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形同陌路范文1
《悲傷逆流成河》讀書心得
前言
我想，如果一切都不得選擇，我們還會不會這樣的快樂，曾經，每個人都有記憶中斑斕、苦痛的青春，如果那是一段埋葬的回憶，是否也還會常常被拾起？在這個被狂風吹打的季節，我讀完了小四的《悲傷逆流成河》，看陽光大片大片從云層中噴涌而出，覆蓋了城市所有的蒼穹，看憂傷的靈魂撕裂過心間，獨自跳著凌亂的舞步，那時候，太多的空白添滿了悲傷，“生如夏花般絢爛，死如秋葉般靜美”，泰戈爾曾經這樣說過，生命到底是怎樣的名詞，該如何詮釋，這也許是年輕的生命給我華美的囑托。
關于易遙
讀小四的文字，因為很干凈，每一個人物都存在另一個遙遠的世界，過著他們的生活，易遙是本書中我最喜歡的角色，我以一種把易遙當做我的心態，去讀完這本書，幻想如果當時的場境是我，會怎么樣，最終的回答是易遙很堅強，渴望得到一點點愛，對她來說，是莫大的力量，卻因為害怕，因為太想一個人獨自承受，卻因為周圍的骯臟拒絕，當一個人在弄堂門口哭的遍體鱗傷，她多么需要一個懷抱，滿足，哪怕一點點的渴望，這樣的女孩也許我們身邊都會有，但她們永遠很落寞，永遠一個人，像易遙一樣，她也許在家長，在很多人眼中的壞孩子，所承受的是孤單，寂寞，是沒人懂的哀傷，沒有愛，越是渴望欲是得不到，那份模糊的母愛，太朦朧，看不到，感受不到，父愛卻將她拒之門外，無法靠近，愛是一種奢侈，華麗的奢侈，卻有一種持續不斷澆在她身上的東西，濕淋淋的仇恨，她曾經吶喊過，可是沒有人聽見。
內心撕裂的吶喊無人懂。
那些被喚醒的記憶沿著照片上發黃的每一張臉。
重新附上魂魄。
易遙是個孩子，哀傷的孩子，命運給予她的一直是她不能改變，也無法改變，她僅僅用她自己的單純的方式，想法，一個人單槍匹馬的面對，對她來說已經蒼皇的世界，無論多么苦痛，她始終堅信，為了生存下去，也挺的過來，易遙在狹長的弄堂里接過一袋熱牛奶，天天如此，那是她心里的寄托。
每個女生生命里，都有這樣一個男孩子，他不屬于愛情，可是，在離自己最近的距離，一定有他的位置，盡管不知道他什么時候會離開自己，成為另一個女孩子的王子。
這樣的感情超越愛情，齊銘對于易遙來說，是超越愛情的存在，很偉大，很偉大……
易遙想過自生自滅，對于她，世界安靜的一片弦音。
為了保護自己長出尖銳的刺，可是還是不能讓自已幸福。一遍遍受傷，一遍遍失望，還繼續渴望，不斷的循環，又因為太倔強。悲劇會發生，這也是因為她的性格，不懂得怎么去保護自己。
最終，她選擇了離開，因為所有人的不相信，因為齊銘和顧森西的不相信，打破了她內心最大的承受，寄托，沒有寄托，也許沒有了活下去的希望，曾經在一起守護秘密的人，就這么朝著世界的另一個方向，走遠了，輕易的丟下一句：“我不想再見到你”，曾經守護過她的人，也冷冷的丟下一句：“我就是恨不得你替我姐姐去死”，巨大的悲傷洶涌的占據了她的全部。
當她張開口躺在血泊中的，所有的一切都破碎了，那些曾經用巨大勇氣筑成的薄紗，那些含著愛，含著恨，含著悲傷的城墻，轟然倒塌，閉上眼的一瞬間，是放逐還解脫，這個黑暗的世界再也看不到，不用再用力的去承受一切，不用在用力的忍住眼淚。
到底是這個世界對不起她，還她對不起這個世界，我迷惑了，或許這兩者之間，根本就沒有界限。
遠方的風景，那些記憶的破碎一片片涌上心頭。
也許，對于易遙來說。
一切都只像是夢，醒了，一切灰飛煙滅。
關于齊銘
一個乖孩子，有著愛他的家庭，他愛的生活，和易遙相比，齊銘的幸福太遠也太多。
卻也因為有齊銘，易遙的黑暗有人分擔，因為有齊銘，易遙不會孤單的哭，不會一個人承受太多，有了齊銘，易遙還會笑，盡管幾率很小。
在你的身邊，總有一個這樣守衛你的人，你們不是太親近，你們可以沉默不語，但他始終守衛著你，從未離開，他會默默的關心你。
這就是齊銘。
為了易遙，義無反顧的齊銘。
這遠是超越愛情的存在。
