前言：中文期刊網精心挑選了細胞免疫范文供你參考和學習，希望我們的參考范文能激發你的文章創作靈感，歡迎閱讀。
細胞免疫范文1
關鍵詞： 戈謝病 免疫表型 吞噬
戈謝病(Gaucher's disease)是一種罕見的脂類代謝異常性疾病，臨床資料報道較多，實驗室研究資料尚少。我們通過對3例戈謝病骨髓中戈謝細胞的免疫表型及吞噬功能研究，發現戈謝細胞主要表達淋巴細胞抗原，高度表達B淋巴細胞抗原，同時證實戈謝細胞具有吞噬功能。
1 材料與方法
1.1 標本來源 取自3例戈謝病患者骨髓液，迅速制成薄涂片，同時取骨髓液做吞噬功能試驗。免疫組化于24 h后進行。
1.2 試劑 ABC試劑盒、單抗購于中國醫學科學院血液學研究所。
1.3 方法
1.3.1 ABC免疫酶法 按操作說明書進行。
1.3.2 戈謝細胞墨汁吞噬功能測定 取肝素抗凝骨髓液100 μl，參考陳群芳方法［1］，37℃孵箱中，孵育2 h，涂片，用瑞氏染色觀察。
1.3.3 戈謝細胞吞噬細菌功能測定 參考臨床免疫學方法［2］，實驗時按墨汁吞噬功能方法操作。
1.3.4 戈謝細胞吞噬膠乳顆粒功能測定 采用市售膠乳顆粒(3.6×108 ml-1)，實驗時按墨汁吞噬功能方法操作。分級標準：“0”：細胞內未吞噬膠乳顆粒?！埃保杭毎麅群?～10個膠乳顆粒?！埃保杭毎麅群?5～30個膠乳顆粒?！埃保杭毎麅群?0～50個膠乳顆粒?！埃保杭毎麅群写笥?0個膠乳顆粒。
2 結果
2.1 3例戈謝細胞免疫組化結果 結果判斷標準分別為強陽性：戈謝細胞呈彌漫的棕黃色，胞漿邊緣及條索狀結構著色濃厚。細胞核為藍色，上面覆蓋一層棕黃色。胞核模糊不清。陽性：戈謝細胞著黃色，胞漿邊緣及條索狀結構著色較深，胞核為藍色，清晰。弱陽性：戈謝細胞漿為淡黃色，細胞邊緣及條索狀結構著色稍深。胞核為藍色，清晰。陰性：戈謝細胞漿不著色，核為藍色。3例戈謝細胞免疫表型結果為：CD8、CD9、CD10、CD18、HLA-DR均為強陽性表達；CD3、CD33、CD15均為陽性表達；CD22均為弱陽性表達；CD7、CD14、CD41均為陰性；CD2、CD4、CD19、CD383例中均為1例陽性表達，而且CD38為強陽性表達。
2.2 3例戈謝細胞的吞噬功能結果 吞噬墨汁的吞噬率分別為75%、90%、95%。吞噬指數分別為105、148、198；吞噬細菌的吞噬率分別為70%、89%、81%，吞噬指數分別為21.5、27.6、22.5；吞噬膠乳顆粒的吞噬率分別為75%、82%、86%，吞噬指數分別為90、103、107。
3 討論
戈謝細胞是由于葡萄糖腦苷酶缺乏和減少，因而在單核-巨噬細胞系統的細胞內積聚大量葡萄糖苷脂而形成。有關戈謝細胞免疫表型報道甚少，僅陳輝樹報道1例脾臟戈謝細胞免疫組化結果為CD33、HLA-DR、CD45、CD71(Wu67)為陽性，CD3、CD4、CD8、CD22、CD38、CD41為陰性［3］。我們測定的骨髓戈謝細胞CD33、HLA-DR、CD41的結果與其相同，但其它單抗結果則有一定差異，有待進一步觀察。3例戈謝細胞免疫表型說明，戈謝細胞主要表達淋巴細胞抗原，高度表達B細胞抗原，而且細胞陽性程度強。髓系抗原部分表達，但陽性程度較弱。提示戈謝細胞主要起源于B淋巴細胞，但也涉及多細胞系，細胞的陽性程度不一，可能與抗原濃度及對單抗的親和力有關。陳璋認為HLA-DR、CD38、CD18為非系列特異性抗原［4］。文獻報道HLA-DR、CD38、CD33為干細胞或未成熟細胞標志，戈謝細胞HLA-DR、CD38、CD33為陽性，表明戈謝細胞是處于早期的單核細胞。
戈謝細胞是被激活的特殊巨噬細胞，其結構和形態發生變異后，是否仍具有吞噬功能?實驗結果證實，戈謝細胞具有吞噬功能，但吞噬率及吞噬指數明顯下降。Marodi報道，戈謝病患者對嚴重感染有較高的易感性，原因是戈謝病患者的單核巨噬細胞在殺死細菌和產生O-．2超氧化物陰離子的中間環節上有缺陷?；颊叩膯魏思毎麣⑺阑畹募毦歪尫臤-．)2能力比對照組的細胞要低得多(P＜0.05)［5］。戈謝細胞吞噬功能降低可導致免疫功能下降，致使戈謝病患者易發生感染。戈謝細胞具有吞噬功能也說明了戈謝細胞確實來源于單核巨噬細胞系統。
參考文獻：
［1］陳群芳，王志澄. 血液病患者白細胞墨汁吞噬功能試驗. 中華血
液學雜志，1981；2(2)：121
［2］甘 芾，陳 璋.臨床免疫檢驗學.天津：天津科學技術出版社，1990：340
