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青春的童話范文1
一、陽光下的眼眸
他笑,眼里泛著我熟悉的光芒。他說:“高三了,要加油??!”當他說這句話的時候,我與他已經相識兩年了,否則也不會覺得如此熟悉。我轉身,濕了眼。
他長的很好看,也很壯實,這是我對他的第一印象。日記本零亂的幾行字,怎么拼湊,都是一種前所未有的安心。就像是有一天,他會像我的王子一樣,給我安全感,保護我。我在乎的,只是那眉間熟悉的溫暖。
二、起初,只是如此
我到現在都還記得,那是一個有著刺眼陽光的中午,排著長長的隊伍,報了名后,我倔強的搶在父母前面,拎著大包大包的行李,向著宿舍樓走去。在家里,我很活潑,沒有拘束。事實上,和大多數人一樣,在學校里,我是個很要強的學生。
那天下午,我們就開始正式上課。教室里,前排的座位永遠都不是我向往的。準確的說,我是個好學生。但是很多時候我很貪玩??拷芭_有一張空桌子。也許是太破舊暫時沒人選。我默默走過去。我不得不說學校的傳統政策:每學期開學都要分班!又一次進入冰冷的世界,我的心很安靜。或許是早已預料。
那天,他比我晚來1小時。前排稀稀落落的被課本、鉛筆侵占了。窗外的陽光照到他的臉上,我抬起頭,他笑,眼里泛著我熟悉的光芒。
三、往后,卻才開始
不知道從什么時候,我就不喜歡數學。莫名其妙的不喜歡。看到它們就煩,尤其是讓我心煩的證明題。那天剛結束數學課,而我也正好放棄了一道十二分的證明題。
“不想學了就休息一會兒,這么低的效率,這么熱的天氣,誰都沒心情做題?!焙孟袷撬芏宜频?。我隨即轉過身,我們出去玩吧,呵呵,我聽到他在后面的笑聲,安靜,不容反抗……日記本里寫著這段話。卻因此忘記了第二天要交的數學作業。只是偶爾貪玩而已!
同桌的那段日子,總是喜歡在無聊的時候聽他講山里的故事。我們頭對頭,腳并腳,因為那樣,可以感覺到自己和他是在一起的,不會孤單,不會害怕。仿佛心里,有些許依靠。下課后,他喜歡打籃球,所以他的衣服總會有斷線裂開一條“傷疤”,那天又是數學課,我摸著早自習從宿舍帶來的針線,偷偷給他縫衣服。他總是對我說:小丫頭上課好好聽講呀!我只是笑笑不說話。
四、教室里的彩虹
教室里是不可能出現彩虹的。這一點我比誰都清楚。晚自習下課后,他帶著我去買冰糖葫蘆,我們一起滑旱冰,我在他雙手提水果和禮物時給他穿外套…太多太多,這些細微的一切,我都記憶猶新。在她身旁,我就是一個小丫頭。他會帶走我所有的煩惱。他會買給我喜歡的水果。他會給我講山里的故事。
我得承認,我喜歡他。喜歡和他在一起。那天,他送我一條純銀項鏈。他親自給我戴上。他的手指穿過我的頭發,我忽而臉微熱。應該是第一次,第一次臉紅。不是因為距離,而是因為溫暖。在他身邊的溫暖,讓我不禁臉紅。我側過身,轉來轉去,不讓他看到我的尷尬。
那天,他說外面下雪了!我一臉迷惑,他敲著我的頭說:“小丫頭,又在想啥呢?發啥楞,你扭頭看看不就知道了!”這時我才發現,我一直都在看著他。我莫名的心虛,然后拉著他的手,跑去操場看雪。我對他的感覺,開始有了微妙的變化。
五、流動的光點
六月夏至,依依不舍的春天。最冷的時候,是他拉著我的手替我塞進他的口袋。最熱的時候,也是他,帶著我去河里,在有樹蔭的岸旁,輕輕地掀開石頭,然后捉起小螃蟹遞給我。好像我的意識里全部是他,很幸福,很簡單,想永遠在他的愛護下,一起上學,一起打鬧。
于是,我望著他印在河里的倒影,發起呆來。那天,不知道什么原因,我把那條項鏈給弄丟了。為此我哭了,一向很堅強、樂觀的我哭了。耳旁姐妹們的勸告都被他的聲音覆蓋。我躺在床上,第一次失眠。腦子里,全部都是他送給我項鏈時的畫面:“小丫頭,我買了這條項鏈給你,這樣我就可以永遠陪著你了”他一邊說,一邊輕輕撥開我的長發,替我戴上項鏈。那一刻,我想是我這么多年最幸福的。所以這會兒才會如此難受。
六、柳絮的世界
那天,他又一次叫我的名字:清,我的座位被調動了,我被分到靠外走廊那里了。他沒有再說什么,因為我的眼角流淌出滾燙的淚水,他要幫我擦掉。我是第一次拒絕他,揮手打掉他將要觸及我額頭的手掌。
揮手之后,我后悔了。那雙熟悉溫暖的手掌,被我硬生生的打掉。他遲疑了一下,并沒有生氣。只是靜靜的看著我。隨后,預備鈴聲響了,我趴在桌子上,獨自流淚。還會有機會同桌嗎?我不知!
