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免疫學分析法范文1
【中圖分類號】 G625.3 【文獻標識碼】 C
【文章編號】 1004―0463（2016）09―0104―01
圓面積”教學中，主要是教會學生通過操作，來對圓面積的計算方法進行深入的了解，要求學生明確對平面圖形的認識和測量，采用做實驗的方法來進行圓面積的推測，運用圓面積計算公式來解決實際生活中的問題。通過這樣的形式，幫助學生理清解題的思路，有助于教師能夠更好地進行“圓面積”教學的開展。
一、學生不能充分掌握“圓面積”教學方法的原因
1.對公式推理理解不深刻
在計算圓面積中，需要學生掌握計算的公式，根據公式進行推理，進而計算出圓面積。但是在實際教學中，教師對圓面積公式的講解情況不清晰，不能對學生做好系統的分析，導致大多數學生不能對該公式充分理解，一旦對題型的意思發生曲解，學生在解題過程中，就會表現出束手無策。例如，數字36，學生能夠很快地知道正方形的邊長的6，正方形的邊長可以作為圓形的半徑，學生可以利用圓的面積公式S=πr2能夠快速地求出圓的面積，但是如果把36改成20，學生就會表現得無從下手，學生在求圓的面積時，總是先想到求出圓的半徑，再利用公式求出圓的面積。教師在教學中忽視了對學生講述圓的面積時r2的π倍，其實圓的面積與r2有著最直接的關系。
2.缺少“圓面積”探究經驗
在小學數學學習圓的面積時，教師沒有充分考慮到小學生的認知能力，認為小學生只需掌握基本的公式，不需要進行漫長的探究過程。所以在圓面積推導過程中，往往忽視對學生圓面積探究的過程，導致學生在解題過程中，不能充分理解圓面積公式。
3.缺乏運用和練習
教師在進行圓面積講解中，把主要的精力放在了公式套用的計算上，學生往往只能采用觀察和推理的手段來進行計算公式的推導，在練習中學生缺少了對公式的推導，在運用過程中，必然就會缺少對推導過程的理解，學生只能機械地通過套用公式的形式進行計算，不利于學生對公式進行深入的理解，導致學生缺乏運用和練習。
二、促進小學數學“圓面積”教學方法有效實施的對策
1.重視情境操作
教師在教學過程中，應該加深對操作情境的理解，使學生加深對幾何圖形周長和面積的理解程度，對圖形的實際意義和變化的本質進行深刻的理解。首先，教師通過描繪的形式，進行圓面積概念的理解。教師在實際教學中，導入了4個大小不一的圓形，學生可以運用筆來描畫或者用線繞取的方式來進行圓面積的計算。用線繞圓形一周能夠充分表現圓的周長和圓的面積，讓學生再次感受圓面積和周長的區別。其次，通過比較和感悟的形式來進行圓面積大小變化的比較。在進行圓面積計算的過程中，教師仍然運用導入的方式，來對圓面積進行觀察和實驗的形式，進而引發學生的深入思考，提高學生的思維能力。
2.運用直觀的方法，探究公式的本質
在探究圓面積計算的過程中，教師可以采用猜想和感知的形式進行圓面積的求取。教師在教學設計中，出示了三個大小不一樣的圓形和正方形，讓學生來進行圖形面積的猜測。學生在解題過程中，可以采用計算和拼接的方式，對幾何圖形的面積進行探討，讓學生明確面積之間的關系，引發學生的猜想。也可以通過估測和感知的形式進行圓面積的求取。教師可以在課件上出示正方形，以正方形的頂點作為圓心，邊長作為半徑，在正方形上畫一個圓，來進行圓面積的估測。通過這一過程，能夠使學生更充分地了解到圓面積公式的推理過程。
3.運用多維的解題方式，進行探索
免疫學分析法范文2
[關鍵詞] 糞隱血試驗；膠體金免疫；假陰性；匹拉米同
[中圖分類號] R446.13 [文獻標識碼] C[文章編號] 1674-4721（2011）03（b）-085-02
Analysis and processing of colloidal gold immunoassay fecal occult blood-negative results
CHEN Tinghong
Department of Medical Laboratory, Benniu Hospital of Wujin District, Jiangsu Province, Changzhou 213131, China
[Abstract] Objective: In the clinical laboratory work, we had found that the results of some of colloidal gold immunoassay fecal occult blood-negative were different from those of the clinical diagnosis, and its negative results needed to be further analysed and processed. Methods: In clinical work, colloidal gold immunoassay fecal occult blood-negative samples were divided into normal and abnormal appearance of two groups, and Pyramidon chemical re-examination conducts a review to find false negative results of immunosorbent assay. Results: Colloidal gold immunoassay fecal occult blood-negative group with normal color was consistent with pyramidon results with chemical re-examination, but colloidal gold immunoassay fecal occult blood-negative group with the abnormal color was quite different from chemical method. Conclusion: Colloidal gold immunoassay fecal occult blood negative for the abnormal color needs to combine chemical methods to re-examine, It can conduct a review in order to avoid false negative results.