［3］陳輝樹. 戈謝氏病脾臟病理形態及免疫組化特征1例. 中華血液學雜志，1992；13(2)：65
細胞免疫范文2
【關鍵詞】 肺炎支原體肺炎； 細胞免疫； 體液免疫
Situation Analysis of Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia in Children with Cellular Immunity， Humoral Immunity/MENG Jiang-mei.//Medical Innovation of China，2013，10（35）：156-157
【Abstract】 Objective： To investigate the children with mycoplasma pneumoniae pneumonia （MPP） cellular immunity， humoral immune changes， in order to provide theoretical reference for the clinical immunotherapy. Method： Selected 196 children with acute period of MPP （MPP）， with light 152 cases， heavy 44 cases， chosen surgery undergoing elective surgery over the same 7 children under the age of 50 cases as control group， detected IgA， IgG， IgM level and CD3+， CD4+. Result： The MPP group of IgG， IgM level higher than the control group， comparison difference had statistical significance （P
【Key words】 Mycoplasma pneumoniae pneumonia； Cellular immunity； The humoral immune
First-author’s address：Tianyang County People’s Hospital，Tianyang 533699，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2013.35.075
肺炎支原體肺炎（Mpcoplasma pneunomiae pneumonia，MPP）是常見的呼吸道感染性疾病，是由肺炎支原體（Mp）感染所引起，在學齡前兒童中容易多發，占到兒童肺炎的10%～20%[1]。有研究認為肺炎支原體肺炎的發病時由于肺炎支原體黏附與上呼吸道黏膜引起免疫功能紊亂所致[2-3]，提示肺炎支原體肺炎的發生與免疫因素密切相關。本院在2011-2012年對收治的196例肺炎支原體肺炎患兒細胞免疫及體液免疫情況進行了檢測，旨在探討其細胞免疫、體液免疫變化，以期能為臨床免疫治療提供理論參考依據，結果如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選取2011-2012年本院兒科住院的急性期MPP患兒196例（MPP組），所有患兒MPP的診斷及分型均符合《實用兒科學》中的MPP相關診斷標準[4]。其中男93例，女103例；年齡3個月～15歲，平均（5.72±2.45）歲；6歲63例；輕型患兒152例，重型44例。選取同期外科擇期手術7歲以下兒童50例為對照組，其中男23例，女27例；年齡9個月～7歲，平均（5.48±2.69歲）。MPP組與對照組在平均年齡、性別方面比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 肺炎支原體檢測 在患兒入院后抽取外周靜脈血2 mL，間接免疫法檢測MP-IgM滴度，如≥160即為陽性。檢測試劑盒為PNEUMOSLIDE IgM（西班牙VIRCELL.S.L有限公司生產）試劑盒。
1.2.2 淋巴細胞亞群及免疫球蛋白檢測 患者在確診后次日、對照組患兒在入院當日抽取外周靜脈血5 mL，以免疫比濁法檢測IgA、IgG、IgM、CD3+、CD4+水平，檢測儀器為美國雅培Ci16200全自動生化分析儀。