他離開以后的日子,我開始習慣望著窗外。偶爾會被數學老師抓住,然后站起來發懵。于是從那天起,他還是給我傳紙條。我以為自己可以安靜,即使整天不說話,我也知道自己是無論如何也安靜不下來的。懷念那雙讓我溫暖的撫摸過我額頭的手掌。懷念那讓我雙手掰手腕都不能取勝的大手。懷念那個替我戴項鏈輕輕挑起我長發的雙手。
我又看到他認真做題的表情了,那么淡定。他也不是數學特棒,只是他會耐心慢慢琢磨。而我會把放棄的時間,用來看他,可是每一次看到他的背影,我的淚水就會悄悄滑落。我多么想告訴他:離開你以后所有的意外,一半是屬于留在我心底的你,一半是有你的那些甜蜜回憶。
青春的童話范文2
我開始察覺到男生追隨著我背影的目光。同桌小米說,你應該驕傲,全校沒有一個女生的身材比你更好了。但我卻是惶恐的,那些目光非但沒有讓我驕傲,反而讓我無所適從,我總感覺他們那些目光仿佛剝開了我的衣服,有時候這種感覺讓我不斷地低下頭來檢查自己是不是扣子沒有扣好,盡管很清楚地知道自己穿的是很規矩的T恤,根本就不可能出現沒扣扣子這種情況,我想或許是我的感覺神經太過于敏銳,我的想象太過于下流。
而楊磊的目光正是我渾身不自在的主因。我含著胸走在校道上,楊磊常常從后面跑過來,或者不跑,而是騎著他的自行車,從我身邊飛馳而過,我會聽到他的口哨,或者別班一些問題男生的口哨,此刻的我會驚恐地聽到楊磊說:葉薔薇,抬頭站直!我居然還會“哦”一聲,然后條件反射地站得筆直。再然后我會聽到楊磊爽朗而大聲的笑,那種笑聲在校道上的枝葉間纏纏繞繞,讓我的心忽然生出一些無名的憂傷,甚至感覺天就要暗淡下來了。那些日子,我發現青春真的很長很長,討厭自己為什么還沒有長到能夠接受變化,長大到可以驕傲。
我仍然含著胸、低著頭走路,原來,對于一個原本就內向的人來說,美麗或者張揚都是一種無形的傷害。這個認識讓我更加沮喪。而這時,我收到了人生的第一封情書。那是隔壁班一個男生寫的,他像他的文筆一樣差,他提到了喜歡我的理由:因為你的胸很大。
看著這7個字,我感覺自己的血液全都涌上了腦袋,我不知道我的臉是不是紅得特別可怕,我只知道有一種無以言喻的羞辱令我渾身顫抖,甚至沒有辦法思考。我能想到的就是沖到隔壁班去,當著那個男生的面撕碎這封信,然后狠狠地甩他一個耳光,然后再語無倫次地罵他不要臉什么的。
我忘記了自己是不是因為這種羞辱的感覺而哭著,沖動地跑出了教室,不知道在走廊里撞倒了誰,我幾乎是手腳并用,混亂而準確地把那封信丟到那個男生的臉上,然后甩給他一個耳光,或者因為我的力道太大,那已經不能算單純的耳光,而是一個拳頭。
那個男生好像被我打得流了血,我的淚水讓我的視線模糊得可怕,幾乎是跌跌撞撞地跑離了那里。
那個讓我感覺恥辱的黃昏,我蹲在教學樓下的球場階梯上哭泣。
空曠的球場上,我聽到自己回蕩著的抽泣聲,還能聽到我大顆大顆淚水滴落在水泥地上的響聲。
這有什么好哭的。你很豐滿呀,我也很喜歡。
我猛地從淚水中抬起頭,居然看到了楊磊。我瞪著他,用一種恥辱的、可怕的并且充滿了憎恨的眼光看著他。他沒有再說話,臉是紅的,也瞪著我,我讀不懂他的眼里是什么樣的情緒,但我想我眼里一定充滿了厭惡的憤怒的火光,它們烤干了我眼睛里原本充盈的淚水,讓我的眼睛變得異常干涸。
我直直地瞪著楊磊,忽然發現此刻的他跟那個寫信給我的男生沒有什么兩樣。這樣的認知讓我的眼神漸漸地空洞起來。
我慢慢地站起來,不再瞪他,我感覺自己很冷,很空,像一具丟失了靈魂的軀體。我輕飄飄地經過楊磊身邊,迎著荒涼的夕陽,我是這樣的空洞、傷心。
我找來一條長長的白色棉布。纏緊了我那像我的傷心一樣瘋狂生長的胸部,這讓我的17歲全是疼痛的記憶。因為打人事件,我在學校里很是出名,而這樣的出名,是一種難以名狀的難堪。我對此的直接表現,除開那根讓我無限疼痛的白色棉布,就是一種沉默。我甚至不和小米聊天了。對于她的話,我甚至開始用“哦”來回應。而對于楊磊,對于他的任何言語,我連“哦”都不用。我想我會在沉默中死去。有那么多的東西沒有人懂,我也不懂,無疑就只有沉默。在這種孤獨的、沉默的、疼痛的、有很多說不出的憂傷時光里,那一條同樣沉默同樣疼痛悲傷的白色棉布牽著我同樣疼痛的青春,陪著我走到了高三。
還有43天就要高考了,而我最后一次模擬考試居然連本科線都沒有上??上胛沂窃鯓拥膽n傷,放學后我沒有回家,一個人在河邊獨自流淚,其實也只是想一個人靜靜。身后卻有人焦急地喊:葉薔薇,你不要做傻事啊。我一驚,真的就失足掉進了冰冷的河水里。有那么一瞬間,我覺得自己離死亡很近,我甚至不去掙扎。河水開始變得很藍,透明清澈純凈的藍,讓我想永遠這樣冰冷地睡過去。
等我醒過來,看到了楊磊滴水的頭發,還有他潮濕的目光,他說,你這樣,不痛嗎?
我散開的扣子,還有那一條松開了的白色棉布,都像我此刻的心情一樣,潮濕而冰冷。
因為這一種不為人知的尷尬,讓我在面對楊磊時更加沉默。我甚至不再看他。
楊磊曾經偷偷地塞我文具盒里一張紙條,那上面的地址,我去過的,是一間在角落里賣一種叫做文胸的小店,在這么偏僻的小鎮上是獨一無二的。那里進出著一些年齡比我大的驕傲的女孩子,去了好幾次,我都沒有勇氣踏進去,成為她們其中的一個。