[Key words] Fecal Occult blood test; Colloidal gold immunoassay; False-negative; Pyramidon
糞便隱血試驗是診斷胃腸道出血性疾病的一個重要指標，當胃腸道少量出血時，糞便外觀可無明顯變化，肉眼不見血色。因少量紅細胞被消化分解，以致顯微鏡下也無從發現，這種肉眼和顯微鏡均不能證實的出血稱為隱血。隱血試驗可作為消化道惡性腫瘤普查的一個篩選指標，其連續檢測對早期發現結腸癌、胃癌等惡性腫瘤有重要的價值[1]，因此隱血試驗成為人們不斷深入研究的熱點。 膠體金免疫層析法，將單克隆技術與膠體金技術結合，利用抗人血紅蛋白或抗人紅細胞基質的單克隆抗體與人血紅蛋白或人紅細胞有高度特異性的特點檢測糞便隱血。由于不受飲食限制，靈敏度和特異性高，反應快速，血紅蛋白為0.2 μg/ml時即可陽性[2]，在臨床得到大力推廣。但在實際應用中發現有部分糞便外觀明顯醬黑色，臨床有明確出血診斷，膠體金法檢測為陰性[3]，以致患者和臨床醫生對檢驗結果產生質疑，因此筆者對膠體金免疫法糞隱血陰性結果用匹拉米同化學法進行復檢，報道如下：
1 資料與方法
1.1 一般資料
2009年2月～2009年7月本院住院患者膠體金免疫法糞隱血陰性標本153例。按照糞便顏色分為兩組，一組為外觀正常組，糞便為黃色，共記錄100例；另一組為外觀異常組，糞便表現為棕色、褐色、鮮紅帶血便和醬黑色，記錄53例。
1.2 試劑
大便隱血膠體金檢測試劑條，上海凱創生物技術有限公司；匹拉米同試劑，珠海貝索公司的貝索糞便隱血2號試劑盒（Fecal OB-Ⅱ）。
1.3 操作方法
膠體金法樣品處理管中加入0.6 ml蒸餾水，用專用取樣棒從患者糞便不同部位取樣，以沾滿專用取樣棒前端的小圓環為準，插入樣品管充分攪拌均勻，以試劑條加樣端浸入15 s取出平放，3～5 min判讀結果，如測試線和質控線都出現紫紅色時為陽性；如質控線出現紫紅色，測試線不顯色時為陰性；如果質控線無紅線出現，表示結果無效。匹拉米同法利用紙卡作為糞便檢體的輸送容器，其陽性反應最終呈色為紫紅色，匹拉米同法陽性患者素食3 d后再次化學法復檢。化學試劑不穩定，久置后可使反應減弱，檢測前需檢測試劑,將過氧化氫滴血片上應產生泡沫；或滴加于重鉻酸鉀硫酸液，顯褐色有效。
2 結果
100例膠體金糞隱血陰性顏色正常組標本經匹拉米同法復檢，結果均為陰性；而外觀異常組53例經匹拉米同法復檢有33例陽性，素食3 d后仍有21例陽性，與臨床聯系均有消化道出血診斷。
3 討論
免疫法特異性地檢測人體血紅蛋白部分，不會被食物的其他因素所影響，具有快速、方便、靈敏度和特異性高等眾多優點，檢測不受飲食限制，在臨床工作中得到廣泛應用，被世界衛生組織和世界胃腸鏡檢查協會推薦作為糞便隱血試驗的一種較為準確的方法。但如果血紅蛋白在胃腸道停留時間過長，被消化酶及細菌作用后分解而使免疫原性減弱、消失或改變，其于膠體金試紙上包被的抗體的相應抗原受到破壞時就會出現假陰性。故免疫法主要用于下消化道出血檢驗，而40%～50%上消化道出血不能檢出；另外，大量出血時，血紅蛋白（抗原）濃度過高造成的與單克隆抗體不匹配（即后帶現象），亦可出現假陰性[4]，此兩種情況大便外觀通常會有明顯改變。而化學法是利用血紅蛋白中的含鐵血紅素有類似過氧化物酶的作用，其可將供氫體（色原）中的氫轉移給H2O2生成水（H2O），供氫體脫氫（氧化）后形成發色基團而呈色，呈色的深淺可反映血紅蛋白（出血量）的多少。故在臨床檢驗工作中，免疫膠體金糞隱血陰性，而外觀明顯為醬黑色、鮮紅帶血或為棕褐色不正常的大便，而臨床又疑為上、下消化道出血、潰瘍病、消化道腫瘤等[5]，應同時用化學法檢查。