1.3 統計學處理 采用SPSS 16.0統計學軟件對數據進行處理，計量資料采用（x±s）表示，比較采用t檢驗，計數資料采用 字2檢驗，以P
2 結果
2.1 各組體液免疫抗體檢測結果 MPP組IgG、IgM水平高于對照組，比較差異具有統計學意義（t=37.91、6.31，P
表1 各組體液免疫抗體檢測結果（x±s） g/L
組別 IgA IgG IgM
MPP組（n=196） 1.18±0.15 11.79±0.75* 2.54±0.18*
輕型（n=152） 1.15±0.11 10.45±0.68* 1.76±0.12*
重型（n=44） 1.19±0.14 12.14±0.70* 2.75±0.24*
對照組（n=50） 1.15±0.14 7.31±0.71 1.34±0.19
*與對照組比較，P
2.2 各組細胞免疫檢測結果 MPP組CD3+、CD4+低于對照組，比較差異具有統計學意義（t=15.53、22.82，P
表2 各組細胞免疫檢測結果（x±s） %
組別 CD3+ CD4+
MPP組（n=196） 60.26±4.11* 28.16±2.83*
輕型（n=152） 67.61±3.21 31.89±2.77*
重型（n=44） 55.49±4.82* 29.93±2.86*
對照組（n=50） 70.02±3.25 38.40±2.77
*與對照組比較，P
3 討論
MPP的發病機制尚不完全清楚，但是研究結果主要傾向于以下幾個觀點：呼吸道上皮細胞吸附學說、支原體直接侵入學說、免疫學發病學說、神經毒作用學說等[2-3]，更多的學者認為是以上多學說綜合作用，而非單一學說。免疫學說主要認為肺炎支原體在侵入患者呼吸道后引起細胞免疫及體液免疫系統發生相應的激活，作為抗原的肺炎支原體在刺激機體產生免疫應答后能產生特異性的IgG及IgM，并且激活補體及免疫細胞功能，其中包括細胞毒作用、溶菌作用、中和作用、調理作用等，肺炎支原體此時還會對細胞正常增殖功能進行破壞，引起T淋巴細胞比例發生異常。由于MP與人體內一些組織存在相同抗原，因此免疫應答發生后會形成相應的免疫抗體，會而這種抗體會引起存在共同抗體的組織器官發生免疫損傷，形成的免疫復合物通過II型、III型超敏反應從而引起機體繼發性的免疫隨時，而且為了清除病原體需要消耗更多的免疫因子，導致免疫功能低下。
T細胞及其亞群是機體細胞免疫主要細胞，能起到免疫平衡的協調作用，CD3+是成熟的T淋巴細胞指標，CD4+是輔T淋巴細胞，主要能輔助淋巴細胞的應答反應，CD3+、D4+的變化往往提示這細胞免疫功能的變化。IgA、IgG、IgM均是由漿細胞合成及分泌的能與抗原產生特異性結合的球蛋白，也是機體重要的免疫應答細胞，是免疫細胞在受到微生物感染后刺激機體免疫系統從而產生的免疫分子，在機體感染肺炎支原體后，肺炎支原體會刺激B細胞產生相應的IgM及IgG抗體，由于在人體中存在與肺炎支原體相同抗原成分的組織，因此在發生免疫應答時會引起機體有相同抗原的細胞組織發生病理免疫反應。臨床研究顯示在MPP患兒存在CD3+、CD4+的降低[5-8]，血清IgG、IgM水平升高，提示MPP患兒在患病后存在T淋巴細胞紊亂，而B淋巴細胞存在過度激活、增殖。本研究對MPP患兒T細胞亞群及IgA、IgG、IgM水平的檢測結果與以上報道是一致的，進一步證實了MPP患兒存在細胞免疫及體液免疫的紊亂情況，而且將輕型及重型的MPP患兒細胞免疫及體液免疫進行了進一步分析，結果顯示無論是輕型還是重型患兒IgM水平均明顯高于對照組，但是重型患兒IgG水平高于對照組，IgM水平也同時明顯高于輕型的患兒，顯示隨著病情嚴重程度IgG活化更為明顯，臨床上如進行IgG檢測，對于患兒的病情判斷也有一定價值。輕型及重型患兒CD4+低于對照組，重型患兒CD3+不僅較對照組低還較輕型低，表明隨著病情加重成熟T淋巴細胞被抑制較為嚴重，這也可能是肺炎支原體致病的關鍵因素之一[9-10]。
綜上所述，MPP的感染與細胞免疫及體液免疫關系密切，MPP患兒細胞免疫及體液免疫的變化主要表現為B淋巴細胞的異?；罨癟淋巴細胞抑制，而且在重型MPP中表明更為明顯，這也可能是肺炎支原體致病的關鍵因素之一，提示臨床檢測體液免疫及細胞免疫對病情嚴重程度及進展有一定的輔助判斷價值，而且采用免疫調節劑治療MPP從理論上是可行的。
參考文獻
[1]胡曉艷，錢衛疆，張雙船，等.肺炎支原體肺炎患兒細胞免疫功能的變化及脾氨肽的輔助治療作用[J].海南醫學，2012，23（21）：5-7.
