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單數雙數范文1
1.通過活動能較熟練地分辨出10以內的單雙數。
2.在區分單雙數的基礎上,能初步歸納出單雙數的排列規律,提高思維的靈活性。
3.體驗數學活動的樂趣。
活動準備:
幼兒人手一張數字卡片、一套1-10數字卡片(紅黃兩種顏色)、大灰狼胸卡、音樂《捉小魚》。
活動過程:
一、玩一玩、做一做,復習10以內的單雙數
1.聽數做動作,復習10以內的單雙數。
教師:小朋友們,瞧,我是誰呀?(老狼)我們來玩個“老狼老狼幾點了”的游戲,好嗎?當老狼說到“天黑啦”的時候,小朋友們要趕快找座位坐下來,會嗎?好,開始。
教師:這個游戲好玩嗎?還想玩嗎?這次注意了,當老狼說單數時,它會回頭尋找獵物,你們一定要趕快站好變成“木頭人”一動都不能動,注意危險;說到雙數時,老狼不回頭,你們可以自由走動?!疤旌诶病?,小朋友們回座位。來,起立,開始。
2.看數做動作,表現10以內的單雙數。
教師:小朋友們真是太聰明了,一個也沒有抓到,老狼有點不服氣,它想增加難度考你們,你們有沒有信心?好,聽好了,這次,老狼不說話,只出示數字讓大家判斷,看到單數,就站好不動,看到雙數,就趕快找一個同伴擁抱,“天黑啦”就回位。準備好了嗎?
評析:活動一開始,采用幼兒感興趣的游戲導入,既集中了幼兒的注意力,又巧妙地復習了單雙數,孩子們非常感興趣,學習的主動性、積極性很高。
二、排一排、找一找,歸納單雙數的排序規律
教師:小朋友們真是太厲害了,老狼還是不服氣,這次,它拿出了它的“秘密武器”,你們怕不怕?好樣的!
1.通過操作,歸納單雙數的排列規律。
教師:瞧!這是1-10的數字寶寶,誰能把這10個數字寶寶按順序排排隊呢?我把1排在這兒,誰能接著往下排呢?(請2個幼兒上來合作排)
教師:在他們排隊的時候,大家要看仔細,也許你會發現一個“秘密”。
教師:你有沒有發現什么秘密?舉手告訴大家。
(是按從小到大的順序排列的;是按一個紅一個黃一個紅一個黃的順序排列的)
教師:紅的都是什么數?10以內有幾個單數?(5個)哪5個?最大的單數是幾?最小的呢?
教師:黃的都是什么數?10以內有幾個雙數?(5個)哪5個?最大的雙數是幾?最小的呢?
教師小結:你們的眼睛真靈,原來它們是按一個單數一個雙數一個單數一個雙數這樣的間隔順序排列的。
2.復習相鄰數,歸納出單數的相鄰數是雙數,雙數的相鄰數是單數。
教師:任意指一張數字卡,問幼兒:“它的相鄰數是幾和幾?它們是單數還是雙數?連續說幾個讓幼兒判斷,你有沒有發現什么?”
教師小結:原來,單數的相鄰數是雙數,雙數的相鄰數是單數,它們手拉手,都是好朋友。
3.尋找、遷移生活中的單雙數,歸納出單數加上1就變成了雙數。
教師:其實,單雙數和我們也是好朋友,它就在我們身邊,找找看,你身上什么東西是單數?什么東西是雙數?
教師:你們還可以在朋友身上找一找,并告訴他找到了什么數。
(幼兒互相找找、說說。)
教師:其實我們身邊到處都有單雙數,我也找到了幾個?,F在請所有女小朋友起立,我們一起來看看一共來了多少個女孩子?1、2、3……8個女孩,是單數還是雙數呢?
教師:那今天來了多少個男孩子呢?9個男孩,是單數還是雙數?
教師:那今天一共來了多少個小朋友呢?17是單數還是雙數?
(幼兒說單數、雙數的都有。)
教師:怎樣驗證?(兩個兩個數,剛好是雙數,多一個是單數。)
教師:那我們一起來數一數。兩個、兩個……還有一個沒朋友,17是什么數?