化學法為陽性，以化學法報告并通知臨床，臨床醫生可根據病情綜合考慮，建議在飲食控制2～3 d后復查，并且不要服用維生素C等還原性的藥物。臨床工作中亦可將標本稀釋后用膠體金復檢[6]，但稀釋倍數沒有標準，需多次稀釋，工作繁瑣，成本較高；若抗原被破壞，稀釋后仍然陰性。此外由于家族肉或直腸癌可能不出血，或間斷性出血，或出血在糞便中分布不均勻[7]，都可造成陰性結果，故本法只能作為篩選或輔助診斷，不能替代胃鏡、直腸鏡、內窺鏡和X線檢查。
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免疫學分析法范文3
【關鍵詞】 化學發光免疫分析技術;基本原理;分類;應用
近10多年來,當代生物技術的研究和應用取得高速發展的同時,也大大推動了化學發光免疫分析方法(CLIA))的更新換代速度?；瘜W發光免疫分析法(CLIA)是建立在放射免疫分析技術(RIA)理論的基礎上,以標記發光劑為示蹤物信號建立起來的一種非放射標記免疫分析法,具有靈敏度高、線性范圍寬、儀器設備簡單、操作方便、分析速度快和容易實現自動化和不污染環境等優點,特別是能在較短的時間內得到實驗結果,因此深受檢驗醫學工作者和臨床醫師的好評。
1 化學發光免疫分析的原理
化學發光免疫分析技術的基本原理,化學發光免疫分析含有免疫分析和化學發光分析兩個系統[1]。免疫分析系統是將化學發光物質或酶作為標記物,直接標記在抗原或抗體上,經過抗原與抗體反應形成抗原-抗體免疫復合物?；瘜W發光分析系統是在免疫反應結束后,加入氧化劑或酶的發光底物,化學發光物質經氧化劑的氧化后,形成一個處于激發態的中間體,會發射光子釋放能量以回到穩定的基態,發光強度可以利用發光信號測量儀器進行檢測[2]。根據化學發光標記物與發光強度的關系,可利用標準曲線計算出被測物的含量。
2 化學發光免疫分析的分類
化學發光免疫分析根據應用發光體系應用于免疫分析中的方式不同可分為直接標記發光物質的免疫分析,酶催化化學發光免疫分析,電化學發光免疫分析(ECLIA)。直接標記發光物質的免疫分析,目前常見的標記物主要為魯米諾類和吖啶酯類化學發光劑。
3 化學發光免疫分析的臨床應用
CLIA已廣泛應用于基礎和臨床醫學的各個領域,成為替代RIA的首選技術。Amersham公司針對AmerliteTM發光增強酶免疫分析系統研制出的試劑盒項目有甲狀腺功能檢測的促甲狀腺素、三碘甲腺原氨酸、甲狀腺素、甲狀腺素結合球蛋白、游離甲狀腺素,與性激素有關的有促黃體激素、促卵泡激素、人絨毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、雌二醇、睪酮,以及其他方面的如癌胚抗原、鐵蛋白、地高辛等。Amersham公司雖然研制出這10余種試劑盒,但因操作不夠簡便,檢測項目僅限于蛋白質類大分子化合物,未能廣泛應用于臨床醫學檢測。
美國Ciba Corning公司研制的ACS:180自動CLIA系統能非常精確測量閃光。經過不斷的改進,實現了ACS:180CLIA系統的全自動化,推出全新產品"ADVIA系列"?，F有檢測項目47項,更多的項目還在開發之中。主要有甲狀腺系統、性腺系統、血液系統、腫瘤標記物、心血管系統、血藥濃度及其他一些檢測項目。
經過改良后,金剛烷衍生物在堿性磷酸酶作用下可發出高強度的輝光,光信號可持續1～2 h。隨后國外生產廠家研制出以堿性磷酸酶為標記物的試劑盒,與之相匹配的有DPC的IMMULITE全自動CLIA系統和Beckman的ACCESS全自動微粒子CLIA系統。IMMULITE全自動CLIA系統可檢測項目有心臟病、甲狀腺功能、性腺激素、傳染病、藥物、血清學、血液病、成癮藥物、糖尿病、過敏檢測和腫瘤標志物。ACCESS全自動微粒子CLIA系統主要可檢測甲狀腺功能、血液系統、內分泌激素、藥物、腫瘤因子、心血管系統和糖尿病等項目。
