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肌球蛋白范文1
關鍵詞 鱖魚；肌球蛋白重鏈；原核表達；多克隆抗體
中圖分類號 Q785 文獻標識碼 A 文章編號 10002537（2012）06006707
肌球蛋白是肌肉主要構成蛋白質之一．它由Kuhne于1859年首先報道，之后于1864年在研究骨骼肌收縮時發現并命名［1］．肌球蛋白不僅是基礎蛋白收縮系統主要成分，也是一種復雜多聚體蛋白，在真核生物肌肉收縮過程中起到很關鍵作用［23］．在不同的動物種類之間，乃至魚類不同品種間，肌球蛋白結構和表達存在著種屬間差異性．大部分研究工作主要針對脊椎動物骨骼肌肉（主要是兔和雞）、心臟肌肉、數種平滑肌而進行，同時也包括部分非肌肉系統肌球蛋白的研究．在魚類中研究較多的是平滑肌組成的心肌肌球蛋白和橫紋肌組成的肌肉肌球蛋白［4］．肌球蛋白不同類型的重鏈基因全序列克隆測序在多種脊椎動物中已經完成，其中包括大鼠（Rattas norvergicus）［5］、雞［6］、人?。?］以及魚類中的斑馬魚［8］、大頭魚、虹鱒［9］、鯉魚［10］，大黃魚［11］和鱖魚［12］等．因此，對魚類肌球蛋白分子研究已擴展到不同魚類品種肌球蛋白重鏈、輕鏈的基因克隆分析及其表達．Lied和Decken采用生物化學方法分離提取出虹鱒肌球蛋白重鏈，并采用此蛋白作為抗原制備出多克隆抗體，鑒定出其結合蛋白［11］．Crockford等［13］和Goldspink等［14］采用哺乳動物cDNA序列為引物從鯉魚基因文庫中克隆出其肌球蛋白重鏈基因，且證實此類基因表達受環境因子所控制；Kato和Konno測定出鯉魚重鏈氨基末端和羥基末端分子結構和調節區域［15］．有關魚類肌肉特異性基因肌球蛋白輕鏈（myosin light chains，MLC）、肌球蛋白重鏈（myosin heavy chains，MyHC）的cDNA序列分析所獲取的數據，為蛋白質和基因結構進化分析提供基礎．這些克隆和分離的基因已經用于研制核酸雜交探針，來研究肌球蛋白基因家族轉錄產物特異性組織表達、進化，以及染色體定位或突變等．
湖南師范大學自然科學學報 第35卷第6期
劉希良等：鱖魚肌球蛋白重鏈基因的原核表達及多克隆抗體的制備本研究旨在通過將鱖魚肌球蛋白重鏈基因片段亞克隆到pET32a質粒，構建出重組表達載體，大量誘導表達此蛋白，制備鱖魚肌球蛋白重鏈多克隆抗體，為日后分析鱖魚肌球蛋白重鏈基因表達對其肉質性狀的影響，進而提高魚類肉質品質提供理論基礎和技術支持．
1 材料與方法
1.1 實驗材料與主要試劑
體重1 kg 左右的鮮活鱖魚購買于長沙水產市場，剪腮放血后取背部白色肌肉，-80 ℃冰箱保存備用．大腸桿菌菌種BL21（DE3）和DH5α均購于北京天根公司．原核表達載體pET32a為本實驗室保存．限制性內切酶EcoRⅠ和HindⅢ購于TAKARA公司；Trizol試劑購于Invitrogen公司；100 bp Marker、MarkerⅢ、PCR擴增所需的試劑以及一抗AntiHis Antiboby 和二抗羊抗鼠購于北京天根公司；T4 DNA連接酶、低相對分子質量標準預染及非預染蛋白質Marker購于Fermentas公司；DNA膠回收試劑盒和質粒提取試劑盒購于Promega公司；His融合蛋白純化預裝柱購于上海悅克生物科技有限公司．羊抗兔辣根過氧化物酶標二抗、DBA顯色試劑盒購于武漢博士德生物公司．其余化學試劑均為國產分析純．
1.2 試驗方法
1.2.1 引物設計 根據作者已克隆得到的鱖魚MyHC全長序列（GenBank：HQ829291）及原核表達載體pET32a的載體圖譜，利用Primer Premer5.0軟件設計一對引物，其序列分別為：