齊銘說：“甚至有一天，她已經完全被旋渦吞噬”。連同她自己本身，也已經變成了那個巨大的黑色旋渦。
齊銘這樣存在著，就又莫然的離開。
關于顧森西
一直，一直，陪在易遙身邊的顧森西，他也同樣給了易遙最安全的保護，在易遙難過的時候。
倘若你的身邊有個一直不知疲倦陪著你的人時，那時個是很幸福的。
他在乎易遙，想著易遙，這是一種本能，也許吧。
他最愛姐姐，因為姐姐是對他最好的人。對易遙，因為他勇敢，敢于把易遙拉出來，去面對一切，顧森西在現實面前，你是最真實的。
這就是顧森西，他懂情，懂責任。
他是故事中最堅強的人，一直存在，從未離開。
關于唐小米
從頭到尾，唐小米一直是專害易遙的，易遙是她的眼中釘，肉中刺。
唐小米本身沒有錯，只要她愛的方式錯了，愛要為愛付出代價，就是這樣。
有一種東西，你愿意為了它舍棄一切，你愿意為它背負世人的罵名，甚至愿用生命去交換，它就是“情”。
唐小米可以為了“情”不擇手段，可以為了“情”喪失善良的本性，我不知道這是不是人性的泯滅？
但我清楚，她敢愛敢恨，這是好的性格。
那么如果換作其他人，是不是也就不會不擇手段得到“情”？
原來人性，在內心深處，在你的生活……
關于結局
易遙死了，齊銘死了，顧森西也死了，如花般的生命卻最終選擇了離開，在黑暗的夜里陌然走遠，來不及挽留，也來不及嘆息，這也終是結局。
生命也許本就該如此，如此脆弱，不過是世俗與性格為他塑了虛無的外殼，終究無法承受，還是逃不過破裂，本該如此。
因為他們是青春，還太小，卻承載了世界上太多他們這個年齡不該承載的東西，最終單薄的力量還是抗不下來，所以選擇逃避，便成了永遠離開，用單純的眼光去看這個世俗的世界會是怎樣？
用小四的話來說：“本該是以一個端點放出的射線，卻因方向不同，最終，形同陌路，漸行漸遠……”
形同陌路范文2
一路跌跌撞撞。
一路吵吵鬧鬧。
一路分分合合。
我累了，如今只想一個人，冷冷清清。
［⒉］
猜不透的永遠是人心，看不懂的永遠是感情。
我如此用心的經營我的一切，小心翼翼，結果最后才發現，沒有那個必要。
我可以做得很灑脫，當做你從不曾出現在我的生命里。
只是回憶，還不斷在旋轉。
只是，還是會不受控制，回想過去。
［⒊］
也許是我變了，那個曾經單純的女子走遠了。
我變了，我承認。不再相信你所謂的永遠。
［⒊］
看不透，永遠看不透你善變的心。
為什么前一刻說著永廝守，后一刻轉身遠走。
我知道你不會難過，至少，不會為我難過。
〈⒋〉
我把所有的人分門別類。對不起，以后，你在陌生人行列。
分手不是誰的錯，不適合是個失敗的借口，不如直接說，你早已厭煩我。
〈⒌〉
我會傷心，會難過，但只會是一陣子。你只是個過客，不是歸人。
有誰會傻到為一個過客惦念一生。
我是個決絕的女子，一直如此。
〈⒍〉
我不會問你，到底曾經有沒有愛過我。
這種問題沒有價值。
既然知道是曾經，問了又如何，至少我知道，現在，你已經不愛了。
［⒎］
結局后才明白，原來，是自己想的太完美。
永遠不要和一個輕狂的少年說永遠。
你要離開，我知道很簡單。
我要放開，你不知道放開后的日子有多難捱。
但時間永遠是一劑良藥，再難捱，總會捱過去。
我知道，我很快會恢復。
形同陌路范文3
利用路口上游的交通流采集信息準確預測車隊到達下游路口的規律是進行交通信號控制的重要基礎，然而車流在從上游交叉口駛往下游交叉口的過程中，由于車隊中車輛速度差異等原因，車流會產生離散現象。因此，需要有相應的車流離散模型來進行交通流到達規律的預測，從而支撐交通信號控制相序、相位及控制參數的優化。車輛離散現象與車道寬度、道路長度、交通流構成、路側停車情況、機非分離情況、是否有人行橫道等有密切關系。目前車流離散模型主要有基于正態分布的Pacey模型［3］和基于幾何分布的Robert-son模型［4］，這些模型基于嚴格的數學假設，在理想交通狀態下適應性良好［5］。