目前商品化的ECLIA分析系統只有Roche公司的ECLIA全自動分析系統。主要特點是本底信號極微,特異性更高,最小檢出值可達1 pmol以下,操作十分簡便快速,是CLIA優點較為集中的完美分析技術。已提供試劑盒的項目有腫瘤標志物、甲狀腺功能、內分泌、傳染病、心肌標志物和維生素類等項目。
王陽[3]運用了電化學免疫分析技術,檢測了3種腫瘤標志物癌胚抗原(Carcinoem-bryonic Antigen,CEA)、細胞角蛋白l9片段(Cytokeratin 19fragments,CYFRA21,1)和神經元特異性烯醇化酶(Neuron-specific enolase,NSE)水平,對肺癌診斷有實際應用價值。張忠英[4]等利用電化學發光免疫分析技術檢測尿CK19片段,結果顯示尿CK19檢測對膀胱癌等泌尿系統腫瘤診斷和復發監測具有敏感性高、無創傷性的優點,優于血清CK19和尿細胞學檢查。動態觀察尿CK19片段含量的變化可降低急性尿感患者的假陽性率。王利娜[5]等應用ECLIA測定和酶免疫測定(EIA)檢測乙肝標志物。結果:應用ECLIA方法檢測HBsAg精密度,最大批內變異≤8.30%,最大日間變異≤15.33%,HBsAg靈敏度0.05 ng/ml,HBeAg靈敏度0.03NCU/ml。HBsAg檢測范圍0.01～7 000 COI。顯示ECLIA檢測HBsAg靈敏度高,重復性好,檢測范圍寬。檢測HBeAg靈敏度可能更高。李錦洲[6]等采用ECLIA法對卵巢癌、良性卵巢腫瘤及健康婦女血清CA125分別進行測定,ECLIA用于第二代CA125(CA125-Ⅱ)測定,使CA125測定更加敏感恒定,每日之間差異較小。黃琛,湯漢紅等[7]在ECLIA法檢測與蛋白質芯片法多腫瘤標志物結果差異的研究中顯示:兩種方法有較好的相關性(P
化學發光免疫分析技術在醫學的臨床應用已非常成熟,有取代放射免疫分析技術和酶聯免疫分析技術而成為診斷市場上的主流產品的趨勢。國外的化學發光免疫分析檢測系統價格昂貴,普及有一定的困難;國內的化學發光免疫分析檢測系統雖然價格較國外產品便宜很多,但其檢測的靈敏度和可靠性,還有待進一提高。研究者在如何提高免疫診斷的敏感性和特異性、發展新的分析體系和檢測技術便攜化等方面仍需要不斷努力。
參 考 文 獻
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免疫學分析法范文4
【摘要】目的 評價貝克曼全自動化學發光免疫分析儀檢測甲狀腺激素的效果。方法 測定T3、T4、FT3、FT4、TSH含量,分別計算批內精密度、批間精密度、回收率和線性范圍。結果 T3、T4、FT3、FT4、TSH的批內精密度分別為4.40%、4.90%、3.00%、4.50%、3.50%,批間精密度分別為6.90%、5.30%、3.50%、6.20%、4.80%,回收率分別為96.7%、95.5%、97.1%、95.6%、96.4%,線性范圍分別為0.15～12.3 nmol/L、3.9～387.0 nmol/L、0.3～30.8 pmol/L、1.3～155.0 pmol/L、0.01～150.0 mIU/L。結論 貝克曼全自動化學發光免疫分析系統測定甲狀腺功能具有重復性好、準確度高、可報告范圍寬、測定速度快等優點,適合于臨床應用。
【關鍵詞】化學發光免疫分析法;甲狀腺激素