[2]陳志敏.肺炎支原體肺炎的再認識-從發病機制到臨床治療的探討[J].中國實用兒科雜志，2012，27（4）：253-257.
[3]劉洋，李敏.肺炎支原體肺炎發病機制研究進展[J].臨床兒科雜志，2011，29（2）：196-198.
[4]錢衛疆，胡曉艷，徐宋周，等.兒童重型與輕型支原體肺炎免疫變化及臨床意義[J].中國現代醫學雜志，2011，21（23）：2882-2885.
[5]韓文寧，李錦亮，李麗，等.肺炎支原體肺炎患兒免疫功能的變化及分析[J].中華全科醫學，2012，10（1）：60-61.
[6]郭紅，王慶山，邵宏偉，等.肺炎支原體感染患兒淋巴細胞亞群及免疫球蛋白的檢測分析[J].中國冶金工業醫學雜志，2012，29（6）：631-632.
[7]萬瑜，程寶金，薛梅.小兒支原體肺炎T細胞亞群和免疫球蛋白水平的變化與分析[J].實用臨床醫藥雜志，2010，14（11）：28-30.
[8]楊紅欣，丁純.小兒肺炎支原體患者體液免疫功能的臨床研究[J].檢驗醫學與臨床，2011，8（13）：1635.
[9]李曉丹，程燕，陳慧.小兒肺炎支原體肺炎的細胞免疫功能研究進展[J].現代中西醫結合雜志，2010，19（17）：2202-2204.
細胞免疫范文3
【關鍵詞】 幽門螺桿菌
【關鍵詞】 幽門螺桿菌；胃疾??；紅細胞免疫
0引言
消化系統疾病患者紅細胞免疫功能有改變，我們對H.pylori感染的相關胃疾病患者紅細胞免疫功能作一探討.
1對象和方法
1.1對象200206/200306 H.pylori感染的相關胃疾病患者135例，年齡18~33（平均 20.6）歲，其中慢性胃炎105例，十二指腸潰瘍30 例. 行胃鏡檢查時在幽門前區5 cm四壁取組織4塊，其中1塊置于快速診斷試劑盒中進行快速尿素酶測定（尿素酶試劑為福建三強生物化工有限公司提供），另3塊送病理科行病理組織學檢查及組織切片Warthinstarry 銀染色法檢查H.pylori. 快速尿素酶試驗陽性，同時Warthinstarry 染色檢出定為H.pylori陽性，抗H.pylori治療后 4 wk復查二者均陰性為H.pylori根除.
1.2方法H.pylori陽性者使用麗珠胃三聯（枸櫞酸鉍鉀220 mg早晚餐前服，替硝唑0.5 g，克拉霉素0.25 g ，早晚餐后服）. 加用奧美拉唑膠囊20 mg，或雷尼替丁150 mg早晚服，治療2 wk，停用抗生素，4 wk后復查. 在治療前3 d和抗菌治療結束后4 wk清晨空腹采血肝素抗凝，采用郭峰法檢測 RBCC3bRR及RBCICR（凍干致敏酵母菌和非致敏酵母菌試劑由陜西省人民醫院免疫研究所提供）.
統計學分析： 應用SPSS10.0軟件，計量資料用x±s采用多個樣本均數間t檢驗.
2結果
H.pylori陽性組RBCC3bRR明顯高于陰性組，而且RBCC3bRR隨著感染的加重而下降，RBCICR則隨著感染的加重逐漸升高，差異均有顯著性意義(P
表1H.pylori感染與紅細胞免疫功能的關系(略)
bP
3討論
H.pylori感染人體后，被感染者免疫功能的紊亂是慢性胃炎和消化性潰瘍的主要發病機制. 我們的結果提示，H.pylori感染越重，胃黏膜的炎癥程度也越重. H.pylori根除后，慢性胃炎及十二指腸潰瘍RBCC3bRR較根治前明顯升高，RBCICR較治療前降低，表明H.pylori根除后患者紅細胞免疫功能較治療前有所改善，與穆永臣等［1］報道一致.