然而與機動化程度較高的國外城市相比，我國城市普遍存在路網間距較大、機非混行、車輛構成復雜等問題，由此導致在車流離散、車流到達等方面也會與國外城市交通流存在差異，因此有必要結合我國道路現狀，研究適用于我國城市道路狀況的交通流離散模型［1］。另一方面，信號控制往往需要在交叉口上游路段安裝檢測器，例如SCOOT(Split-Cycle-OffsetOpti-mizationTechnique)系統，而常用的線圈檢測器在我國城市的適用性較差，從而增加了信號控制的成本。而當前我國各城市迅速發展的帶卡口功能的電子警察系統，為交通流采集提供了新的方式。上游路口的卡口設備可以檢測在上游路口直行、左轉或右轉駛向下游路口的交通流，實際上獲得了上游駛離的交通流信息，通過建立交通流離散模型，可以預測下游路口的到達交通流的規律，因此，如何確定不同路段的交通流離散特性成為基于卡口數據進行信號控制的關鍵。本文選擇國內城市道路基本路段，基于實際調查數據研究交通流離散特性。在傳統的車流離散模型基礎上，針對不同的道路交通流狀態，通過分析上下游交通流之間的關系，一方面對Robertson幾何分布離散模型的離散系數進行修正，提出適合我國交通流特性的離散系數，另一方面基于上下游交通流數據建立線性回歸模型，并通過對比幾何分布模型與線性回歸模型，給出建議的交通流離散分析模型。
2典型車流離散模型
目前車流離散模型主要有基于正態分布的Pacey模型和基于幾何分布的Robertson模型。Pacey模型由Pacey提出，適用于中等交通流狀態的車隊離散模型。到達流取決于上游若干時段之前的駛出流，其基本模型假設是車隊行駛時間遵循變換的正態分布，每輛車的速度在路段行駛過程中不發生變化。然而上述模型基于嚴格的數學假設，限制了其應用的范圍，因此，Robertson又在TRANSYT手冊中給出了在不同狀態下的α的取值［4］，如表1所示。然而，如前所述，城市道路交通流離散特性與眾多因素有關，因此，對于路段交通流的離散特性，需要通過實際檢測數據進行分析、回歸，以找出更為合適的車隊離散模型。
3交通流離散特性分析
2014年1月17日對廊坊市和平路與藝術大道、和平路與北鳳路兩個交叉口之間的路段進行現場調查，該路段長度700m，以南向北行駛方向為調查方向，上游攝像機位于上游出口道位置，與卡口系統所拍攝的數據基本一致，距離下游交叉口停車線700m;下游攝像機距離停車線120m，故檢測路段長度為580m。該路段雙向六條機動車道，有中央隔離護欄，非機動車數量較少，大型公交車比例為8%，距離下游路口150m位置有公交車站，檢測的580m長的路段內無行人過街橫道、無路側單位出入口和相交支路。車隊向下游行駛過程中，由于要保持安全的車頭時距，車輛行駛速度發生變化，上游放行時綠燈時刻駛出的初始排隊會在行駛過程中出行離散現象，圖1表示調查過程中某時段的車隊離散現象。橫坐標為10s為時間間隔的統計時段，縱坐標為10s時段內通過檢測斷面的車輛數(三條車道)。對比上游車流通過分布圖和下游車流通過分布圖，由于上游檢測器位于上游交叉口出口道，車流主要來源為上游的南口直行、西口左轉以及少量的東口右轉，且相序為東西左轉(24s)－南北直行(38s)－南向通行(15s)，因此，理論上而言，如果上游路口排隊足夠長能夠充分利用各相位綠燈時間的話，則上游斷面車流量較為集中的時段為77s，而一個周期內的其他相位時間則會較少，即由于受上游路口信號配時的影響，上游檢測斷面車流駛離有明顯的波峰與波谷，即脈沖現象。車流行駛通過580m路段后出現離散現象，因此到達下游檢測線位置時車流波動峰值不如上游檢測斷面顯著［8，9］，如圖1所示，上游車流波動峰值為11輛，而下游只有9輛。圖2為車流分布情況圖，表示以同一輛車通過上下游攝像機時刻分別開始計時(即某車通過上游檢測斷面時刻t0開始繪制帶圓形的實線，該車通過下游檢測斷面時刻t開始繪制帶菱形的虛線)，如果路段每輛車行駛規律不變，即路段無離散，則兩個攝像機檢測車流到達分布應該是一致的，即兩條線應該重合。但是如圖2所示，虛線表示的下游檢測斷面車流變化情況滯后于實線表示的上游檢測斷面，而且波動較小(即波峰與波谷的差距變小，車輛逐漸趨于均勻)，車輛通過數方差為8.75。上游檢測斷面車流變化較大，車輛通過數方差為13.45。說明隨著車輛行駛，車流由脈沖式到達向均勻到達變化，車流離散情況明顯。