教師(站到隊伍最后):老師和她做朋友,加上一個老師,現在有幾個人了?(18個)
教師:現在大家都有朋友了,變成什么數了?(雙數)
教師小結:原來單數加上一個就變成了雙數。
評析:通過排一排、找一找、數一數,運用由易到難、環環相扣的幾個小游戲,將枯燥抽象的數學知識形象化、趣味化、生活化,很巧妙地突破了難點,促進了幼兒對單雙數及相關概念有更透徹的理解。
三、想一想、辨一辨,鞏固10以內的單雙數
教師:單雙數真神奇,里面藏著這么多的奧秘呢,小朋友們真棒!老狼徹底認輸了,為感謝大家,它還帶來了一個游戲《捉小魚》,請小朋友們拿出椅子底下的數卡來,看一看,是數字幾?是單數還是雙數?請最大的單數和最小的單數寶寶上來搭橋,其它的單數寶寶上來排好隊,(聽音樂做游戲)不好!這位數字寶寶被捉住了,請它的相鄰數朋友快來救救他。
教師:好,請單數寶寶們回位,下面呢,我要請所有的雙數寶寶上來做游戲,請最大的雙數和最小的雙數寶寶上來搭橋,其他的雙數寶寶快速排好隊,(聽音樂做游戲),這位數字寶寶被捉住了,請它的大相鄰數朋友快來救救他……
評析:在游戲中結尾,既自然地將前面的知識進行鞏固,又做到了前后呼應、動靜交替,將活動推向了。
單數雙數范文2
1 病歷摘要
患者,女,20歲,未婚。因停經50天伴早孕反應1周,于2009年3月20日到我院門診就診。末次月經2009年1月31日,平時月經周期為28~30天。婦科檢查:外陰發育正常,呈已婚未產型,陰道有完整性縱隔,右側陰道比較寬松,左側陰道狹窄,兩個陰道頂端均有宮頸,宮頸光滑,右側宮頸較左側宮頸大并著色,盆腔可觸及一個如孕50天的子宮和一個正常大小的子宮。無壓痛,雙側附件區未見異常。超聲提示:雙子宮,右側宮腔妊娠,子宮前位,呈馬鞍型,右側比左側飽滿、增大如孕7周大小?;灆z查:尿hcg陽性,白帶常規正常。
術前查心電圖、血常規及凝血時間正常。囑術前禁食、禁飲4 h。協助患者取膀胱截石位,建立靜脈通道、吸氧,持續心電監護監測生命體征。麻醉師靜推力蒙欣后1 min患者意識消失,在常規會陰消毒下行無痛人流術,用窺陰器將右側宮頸暴露,宮頸鉗固定,用探針測宮腔深度后再進行手術,術程順利,2 min后,刮出組織檢查,約孕45天大小,見絨毛組織,手術中出血約10 ml,手術結束后3 min患者完全清醒?;颊咧髟V:下腹有輕微疼痛。協助穿好衣褲,扶入觀察室休息清醒后再走,并要注意陰道流血量及腹痛情況。
2 討論
雙子宮、雙陰道是生殖道畸形的一種,是由于苗勒管發育、融合、吸收演變而成,在胚胎發育的任何時期出現停滯而造成的畸形。而內生殖器在月經正常的條件下,不做婦科檢查很難發現。超聲檢查縱切時可見兩個獨立完整的子宮,均有完整的內膜、肌層和漿膜層,橫切面見兩個子宮之間有凹陷,兩宮體并列呈蝴蝶狀。宮頸及陰道全部分開,以上特征在超聲圖像上不難分辨。本例同時并有單側妊娠,是在行無痛人流術前做婦科檢查時發現生殖器畸形。
生殖系統發育異常無臨床表現,患者因缺乏典型癥狀,常不易被發現,生殖器畸形往往難以受孕,如果受孕易出現流產、死胎、早產、產后出血等并發癥。因此,對原發性閉經、月經過多、經期延長、周期性下腹痛習慣性流產、不孕、多次產胎位均異常,應想到有子宮發育異??赡埽瑧痹鐧z查、早診斷、早治療。
單數雙數范文3
關鍵詞 手工電弧焊;單面焊雙面成形;仰位
中圖分類號:TG444 文獻標識碼:A 文章編號:1671-7597(2013)15-0127-01
隨著科學技術的進步和工業的發展,焊接結構日趨復雜,工作量越來越大,為了滿足生產的需要,出現了一系列高端的焊接方法。但是,單面焊雙面成型技術在現代手工電弧焊接領域仍占有不可替代的作用,是每一個焊接操作者都應掌握的基本技能。其中板材的仰位焊接在各種焊接位置中操作難度最大,為了得到滿意的焊縫,現將它的操作技術作簡單的介紹。