上游引物P+ 5′CAGAATTCATGGAAGAGTCCATTGAGGCTG3′（雙下劃線部分為引入的EcoRⅠ 酶切位點，粗體字為引入的起始密碼子）；
下游引物P-5′GCGAAGCTTCTAGTTCCTCTTGATTTGCTCC3′（雙下劃線部分為引入的Hind Ⅲ 酶切位點，粗體字為引入的終止密碼子）．
1.2.2 目的基因PCR擴增 采用Trizol一步抽提法提取鱖魚肌肉組織的總RNA后根據反轉錄試劑盒（Fermentas）合成第一鏈cDNA，并以其為模板進行PCR擴增．PCR擴增條件為：94 ℃預變性 5 min； 94 ℃變性30 s，57 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，共35個循環；72 ℃反應10 min．PCR產物經10 g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測后用DNA膠回收試劑盒進行純化．
1.2.3 原核表達載體構建 pET32a質粒經EcoRⅠ和Hind Ⅲ 雙酶切處理回收后與同種酶雙酶切后的PCR純化產物在T4 DNA連接酶的作用下16 ℃過夜，將目的基因定向連接到pET32a載體上，再轉化到大腸桿菌DH5α感受態細胞，接種于含50 mg/L氨芐青霉素LB固體培養基平板上37 ℃過夜培養，挑取單菌落進行菌落PCR鑒定，提取質粒進行雙酶切鑒定，挑選陽性克隆送上海生工生物有限公司測序．
1.2.4 重組質粒的原核表達及重組蛋白的純化 把構建好的表達載體pET32aMyHC轉化到大腸桿菌BL21（DE3）感受態細胞，取單個菌落接種到LB液體培養基中，37 ℃振蕩過夜，取上述培養物以體積比1∶ 100比例接種于200 mL LB液體培養基，37 ℃振蕩培養3 h左右，至OD600 值達0.5時，取1 mL菌液作為誘導前對照，分別加入終濃度為0.2、0.4、0.6、0.8、1.2 mmol/L的IPTG，37 ℃分別誘導1、2、3、4、5 h，收集菌液進行150 g/L SDSPAGE電泳，觀察不同IPTG濃度和誘導時間對目的蛋白表達量的影響．
1.2.5 抗血清的制備 用 NiNTA 純化表達的鱖魚MyHC融合蛋白，然后將純化的MyHC融合蛋白皮下多點注射新西蘭兔，共免疫3次．注射的抗原均為MyHC蛋白與弗氏完全佐劑按體積比1∶ 1混合液．首次免疫后，每隔兩周加強免疫一次．末次加強免疫后兩周采集少量血液，ELISA檢測血清抗體效價．之后，頸動脈放血，離心分離血清，即得到鱖魚MyHC蛋白的多克隆抗體，分裝后-80 ℃保存．
1.2.6 Western blot分析抗體特異性 使用哺乳動物細胞蛋白提取試劑盒提取鱖魚肌肉組織總蛋白，-20 ℃保存備用．分別取空白質粒pET32a細菌裂解液、鱖魚肌肉總蛋白、純化的MyHC蛋白，經100 g/L SDSPAGE電泳后濕法轉到NC膜上，使用50 g/L脫脂奶粉/TBST 4 ℃封閉過夜．加入一抗（兔抗MyHC血清，濃度比1∶ 1 000稀釋）4 ℃過夜孵育，TBST清洗3次后加入二抗（HRP標記的羊抗兔IgG，濃度比1∶ 2 000稀釋），TBST清洗，HRPDAB顯色，至出現明顯條帶后終止反應．
1.2.7 免疫組化分析抗體的特異性 石蠟切片脫蠟、水化；3%（體積分數）H2O2 室溫孵育15 min；蒸餾水沖洗，微波爐內抗原修復15 min；自然冷卻后，蒸餾水沖洗；PBS沖洗3次，每次5 min；50 g/L BSA室溫封閉30 min；傾去封閉液，滴加濃度比1∶ 2 000稀釋的兔抗MyHC多克隆抗體（一抗），室溫孵育1 h；PBS沖洗3次，每次5 min；滴加二抗生物素標記兔IgG（濃度比1∶ 1 000），室溫孵育20 min；PBS沖洗3次，每次5 min；BCIP/NBT顯色；自來水沖洗，核固紅輕度復染，水洗，干燥后水溶性封片劑封片，鏡檢．用PBS代替一抗作為陰性對照．