半年后的大學校園里,我丟棄了那一條已經不再潔白的棉布,我離那個偏僻的小鎮已經很遠很遠了,這個城市里的女孩子,全都妖嬈美麗得像怒放的玫瑰。這個城市里,也有很多更漂亮的內衣小店,已經有很多與我同齡的女孩常常很快樂地從里面走出來,我開始成為其中的一個。
青春的童話范文3
關鍵詞:蟬擬青霉;總多糖;腺苷;腫瘤;體外
中圖分類號:R285.5 文獻標識碼:A 文章編號:1673-7717(2010)04-0760-05
Research of Anti-tumor Effects of Different Purified Components of Cordyceps Cicadae in Vitro
CAI Jufen, JIANG Zhiming, LU Hongyang, LU Bozheng
(Zhejiang Cancer Hospital, Hangzhou 310022, Zhejiang, China)
Abstract:Objective: To further study anti-tumor effect in vitro of polysaccharides and adenosine respectively, or combined with cisplatin (DDP) or adriamycin (ADM). Methods: Detection of inhibition of human lung adenocarcinoma (PAA-1) cell growth with DDP, ADM, polysaccharides and adenosine respectively or combined administration by MTT assay, cell cycle by flow cytometry on cultured cell lines, colony-forming rate of PAA-1 cell in vitro by light microscope examination, and lymphocyte subsets by flow cytometry. Results: IC50 of DDP, ADM, total polysaccharides, and adenosine on growth inhibition of human lung adenocarcinoma (PAA-1) cell were 9.05μg/mL, 36.21μg/mL, 1086mg/mL and 7.81mg/mL. It is antagonist of Polysaccharide combined with ADM or DDP on growth inhibition of PAA-1 cells. Adenosine with 8mg/mL combined with ADM with 4μg/mL indicate synergism. It is no different between different concentrations of adenosine alone and combined with DDP on cell growth.With the increase of concentration of adenosine, G0/G1 phase cells decreased, while the G2 / M phase relative increase when adenosine combined and ADM. It is no different between polysaccharide group and negative control group on colony-forming rate of PAA-1 cell in vitro. Adenosine groups were slightly lower than negative control group on colony-forming rate. With a gradual increase in the concentration of adenosine, the rate of colony-forming gradually decreased. Polysaccharides had no effect on on lymphocyte subsets of PAA-1 cell in vitro. Conclusion: The polysaccharides and adenosine has a certain anti-tumor effects in vitro. Polysaccharide combined with ADM or DDP can not increase their anti-tumor effects in vitro, adenosine combined with ADM can increase anti-tumor effects in vitro.