1 單面焊雙面成型焊接的定義
單面焊雙面成型是從焊件坡口的正面進行焊接,實現正面和背面同時形成致密均勻焊縫的操作方法。其廣泛應用于鍋爐、壓力容器的焊接,也是某些既要焊透又無法在背面清根的重要焊接結構所必須采用的焊接技術。
2 焊前準備
1)焊件:Q235鋼板,長×寬×厚為300 mm×100 mm×12 mm,一側開30°坡口,每組兩塊。
2)焊條:E5015型焊條,直徑為3.2 m、4.0 m。在烘干箱中進行350℃-400℃烘干,保溫2 h,然后放入焊條保溫筒中,隨用隨取。
3)焊接電源:ZX7-315型直流電焊機,按常規標準應一律采用直流反接法,但是在反復實踐中發現:用直流反接法進行滅弧打底焊,起弧困難,焊條端部有粘渣,不能避免背面焊縫凹陷的問題;而用直流正接,能有效的避免這些問題。但缺點是飛濺較大。
4)試件清理:用角向磨光機、紗布等將待焊處正反兩面坡口兩側20 mm范圍內的油、污、銹等清理干凈,直至露出金屬光澤。
5)試件裝配:將兩塊鋼板裝配成V形坡口的對接接頭,起焊處的根部間隙為3.2 mm,終焊端為4 mm。在距焊件端頭20 mm之內進行定位,定位焊縫長10 mm -15 mm,所用焊條與正式焊接時相同。錯邊量應小于1 mm。
6)反變形:將組對好的焊件向焊后角變形相反的方向折彎一定的反變形量。反變形量一般憑經驗確定:用一水平尺擱在焊件兩側,中間的空隙剛好放置一根直徑為4 mm的焊條(包括藥皮)并能通過即可。
7)焊接工藝參數。
正確選擇工藝參數是獲得質量優良焊縫的關鍵,每人都有適合自己的一套工藝參數,應根據自己的操作習慣在規定范圍內來選擇。(表)
3 焊接操作
3.1 打底層焊接
背面焊縫是否符合質量要求,關鍵在于底層焊接。底層焊接的方式主要有滅弧焊和連弧焊兩種。
1)滅弧法。用直徑為3.2 mm的焊條,采用大電流,大電流的優點在于它不容易出現未融合、未焊透、夾渣等缺陷。在焊接時由遠及近運條,保持焊條角度沿焊接方向70°-80°,在定位焊縫處引弧,隨后將電弧拉到定位焊縫中心部位預熱,當坡口鈍邊即將熔化時,將熔滴送至坡口根部,并向上頂一下,使熔滴熔化部分定位焊縫和坡口鈍邊熔合成第一個熔池,并聽到“噗噗”聲,立即滅弧,當第一個熔池顏色由明亮開始變暗時,迅速將焊條落在熔池1/2-2/3處引弧,上頂電弧,聽到擊穿聲,再次滅弧,這樣周而復始的燃弧-滅弧,直到完成打底焊,這是一點擊穿法。滅弧法要求每個熔滴都要準確送到欲焊的位置,每形成一個熔池都要在其前面出現一個熔孔,熔孔以大于根部間隙約1 mm為宜,也就是要始終保持坡口兩側同時熔化0.5 mm左右。根據熔池的溫度來控制燃、滅弧的頻率,當熔池的溫度過高時,燃、滅弧間隔要長些,并在熔池兩側起弧,作兩點擊穿法操作,待熔池溫度正常后,再采用一點擊穿法;更換焊條前,將焊條上頂,燃燒時間長一些,形成略大正常焊接時的熔孔,并將焊條拉至坡口后方約10 mm左右滅弧,使其形成一個緩坡,便于接頭和防止形成冷縮孔。接頭應盡量采用熱接法,更換焊條要迅速,在熔池還處于紅熱狀態時,立即在熔池前端10 mm-15 mm處引弧,稍拉長弧,并退至原焊接熔池處預熱1 s-2 s,然后壓低電弧將焊條向上壓送,聽到擊穿聲后,不要急于熄弧,連弧鋸齒形擺動幾下,在恢復正常的斷弧焊法。冷接法一般是在最初練習階段或耽擱了熱接時間時采用,要將熔池周圍的熔渣和飛濺物清理干凈,必要時將接頭打磨成緩坡,然后在引弧迅速移至原熔池后方10 mm處長弧預熱,然后再壓低電弧,采用與熱接法相同的操作方法進行焊接。