2 實驗結果
2.1 重組表達載體pET32aMyHC的構建
將重組表達質粒pET32aMyHC經EcoRⅠ和HindⅢ雙酶切鑒定結果如圖1．其中，大于4 500 bp條帶為酶切載體大小，500 bp左右的條帶為目的基因片段大?。瑫r以單菌落為模板，經菌落PCR鑒定，結果如圖2，可見在500～600 bp間有一條明顯的特異條帶。
2.2 鱖魚MyHC原核表達及條件優化
將重組表達載體pET32aMyHC（實驗組）和空載體pET32a（對照組）轉化到宿主菌BL21中，分別利用IPTG誘導，經SDSPAGE檢測結果如圖3和圖4．其中，對照組顯示一條相對分子質量約為17 000的特異性條帶，即為pET載體的His標簽蛋白；而實驗組在相對分子質量約40 000處出現一條較明亮的條帶，即為HisMyHC融合蛋白．His標簽蛋白的相對分子質量約為17 000，而插入的小清蛋白目的片段預測其蛋白相對分子質量大約為25 000，因此，MyHC融合蛋白的相對分子質量理論上接近40 000，這與SDSPAGE電泳結果一致，表明重組表達質粒pET32aMyHC經IPTG誘導后在大腸桿菌BL21中成功表達出HisMyHC融合蛋白．
M：蛋白Marker ； 1～5：不同IPTG濃度誘導的含pET32aMyHC的BL21菌體，其IPTG濃度依次為0，0.2，0.6，0.8，1.2 mmol/L；6：0.8 mmol/L IPTG誘導的含pET32a的BL21菌體
為了獲得穩定的目的基因片段和可溶狀態的重組蛋白，克隆片段起始位置應位于保守性較高且親水性高的區域．作者在設計引物前利用DNAstar軟件對鱖魚肌球蛋白重鏈基因進行親/疏水性預測［16］，結果顯示鱖魚肌球蛋白重鏈基因親水性氨基酸多集中于850～1 983位．分析鱖魚MyHC的保守結構［17］，作者選擇在Myosin_tail_1親水性氨基酸集中的區域（1 404～1 592位氨基酸）對應的核苷酸序列進行克隆和表達．基因的高效表達是在載體、基因和受體細胞的協同作用下完成的，主要受啟動子、SD序列、轉錄終止序列、載體系統等因素的影響［1821］．宿主的選擇及培養條件的控制等因素對外源基因在原核細胞中的表達效率也有很大影響．本實驗所選用的表達載體大腸桿菌BL21具有T7啟動子，可通過化學誘導高效地表達外源蛋白，目的蛋白前端的促溶蛋白（相對分子質量約為17 000）可以增加蛋白的表達及可溶性．同時，BL21含有6個組氨酸標簽，可以提高外源表達蛋白的表達效率而不影響目的蛋白的高級結構，從免疫組化和免疫印跡結果來看， 作者表達出的帶有His標簽的蛋白也沒有影響到抗原抗體特異結合的性質［22］．同時多聚組氨酸標簽對外源重組蛋白的純化也具有一定的作用．
進行融合蛋白誘導時， 蛋白極易以包涵體的形式表達， 而包涵體形成后的缺點是需變性、 復性等復雜處理過程后才能得到可溶性融合蛋白質．為了避免變性復性等復雜過程，通過改變誘導的時間和 IPTG的濃度，摸索到最適宜的條件為0.8 mmol/L IPTG誘導3 h．
肌球蛋白重鏈（ MyHC）具有ATPase活性、肌動蛋白結合位點以及a螺旋卷曲螺旋尾部等重要特性，是決定肌纖維收縮性質的主要分子之一．本研究以前期研究中已經克隆的鱖魚MyHC序列［2324］為目的基因，利用大腸桿菌BL21作為表達載體，對目的基因進行原核表達載體的構建和多克隆抗體的制備．研究成果為進一步研究肌球蛋白重鏈對肉質的影響，提高優良肉質性狀提供理論支持．
參考文獻：
［1］ SELLERS J R， GOODSON H V， WANG F. A myosin family reunion［J］. J Muscle Res Cell Motil， 1996，17（1）： 722.