細胞免疫范文4
1材料和方法
1.1實驗材料
1.1.1實驗動物昆明種小鼠24只，由本校實驗動物室提供。
1.1.2主要試劑弗氏完全佐劑，為sigma公司生產。
1.2實驗方法
1.2.1CFA對小鼠產生抗卵黃抗體水平的影響昆明種小鼠24只，體質量18～22 g，雌雄隨機分組，8只/組，以5倍稀釋雞卵黃為抗原。免疫方法及程序見表1。
表1卵黃抗原免疫程序
組別注射物第1天第4天第10天佐劑組佐劑(ml)0.2抗原(ml)0.20.2非佐劑組抗原(ml)0.20.2空白對照組生理鹽水(ml)0.20.20.2注：以上均為背部皮下多點注射
末次注射7 d后，將小鼠眼球取血并分離血清，用ELISA方法測定待檢血清中抗卵黃抗體：雞卵黃抗原5倍稀釋包板，待檢血清1∶10稀釋，HRP-SPA按說明書配制。
1.2.2CFA對小鼠足跖腫脹的影響實驗動物及免疫程序同表1，末次注射6 d后每只小鼠右后掌皮下注射卵黃(5倍稀釋)0.02 ml/只致敏，第2天測量其足的后掌至踝關節體積(ml)，并與小鼠自身左后足體積作對照，計算足腫率，如下：
足腫率(%)=免疫后右足體積-自身左足體積自身左足體積×100%
1.2.3CFA對小鼠碳粒廓清實驗的影響昆明種小鼠16只，體質量18～22 g，雌雄隨機分組，分為佐劑組與對照組，8只/組。佐劑組小鼠腹腔注射CFA 0.2 ml/只，對照組腹腔注射無菌生理鹽水0.2 ml/只，1 w后給2組小鼠分別經尾靜脈注射20%墨汁0.2 ml/只，注射后1 min與5 min于小鼠眼球采血20 μl，置于2.0 ml 0.1%碳酸鈉溶液中混勻，于680 ml波長下測定A值，并按如下公式計算K值：
K=logA5-logA1[]T5-T1=[SX(]logA5/A1[]4[SX)]
1.3統計分析數據均采用SPSS統計軟件進行組間t檢驗，方差不齊時行t′檢驗。
2結果
2.1CFA對小鼠產生抗卵黃抗體水平的影響佐劑組小鼠產生抗卵黃抗體水平明顯高于非佐劑組。見表2。
2.2CFA對小鼠足跖腫脹率的影響佐劑組比非佐劑組的足腫率明顯提高。見表3。
2.3CFA對小鼠碳粒廓清能力的影響佐劑組小鼠碳粒廓清能力明顯高于非佐劑組，結果見表4。
3討論
實驗表明，弗氏完全佐劑能顯著增強機體細胞免疫應答能力。足腫脹實驗是體內測定細胞免疫功能的指標，佐劑組足腫率高于非佐劑組，證明佐劑提高體液應答能力的同時，也能增強細胞免疫功能。
佐劑作用機制，以往比較側重于與抗原混合后起到油包水作用，從而增強抗原表面積，或者使抗原緩解，增強與免疫細胞接觸，從而達到增強免疫應答效果的作用。本次實驗并未將抗原與佐劑混合為油包水狀態，而是與抗原分離，先將抗原注射給小鼠，結果小鼠特異性抗體產生能力明顯高于未注射佐劑組，其機制之一可能與活化巨噬細胞有關。通過碳粒廓清實驗得以證實，佐劑確能顯著提高小鼠巨噬細胞吞噬能力，而巨噬細胞在免疫應答中起到遞呈抗原的作用，這與佐劑提高免疫應答有密切關系。
細胞免疫范文5
【關鍵詞】NK細胞：CIK細胞；γδT細胞：化療：小細胞肺癌
【中圖分類號】R59
【文獻標識碼】A
【文章編號】1674-0742（ 2015） 06（b）-0059-02
肺癌是臨床最常見的惡性腫瘤之一，致死率及發病率在惡性腫瘤中居高不下，成為當前威脅人類生命健康安全的頭號殺手。據不完全數據分析，小細胞肺癌（SCLC）發病率占肺癌發病率的15%～20%，多發于中老年男性，與吸煙關系密切，約90%以上的患者存在吸煙史。該疾病早期癥狀具有一定隱匿性，多數患者以咳嗽、氣促、疼痛、咯血、乏力等表現為主，部分因未出現上述癥狀而延遲病情診斷，錯過最佳時間。當前越來越多研究報道顯示，SCLC患者存在多種免疫細胞功能缺陷，故研究者將探討方向轉移至改善患者免疫狀態上，希望以此開辟新途徑，提高SCLC患者治療效果，延長其生存時間。該研究整群選取2009年8月一2014年12月間該院收治的94例小細胞肺癌患者為研究對象，以此為方向展開討論，現報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
整群選取該院于2009年8月-2014年12月收治的94例小細胞肺癌患者為研究對象，均通過病理檢杏及細胞診斷，符合《NCCN臨床腫瘤治療指南（2010年第1版）》中小細胞肺癌相關診斷及分期標準。根據患者人院順序分成聯合組（A組，n=47）和對照組（B組，n=47）兩組，A組中男25例，女22例；年齡19～62歲，平均（48.3±4.4）歲；Karnofsky功能狀態（KPS）評分（80.1±3.8）分；體力狀況ECOC評分（1.1±0.5）分；病情發展：局限期29例，廣泛期18例。B組中男24例，女23例；年齡20～63歲，平均（48.6±4.5）歲；KPS評分（80.3±3.9）分；ECOC評分（1.3±0.6）分；病情發展：局限期28例，廣泛期19例。兩組患者在一般資料對比上差異無統計學意義（P>0.05），具有可比降。
1.2 納入標準
①符合小細胞肺癌相關診斷標準者；②符合《NCCN臨床腫瘤治療指南（2010年第1版）》中相關化療指證（KPS≥70分且Ps≤2分）者；③臨床資料完整者；④預計存活期超過3個月者；⑤自愿簽署的知情同意書者。