2)連弧法。在焊接過程中,電弧始終燃燒并作有規律的擺動,使熔滴均勻地過渡到熔池中,達到良好的背面焊縫成形。運條采用小鋸齒形橫向短弧焊接法,電弧從坡口兩側運條時均稍停頓,避免焊道表面出現凸形。使每形成的熔池覆蓋前一熔池1/2-2/3,移動速度盡可能快些,熔池體積應小些,焊道應薄些。若發現熔池溫度過高,可瞬間作挑弧或熄弧動作。
3.2 填充焊
施焊前,應認真清理打底層的熔渣和飛濺物。焊條角度同打底層,采用鋸齒形或月牙形運條,電弧要控制短些,焊條在焊道中間要快,兩側作適當的停頓,填充后的焊道表面與母材要融合良好,不得有夾渣。焊完一層后要進行層間清理。在焊填充層的最后一層時,要注意觀察不得熔化坡口邊緣,并且通過運條控制焊道形成中間凹形焊道,這樣便于蓋面層的焊接。焊完填充層應比焊件表面低1 mm左右,凹凸不平處要予以補平,以便蓋面焊接易于控制焊縫的平直度。
3.3 蓋面層
運條方法與填充層相同,但橫向擺動的幅度要大些,至坡口兩側棱邊保持熔化1.5 mm左右,并稍加停頓以防止咬邊,中間稍快些可避免熔池金屬下墜產生焊瘤。一根焊條焊完后,電弧要收在焊縫中間,并迅速更換焊條,在引弧應位于熔池前方10 mm-15 mm處。引燃電弧后,并迅速拉向熔池,待熔池金屬熔化后,在繼續向前擺動施焊,完成蓋面層的焊接。
4 結論
采用堿性焊條進行板對接仰位單面焊雙面成形時,只要我們正確的選擇工藝參數,熟練的掌握操作方法,就可以避免焊道正面形成焊瘤,背面出現凹陷等缺陷,從而獲得質量優良的焊縫。
參考文獻
[1]焊接技術:單面焊雙面成型技術[Z].中國焊接資訊網.
單數雙數范文4
為了迎接“圣誕、元旦”的到來。讓同學們感受造價一班集體這個大家庭的溫暖,感受節日的氣氛。為此,造價一班團支部在新年來臨之際策劃舉辦了“包餃子”活動。
活動目的:
1.促進同學們之間的交流,增強班級的凝聚力。
2.豐富同學們的課余生活,緩解同學們的備考壓力。
3.增強同學們的動手實踐能力。
活動主題:餃子包著“你、我、他”
活動對象:造價一班全體同學
活動時間:xx年12月25日
活動地點:地下餐廳
活動過程:
1. 18:00在c樓1002集合有活動組織者帶隊到地下餐廳。
2. 同學們協同地下餐廳工作人員布置好場地。
3. 包餃子材料(餡、面),工具(刀、搟面杖、案板)食堂免費提供。
4. 同學們合作一起包餃子,相互學習,相互合作。
5.將買好的糖包入餃子中。
6.餐廳負責將同學包好的水餃煮熟。
7.吃著餃子,嘮嘮感情。用各自家鄉的方言互致賀詞。例如:“新年好運” “新年快樂”……
8.吃到包著糖的餃子的同學給大家表演節目。
9.用相機記錄活動的過程,同學們在一起的美好日子。
10.將照片上傳班級博客、qq群相冊,沖洗部分貼在班級教室的墻上。
活動經費:
1.場地租用費50元,買糖用1元。
2.沖洗照片需要一定的錢,以上兩項開支班費支出。
3.每位同學收取5元
活動亮點:
1.包糖的餃子(她象征著吉祥、好運,更代表造價一班所有同學美好的祝愿。)
2.同學們用方言互祝賀詞。
活動前期工作:
1.邀請導員光臨此次活動。
2.做好大家的思想工作,讓每個同學都參加支持此次活動,爭取讓每個同學都能以愉悅的心情包餃子,高高興興的吃餃子。
3.借一架數碼照相機。
4.活動負責人至少提前一天將參加活動人數(40人),水餃餡品種(2種)報與餐廳經理。
注意事項
1.班委負責維護現場秩序,防止安全問題的發生。
2.活動期間須保證餐廳一切的設施不受任何損壞,損壞照價賠償。
3.活動結束后協助餐廳擺好桌椅板凳,打掃衛生。
應急工作:
1.負責人買幾張創可貼,當手被菜刀切傷應急。
2.當借不到相機或相機中途卡殼(相機沒電了或由于其他原因相機無法工作)時,用高像素手機應急。