4交通流離散模型修正
4.1Robertson模型修正在Robertson幾何分布模型中，離散系數F值的確定至關重要，其與車道寬度、坡度、交通流量、停車情況、車輛構成等諸多因素相關，對不同的路況和車流行駛規律應該有不同的車隊離散系數，首先基于本次調查數據對Robertson模型離散系數進行修正，以更好地適應我國道路交通流特性［2］。Robertson幾何分布模型中上游斷面對應時刻的通過車流qA(t0)與下游斷面上一時段的通過車流qB(t－Δt)共同影響當前時刻下游斷面通過車流qB(t)。本文根據實際檢測數據對車流離散系數進行修正。
4.2線性回歸模型事實上，交通流離散規律研究的就是上游斷面交通流與下游斷面交通流之間的關系，如果不存在離散，則上游某時段內通過的車輛經過一段旅行時間xΔt后到達下游某處，即下游某時段內的交通流只與上游斷面xΔt之前的同一時段內的交通流有關。然而，由于車輛的離散性，使得下游某時段內的交通流與上游多個同樣長度時段內的交通流有一定的關系，而前面的兩個離散模型亦體現了類似的想法。因此，在此結合實測數據獲得的可能性，提出相應的回歸模型并進行檢驗。①四元回歸模型。從車流到達角度考慮，下游檢測斷面t時刻的車流到達情況與上游檢測斷面t0、t0－Δt、t0+Δt時刻及下游檢測斷面t－Δt時刻的通過交通流相關(t－t0為上下游斷面間的旅行時間)，即下游斷面的車流qB(t)與上游檢測斷面對應放行時段的車流qA(t0)、放行時段之前的車流qA(t0－Δt)(部分車延遲到達)、放行時段之后的車流qA(t0+Δt)(部分車提前到達)以及與下游檢測斷面前一時段的通過交通流qB(t－Δt)相關。
5結果對比分析
以10s為時間間隔統計早高峰車流通過數據，按照路段旅行時間和流量情況分為3種不同的交通流狀態，第一組108條數據，路段旅行時間45s，流量44pcu/周期，為飽和度較低的狀態;第二組91條數據，路段旅行時間50s，流量68pcu/周期，為飽和度適中的階段;第三組56條數據，路段旅行時間55s，流量80pcu/周期，為飽和度較高的階段。從四元回歸、二元回歸和修正的Robterson模型來看，隨著流量的增加、旅行時間的延長，下游檢測斷面t－Δt時刻的通過交通流對下游檢測斷面t時刻的車流到達影響逐漸增加。通過將本研究中的α值與TRANSYT推薦的參考值相比較，本案例中的車流離散性相對TRANSYT采用的Robertson模型更強。一方面是由于調查路段中有公交車站，且有8%的公交車，對車輛離散將帶來較大影響;另一方面由于缺乏機非隔離，非機動車對機動車的運行也會帶來一定的影響。
6總結
形同陌路范文4
【關鍵詞】 內皮細胞
關鍵詞: 內皮細胞;體外模型;牛血清白蛋白;血迷路屏障;豚鼠
摘 要:目的 研究豚鼠血迷路屏障通透性體外模型的建立方法及其通透性特征. 方法 ①用組織塊貼壁培養法分離培養豚鼠耳蝸微血管內皮細胞，免疫組化法進行鑒定;②用小池技術建立起內皮細胞通透性的體外模型，并研究該模型中耳蝸、腦及肺3種內皮細胞對125 I-牛血清白蛋白的通透性;③研究豚鼠血迷路屏障對125 I-牛血清白蛋白的通透性. 結果 ①培養細胞致密融合時具有內皮細胞培養時典型的“鋪路石樣”外觀，經免疫組化檢測其內皮細胞標志性抗原Ⅷ因子，95%以上的培養細胞的胞質中呈棕黃色陽性反應;②耳蝸、腦及肺3種內皮細胞的體外模型中加入125 I-牛血清白蛋白后，貝克-時間變化圖均呈拋物線型上升曲線，90min內幾乎呈直線;③豚鼠血迷路屏障對125 I-牛血清白蛋白的通透性曲線與體外模型相似. 結論 血迷路屏障的體外模型能大體反映在體時的通透性特征.
