD大鼠紅細胞生成的特性以評價其體內動力學。也可利用體外酶體系進行生物檢定法分析,如Han等利用水蛭素對抗凝血酶活性的影響間接分析了N2Ilel2Thr22632去硫重組水蛭素(rH)在家兔的體內動力學,實驗結果表明:rH在家兔體內迅速消除,分布局限于細胞間隙,在皮下注射點吸收迅速,主要通過腎排泄。
2 同位素標記示蹤法
同位素示蹤法是利用放射性核素作為示蹤劑對研究對象進行標記的微量分析方法。由于獲得的分析結果符合生理條件,更能反映藥物代謝、轉化的機制。另外,同位素示蹤法在離體、整體、無細胞體系的情況下也能進行定性、定量分析。Plech等用同位素125 I標記的-白細胞焦激肽研究其在大鼠腦部和內臟器官中的分布,發現其在腎上腺、下丘腦和大腦海馬部位有很高的積聚。標記法有體內摻人法和體外化學連接法。體內摻人法即把含有同位素的氨基酸加入生長細胞或合成體系,但是獲得的蛋白多肽分子生物活性較小,且制備復雜而限制了其廣泛應用。體外化學連接法如氯胺T、Iodogen和Bolton―Hunter試劑連接到1分子上,因相對簡單而被首選。Iodogen法適于標記含有酪氨酸或賴氨酸的蛋白,標記效率高、反應溫和,但這種方法得到的標記物存在體內迅速脫碘并使放射性碘被甲狀腺所攝取的問題。由于蛋白多肽進入體內會被降解代謝,或與其它蛋白質結合,同位素標記示蹤法不能代表藥物動力學過程。
3 色譜法和質譜法
高效液相色譜法(HPLC)具有分離速度快、效率高、可對藥物進行有效的分離鑒定,廣泛應用于藥物分析中,可分離極性的、離子化的、不易揮發的的高分子質量和熱不穩定的化合物,對于蛋自多肽類藥物主要是分離純化。質譜分析(MS)也能用于蛋白質多肽藥物及其代謝物的鑒定。然而生物制品的處理過程和生物樣品中分析物的含量太少已很大程度上限制了它的應用和普及。在逐步研究中發現,色譜一質譜聯用在蛋白多肽類藥物分析中具有明顯的優勢,尤其是液相色譜一質譜聯用技術(LC-MS)的應用,很大程度上對蛋白多肽類藥物的藥物動力學研究提供科學依據。瞿文等制備了丙氨瑞林微球,由于丙氨瑞林在體內不穩定,按常規測定血藥濃度的方法考察體內藥動學比較困難,所以通過測定注射微球中殘留的藥量,計算釋放百分數對其進行體內評價。Ferraiolo等在給實驗對象大劑量(0.5~1.0mg/kg)靜脈注射松弛激素后,用單克隆抗體親和層析分離得到外源性人松弛激素后再用快速原子轟擊質譜進行分析。色譜和質譜技術的日益成熟,LC-MS已逐漸成為新藥研究必不可少的手段之一。
免疫學分析方法范文5
關鍵詞:醫學免疫學;教學方法;新模式
醫學免疫學是醫學本科生必修的一門主干課程。免疫學具有知識性強、抽象理論多、內容繁雜的特點,因此怎樣把這門枯燥難懂的理論課變得輕松易學,就需要我們不斷改進教學方法,探索新模式,同時也應及時總結思考。
一、研究對象
選擇本校藥學專業的本科生為研究對象,每年級選擇2個班級進行新模式教學,其他班級采取傳統教學方法。
二、研究方法
教學大綱的重新編寫。編寫實用性、針對性強的高質量學習指導,完善考試題庫,考試制度以配合該學科的教學。優化教學資源,充分利用學校的網絡平臺,一方面跟蹤瀏覽各大院校的教學改革歷程,另一方面完善本校的教學學習交流網站,要求學生利用網絡資源查閱文獻資料,有利于培養學生初步的科研能力和創新精神。改進教學方法,采用多樣化的教學方式。
1.討論式教學