［2］ HOOPER S L， THUMA J B. Invertebrate muscles： muscle specific genes and proteins［J］. Physiol Rev， 2005，85（3）：10011060.
［3］ MUNAKATA T. Crystal engineering using multiple hydrogen bonds［J］. Tetrahedron Lett， 2004，108（38）：5596.
［4］ WEEDS A G. Light chains from slowtwitch muscle myosin［J］. Eur J Biochem， 1976，66（1）：157173.
［5］ STREHLER E E， STREHLERPAGE M A， PERRIARD J C， et al. Complete nucleotide and encoded amino acid sequence of a mammalian myosin heavy chain gene. Evidence against introndependent evolution of the rod?。跩］. J Mol Biol， 1986，190（3）：291317.
［6］ MOLINA M I， KROPP K E， GULICK J， et al. The sequence of an myosin heavy chain gene and isolation of its corresponding cDNA?。跩］. J Biol Chem， 1987，262（14）：64786488.
［7］ JAENICKE T， DIEDERICH K W， HAAS W， et al. The complete sequence of the human betamyosin heavy chain gene and a comparative analysis of its product［J］. Genomics， 1990，8（2）：194206.
［8］ BRYSONRICHARDSON R J ， DAGGETT D F， CORTES F， et al. Myosin heavy chain expression in zebrafish and slow muscle composition［J］. Dev Dyn， 2005，233（33）：10181022.
［9］ MC GUIGAN K， PHILLIPS P C， POSTLETHWAIT J H. Evolution of sarcomeric myosin heavy chain genes： evidence from fish［J］. Mol Biol Evol， 2004，21（6）：10421056.
［10］ MURAMATSUUNO M， KIKUCHI K， SUETAKE H， et al. The complete genomic sequence of the carp fast skeletal myosin heavy chain gene?。跩］. Gene， 2005，349（11）：143151.
［11］ LEID E A， VON DER DECKEN. Purification of fish muscle myosin heavy chain and quantification of the specific polyribosomebond polypeptide［J］. Biochem J， 1985，232（2）：467470.
［12］ ZHANG J S， CHU W Y， CHEN J， et al. cDNA cloning and expression analysis of myosin heavy chain gene（MHC）of the Mandarin fish， Sniperca kneri ［J］. Aquacuture Reseach， 2009，40（4）：412418.
［13］ CROCKFORD T， JOHNSTON I A. Isolation of unstable myosins and the analysis of light chains by capillary electrophoresis［J］. Anal Biochem， 1995，231（1）：2026.
［14］ GOLDSPINK G， TURAY L， HANSEN E， et al. Switches in fish myosin genes induced by environment temperature in muscle of the carp［J］. Symp Soc Exp Biol， 1992，46：139149.
［15］ KATO S， KONNO K. Filamentforming domain of carp dorsal myosin rod［J］. J Biochem， 1993，113（1）：4347.
［16］ BARTLETT G J， TODD A E， THORNTON J M. Inferring protein function from structure［J］. Methods Biochem Anal， 2003，44：387407.
［17］ 符貴紅.鱖魚肉質營養成分分析及肌球蛋白重鏈基因克隆與表達［D］.長沙：湖南農業大學， 2007.
［18］ SHINE J， DALGARNO L. Terminalsequence analysis of bacterial ribosomal RNA. Correlation between the 3′terminalpolypyrimidine sequence of 16S RNA and translational specificity of the ribosome［J］. Eur J Biochem， 1975，57（1）：221230.