1.3 排除標準
①合并其他嚴重疾病、功能障礙或惡性腫瘤者；②相關治療禁忌癥者；③精神障礙、意識障礙或語言障礙者；④中途退出治療或隨訪期失聯者；⑤未成年患者或年齡超過65歲者。
1.4 治療方法
1.4.1 B組予以單純化療方案①依托泊苷注射液（規格：5mLO.Ig，批準文號：國藥準字05253H823），100m/m?，生理鹽水稀釋后靜脈滴注，濃度30min，dl-3；②注射用順鉑（規格：1Omg，批準文號：國藥準字H20073652），75mg/m?，與5%葡萄糖注射液稀釋后靜脈滴注，滴注時間>30min，dl；局限期患者治療4周，廣泛期患者治療6周后觀察效果。
1.4.2 A組采用細胞免疫聯合化療方案①化療方案同B組一致；②過繼性細胞免疫治療：治療第1天采集患者白體外周血單個核細胞，體外培養擴增后于2周后回輸NK細胞、CIK細胞及γδT細胞，持續6d，維持治療至疾病進展。
1.5 評估標準
1.5.1 療效評估標準參考《實體瘤新的療效評價標準（解讀1.1版RECIST標準）中相關標準。以患者無進展生存期（PFS）及總生存期（os）長短評估療效。
1.5.2 觀察指標行為期2～5年隨訪，比對兩組患者總生存期及無進展生存期差異，記錄其相關不良反應發生情況。
1.6 統計方法
應用統計學軟件SPSS14.0分析數據，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，計數資料以百分率表示，采用X2檢驗，P
2 結果
2.1 生存率及生存期對比情況分析
A.B兩組的局限期患者在PFS及1年生存率對比上差異無統計學意義（P>0.05）；A組局限期患者Os及2年生存率優于B組，差異有統計學意義（P
2.2 不良反應發生情況對比分析
兩組患者不良反應發生率對比差異無統計學意義（P>0.05）；詳細見表3。
3 討論
細胞免疫范文6
[關鍵詞] 南瓜多糖；抑瘤率；細胞增殖；紅細胞免疫吸附
[中圖分類號] R-33 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2012）02（a）-0017-02
Research of antitumor and RBC immune adsorption enhancement with Pumpkin Polysaccharide
WANG Chuandong LAN Tian GUO Xiaodong SHI Xuejun LV Bingbing
Department of Radiotherapy, Anqiu People's Hospital of Shandong Province, Anqiu 262100, China
[Abstract] Objective To study the antitumor and red blood cell immune adsorption enhancement action of Pumpkin Polysaccharides internal and external. Methods (1)MTT method for detected the Pumpkin polysaccharide effect to H22 cell proliferation. (2)Established H22 tumor-burdened mice model, to observed the effect of pumpkin polysaccharide to tumor weight and red blood cells immune adsorption ability to tumor cells in tumor-burdened mice. Results Pumpkin polysaccharide could inhibits H22 cell proliferation, the inhibition ratio of middle and high dose group was 33.7% and 40.3% respectively, compared with control. Pumpkin polysaccharide could inhibit tumor growth in tumor-burdened mice, the inhibition ratio was 55.8% compared with the controls for a significant difference. Pumpkin polysaccharide could enhance immune adsorption capacity of red blood cell. Conclusion Pumpkin polysaccharide has certain antitumor and immunity enhancement action.