化學發光免疫分析法是20世紀80年代以來發展起來的一項新的標記免疫技術,在臨床上有廣泛的應用,包括內分泌激素、腫瘤標志物、血藥濃度、傳染病、心血管疾病標志物、貧血及過敏原等,特別是在甲狀腺激素檢測中應用更為廣泛[1]。本文采用貝克曼全自動化學發光免疫分析儀檢測T3、T4、FT3、FT4、TSH,對其方法學進行綜合評價。
1 材料與方法
1.1 儀器貝克曼全自動化學發光免疫分析儀。
1.2 試劑發光試劑、質控品、標準品由貝克曼公司提供。
1.3 血清來源試驗所需血清樣本采自本院門診和住院患者,每例取3ml血,離心3000 r/min,10分鐘,取血清-70℃保存備用。
1.4 檢測方法利用化學發光技術和磁性微粒分離技術相結合的測定方法,其反應原理與放免和酶免中的雙抗夾心法、競爭法相似,嚴格按試劑盒操作說明書操作。
1.5 評價指標
1.5.1 批內精密度取含T3、T4、FT3、FT4、TSH高、中、低三種濃度的血清樣本,每種濃度同批平行測定10次,計算平均變異系數(CV)。
1.5.2 批間精密度取含T3、T4、FT3、FT4、TSH高、中、低三種濃度的血清樣本各10份,每天各測定1次,共測定10天,計算平均變異系數(CV)。
1.5.3回收率:由貝克曼公司提供原裝3個濃度的標準品,分別測定T3、T4、FT3、FT4、TSH含量,每個濃度平行測定3次,計算平均回收率。
1.5.4 線性范圍收集患者血清標本,取T3、T4、FT3、FT4、TSH濃度高于廠家提供線性范圍上限作為高值濃度水平(H),廠家提供稀釋液作為低值濃度水平(L),用稀釋液稀釋高值濃度血清,形成如下系列濃度檢測標本:1H+0L、4H+1L、3H+2L、2H+2L、2H+3L、1H+4L、0H+1L。用配制成的系列濃度標本平行測定各項指標含量,取平均值作圖,取在坐標紙上呈明顯直線趨勢的各點值進行直線回歸統計,取回歸系數r大于0.9的濃度范圍為可報告的濃度線性范圍。
2 結 果
2.1 批內精密度T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均變異系數分別為4.40%、4.90%、3.00%、4.50%、3.50%。
2.2批間精密度T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均變異系數分別為6.90%、5.30%、3.50%、6.20%、4.80%。
2.3 回收率T3、T4、FT3,FT4、TSH的平均回收率分別為96.7%、95.5%、97.1%、95.6%、96.4%。
2.4 線性范圍T3所測結果得到回歸方程為y=1.069x-0.2468,r=0.9966,截距經t檢驗,ta=1.36,0.95,截距經t檢驗,ta=0.36,
3 討 論
血清中三碘甲狀原腺氨酸(T3)、四碘甲狀原腺氨酸(T4)、游離三碘甲狀原腺氨酸(FT3)、游離四碘甲狀原腺氨酸(FT4)、促甲狀腺激素(TSH)的測定對甲狀腺疾病的診斷具有重要價值。以往國內實驗室多采用RIA、MIRA檢測血清甲狀腺激素水平,此法雖較準確,儀器與試劑也較為低廉,但對操作人員水平要求較高,對實驗條件及環境有較多要求,且隨著標記抗原的放射性衰減,而使計數不穩定及曲線失真,導致結果偏離,結果重復性差,且可產生放射性污染[2,4]。