Key words:Cordyceps cicadae; total polysaccharides; adenosine; tumor; in vitro
收稿日期:2009-11-10
基金項目:浙江省中醫藥管理局資助項目(2007CB186)
作者簡介:蔡菊芬(1953-),女,浙江蕭山人,主任醫師,研究方向:腫瘤化療及中西醫結合診治。
蟬花是一傳統名貴中藥,含有多種必須氨基酸、真菌多糖、腺苷、生物堿、麥角甾醇、蟲草素酸等成分,具有滋補強壯,抗疲勞抗應激以及免疫調節作用等。筆者前期工作已經從蟬花中提取了總多糖和腺苷,筆者進一步研究了其在體外的抗腫瘤作用。
1 儀器與材料
1.1 儀器
[BW(S(Z,1,2)MD2]
[WT5”FZ〗中華中醫藥學刊
TU-1800PC紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)。高效液相色譜儀Shimadzu LC-20AT型、SPD-20A(VWD檢測器),N2000工作站。CO2培養箱(德國Heraeus公司),流式細胞儀(型號FACS Calibur,美國BD)。熒光倒置顯微鏡(Olympus)等 。
1.2材料
腺苷、蟲草素對照品:由中國藥品與生物制品檢定所提供。CycleTest細胞周期試劑盒(美國BD公司),RPMI 1640培養液(美國GIBCO),小牛血清(杭州四季青生物工程材料研究所),(簡稱DDP,云南個舊生物制藥有限公司產品,批號:070101),阿霉素(簡稱ADM,浙江海正藥業股份有限公司,批號071105),總多糖和總腺苷(由浙江省醫學科學院藥物研究所天然藥物研究室提供,苯酚硫酸法檢測,未減去水分含量的蟬花中總多糖含量為51.6%,蟬花總多糖中的水分含量為8.7%。蟬花中腺苷在210 nm檢測時,純度為19.88%;在260nm檢測時,純度為31.82%。),CD25,CD19,CD3,CD4,CD8,CD56,CD44抗體(美國BD)淋巴細胞分離液,PBS緩沖液,RPMI 1640培養液(美國GIBCO)等,
1.3細胞株
人細胞肺癌細胞系PAA-1。
2方 法
MTT法檢測DDP、ADM、總多糖、總腺苷單獨及聯合用藥對人肺腺癌(PAA-1)細胞的生長抑制能力。
2.1 實驗分組
DDP采用濃度為0.3125μg/mL,0625μg/mL,1.25μg/mL,2.5μg/mL,5.0μg/mL,10μg/mL,20μg/mL,40μg/mL,80μg/mL和160μg/mL;ADM采用濃度為0.25μg/mL,0.5μg/mL,1.0μg/mL,2.0μg/mL,4.0μg/mL,8.0μg/mL,16μg/mL和32μg/mL;總多糖采用濃度為:0.3125mg/mL,0.625mg/mL,1.25mg/mL,2.5mg/mL,50mg/mL和10.0mg/mL;腺苷采用濃度為:0.0625mg/mL,0125mg/mL,0.25mg/mL,0.5mg/mL,1.0mg/mL,2.0mg/mL,4.0mg/mL,80mg/mL,16mg/mL和32mg/mL;DDP與多糖聯合作用,分別為:陰性對照組,DDP16.0μg/mL,DDP 8.0μg/mL,DDP 40μg/mL,DDP 2.0μg/mL,DDP 16.0μg/mL+多糖5mg/mL,DDP 8.0μg/mL+多糖5mg/mL,DDP 4.0μg/mL+多糖5mg/mL,DDP 2.0μg/mL+多糖5mg/mL;DDP與多糖聯合作用,分別為:陰性對照組、ADM16.0μg/mL、ADM 8.0μg/mL、ADM 4.0μg/mL、ADM 2.0μg/mL、ADM 16.0μg/mL+多糖5mg/mL、ADM 