醫學免疫學中對于信號通路,抗原抗體結合等許多知識點描述讓人感到抽象、難懂。教學過程中我們發現學生經常會提出許多他們難以理解的知識點和困惑。為了解決這種情況,我們提出課后問題討論的模式。每堂課結束后,學生對難以理解的或者想進一步了解的知識點進行提問并在下堂課中和教師一起討論。這種方式有利于提升學生的發散性思維。例如在“免疫球蛋白”這章結束后,集體討論:“為什么說IgG是機體內主要的抗感染抗體”。通過這種教學模式,鼓勵學生思考問題、提出問題,知曉學生學習過程中的問題所在并幫助他們解答、討論這些問題,從而使學生更好地理解所學的知識并對所學的知識有更好地延伸掌握。
2.教學倒置模式
這個“倒置”是說讓學生改變身份,走上講臺當一回老師。為了加強學生對“超敏反應”內容的理解,我把全班同學分成四組,每一組都做好PPT,上臺講解這章的內容并回答其他組同學提出的問題。這樣的課堂教學凸顯學生的主體作用,啟發學生自主思考。在整個過程中每個學生從查閱資料到融入理解完整的制作PPT,再到連貫性的講解,使學生真正地體會教師的思想,引起學生興趣,增強記憶,變被動學習為主動探索,最大限度地實現了教學互動。通過這樣的教學,提高學生的歸納總結效率,有利于學生將成功的經驗更好地應用到其他學科的學習和提高解決一些書本上難以解決的實際問題的能力。
3.改進實驗課教學改革后的實驗安排包括
醫學免疫學實驗課教學是為了驗證理論,以幫助學生正確理解并掌握復雜抽象、難懂又不易記憶的醫學免疫學理論知識,使學生通過基本技能的訓練,掌握實驗技術及相關的檢測技術,培養學生的實際操作能力、觀察能力、綜合能力和創新能力。以往的實驗課教學實驗以驗證性實驗為主,在實驗中同時應用幾種簡單的實驗技術,這種強調傳授知識的思路能起到鞏固理論知識的作用,但在創新能力培養方面略顯不足,不利于學生綜合技能的開發與提高。為了改善這種狀況,我們開設了實用性和發散性強的實驗課程,注重課程的連貫性和整體性。與此同時,我們對科研興趣高的同學定期開設科研小實驗,以學生自己發現問題為主,通過文獻檢索、教師集中輔導、分組安排實驗、學生實驗操作、師生討論總結、學生撰寫科研報告及總結,使學生提高探索的興趣。實驗流程例如分離免疫細胞、檢測表面標志物及其功能性檢測的系統性實驗。學生首先學習如何分離外周血單個核細胞,然后學習采用免疫細胞化學法檢測細胞表面CD抗原,接下來采用T細胞/B細胞增殖試驗、T細胞介導的細胞毒試驗、溶血空斑試驗等檢測免疫細胞功能。連貫性實驗可以使學生充分了解細胞分離、表面標志檢測及其功能檢測,從形態上觀察細胞以及細胞鑒定的重要性。更有利于把所學的理論寓于實踐,又能將大量的實驗體會升華為理性認識,發現自己的不足,大大增強了理論知識的理解和應用能力。真正做到教學理論與實踐的密切結合。
三、反饋調查
反饋調查問卷分析結果顯示,作為研究對象班級有35%的學生認為新的教學模式更有利于提高學生自主學習的能力,增強學生的理解力和創新力。15%的學生認為通過新的課改可以提高對其他學科的學習理解,而且有48%的學生認為對本學科的學習有極大幫助,從調查結果可以總結出:該教學模式獲得了大部分學生的贊同和肯定,并對學生有所幫助。
四、討論
通過對醫學免疫學實驗和理論教學內容和形式的改革,完成了教學大綱、教案、課件和網絡平臺的建設。無論采用何種教學方式,目的是相同的,即為了使教學課程更利于學生的學習需要,在提高學生的基本操作能力和技能的同時,提高學生的創新力和理解力,以及對新知識的分析和延伸能力。醫學免疫學的教學改革是一項探索性工作,在傳統教學模式情況下,引入全新的教學理念,使用先進的教學方法,提高教學效率。以有限的教學資源支撐教學需求,順應社會發展和教育發展的潮流,符合實施素質教育以及培養應用型人才的需要。
參考文獻:
1.韓德平、田野蘋,精心設計課堂提問提高醫學免疫學教學質量[J],西北醫學教育,2008,16(2):276-277
2.林巧愛,薛向陽,提高醫學免疫學教學效果探討[J],基礎醫學教育,2011,13(5):407-408