Keywords:endothelial cell;model in vitro;bovine serum al-bum;blood labyrinth barrier;guinea pig
Abstract:AIM To study the method of setting up model in vitro for the permeability of blood labyrinth barrier from guinea pigs and the model’s permeability.METHODS ①Cochlear microvascular endothelial cells（CMEC）from guinea pigs were isolated and cultured by tissue nubbles culti-vation and were identified with immunohistochemical test，and the model in vitro for the permeability of CMEC was es-tablished using small pool technique;②Researched the model’s permeability on radioiodinated125 I bovine serum al-bum（RISA）;③Studied the permeability on RISA of blood labyrinth barrier from guinea pigs in vivo.RESULTS ①The monolayer confluent cells showed typical“flagstone”ap-pearance as cultured endothelial cells，according to immuno-histochemical detection of factor VIII，which is the mark antigen of endothelial cell，over95%cells were observed the positive reaction with cytoplasmic buffy pigsmenting;②Af-ter RISA administration，the Bake-time curve of the model took on an ascending parabola，while within90min appeared like a straight line;③Permeability curve on RISA of the model in vitro simillar to that of blood labyrinth barrier in vivo.CONCLUSION The model in vitro of blood labyrinth barrier reveals the permeability of in vivo.
0 引言
血迷路屏障的作用在于保持迷路液成分的穩定，從而保證內耳行使正常生理功能，同時其通透性異常也是某些內耳疾病發病機制的重要環節，因此，研究血迷路屏障的通透性的調控機制具有重要的臨床意義.但是，截止目前在活體動物上開展的相關研究工作中，尚未能取得有意義的進展［1］ .耳蝸血管紋等特定部位的微血管內皮細胞是構成血迷路屏障的基礎，本研究在分離培養豚鼠耳蝸微血管內皮細胞的基礎上，建立起了該屏障通透性的體外模型，并將這一體外模型對125 I標記的牛血清白蛋白的通透性與肺和腦微血管內皮細胞，以及與活體動物的通透性進行了對照研究，為今后進一步探索血迷路屏障的體外調控機制打下了良好的基礎.