8.0μg/mL+多糖5mg/mL、ADM 4.0μg/mL+多糖5mg/mL、ADM 2.0μg/mL+多糖5mg/mL;DDP與腺苷聯合作用,分別為:陰性組、DDP 8.0μg/mL、腺苷8mg/mL、腺苷05mg/mL、腺苷0.25mg/mL、DDP8.0μg/mL+腺苷8mg/mL、DDP 8.0μg/mL+腺苷0.5mg/mL、DDP8.0μg/mL+腺苷0.25mg/mL;ADM與腺苷聯合作用,分別為:陰性組,ADM40μg/mL、腺苷8mg/mL、腺苷0.5mg/mL、腺苷0.25mg/mL、ADM4.0μg/mL +腺苷8mg/mL、ADM4.0μg/mL +腺苷0.5mg/mL、ADM4.0μg/mL +腺苷0.25mg/mL。
2.2細胞實驗處理
對數生長期PAA-1細胞用025%胰酶+0.02%EDTA消化后懸液配成7×105/mL,96孔板每孔加100μL,每孔7000細胞,培養24h后加藥處理。每個處理組設6復孔。陰性對照組加100μL培養液;依照各實驗分組加不同濃度藥物,各孔終體積為200μL;處理24h后加20μL MTT,37℃ 5%CO2培養4h后離心,小心棄去上清,加150μL二甲基亞砜,微振蕩1min使之充分溶解,酶標儀雙波長(570nm/690nm)檢測吸光度OD值。
2.3數據處理
對各組OD值取平均值,計算抑制率(IR)。藥物抑制率= (1-藥敏組平均OD值/陰性組平均OD值)×100%。對結果應用直線回歸法分析IC50,并作相關性分析求r值。
2.4對體外培養細胞系細胞周期的影響
細胞分成15組,分別為:陰性組,腺苷8.0mg/mL組,腺苷0.5mg/mL組,腺苷0.25mg/mL組,DDP 8.0μg/mL組,DDP 8.0μg/mL+腺苷8mg/mL組,DDP 8.0μg/mL+腺苷0.5mg/mL組,DDP 8.0μg/mL+腺苷0.25mg/mL組,ADM 4μg/mL組,ADM 4μg/mL+腺苷8mg/mL組,ADM 4μg/mL+腺苷0.5mg/mL組,ADM 4μg/mL+腺苷025mg/mL組,多糖5mg/mL組,DDP 8.0μg/mL+多糖5mg/mL組,ADM 4μg/mL+多糖5mg/mL組。
PAA-1細胞按照1∶3傳代,24h后加藥換液,繼續培養24h,0.25%胰酶+0.02%EDTA消化收集,PBS漂洗,離心,收集細胞沉淀75%冷酒精固定,按照Cyclone DNA試劑盒說明書操作,BD FACSCalibur流式細胞儀檢測并分析細胞周期。
2.5 對體外培養PAA-1細胞系集落形成率的影響
2.5.1實驗分組陰性組,多糖5mg/mL組,DDP 8.0μg/mL組,ADM 4μg/mL組,腺苷0.5μg/mL組, DDP 8.0μg/mL+多糖5mg/mL組,DDP 8.0μg/mL+腺苷0.5mg/mL組,ADM 4μg/mL+多糖5mg/mL組,ADM 4μg/mL+腺苷0.5mg/mL組。
2.5.2 實驗方法 對數生長期PAA-1細胞胰酶消化后培養24h,每組1瓶細胞分別處理24h,胰酶消化計數細胞,每組3瓶,每個培養瓶中加入400個細胞,加足量培養液,靜止培養10天。然后倒去上清液,PBS小心漂洗2次,甲醇∶冰醋酸3∶1固定10min,PBS漂洗2次,加2%Giemsa染色10min,PBS漂洗2次,陰干后光鏡檢查,大于30個細胞的團塊記為一個集落。
2.6對體外培養淋巴細胞亞群分化的影響
2.6.1 實驗分組 陰性組,多糖5mg/mL組。