建工學院
10級造價一班團支部
單數雙數范文5
關鍵詞:雙線雙環;教學模式;實踐
中圖分類號:G642.0 文獻標志碼:A 文章編號:1674-9324(2013)36-0059-02
國家十二五規劃將精品開放課程作為教育教學改革的重要項目之一,精品資源共享課建設是國家精品開放課程建設項目的組成部分,為了更好地服務社會和經濟建設,提高高校人才培養質量,運用現代信息技術手段建設的資源共享課程已經成為推動教學方法改革的重要途徑。
我校在建設《單片機應用技術》資源共享課程中,經過長期的教學實踐和資源累計,形成了以職業能力培養為核心,針對不同環境、不同空間、不同階段、不同角度培養的全方位立體化教學模式,稱為“雙線雙環”教學模式。如圖1所示。
一、雙線
課內一條線和課外一條線,課內一條線以項目A為主線實施教學;課外一條線,以項目B為主線實施教學。
1.課內教學線。學生在教師的引導下完成項目A,該線以項目為導向,通過問題引導、任務分析、分組合作、主體操作等方式實施教學。教師的重點是如何實施教學情境;學生的任務是訓練能力,實現能力目標,重點是知道學什么、怎樣學。教師可通過網絡論壇、指導材料進行輔助教學。學生成績以學生完成項目過程為主要評價依據。
2.課外教學線。學生在引導材料的指導下,獨立查閱技術資料、器件資料,按照企業典型工作流程方式PDCA(Plan—Do—Check—Act:計劃—執行—檢查—處理)獨立完成項目B。這個過程教師的任務是以項目A為背景引導學生完成項目B的任務,重點是如何引導學生使其清楚自己需要什么,如何獲得?學生的任務是訓練獨立完成任務能力,訓練知識的獲取、學習能力。教師通過網絡論壇、資源資料庫、輔助創新活動來進行輔助教學。學生成績以PDCA報告、企業測試報告為主要評價依據。雙線有利于職業核心能力的培養,有利于應用能力、遷移能力、創新能力的培養。
二、雙環
以職業崗位能力培養為核心的技能訓練環和以學習規律過程為核心的資源平臺環,以職業崗位能力培養為核心的“課內訓練->課外項目->企業實習”環注重職業崗位能力的訓練,是核心;而以學習規律過程為核心的資源平臺環:“學習指導-論壇交流-海量資源-創新活動-進階訓練-企業項目”,強有力地提供了學生學習和技能提升的資源保障。
1.技能訓練環。課內訓練訓練基本專業能力;課外項目要求學生將課內訓練的能力遷移到課外訓練,獨立完成項目,這一過程重點訓練學生的基本方法能力;企業實習則將學生帶入企業真實工作環境,通過團隊合作項目B的企業訓練環節,訓練學生的基本社會能力。在企業中團隊合作完成訓練任務,使學生直接感受企業對工作崗位職業能力的要求,為后續課程以及就業打好基礎。
2.資源平臺環。學習指導:提供學習情境教學中所需的一切指導材料,學生利用這個平臺獲得學習指導,教師利用這個平臺獲得教學指引;論壇交流:提供師生、同學間的交流、互動平臺。海量資源:提供資源平臺,保障教學的信息搜集需要,保障學生活動的可持續性,開拓學生眼界,提供更多的解決方案思考;創新活動:除了教學計劃中的訓練,學生還可以利用學校提供的創新訓練室完成校內、外各種活動、比賽,激發學生的學習興趣,激勵學生的學習志向,培養學生的創新能力;進階訓練:提供與課程密切相關的能力訓練提升平臺。學生可利用這個平臺掌握與課程相關的進階的知識,訓練相關進階的能力,拓展學生的學習、訓練內容,強化學生能力,了解更多實用的知識和技術;企業項目:可利用的企業資源,提供企業真實項目案例參考,開闊學生眼界,提供學生參與教師項目機會。
三、雙線雙環模式應用的優點