1 材料和方法
1.1 材料 ①兔抗人八因子相關抗原（Ⅷ-R Ag）多克隆抗體試劑盒由北京中山生物技術有限公司生產.②Millicell，底部為多聚醋酸酯濾膜的培養碟，底面積為4.2cm2 ，微孔直徑為0.4μm由Millipore公司生產，使用前濾膜上分別涂以醋酸鼠尾膠原和粘連蛋白（Roche）液.③碘化鈉（Na125 I）購于中國核動力研究設計院第一研究所.將牛血清白蛋白溶于PBS中，加入氧化劑氯甘脲后注入Na125 I震蕩、上柱、層析、分離，收集產品配成放射濃度為3.7MBq?mL-1 的工作液.
1.2 方法
1.2.1 豚鼠耳蝸微血管內皮細胞的分離培養及鑒定［2，3］ 選取200g左右的正常雜色豚鼠10只，麻醉，斷頭，取出聽泡，用750mL?L-1 乙醇浸泡5min，沖洗浸入D-Hanks液中，解剖顯微鏡下完整剝離出耳蝸外側壁軟組織，分離出含深素的血管紋，并將其切碎成0.5mm大小的微小組織塊，均勻平鋪于直徑35mm的培養皿底.貼壁牢固后，向培養皿中加入含有250mL?L-1 胎牛血清（hyclone）的DMEM（hyclone）細胞培養液，置50mL?L-1 CO2 ，37℃培養箱中進行培養.發現有細胞自組織塊邊緣長出后，6d時刮除所有組織塊.待細胞集落增殖到有足夠數量后開始首次傳代:D-Hanks液沖洗，2.5g?L-1 胰蛋白酶-0.1mL?L-1 EDTA細胞消化液（Sigma）消化，待大部分細胞脫壁后，含胎牛血清的培養液中止消化，將細胞懸液離心，棄去上清液后加血清培養液，接種于25mL的培養瓶中繼續培養，細胞接種密度為（2～3）×105 ?cm-2 .
在細胞傳代過程中，細胞消化后只留取貼壁較快的約3/4的培養細胞.細胞接種時，只留取約3/4的貼壁較快的細胞繼續培養.每次傳代后，倒置顯微鏡下用細胞擦刮去已貼壁的可疑雜細胞.前三代細胞傳代時連續進行上述操作，對內皮細胞進行純化.
培養皿底放入蓋玻片，將純化的培養細胞接種其中，待細胞到達合適密度后，40g?L-1 多聚甲醛固定，依次滴加過氧化物酶阻斷液（30mL?L-1 H2 O2 ，甲醇配制），正常山羊血清，1∶100兔抗人Ⅷ因子多克隆抗體（一抗），生物素標記的1∶100二抗工作液（通用型IgG/Bio），辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素1∶100工作液，然后用DAB顯色液顯色，封片觀察.同時用大鼠肝細胞作陰性對照，用PBS代替Ⅷ因子抗體作空白性對照，其余步驟不變.
1.2.2 微血管內皮細胞通透性體外模型的構建 該模型由內池和外池兩部分組成.內池為Millicell，外池為6孔培養板的培養孔.使用時將Millicell放入培養孔中，60 Co照射滅菌后，向內池中接種入內皮細 胞懸液（細胞密度5×104 ?cm-2 ），爾后向內、外池中加入血清培養液后置CO2 孵箱中培養，7～8d時，觀察內皮細胞已完全形成致密融合的單層時，該系統即為內皮細胞通透性體外模型［4］ ，待用.
1.2.3 體外模型對RISA的通透性 取待用模型，向內池和外池中分別加不含血清的DMEM培養液，同時向內池中加入RISA工作液3mL11.1MBq，放入50mL?L-1 CO2 ，37℃之培養箱中培養，分別于15，30，45，60，75，90，120和240min時從外池中取液5μL，及時檢測其每分鐘放射強度計數，計算出其放射活度值，繪制時間-通透性曲線［5］ .