近年來發展起來的全自動化學發光免疫分析系統是利用化學發光技術和磁性微粒分離技術相結合的測定方法,其反應原理與放免和酶免中的雙抗體夾心法、競爭法相似。其優點是[3,5]:(1)成熟的單克隆抗體技術或獨特的磁性微粒子技術,保證了反應的高特異性;(2)檢測范圍寬,具有良好的稀釋線性;(3)試劑穩定性好,不需酶促反應,有效期可長達半年;(4)操作簡便,分析過程采用全自動化,減少了人工操作誤差,重復性好;(5)試劑及標本均采用無吸附材料,故相互間的交叉污染率低,干擾因素少;(6)真正的隨機連續檢測,樣本隨到隨測,具有急診優先插入功能。因此全自動化學發光免疫分析系統是目前檢測甲狀腺激素等指標的較好方法。
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免疫學分析法范文5
[關鍵詞] 濾泡；淋巴瘤；免疫性溶血；免疫球蛋白血癥
[中圖分類號] R739 [文獻標識碼]B [文章編號] 1673-9701（2011）25-132-02
濾泡型淋巴瘤（FL）發病率在非霍奇金淋巴瘤（NHL）中位居第2位，WHO統計FL占NHL的22.1%，我國發病率較歐美國家略低。約3%的[1]FL患者并發自身免疫性溶血（AIHA），而同時合并繼發性單克隆免疫球蛋白血癥的患者，臨床較罕見。本文現報道我院診治1例濾泡型淋巴瘤，并就NHL的AIHA及繼發性單克隆免疫球蛋白血癥問題作文獻復習。
1臨床資料
患者女，79歲。因發現雙側頸腫塊3年，腹腔腫塊1個月，于2009年6月30日收入我科?；颊?007年10月體檢時發現雙側頸部淋巴結腫大，花生米大小，無觸痛，未予重視。2009年5月，盆腔B超體檢示：左側盆壁處囊性腫塊。腹部增強CT示：1.雙側盆壁髂外血管旁多發腫塊；2.雙側腹股溝多發淋巴結；3. 左側髂外血管內側囊性灶，淋巴囊腫可能。為明確病理類型，6月2日門診行右頸部淋巴結活檢術，病理示：濾泡性淋巴瘤（WHO Ⅱ級），見圖1。免疫CD5-，CD3-，CD20+++，CD45RO-，CD43+，CD79a+++，Bcl-2+++，Bcl-6+，MUM-1-，CD10+/-，P53++，Ki67+，CD68-，CyclinD1-，D240-?；颊呒韧兄U史50年，類風濕性關節炎病史39年，治療控制。入院查體：輕度貧血貌。雙側頸部、鎖骨上、腋窩、腹股溝淋巴結腫大，花生米大小，活動度可，無觸痛。胸骨無壓痛，左側腹部可及一約（5×3）cm腫塊，活動度可，無觸痛，肝脾肋下未觸及，雙側手掌、雙足呈鷹爪狀，活動障礙。血常規：WBC：5.2g/L，HB：98g/dL，PLT：116g/L，RET 2.5%。LDH 181IU/L，余無殊。IgG：11.63g/L；IgM 16.28g/L；IgA 1.57g/L。血輕鏈KAP 30.3g/L；尿輕鏈 KAP 0.08g/L。ESR 9mm/h，RHF 14.26IU/mL，DAT：陽性；IAT：陰性。ANA譜：ANA1320；SS-A陽性；著絲點陽性，余陰性。LDH：227IU/L。淋巴結B超：右頸部最大2.74cm×1.4cm，左頸部最大2.4cm×0.87cm；右腋下最大1.77cm×1.25cm， 左腋下最大2.66cm×1.43cm；右腹股溝最大2.1cm×0.71cm，左腹股溝最大1.35cm×1.09cm；腹腔多發低回聲團，最大約4.83cm×3.38cm。全腹增強CT：1.下腹部主動脈旁，雙側髂窩內外動脈及雙側腹股溝多發腫大淋巴結，最大者位于左髂窩處，約4.9cm×3.2cm，左側盆腔內局部可見類圓形低密度影，大小約2.5cm×3.0cm。肺部CT示：右肺支氣管擴張伴感染可能，縱隔見小淋巴結影。骨髓示：淋巴細胞比例增高占37.5%，以成熟小淋巴細胞為主，偶見幼稚細胞；紅系增生活躍，占20.5%，以中晚幼紅細胞增生為主。染色體：46，XY。免疫固相電泳：IgM、Kap單克隆免疫球蛋白陽性。