3.柳忠輝,臺桂香,醫學研究生素質教育所引發的公共實驗課教材改革的思考[J],中國教育理論雜志,2003,27:53
免疫學分析方法范文6
【中圖分類號】G64 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-3089(2014)10-0225-02
免疫學是生命科學發展的三大支柱之一(細胞生物學、免疫學和分子生物學),理論和實驗性強,并與其他學科交叉明顯的一門重要專業基礎課。免疫學是一門概念抽象、邏輯性強的學科,學生普遍認為免疫學深奧、難學。如何在傳授基礎理論知識、實驗動手技能的同時,增加學生的興趣和學習主動性、提高學習效果一直是我們探索與改革的重點。經過多輪的調研、實踐與反饋,本課程組探索了一套理論教學、實踐教學和開放式考試三位一體的研究型教學模式,取得了良好的效果。
1.免疫學理論的研究型教學
1.1 教學方式與組織形式
隨著信息技術的發展,多媒體教學手段的普及,教學效果得到了較大的提高。然而多媒體教學并沒有從根本上改變教學方式與組織形式,而且在傳統的教學尤其是合班上課中,經常出現“原理概念滿堂灌”的現象。在這種課堂中,教師從頭到尾唱主角,無法顧及到每個學生是否聽懂;學生往往只是一種被動的學習,教學效果較差[1]。因此,要激發學生的求知欲、好奇心和學習興趣,必須實現教學方式與組織形式的轉變,引入學生參與式教學,將教學組織形式從“以教師為中心”向“以學生為中心、以教師為引導”轉變,讓大學生走上講臺,而老師則主要起好引導作用[2]。
通過多年的教學改革和實踐摸索,我們在免疫學教學中成功地引入學生“參與式”教學。在這種“參與式”教學中,課題組教師結合國內外免疫學研究熱點、動態以及與免疫學相關的社會生活事件,擬定了一些主題,如“三聚氰胺”、“甲型H1N1流感”、“器官移植”、“奧運會違禁藥物”、“艾滋病”、“瘧疾”、“有機磷農藥”等,并將學生分組,自由選題,通過課后查閱國內外文獻進行拓展式學習,安排兩學時的時間由每組學生推舉代表講解各組制作的PPT。在參與式教學中,臺上的學生或娓娓道來,或熱情洋溢,將理論學習聯系科研或生活實際,通過科學問題的提出、研究內容的歸納與分析,最后都能提出一套比較完善的方案來解決問題;臺下的師生參與討論與點評,收獲都很大。這種“參與式”教學方式將學生的被動學習變為主動式學習,將教師的課堂灌輸變為學生課后拓展、師生共同探究。通過學生上講臺,師生互動,教師轉變角色,教師的權威不再建立于學生的被動學習基礎上,而是師生在共同參與的探究活動中掌握知識,提高能力。從多年教學實踐的情況來看,學生主動式學習的興趣提高,并通過課外學習延展了課堂的內容,收到了良好的效果。
而且,我們在教學中將我院熊立仲教授提出的“千問計劃”的教學組織形式也運用到日常教學中。在教學中多鼓勵學生自己提出問題,通過課堂討論或課后查找資料來回答問題。有的問題雖然是目前暫時回答不了的,但為他們以后探索研究這些問題播下了種子[3]。
1.2注重與研究型教學相適應的免疫學內容調整與更新
在教學內容方面,免疫學課程過去主要講授免疫學的一些基本理論技術,根據教學大綱的框架來實現既定的目標。對于這樣一門實踐性很強、發展日新月異的學科來說,完全按照以前的知識結構來設計教學內容已遠遠滿足不了學生的需要。一方面,我們根據課堂需要經常對教學內容進行更新,打破“重近代經典內容、輕現代新科技知識”的傳統,精選經典教學內容,在內容上更要力求反映科學技術和社會發展的最新成果,注意把體現當代學科發展特征,免疫學與其他學科間的知識交叉與滲透反映到教學內容中來,加大新內容的份量。另一方面,結合筆者的免疫學相關研究內容和成果引入課堂,把創新思維逐步融入學生的知識結構中,為學生探索新事物、培養樂于創新的精神和習慣打下了良好的基礎[4] 。