本研究分別用豚鼠腦微血管內皮細胞（按Diglio等［6］ 的方法培養獲得）、兔肺微血管內皮細胞（從APCC購買）及未接種細胞的Millicell濾膜作陽性、陰性和空白對照，樣本數均為6.
1.2.4 豚鼠活體血迷路屏障對牛血清白蛋白-125 I的通透性 選取2mo齡，質量200～300g的正常雜色豚鼠48只，雌雄不限.全部動物用烏拉坦按1.5g?kg-1 的劑量ip麻醉，切開頸部皮膚顯露頸靜脈，按5.55MBq?kg-1 的劑量向靜脈中注入RISA工作液，1，2，3，4，5，6，12和18h后隨機抽取6只動物作為一組，斷頭，取出聽泡，剪去聽泡骨壁，鉤破前庭窗并擴大，微量取樣器吸出迷路液5μL，立即作每分鐘放射強度計數，計算出放射活度值，繪制時間-通透性曲線［5］ .
2 結果
2.1 培養細胞的形態學觀察及鑒定 耳蝸血管紋組織塊培養后2d，部分組織塊邊緣可見有細胞生長，10d以后增殖成數個較大的細胞集落.初期細胞呈梭形及多邊形，其間夾雜著少數雜細胞，原代細胞經消化接種后，用臺盼藍排阻法鑒定細胞存活率約90%.
培養細胞純化后，以多邊形為主，7～8d形成致密融合的單層，呈現出內皮細胞培養時典型的“鋪路石樣”外觀（Fig1）.經免疫組化法檢測其標志性抗原Ⅷ因子，95%以上的培養細胞胞質內有棕黃色著色，呈陽性反應（Fig2）. 轉貼于
2.2 內皮細胞通透性體外模型對RISA的通透性 觀察Fig3，可發現曲線均呈上升趨勢，經統計學（SSPS10.0軟件）各種曲線擬合，均以二次曲線擬合最佳.同時前9min內上升幾乎呈直線，可得到直線回歸方程.經方差分析，實驗組與陽性對照組相差顯著（P
2.3 豚鼠血迷路屏障對RISA的通透性 觀察分析該散點圖，可發現呈拋物線型曲線，其中前6h內幾乎呈直線上升，12h到達峰值，此后呈較快下降，提示該通透性曲線在6h內直線化上升，12h內則呈上升的雙曲線，整條曲線則為3次拋物線，經統計學處理后能分別得到直線、雙曲線及三次拋物線方程（Fig4）.
圖1 － 圖4 略
3 討論
自20世紀60年代，國外學者提出血迷路屏障的概念并被普遍接受以來，國內外對該屏障進行了大量研究，并取得一些進展.但由于受到在體（in vivo）研究技術手段的限制，均未能對其病理生理學進行更深入的探索，更無法利用調控其通透性的方法對這類內耳疾病進行防治，未能達到指導臨床應用的目的.國外學者通過研究證實，血迷路屏障同血腦屏障等其他屏障系統一樣，是以毛細血管內皮細胞及其連結為基礎而構成的物質交換機制的集合，因此，研究血迷路屏障的關鍵是研究耳蝸微血管內皮細胞的通透性.近年來，由于活體組織毛細血管內皮細胞分離及培養技術的發展，通過獲取體外培養的單層融合內皮細胞，一些器官血管內皮細胞通透性的體外模型不斷建立成功，被多數學者廣泛用于外周器官血管內皮細胞通透性和血腦屏障通透性的調控機制及藥理學研究，并取得了許多重要進展［7］ ，但迄今國內外尚未見耳蝸微血管內皮細胞通透性體外模型的研究報告［7］ .