全身骨骼ECT：未見異常。診斷為：FL Ⅳ B期，AIHA，繼發性單克隆免疫球蛋白血癥（IgM）。7月14日、9月25日行R-CVP方案2個療程（美羅華、環磷酰胺、強的松、長春地辛）；8月20日、10月31日行R-CHOP方案2個療程（美羅華、環磷酰胺、強的松、長春新堿、吡柔比星）化療。淋巴結及腹腔腫塊縮小不顯著，按IWG療效標準達：疾病穩定（PR）。血紅蛋白升至110g/dL，RET 2.07%，IgM降至 11.37g/L，血輕鏈KAP 21.5g/L；尿輕鏈 KAP 0.02g/L。DAT：陰性；IAT：陰性?，F隨訪中。
圖1濾泡性淋巴瘤（WHO II級，HE×200）
2討論及文獻復習
自身免疫性溶血性貧血（AIHA）是少見的非霍奇金淋巴瘤（NHL）的并發癥之一，其中慢性淋巴細胞白血病/小淋巴細胞淋巴瘤（CLL/SLL）并發AIHA的發生率最高，約5%~10%，包括原發性AIHA[2，3]和藥物源性AIHA，特別是嘌呤類似物誘發[4]。NHL合并AIHA臨床上并非罕見，但同時并發單克隆免疫球蛋白血癥國內首次報道。Economopoulos等[11]統計約有12.3%的惰性B細胞淋巴瘤伴有單克隆IgM升高，以NMZL和B-SLL/CLL最為常見。常繼發于血液性疾病或自身免疫性疾病等導致漿細胞增多并惡變，產生由單株漿細胞（單克隆性）無節制的大量增殖，血清中出現其分泌的大量同源的、結構完整均一的免疫球蛋白或其多肽鏈亞單位。本例FL患者外周血出現IgM明顯升高，余免疫球蛋白正常，血、尿KAP輕鏈升高。免疫固相電泳顯示IgM、Kap型單克隆免疫球蛋白陽性。全身骨骼ECT未見異常。因患者無肝脾腫大、骨質破壞，骨髓未見淋巴樣漿細胞和原漿/幼漿細胞，診斷可排除多發性骨髓瘤（MM）等漿細胞疾病，而類風濕性關節炎同樣可誘發單克隆免疫球蛋白血癥。
關于NHL合并AIHA的發病機制尚未明確，并發AIHA的NHL患者絕大多數臨床分期較高（Ⅲ~Ⅳ），或存在結外病變（IE）。CLL/SLL患者并發的AIHA僅1/3發生于疾病早期，而余下2/3的AIHA則伴隨疾病的進展而發生。而在MCL、AILD中AIHA常為疾病的初發癥狀之一，而在疾病過程中則較為罕見，僅在毛細胞白血病中并發的AIHA多發生于疾病進展過程中。AIHA的發生同樣可獨立早于淋巴瘤的產生[8]。該部分患者發生AIHA先于淋巴瘤細胞產生克隆性免疫球蛋白抗體，提示這部分患者產生具有生物活性的意義未明的單克隆抗體可能有助于淋巴瘤的發生。研究發現，NHL細胞中IgVH基因家族最常見基因VH4-34，編碼具有抗紅細胞活性的免疫球蛋白[10]。因此，目前認為在部分NHL中抗紅細胞抗體可能由淋巴瘤細胞克隆產生。而針對淋巴瘤的化療對于并發的AIHA療效良好也支持以上觀點。另一部分患者AIHA則常伴隨自身免疫性疾病，以DLBCL的發生率高[9]。而本例FL患者既往患類風濕性關節炎病史39年，也可能是發生上述病變的原因之一。
利妥昔單抗聯合化療已成為治療FL的一線方案，可顯著提高緩解率，延長無進展生存率（PFS）和生存時間（OS）。Jourdan等[12]嘗試應用美羅華治療NHL并發的AIHA取得不錯的療效。該患者先后予R-CVP和R-CHOP方案化療4個療程，達PR，且DAT和IAT轉陰，血紅蛋白明顯升高，接近完全緩解，與國外報道一致[13]，提示利妥昔單抗無論是對繼發于自身免疫性疾病的AIHA還是并發于B細胞性NHL的AIHA療效同樣顯著，同時伴隨疾病的控制，繼發性免疫球蛋白明顯降低。