表1與研究型教學相適應的免疫學實驗課內容調整
同時,通過單獨設置免疫學實驗課,對課程的理論與實驗內容進行整合,補充了間接法ELISA實驗,并采用酶標儀對ELISA結果進行檢測,強化了實驗教學的先進性和新穎性。在實驗內容的安排上則強調實驗順序的連續性、實驗內容的密切銜接(見表1)。在免疫學實驗中,學生以基因工程技術超表達的蛋白為抗原,以小鼠和家兔為免疫動物,每班每人都能得到抗血清制備和ELISA檢測的實驗技能訓練,加深了對免疫學方法原理的深入了解。
2.以科研課題形式設計實驗課,培養學生創新能力
2.1將實驗內容與科研課題、大學生科技創新基金(SRF)項目、畢業論文和興趣小組等科研活動有機融合
免疫學實驗內容被整合成一個綜合大實驗后,類似于一個小型科研課題,是一種需要學生主動參與、發現問題、分析問題、解決問題為一體的初步科研訓練,要求學生必須以科研探索者的角色融入到實驗中,加強了實驗的科研訓練目的。在課余,我們還注意收集一些能用免疫學實驗解決的科學問題,如某些教師想用表達的蛋白來免疫獲得相應抗體、某個研究生正在制備抗血清用于免疫印跡雜交、某些SRF項目正在研究的對象可作為抗原等,將學生正在接觸或即將接觸的科研課題與實驗內容有機結合,學生更能體會免疫學實驗技能的重要性,會更能有準備地上好免疫學實驗課,避免為了做實驗而實驗,為了修學分而做實驗的消極態度[5]。
2.2以自身血液為標本,與社會實際加強聯系,提高學生動手的興趣
在間接法ELISA孵育等待的過程中,我們穿插安排了血型鑒定的興趣實驗。在實驗中讓學生親手采集自身血液,研究自己的血型。實驗完畢后將本班同學測得的血型做一統計,并與獻血、中國的血庫供應情況、血型改造等相關信息聯系起來。這個與自身相關的興趣實驗,極大地激發了學生的學習興趣,調動了學生的積極性。
2.3要求學生以論文格式提交實驗報告,為科研論文寫作打下堅實的基礎
在第一次實驗課上,讓學生明確本實驗類似于一個小型科研課題,并要求學生以論文格式提交實驗報告。對于即將邁入大四,進行畢業設計和畢業論文寫作的學生來說,寫論文比寫一般的實驗報告要難。因為,前言部分需要他們去查閱大量的相關資料;材料與方法部分要求他們了如指掌;實驗過程中要求觀察更加細致全面;所有實驗結果要求及時實事求是地紀錄;實驗后要求對結果運用因果關系、現象與本質等關系去推理分析,運用理論知識去認識討論各種本質變化之間的內在聯系,從而形成關于本實驗或整個綜合實驗的本質的完整的認識。如此理論一實踐一再理論一再實踐,能較好地激起了學生對科研的興趣,培養了嚴謹的科學態度和科研作風,更重要的是提高了他們的科學思維能力和科研寫作能力,從而達到了研究型教學的目的[6]。
3.實行開卷考試,考察學生理論聯系實際的能力
本科教學改革中一個很重要的方面是考試改革。生命科學的一些專業課和專業基礎課,基本上都是實踐性很強的課程。如果采用一般的閉卷考試,這樣容易造成學生僅僅通過死記硬背來應付考試,而不是通過靈活運用知識去分析和解決問題的弊端。因此,本教學團隊結合我院考試改革的要求,在考試方式上做了一些改革,對免疫學開卷考試進行了一些嘗試??荚囶}目結合當前農業、醫學、環境和食品等領域與免疫學相關的熱點問題,如針對瘦肉精的安全檢測或禽流感病毒的檢測等,如何建立快速靈敏的免疫學檢測方法。在考試內容的靈活性和題目的多樣性上下工夫,使之更全面地考察學生掌握和運用知識的能力,在解決這些實際問題中使學生理論聯系實際,做到學以致用,取得了較好的效果,受到了學生的好評。