［19］ STUDIER F W， MOFFATT B A. Use of bacteriophage T7 RNA polymerase to direct selective highlevel expression of cloned genes［J］. J Mol Biol， 1986，189（1）：113130.
［20］ 趙發蘭，周瑞雪，成 嘉，等.鱖魚與鰱魚肌球蛋白輕鏈2啟動子的克隆及其序列比較分析［J］.湖南師范大學自然科學學報， 2011，34（1）：7579.
［21］ 農小獻，趙發蘭，賓石玉，等.斑鱖輕鏈3基因（MLC3）cDNA的克隆及縱向表達分析［J］.湖南師范大學自然科學學報， 2011，34（2）：7983.
［22］ 宋小燕， 耿梅梅， 褚武英， 等. 從大腸桿菌中表達、純化寧鄉豬N乙酰谷氨酸合成酶并制備其多克隆抗體［J］. 激光生物學報， 2008，17（6）：750755.
肌球蛋白范文2
這樣一座城市，不僅旅游業發達，吸引著周邊的人群來這里貼近大自然，還積極地發展著體育事業。作為一個縣級市，安吉自2001年以來承辦了包括國際、全國的山地極限挑戰賽、戶外運動錦標賽、WCBA全明星賽等項目，標志性場館設施――龍山體育中心更是投入1.2億元，集體育館、訓練健身館、游泳池、戶外拓展為一體。這樣一個具有優勢地理位置和體育氛圍的地方，自然成為了百片網球學校的落戶地。
一百片網球場是什么概念?著名的尼克-波利泰尼網球學校有5l片網球場，舉辦過戴維斯杯和聯合會杯的拉曼加度假村有28片網球場。國內連十片以上的網球場都屈指可數，安吉這個地方卻要造一百片?帶著這樣的疑問記者來到了安吉一探究竟，看看這百片網球場是如何誕生的。
網校的投資人兼校長老胡有著十多年的球齡，曾經打網球把體重從240多斤減到170斤，從商數十年帶來的健康問題也都被“打”掉了。因為之前網球給自己帶來的好處太多，所以老胡在金融危機后毅然離開美國，用上半生積攢的財富投入到計劃后半生運營的網球事業中去。
忙而不亂的施工
為了實地考察，記者從上海出發坐大巴前往安吉。目前安吉還沒有通火車，到達這里比較方便的交通工具就是汽車，一路過來走高速路四通八達非常便利，驅車需要兩個多小時。安吉縣管轄著lO個鎮、5個鄉，其中的上墅鄉就是正在修建的網球學校所處之地。從安吉縣汽車站到上墅鄉大約是二十分鐘的車程。
這里的前身是上墅鄉的一所中學，門口還掛著中學的牌子。在大門的一面墻上，有油漆繪成的幾個大字：“浙江安吉國際網球學?！?。走進學校，一片熱火朝天的忙碌景象。十幾個工人有在清理沙石，有在平整土地，有在焊接銅板?！罢麄€中學大概是20畝地，一期工程將修建5片標準網球場和lO片短式網球的場地?！毙煨驴抵魅谓榻B道。整個學校是方形的結構，正中間的位置是大操場和橢圓形跑道，這里將是網球場的主要落腳之地。周邊的兩片宿合樓將相應地改造成為學生公寓和酒店式公寓，一棟教學樓將改造成為多功能，多媒體的教學活動區，食堂也將會重新進行修整。
由于計劃在6月份完成第一期工程為招生做準備，工人們已經開始加班加點。監督工程進展的徐主任干脆就住在了工地里。在中學的周邊還有140畝地是在網校用地的規劃當中，這項總投資6000萬元、占地面積約160畝，包括青少年網球學校、網球訓練基地、高檔網球會所在內的工程將計劃用4年的時間分三期完工。