由于內耳結構復雜，豚鼠中毛細血管量少，所以取得耳蝸微血管內皮細胞有較大困難.在本研究中，作者應用顯微解剖分離技術出耳蝸血管紋后，采用微小組織塊貼壁培養法，再結合應用差別純化技術，國內外首次成功分離培養了所需要的豚鼠耳蝸微血管內皮細胞［8］ .分離純化后的培養細胞，形態基本一致，多數呈多邊形，單層融合狀態下具有內皮細胞培養時典型的“鋪路石”樣外觀，經免疫組化法鑒定，95%以上的細胞胞質中含有內皮細胞的標志性抗原Ⅷ因子，表明作者培養的細胞是基本純凈的豚鼠耳蝸微血管內皮細胞［9］ .
在參照國外研究血腦屏障通透性體外模型技術方法的基礎上［10］ ，作者采用小池技術，將內皮細胞接種在經鼠尾膠原及粘連蛋白處理后的Millicell上，使細胞順利貼壁，單層生長，底層濾膜經透明化處理后，能夠對細胞生長及融合情況進行觀察，滿足了實驗需要.該方法建立的內皮細胞通透性的體外模型，在對RISA通透性的研究中表明，耳蝸內皮細胞的通透性，大于腦灰質內皮細胞，但明顯小于肺內皮細胞，這一結果與Juhn等［1］ 在活體動物上的研究結論一致.同時，牛RISA在該CMEC通透性的體外模型中的通透性曲線，亦與其在動物血迷路屏障中的通透性曲線非常相似（12h內），都呈現先快后慢的上升型曲線，都能進行最佳的二次曲線擬合.另外，本研究中豚鼠血迷路屏障對牛RISA的通透性曲線，與以前該項研究中［9］ 所得到的曲線基本相同，從而證明，本研究建立的耳蝸微血管內皮細胞通透性的體外模型，基本上反映了其在機體內的機能狀態，適用于離體（in vitro）開展血迷路屏障的某些通透性研究.
參考文獻
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形同陌路范文5
竟是無話可說，
原來形同陌路，
卻思念至深。
如果我不告而別，
你是否會將我的點點滴滴
保留腦海？
思念越多，
眼淚越多，
心酸越多。
明明約定好，
相守到老，
你卻悄然離去。
原來，原來，
這一切都是欺騙。
約定也好，
誓言也好，
形同陌路范文6
本書向讀者提供了在納米尺度工藝方法存在變化的情況下，適用于有變化意識設計方法和VLSI系統的計算機輔助設計（CAD）的工具。作者介紹了建模與分析的最新進展，內容集中在統計互連建模、統計寄生析取、考慮到空間相關的統計全芯片漏泄及動態功率分析、適用于大型整體互連及模擬/混合信號電路的統計分析與建模。本書向讀者提供了有關VLSI系統統計建模及分析的系統全面的論述，內容集中在互連、單片功率網格和時鐘網絡，以及模擬/混合信號電路上。作者幫助芯片設計者了解他們設計工具的潛能與局限，改進他們的設計效率，描述了每一種算法分析以及它們在真實電路設計情境中的實際應用。本書還包括了用來量化分析與評估作者提供的算法的數值實例。
本書共有17 章，分成5個部分：第1部分 基礎，含第1-2章：1.緒論；2.統計分析基礎。第2部分 統計全芯片功率分析，含第3-7章：3.傳統的統計漏功率分析方法；4.使用譜隨機方法的隨機漏功率分析；5.利用基于虛網格建模的線性統計漏泄分析；6.統計動態功率估算技術；7.統計總功率估算技術。第3部分 變化單片功率發送網絡分析，含第8-10章：8.考慮到對數-正態漏電流變化的統計功率網格分析；9.利用隨機廣義克雷洛夫子空間方法的統計功率網格分析；10.利用變化子空間方法的統計功率網格分析。第4部分 統計互連建模與析取，含第11-13章：11.統計電容建模與析??；12.變化電容的增量析取；13.統計電感建模與析取。第5部分 統計模擬及輸出分析和優化技術，含第14-17章：14.變化線性化模擬電路的性能限制分析；15.隨機模擬失配分析；16.統計輸出分析及優化；17.用于輸出優化的電壓分級技術。
本書可供微電子學專業的研究人員、研究生、工程師閱讀借鑒。
胡光華，高級軟件工程師
（原中國科學院物理學研究所）