2.6.2實驗方法無菌抽取人外周血100mL,加肝素抗凝,使肝素的終濃度為25 IU,輕輕搖晃5min,使其抗凝完全。50mL離心管中加35mL淋巴細胞分離液,小心在上層加15mL抗凝血,2000r/min離心30min。小心吸取中間層淋巴細胞,PBS漂洗2次,1500r/min離心10min,收集沉淀細胞,計數,取3000萬總細胞,加含有重組人白細胞介素-4(rhIL-4)10ng/mL,重組人粒-巨噬細胞集落刺激因子(rhGM-CSF)1000IU/mL的培養液10mL,37℃ 5%CO2培養3h。輕輕傾斜液面,使懸浮細胞漂浮,小心吸取,37℃ 5%CO2培養過夜。按照分組,加藥培養24h,離心收集細胞,PBS漂洗2次,分5小管,4管分別加CD25/CD19,CD4/CD8,CD56/CD3,CD44抗體10μL,5號管作為陰性對照不加抗體,避光孵育30min,流式細胞儀檢測。
3結 果
3.1 MTT法檢測DDP ADM 總多糖 總腺苷對PAA-1細胞的生長抑制能力
見表1。
表1DDP ADM 總多糖 總腺苷對PAA-1細胞的生長抑制情況
組別IC50r
DDP9.05μg/mL0
ADM36.21μg/mL20.66
總多糖10.86mg/mL54.52*
總腺苷7.81mg/mL39.51**
3.2 各藥聯合對細胞生長的影響
3.2.1 多糖和順鉑聯合對PAA-1細胞的生長抑制作用 5mg/mL多糖聯合16μg/mL,8.0μg/mL,4.0μg/mL順鉑作用時,對PAA-1細胞也有一定的抑制作用,但是與16μg/mL,8.0μg/mL,4.0μg/mL順鉑單獨作用的效果分別相比,抑制率均降低,差異有統計學意義(P=0.000188, 639E-06, 0.000526);而5mg/mL多糖聯合2μg/mL順鉑與2μg/mL順鉑單獨作用相比,兩者抑制率無顯著差異 (P=0.099>0.05)??傊?5mg/mL多糖和順鉑表現出強烈的拮抗效應,見表2。
表2 順鉑及順鉑聯合多糖對PAA-1
細胞生長抑制作用(±s)
組別OD值平均抑制率(%)
陰性對照組0.9745±0.0986 0.00
DDP 16.0μg/mL0.4432±0.052354.52*
DDP 16.0μg/mL +多糖5mg/mL0.6798±0.086430.24*
DDP 8.0μg/mL0.5895±0.058639.51**
DDP 8.0μg/mL +多糖5mg/mL0.8277±0.034615.07**
DDP 4.0μg/mL0.7652±0.0424 21.48***
DDP 4.0μg/mL +多糖5mg/mL0.8802±0.04439.68***
DDP 2.0μg/mL0.8464±0.039613.15
DDP 2.0μg/mL +多糖5mg/mL0.9015±0.0756 7.49
3.2.2 阿霉素聯合多糖對PAA-1細胞生長抑制作用 與16μg/mL阿霉素單獨作用相比,5mg/mL多糖與阿霉素聯合作用時,對細胞的生長抑制率降低,差異有統計學意義(P=0.0308),而與8.0μg/mL、4.0μg/mL、2.0μg/mL阿霉素聯合作用時,對應各組的抑制率沒有顯著性差異(P=0909,0.987,0.891)。總之,5mg/mL多糖與阿霉素表現出拮抗效應,見表3。
3.2.3 順鉑聯合腺苷對PAA-1細胞生長抑制作用與8.0μg/mL DDP單獨作用相比,8mg/mL、0.5mg/mL、025mg/mL濃度腺苷與其聯合作用時,對細胞生長抑制作用均無顯著差異。因此,腺苷和DDP表現出拮抗效應,見表4。
表3 阿霉素及阿霉素聯合多糖
對PAA-1細胞生長的影響(±s)
注:阿霉素16.0μg/mL+多糖5mg/mL與16μg/mL阿霉素單獨作用相比,*P=0.0308
表4 順鉑聯合腺苷對PAA-1細胞生長抑制作用(±s)
組別OD值平均抑制率(%)