“這些人肯定是來‘圈地’的?！边@是大多數安吉人聽到這網校的“風聲”時最直接的反應，包括在水利局工作的網球愛好者祁凱在內。盡管在外地人心目中，安吉還是享有很高的聲譽，它是旅游休閑度假的不二之選，可是在本地人眼中，還是有很多相對閉塞的觀念。當工程真正開展起來，祁凱到實地一睹為快后才開始有幾分相信。
安古人打網球主要是到體育中心，那里有一片室內網球場和四片室外場，都是向公眾免費開放的，可是打網球的人并不多，場地經?？罩弥??！爸饕钦?、機關的領導或是工作人員打球?！逼顒P告訴記者，此外，這里離中心區有幾分鐘路程，當地人覺得太偏僻了。在這樣的氛圍下，想要改變人們的生活和娛樂習慣，把他們吸引到網球場甚至是將來的上墅網球場來，的確是巨大的挑戰。
“這正是我們的機遇。在房地產一片大好的形勢下你來做房地產，不一定就能經營好，網球從零開始，我們的思路也更寬廣?！崩虾f道。為了投身網校，在美國10多年的老胡正準備把國內的先進理念帶回國，推動網球事業的發展。
目前盡管學校還是雛形的階段，但已有兩位專業教練開始對網球愛好者進行培訓。“網校一旦建成，第一期暑期網球夏令營活動動會正式啟動，屆時將會把上海、溫州、杭州等地的學生吸引到安吉來。”網球旅游成為休閑度假新選擇
記者到達安吉的當天，上海有一家三口正驅車來旅游，并在安吉體育中心的網球場打了一場球。像這樣旅游與網球的結合，也正是老胡對網校的發展思路之一。“對于安吉來說，網校的建成，將會在社會效益和休閑旅游方面起到助推的作用，它將帶來新一輪的休閑經濟發展?！卑布嚓P負責估量道。
安吉山青水秀、環境優美，是長江三角洲經濟區內一顆璀璨的綠色明珠。在這里，“川原五十里、修竹半其間”；在這里，“修竹拂云當戶聳，暗泉明玉繞亭飛?！边@座有著1800年歷史的縣城以“竹”而聞名天下，素有“中國竹鄉”之美譽。
由于安吉生態環境優越，旅游資源豐富，屬于理想的人居住地。中國大竹海、白茶谷、九龍峽、芙蓉谷等旅游景區，是吸引不少游客到此一游的籌碼。為了遠離大城市的喧囂，尋求一片凈土，安吉是不錯的養生之選。記者在采訪中了解到，長江三角洲附近城市的網球愛好者在設計自駕游線路時，安吉總是時常被提及并納入行程的一站。今后，如果安吉的網球與旅游能夠做到完美融合，確實是發展休閑經濟的新思路。
近十幾年來，在安吉縣委、縣政府的領導下，安吉縣風景與旅游管理局大力發展生態旅游、休閑旅游。從1997年起，旅游人次、門票收入、旅游收入每年都以40％以上的速度快速遞增。安吉全縣山巒疊嶂，綠蔭環抱，林海茫茫，70％的森林覆蓋率讓這里成為了一個天然的綠色世界。安吉，正以其獨特的生態魅力，吸引著越來越多的海內外游客前往休閑度假與觀光。堅定前行
近幾年來，隨著中國女子網球在世界的名氣逐漸增大，網球的發展也提速了。全國也有不少網校存在，老胡其中也走訪了江門天力網球學校、保定的超達網校、浙江萬祥網球學校等。辦網校，辦好網校，這是很多網球人仍然在積極探索的難題，甚至其中暴露的一些弊端目前還無法去調節。
肌球蛋白范文3
【關鍵詞】 妊娠;白蛋白;球蛋白
The change of prenatal serum globulin concentration and clinical significance
PENG Qi cai,ZHOU Shui sheng,WU Ling.