1.雙線并行以項目為載體,體現工作過程系統化項目特點。建立并實施了雙線并行貫穿項目為載體的教學內容。經教學實踐證明,選擇兩個具有相同交集能力訓練點的并行貫穿項目,一個用于課內,一個用于課外,學生在項目A中訓練的能力在項目B中得到遷移,體現了工作過程系統化的項目特點。
2.構建了以職業能力培養為核心的立體化教學模式。構建了以職業能力培養為核心,依據學生學習規律,針對不同環境、不同空間、不同階段、不用角度培養的全方位立體化教學模式。
該模式引導學生自主學習,通過多環境,多空間,多類型,多途徑設立相應的訓練條件,使學生的學習環境與實際工作環境貼近,使學生的完成任務的過程與實際工作任務的過程相接近,實現與企業的無縫對接。
3.塑造了課程文化理念,打造優質網絡學習平臺,深化課程改革。課程引入企業參與資源建設的理念,通過課程資源網站建立“溝通創造價值、創新實現夢想”的課程文化理念,引入了企業化管理概念,滲透8S、PDCA管理意識,在學習、訓練過程中培養學生良好的工作習慣,先進的企業意識。課程內容體現工作過程,更具備企業管理思想。教學過程中強調交流、合作,關注質量、責任,鼓勵獨立、創新,使學生在掌握單片機應用技術技能的同時,能顯著提升職業素質和能力。
四、雙線雙環模式應用的缺點
1.課外教學任務加重。資源的建設增加了學生獲得知識的多樣性,表面上是減少了教學任務,實際上是需要在網絡資源維護上下功夫,每門課程需要1名教師在網絡上專職維護,才能保障資源的提供,并不是當初設想的由教師兼職即可以完成的。
2.教學管理達不到預期效果,過程反饋系統還需改進。因為網絡資源的提供,教師對自學的學生失去了監督,對于那些自律性不強的學生,反而不利于學習成績的提高。另外學生失去了對問題解決的及時性,許多實踐性的問題仍需要在實驗室才能解決。
3.該模式仍然不能改變企業對資源建設的興趣,企業未能在此中獲得效益,這還需作為一項課題繼續研究。
以上是我校三年來運用雙線、雙環教學法的一些思考,希望能為精品資源課程的運作、改革提供一些借鑒作用。
參考文獻:
[1]宋佳琪,鄭燕林.國家精品課程的網絡資源建設現狀研究[J].軟件導刊(教育技術),2010,(05).
單數雙數范文6
關鍵詞 鎘;雙齒圍沙蠶;類金屬硫蛋白;誘導
中圖分類號 X503.225 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739(2013)11-0287-03
多毛類(polychaete)是棲息于海陸交錯帶、具有重要生態學意義的無脊椎動物。自1960年始,國外學者就將多毛類的作為毒理生態學測定的模式生物[1-4]。雙齒圍沙蠶(Pernereis aibuhitensis)隸屬于環節動物門、多毛綱,廣泛分布于我國河口和海灣生態系統,為近海沉積環境的主要優勢種類[5-6]。
近年來,隨著工農業以及經濟的迅猛發展,我國沿岸海域重金屬污染日趨加劇。自20世紀70年代至今,對我國主要海灣沉積物中重金屬污染的調查研究表明,某些典型海域沉積物中重金屬嚴重超標[7-12]。重金屬不容易被降解,能夠通過食物鏈傳遞富集而危害生態健康。海水中重金屬能通過水相或者食物相在海洋生物體內富集,通常生物機體會迅速地發出應激信號,調整一系列的生理機制來緩解和消除金屬脅迫,如增加金屬硫蛋白(metallothionein,MT)的合成。