3.2.4 阿霉素聯合腺苷對PAA-1細胞生長抑制作用 8mg/mL、0.5mg/mL、0.25mg/mL濃度腺苷與4.0μg/mL阿霉素聯合作用和4.0μg/mL阿霉素單獨作用相比,對細胞生長抑制作用均顯著增加,差異具有統計學意義(P=230524E-08, 0000116,9.8488E-05)。數據顯示,0.5mg/mL、0.25mg/mL腺苷與4μg/mL阿霉素聯合作用時,顯示出拮抗效應;而當8mg/mL腺苷與4μg/mL阿霉素聯合時,對細胞顯示協同效應,見表5。
表5 阿霉素聯合腺苷對PAA-1細胞生長抑制作用(±s)
組別OD值平均抑制率(%)
注:與4.0μg/mL單藥阿霉素作用相比,*P2.30524E-08,**P=0000116,***P=9.8488E-05。
3.3 對體外培養細胞系細胞周期的影響
單DDP組,各濃度腺苷組,DDP和腺苷聯合組,多糖組,多糖和DDP,多糖和ADM組中,細胞各周期并未出現明顯變化。ADM組,ADM和腺苷聯合組的G0/G1期細胞明顯減少,特別是單用ADM組,G0/G1細胞特別少,而G2/M期細胞特別增多。ADM和腺苷聯合作用,隨著腺苷濃度的增加,G0/G1期細胞逐漸減少,而G2/M期相對增加,見表6。
表6各組處理對體外培養細胞系細胞周期的影響
3.4 對體外培養PAA-1細胞系集落形成率的影響
加化療藥各組,及聯合使用各組的集落形成率遠低于陰性對照組,而多糖組的形成率和陰性對照組未見明顯差異。不同濃度腺苷組的集落形成率略低于陰性對照組,隨著腺苷濃度逐漸增加,集落形成率逐漸下降,見表7。
表7 各組處理對體外培養細胞集落形成率的影響(±s)
組別集落數P值
3.5 對體外培養淋巴細胞亞群分化的影響
多糖5.0mg/mL體外處理淋巴細胞24h后,各組加抗體孵育后,流式測分型。經多糖處理和陰性對照組兩者之間未看到明顯差別,見表8。
表8多糖處理對體外培養淋巴細胞亞群分化的影響
組別陰性對照組(%)多糖5.0μg/mL(%)P值
4討 論
蟬花是麥角菌科真菌大蟬草(Cordyceps cicadae Shing)寄生于蟬科昆蟲山蟬(Cicada flammata Dist)若蟲上的子座及若蟲尸體的干燥復合體。蟬花藥用已經有1000多年時間,含有多種必須氨基酸、真菌多糖、腺苷、生物堿、麥角甾醇、蟲草素酸等成分,具有滋補強壯,抗疲勞抗應激以及免疫調節作用,所含的蟲草多糖具有抗腫瘤作用[1]。與冬蟲夏草相比,兩者的菌株均為蟬擬青霉[Paccilomyccs cicadac (Miqucl.)Samson],含有相近的成分,因此蟬花常被用作冬蟲夏草的代用品[2]。目前在市場上流通的蟬花藥材基本上為無性型的蟬擬青霉藥材。
化療是治療肺癌的主要手段之一。但是化療藥物都有較強的毒副作用,并且治療中癌細胞容易產生耐藥性。為了增加腫瘤細胞對化療的敏感性,降低藥物的毒副作用,許多醫生在應用化療藥物的同時給病人進行中醫中藥扶正治療。多年的研究觀察表明, 化療同時配合中醫中藥辨證治療, 能減輕化療的毒副反應, 增強腫瘤細胞對化療藥物的敏感性, 提高機體對化療的耐受性, 尤其在延長中位生存期和生存率方面有良好的療效。
蟬花作為一味名貴中藥,在臨床上多用于鎮痛,鎮靜,提高機體的免疫能力,改善病人的營養狀況,實踐中也有將蟬花應用于中藥抗腫瘤[2],但是蟬花的直接殺傷腫瘤作用有待開發。
蟬擬青霉中主要的活性成分包括蟲草多糖、腺苷以及蟲草素。本項研究表明蟬擬青霉中多糖和腺苷成份含量較多,但是未提取到蟲草素。多糖和腺苷在一定的濃度下對癌細胞的生長有明顯的抑制作用,且存在劑量關系,隨著作用時間的不斷增加,但是兩者的使用量都較大,在臨床上較難應用于直接殺傷。