Department of Obstetrics,the Third Affilated Hospital Of Zhongshan University,Guangzhou 510630,China
【Abstract】 Objective To evaluate the antenatal serum globulin concentration and clinical significance.Methods A random sample from July 2009 to March 2010 into full term pregnancy in our hospital 108 cases of obstetric patients,said the prenatal group,and randomly selected the same period 40 cases of non pregnant women of childbearing age for the control group.Admitted to hospital to collect serum albumin、globulin data of two groups patients,and analysis of data recorded.Results The prenatal group albumin(37.35 ± 2.11)g/L,control group(45.12 ± 3.55)g/L,the difference was significant,P
【Key words】 Pregnancy;Albumin;Globulin
正常妊娠中期后血清白蛋白因孕期血液稀釋其降低,約為35 g/L[1],但有關妊娠期血清球蛋白的變化情況報道較少。妊娠被認為是成功的自然同種異體移植[2],必然涉及細胞免疫和體液免疫反應,而球蛋白與機體免疫功能和血漿粘度密切相關[3],所以,了解妊娠期球蛋白的變化相當重要,但目前人們對妊娠后球蛋白變化的研究不足,為此本項目通過對產前孕婦和正常育齡婦女的血清白蛋白和球蛋白濃度分析,了解妊娠期球蛋白質的變化情況,為進一步研究妊娠免疫提供臨床依據?，F報告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 隨機抽取2009年7月至2010年3月孕足月入我院產科待產病例108例,排除妊娠合并癥如妊娠合并肝炎、心臟病、糖尿病等和妊娠并發癥如先兆子癇等,同時隨機抽取非孕期正常育齡婦女40例作對照。
1.2 方法 孕婦入院后確定孕周,抽靜脈血2 ml放干燥管送檢測,對照組同樣抽靜脈血2 ml放干燥管送檢,用全自動生化檢測儀進行檢測,記錄檢測結果。
1.3 統計學方法 采用EXCEL內統計軟件進行數據處理,計量資料用t檢驗,計量資料用χ2檢驗,以P
2 結果
2.1 產前組孕婦平均年齡30.2歲,最大38歲,最小20歲,平均孕周39周,最大41孕周,最小37孕周。對照組婦女平均年齡29.7歲,最大40歲,最小16歲,兩組年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)。
2.2 兩組血清白蛋白和球蛋白檢測結果(表1)。
表1
兩組血清白蛋白和球蛋白檢測結果(x±s,例)
例數白蛋白x±s(g/L)球蛋白x±s(g/L)
產前組10837.35±2.11 28.73±3.78
對照組10045.12±3.55 26.47±3.37
P值
表1說明:產前孕婦血清白蛋白濃度比對照組明顯降低,而球蛋白濃度卻明顯升高。
3 討論
我們的研究結果提示,與正常育齡婦女比較,妊娠晚期血清白蛋白濃度降低極為明顯(P
球蛋白與機體免疫功能和血漿粘度密切相關[3],而妊娠被認為是成功的自然同種異體移植[2],這必然涉及細胞免疫和體液免疫反應。正常人血清蛋白電泳顯示白蛋白、a1球蛋白、a2球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白五個區帶[3],a1球蛋白區帶是以a1酸性糖蛋白、a1抗胰蛋白酶為主,a2球蛋白區帶是由觸珠蛋白、a2巨球蛋白、銅藍蛋白等組成,β球蛋白區帶是由轉鐵蛋白、 脂蛋白、補體C3等組成,γ球蛋白主要是由免疫球蛋白IgG等組成。球蛋白包括a1球蛋白、a2球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白,妊娠期血清球蛋白蛋白濃度增加,是哪些球蛋白增加呢?王玉潔[4]對待產婦血清蛋白電泳研究提示妊娠期a1球蛋白、a2球蛋白、β球蛋白均增加,而γ球蛋白減小,鄭玉玲[5]對妊娠期婦女血清蛋白電泳研究提示妊娠期a1球蛋白、a2球蛋白、β球蛋白均增加,而γ球蛋白無變化。兩位研究者均認為血清蛋白的變化是正常妊娠生理現象,認為a1球蛋白、a2球蛋白、β球蛋白均增加主要是適應胎兒生長發育對脂類及鐵、銅等微量元素的需要,而γ球蛋白減少可能與免疫球蛋白IgG經胎盤進入胎兒體內有關。但這些推論都沒有實驗結果支持,尤其IgG變化機制,會不會與妊娠屬同種異體移植有關?這個問題值得我們去進一步探索。
妊娠后血液稀釋了,而血清球蛋白濃度比正常育齡婦女增加了,目前其原因還不是很清楚,研究其產生機制對了解妊娠生理及妊娠相關疾病如流產、子癇前期等的處理都有重要意義!