該病例對于我們認識FL的生物學特性及病因提供了新的線索。我們應用利妥昔單抗治療合并AIHA及繼發性單克隆免疫球蛋白增多癥的FL，不僅本病得到有效治療，且AIHA和單克隆免疫球蛋白都得到有效控制和降低，說明利妥昔單抗仍是治療該類患者的首選方案，雖然遠期效果尚有待觀察，利妥昔單抗聯合其他化療藥物如萬珂等是否可提高該類患者的緩解率及長期生存率，值得我們累積病例后進一步探討。
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免疫學分析法范文6
【關鍵詞】酶聯免疫法；化學發光法；CA-125
腫瘤死亡率僅次于心血管疾病，位居全球第二，已成為嚴重危害人類健康的疾病，每年都有許許多多的腫瘤患被確診，其中不少患者由于就診晚，已出現全身嚴重癥狀，或是轉移到遠處，治療效果均不佳、預后差。隨著檢驗醫學的不斷發展，對腫瘤的早起診斷已經成為患者的需求，CA125是1983年由Bast等從上皮性卵巢癌抗原檢測出可被單克隆抗體OC125結合的一種糖蛋白。其中健康人群中95%的成年婦女血清中CA125的水平≤35U/ml。若患者血清中CA125大于基線水平的兩倍以上，就應進一步行CT、TVS等其它的物理檢查以明確病因。CA125是目前研究最廣泛的卵巢癌血清標志物，在早期篩查、診斷、療效監測及預后方面的研究均有報道[1]。常用的測定方法是酶聯免疫法和化學發光法等，現就這兩種方法做以下對比分析：
1資料與方法
1.1一般資料選取我院2011年1月――2012年6月的86例血液標本，年齡34-62歲。
1.2儀器和試劑采用安圖全自動酶標儀和Roche co base 411全自動化學發光儀，ELISA檢測所用試劑盒購買于鄭州博賽生物工程股份有限公司，化學發光法檢測試劑盒購買于佳業公司，并按照儀器的使用說明及操作步驟規程進行。
1.3方法分別用ELISA和CLIA對每一份標本同時進行血清CA-125檢測，將患者血清分裝冷凍，每天對每份標本檢測1次，20天連續檢測，比較CA-125使用ELISA和CLIA檢測的穩定性及其重復性，同時比較兩種方法檢測CA-125的敏感性。
3討論
CA125是診斷卵巢癌的相關指標之一，它是一種大分子的糖蛋白，其敏感性與卵巢癌的組織學類型及臨床分期密切有關，在中晚期患者血清中CA125的測定結果升高顯著。國內外對CA125等指標進行了大量的臨床研究，對卵巢癌的早期診斷起了重要的作用，已廣泛用于卵巢癌的診斷及術后監測[2]。
化學發光現象是自然界中常見的一種自然現象，在化學反應中，物質分子在吸收化學能后形成的光輻射現象，臨床上常常利用化學發光測定化學發光反應中的催化劑、反應物、抑制劑、增敏劑，這種方法通常認為是化學發光法。從本資料表明，化學發光法的敏感性比酶聯免疫法好，尤其是對于低值和高值，穩定性及重復性很好。在臨床檢驗中采用CLIA檢測CA125，檢測標準曲線穩定時間比較長，不需要像ELISA每批檢測都要重新制作標準曲線，且ELISA存在受人工操作影響大的問題[3]，但ELISA法具有成本低廉、測定快速簡便的優點，常常用于健康人群的普查及體檢，因此對于受醫療條件限制醫院ELISA法也是一個很好而實用的檢測方法；CLIA是將發光系統與免疫反應相結合以檢測抗原或抗體的方法，是繼放射免疫、酶免疫、熒光免疫、化學發光免疫之后的新一代標記免疫技術，具有靈敏度高、線性范圍寬、快速、應用范圍廣等特點。
綜上所述，化學發光法的穩定性好、重復性好、敏感度高、但費用昂貴；酶聯免疫法經濟實用，再高值測定中的敏感性比較好，臨床上要根據自己的具體情況，量力而行，情況允許的時候最好選擇化學發光法。
參考文獻
[1]張月存.血清CA125在上皮性卵巢癌診斷治療中的應用[J].中國現代手術學雜志，2004，8（1）：57.