多糖和DDP和ADM聯合應用未見有明顯的抑制效率提高,反而使同濃度下DDP和ADM的殺傷降低。這和我們前期的研究一致[3]。這表明多糖對直接殺傷腫瘤細胞這方面沒有協同增效作用。多糖單獨使用和DDP、ADM聯合使用與陰性對照相比,細胞的周期分布未見明顯變化,但是和單獨使用ADM相比,細胞G0/G1期變化較大。這和我們前期工作有一定的分歧,可能的原因是粗提物和純總多糖相比,含有一定量的未知物質,今后將對這部分物質繼續進行分離鑒定。
單獨使用多糖對集落形成率有一定的影響。但是多糖聯合化療藥物和單獨使用化療藥物兩者之間未見有明顯差異。
腺苷在0.25mg/mL~8mg/mL濃度,對細胞的抑制率保持大約35%,出現此平臺效應。在和DDP聯合時,顯示出明顯的拮抗作用。而當聯合ADM時,ADM4.0μg/mL+腺苷8mg/mL對細胞出現協同殺傷作用,ADM4.0μg/mL+腺苷0.5mg/mL、ADM4.0μg/mL+腺苷0.25mg/mL時,腺苷出現拮抗作用,表明腺苷在這個濃度范圍內,對細胞的作用可能存有2種不同的機制,單用低濃度腺苷時,抑制效應占主要,但是遇上ADM時能起到拮抗ADM的作用。單用較高濃度腺苷時,促進細胞生長的機制逐漸加強,但是和ADM聯合時顯示出協同作用。此現象尚未見文獻報道。具體的作用機制有待更深入研究。
腺苷聯合ADM時,能使細胞周期向對照組比例轉化,削弱ADM的改變周期效應,隨腺苷濃度降低,這個削弱效應越明顯。這與低濃度腺苷和ADM有拮抗效應相吻合。
多糖對體外培養的淋巴細胞亞群分化沒有明顯效果。而文獻中,在大鼠身上使用的多糖能顯著影響機體的免疫能力,這表明多糖對免疫能力的促進功能依賴整個機體來發揮作用,或者是多糖對免疫能力的影響主要作用于淋巴細胞以外的其他免疫相關細胞群。
實驗表明,蟬擬青霉總多糖和總腺苷有一定抗腫瘤的能力,能夠在體外發揮明顯的抑瘤作用,有進一步研究和開發的必要。但是總多糖和總腺苷的各自作用機制有所不同,高濃度和低濃度的腺苷作用也不盡相似,需要有進一步實驗研究來指導臨床應用。
參考文獻
[1] 史宇翔.冬蟲夏草藥理作用研究概況[J].中國藥業,2005,14(2):72-74.
[2] 秦葵,陳紅英.蟬花的研究概況[J].基層中藥雜志,2002,16(6):54-55.
青春的童話范文4
耳邊,媽媽的童話故事不知什么時候停止了,余音仍在心房回蕩。老師笑著告訴我們我們長大了將要畢業了。童話伴隨著我們的童年逝去了。
我們笑著領取畢業證,笑著填同學錄,但是每個人都感覺得到,笑容依舊,夢幻般的童年回不來了,一種悲傷在空氣中蔓延,淚水應頰而下,親愛的同學,敬愛的老師,分別了,幾個春秋悄然逝去了,走向童話的盡頭。
長大了,是的,白雪公主的舞裙不再華麗,小矮人的友誼還在延續。童話的盡頭,是悲傷,是青春的憂郁。
青春,回首,是無知。
青春的童話范文5
燕子去了,不會再回來:
曾經認為,
桃花謝了,不會在盛開:
曾經認為,
月兒走了,不會再出現:
我想童話王國的孩子,
總在夢境中徘徊。
然而有一天,
當我發現那風中搖曳的較弱花蕾,
當我望到那群星閃耀的璀璨夜空,
當我看到雨過天晴之后,
圣潔的云朵又綻開在藍天。
我,終于走出了那童話的王國,
走進了青春的純色果園。
在陽光如包中感受溫暖,
在風雨如磐中體會失落,
在冰雪茫茫中經受考驗。
終在一天,
那青春德國的展現青春的紅顏。
人生是河,青春似流水,
河流永不停息,
流水逝而不返:
人生是列車,青春是驛站,
列車呼嘯而過,驛站只是瞬間;
只是,當我們驀然回首,
青春的童話范文6
新陽已經升起
暮光早已逝去
白鴿掠過頭頂
陽光少年
輕狂際你短發飛揚
熾紅的長劍猶勝新日
縷縷陽光撫摸眼角眉梢
亦似王子
記憶好似開始飛翔
飛得很遠很遠
劍梢仿佛仍在手中
抬眸時卻發現
你的世界已沒有它的痕跡
卻必須承認
青春是一場如實如夢的童話
你們