[Key words] Pumpkin Polysaccharide; Cell proliferation; Inhibition ratio; RBC immune adsorption
南瓜（Cucurbita，spp）是葫蘆科南瓜屬的一年生草質藤本植物。臨床實踐證實，南瓜多糖（Pumpkin polysaccharide，PP）是南瓜成分中最重要的活性成分，它直接參與了降血糖、調血脂等有關活動[1-4]。近年來對南瓜多糖的其他作用研究成為熱點，它是非細胞毒性物質，毒副作用小，而且藥物質量可通過化學手段控制，在醫藥學領域有著廣闊的應用前景[5-6]。目前南瓜多糖對惡性腫瘤影響的研究還有待深入，進一步探討南瓜多糖的抑瘤作用及對免疫的影響，以尋找和開發新的天然、無毒的抗腫瘤藥物將有深遠的醫用和經濟意義。
1 材料與方法
1.1 實驗材料
南瓜多糖購自泰安中薈植物生化有限公司、DMEM培養液、胎牛血清、環磷酰胺、0.9%氯化鈉溶液、肝素、蒸餾水、MTT磷酸緩沖液、甲暇顆粒、DMSO。
1.2 動物
昆明種小鼠60只，18～22 g，雌雄各半，小鼠肝癌H22細胞株。
1.3 儀器
試管、燒杯、毛細管、天平、吸管、干燥器、離心機、培養箱、培養瓶、96孔培養板、酶標儀、注射器、顯微鏡。
1.4 實驗方法
1.4.1 MTT法檢測H22細胞增殖
取處于對數生長期且臺盼藍拒染率大于95%的H22細胞，1 000 r/min，離心10 min，用DMEM培養液（含10%胎牛血清）將沉淀細胞濃度調為1×105 cell/mL細胞懸液后，將細胞接種于96孔培養板。每孔加細胞懸液100 μL（1×104 cell），然后分別加入不含藥物的培養液、濃度分別為：10 μg/mL和20 μg/mL的南瓜多糖和環磷酰胺5 μg/mL各100 μL，每孔4個平行孔，使總體積達200 μL。調零孔不加H22細胞懸液，只加含10%胎牛血清的DMEM培養液200 μL?；靹蚝笾?7℃、5%CO2、95%濕度條件下培養44 h后，每孔加入5 mg/mL 的MTT磷酸緩沖液20 μL，同樣條件下繼續培養4 h，終止培養。1 000 r/min，離心5 min，然后棄去培養板孔內的培養液，每孔加入150 μL DMSO，震蕩10 min，酶標儀檢測吸光值。選擇測定波長570 nm，參考波長655 nm。
1.4.2 南瓜多糖對小白鼠的抑瘤作用及對淋巴細胞的影響
1.4.2.1 荷瘤小鼠模型的建立 無菌條件下取傳代6～7 d的H22肝癌小鼠腹水，用0.9%氯化鈉溶液稀釋成含量為1×10/mL的細胞懸液。小鼠右側腋窩皮下接種0.2 mL細胞懸液制備實體瘤模型。
1.4.2.2 分組及給藥 將接種H22細胞24 h后的小鼠隨機分為3組，每組20只，雌雄兼有，并于同一天開始分別給藥。陽性對照用安瘤乳每日灌胃0.4 mL，劑量為0.5 mg/mL。治療組用南瓜多糖每日灌胃0.4 mL，劑量為10 mg/mL，空白對照組用0.9%氯化鈉溶液每日灌胃0.4 mL ，連續給藥7 d。
1.4.2.3 分項檢查 于第8日眼底動脈取血，肝素抗凝，檢測各組紅細胞免疫吸附腫瘤細胞能力。取出瘤塊并稱重。
1.4.2.4 結果分析方法 南瓜多糖對H22細胞的生長抑制率采用公式進行計算，即H22細胞的生長抑制率（%）＝（1－試驗孔OD570/對照孔OD570）×100%。南瓜多糖對荷瘤小鼠的抑瘤率采用公式進行計算，即抑瘤率（%）=（1-T/c）/100% ，式中T=給藥組平均瘤重，c=對照組平均瘤重。南瓜多糖對荷瘤小鼠胸腺的增重率（%）=[（治療組平均胸腺重-對照組平均胸腺重）/對照組平均胸腺重]×100%。各組小鼠均用眼底取血，肝素抗凝，分離出紅細胞，紅細胞免疫吸附腫瘤細胞能力的測定按郭峰法[7]改進，結合3個以上紅細胞的腫瘤細胞為1個花環。
1.5 統計學處理
對所得數據進行χ2及t檢驗，以P < 0.05為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 南瓜多糖對H22細胞增殖的影響