金屬硫蛋白在生物新陳代謝過程中擔當的主要生理作用是儲運、代謝和精細調節生物體內必需金屬元素(Cu,Zn,Co,Ni)、絡合固定游離金屬特別是非必需金屬元素(Cd,Hg,Ag,Pb),以完成體內解毒過程。金屬硫蛋白在一些低等動物和植物體內發現的金屬結合蛋白同樣富含巰基(-SH),具有經典的金屬硫蛋白性質,但并不完全符合上述MT的定義,通常被稱為類金屬硫蛋白(Metallothionein like protein,MTLP)或金屬硫肽(Metallothiopeptide,MP),至今已發現60多種無脊椎動物中存在著MT,海綿、帽貝、貽貝、沙蠶、蝦蟹類、海膽和多種魚體內也發現有MTLP的存在[13-15]。作為重金屬污染的早期預警指標,海洋生物金屬硫蛋白的分析測定及其與重金屬污染的關系是目前海洋環境研究的熱點領域[16-20]。
本試驗選取典型的底棲多毛類雙齒圍沙蠶(Pernereis aibuhitensis)作為試驗生物,以重金屬鎘(Cd)為目標污染物,探討了鎘脅迫對雙齒圍沙蠶體內金屬硫蛋白的影響,以期為我國海灣和河口區域多重金屬污染生態風險的評價提供背景資料。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
試驗用雙齒圍沙蠶采于遼寧盤錦市雙臺子河口,采集后將蟲體置于冰盒運至大連市國家海洋環境監測中心活體培養實驗室,迅速將蟲體轉移至鋪有細砂和過濾海水的聚乙烯水箱中。海水鹽度30,pH 值8.1,溫度15~20 ℃,連續充氣,換水1次/d,換水時先沖刷箱底細砂,以洗去其上附著的殘餌糞便為宜,養殖密度約100條/m3,投餌2次/d,早、晚各1次,餌料為牙鲆餌料。暫養時間約30 d,目的是使試驗生物可以較好地適應實驗室水溫、鹽度等理化因子的變化,以保證毒性試驗的順利進行。暫養期間隨時檢出死亡的蟲體并記錄。
1.2 試驗方法
1.2.1 濃度梯度設置。鎘單一污染組分別為:5、50、500、1 000 μg/L,設置過濾海水為對照,即鎘濃度為0 μg/L。首先配制高濃度的儲備液,避光4 ℃保存。鎘的設定濃度與實際測定濃度見表1。表1中鎘的實際濃度通過電感耦合等離子體質譜法(Agilent 7500 ce-電感耦合等離子體質譜儀)測得。此實際濃度和設置濃度差距很大,但其數值趨勢與設置濃度的相同,可用于以后相關試驗濃度設置的參考依據。
1.2.2 暴露試驗。毒性試驗開始前要將用于試驗的全部玻璃器材在10% HNO3中浸泡48 h除去其表面的重金屬元素,過濾海水清洗備用;選用粒徑為60~2 000 μm的海砂作為沙蠶底棲生活基質,首先將海砂浸泡于10% HNO3中4~7 d,以除去其表面的重金屬元素,于65 ℃烘干,再于550 ℃下灼燒12 h,以除去細砂表面的有機質,最后過濾海水洗凈,分裝于上述已處理好的2 L玻璃燒杯中,細砂厚度約為3 cm。試驗開始前24 h將配制好的母液用經脫脂棉過濾的海水稀釋到各指定暴露濃度。試驗中包括對照組在內的每個濃度梯度設置5個重復(2 L燒杯),每個重復放置3條大小均勻、健壯活潑的沙蠶。試驗于國家海洋環境監測中心的毒理學實驗室中進行,燒杯置于恒溫水浴槽中,溫度為20 ℃,試驗期間保證向燒杯中連續充氣,光照∶黑暗為12 h∶12 h,每天置換暴露溶液1次,投餌1次。
1.3 數據處理與分析
2 結果與分析
2.2 鎘誘導下雙齒圍沙蠶MTLP含量的劑量-效應關系
3 結論
試驗結果表明,鎘誘導下,暴露濃度對雙齒圍沙蠶體內MTLP含量影響極顯著(P0.05),低劑量鎘(5、50 μg/L)誘導下,MTLP含量隨暴露時間延長 表現出先升高后又略有降低的變化趨勢。高劑量鎘(500、1 000 μg/L)誘導下,雙齒圍沙蠶MTLP含量4 d和7 d逐漸升高,14 d時MTLP含量趨于穩定。MTLP作為應激蛋白,其誘導合成是有一定限度的,隨暴露濃度呈現合成量上升并達到一定程度后呈下降的趨勢。
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