南瓜多糖對H22細胞的生長抑制率采用公式進行計算，即H22細胞的生長抑制率（%）＝（1－試驗孔OD570/對照孔OD570）×100%。見表1。
2.2 南瓜多糖對荷瘤小鼠腫瘤細胞生長的抑制作用
南瓜多糖對荷瘤小鼠的抑瘤率采用公式進行計算，即抑瘤率%=（1-T/c）/100% ，式中T=給藥組平均瘤重，c=對照組平均瘤重。見表2。
2.3 南瓜多糖對紅細胞免疫吸附腫瘤細胞能力的影響
紅細胞免疫吸附腫瘤細胞能力的測定按郭峰法改進，結合3個以上紅細胞的腫瘤細胞為1個花環。見表3。
3 討論
自20世紀50年代末人們發現真菌多糖具有抗腫瘤活性以來，多糖的研究受到越來越廣泛的關注。多糖是由單糖連接而成的生物大分子物質，多糖的糖鏈能控制細胞的增殖和分化，調節細胞的生長與衰老，在抗腫瘤和促進免疫力方面療效明確[5-6]。本實驗從腫瘤細胞增殖、瘤重、紅細胞免疫功能多項指標的觀察表明，南瓜多糖可抑制小鼠H22的增殖，高中低劑量組平均生長抑制率分別為40.3%、33.7%、28.5%，與空白對照組相比差異有統計學意義，其中高劑量組接近環磷酰胺平均生長抑制率；南瓜多糖可降低荷瘤小鼠瘤重，抑瘤率為55.8%，接近陽性對照安瘤乳抑瘤率；以上實驗證明南瓜多糖具有一定的抑制腫瘤生長作用。
有研究表明，植物多糖抑制腫瘤的效果，不是直接作用于腫瘤細胞，而可能是通過提高生物機體對腫瘤細胞的防御能力和增強宿主免疫系統的功能來實現的[8-10]，其中紅細胞膜上具有黏附活性的C3b受體（CR1），通過CR1 癌細胞可黏附于紅細胞上，易被吞噬細胞捕捉吞噬[11-12]。因此，筆者觀察了南瓜多糖對荷瘤小鼠紅細胞免疫吸附腫瘤細胞的影響，南瓜多糖組紅細胞免疫吸附腫瘤細胞的能力明顯高于腫瘤空白對照組，P < 0.01，與安瘤乳組相近，表明南瓜多糖具有激活補體的作用，且可增強紅細胞對腫瘤細胞的免疫吸附。
本文通過動物實驗和細胞實驗，發現南瓜多糖具有延緩與抑制腫瘤生長的作用，還可提高紅細胞的免疫吸附功能。南瓜多糖作為一種天然的潛在抗腫瘤物質值得進一步研究。
[參考文獻]
[1] 田庚元，馮字澄，林穎. 植物多糖的研究進展[J]. 中國中藥雜志，1995，20（7）：441-444.
[2] 章靈華，肖培報. 藥用真菌中生物活性多糖的研究進展[J]. 中草藥，1992，23（2）：95-99.
[3] 王健，龔興國. 多糖的抗腫瘤及免疫調節研究進展[J]. 中國生化藥物雜志，2001，22（1）：52.
[4] 中國農業百科全書編輯部. 中國農業百科全書（蔬菜卷）[M]. 北京：農業出版社，1990：713.
[5] 王萍，劉杰才，趙清巖，等. 南瓜果實營養成分分析及利用研究[J]. 內蒙古農業大學學報，2002（3）：52-54.
[6] 張擁軍，王蘭州，姚惠源. 南瓜中降血糖活性成分的提取及其功能性質的研究[J].食品與發酵，2002，28（6）：32.
[7] 郭峰. 三種常用紅細胞免疫功能檢測試劑與使用[J]. 第二軍醫大學學報，1995，16（4）：379-380.
[8] 嚴曉星，汪國樣，黃如兵. 惡性腫瘤介人化療對患者外周血象的影響[J]. 腫瘤防治研究，2000，27（2）：148-149.
[9] 戴德順，王若霞，胡衛靖，等. 正常人紅細胞對多種體外培養的腫瘤細胞免疫粘附的研究[J]. 癌變畸變，1997，9（2）：108-110.
[10] 吳瑞瓊，揚治華，董志偉. 腫瘤耐藥基因治療研究進展[J]. 國外醫學：腫瘤學分冊，1999，26（2）：68-70.
[11] Thomason NR，Crow MA，McGowan SJ，et al. Biosynthesis of carbapenem antibiotic and prodigiosin pigmentin Serratia is under quorum sensing control[J]. Mol Microbiol，2000，36（3）：539-556.