參考文獻
[1] 劉元姣,曹來英.新編婦產科疾病診療學.人民衛生出版社,2003:31 31.
[2] 樂杰.婦產科學.人民衛生出版社,2008:92 92.
[3] 陳文彬,潘祥林,康熙雄,等.診斷學.人民衛生出版社,2008:392 394.
肌球蛋白范文4
摘要本文對2011年倫敦羽毛球世錦賽男單決賽中李宗偉與林丹的技術進行統計分析。為了明確差距、找出不足，主要從網前球、扣殺球等得失分方面與對手進行比較分析。結果表明：李宗偉在整場比賽情況發揮正常，比以前進步很快，技術和林丹不相上下，但是還是敗陣林丹。這和體力技術有相關關系，一度被動地陷入對方的戰術。通過比較分析，找出問題，分析羽毛球技術戰術中合理利用體能與心理，向羽毛球最高水平進軍。
關鍵詞倫敦羽毛球世錦賽男單決賽李宗偉扣殺球
現代羽毛球運動誕生于1873年，約有一百多年的歷史，它是國際重大體育比賽中不可缺少的項目，在奧運會上，羽毛球運動也是進行國際文化交流，增強與各國人民的相互了解和友誼的有效手段。其特點在戰術上表現以我為主、以攻為主、以快為主，基本技術全面、熟練，特點突出，進攻點多，封網積極，劈殺兇狠，防守穩中有刁，守中有攻，能攻善守，力求“快、狠、準、活”的有機結合?？偟膩碚f，世界羽毛球運動將朝著“更加積極主動，特長非常突出，技術比較全面、戰術變化多樣”的趨勢發展。
隨著羽毛球運動的發展，尤其在實行新賽制以后，比賽的偶然性大大增加，受到了各國優秀羽毛球運動員的強烈沖擊，晉級之路頗為坎坷。李宗偉是典型的拉吊突擊型打法的選手，防守穩健，技術細膩，無論是從個人能力，還是從技、戰術方面，都是世界一流的。但經常被我國林丹的氣勢所壓制，網上流傳“既生李何生丹”的言論，問其原因，所謂“知己知彼，百戰不殆”，有比較才有鑒別，本文通過與我們過優秀羽毛球運動員林丹的比賽中，主要從前場網前球、中場平高球、后場扣殺球等得失分情況，認真、細致地對李宗偉的技術進行比較分析，找出不足與存在的問題，取人之長，補己之短。
一、研究對象與方法
（一）研究對象
李宗偉――目前世界排名第一，本世錦賽的一號種子選手，對手林丹為二號種子。
（二）研究方法
1．文獻資料法
本文查閱了大量與本研究相關的專著，期刊，為本研究提供了科學的理論依據。
2．錄像統計法
觀看2011年倫敦羽毛球世錦賽男單決賽李宗偉與林丹的比賽錄像，對其中主要技術進行數據統計與分析。
3．對比分析法
將觀看錄像所統計出的數據進行對比分析。
二、結果與分析
李宗偉與林丹主要得分技術的比較分析如下：
表1李宗偉與林丹網前撲殺球情況一覽表
頭頂直線 頭頂斜線 正手直線正手斜線正手追身 總計
李宗偉 0 3 552 15
林丹 102 3 40 19
網前撲殺球是網前技術的一種，它不但可以直接得分，而且可以提高運動員的自信心和在氣勢上的鼓舞。從表1的統計數字來看，李宗偉在比賽中頭頂直線得分為0，頭頂斜線得分為3，相比較對手而言實力薄弱，但是正手直線斜線以及追身得分優勢大于對手。在以上的統計數字對比中，李宗偉在撲殺球得分上少于對手，相差4分，說明在網前撲殺球技術上僅次于林丹。網前撲殺球得分少也是李宗偉敗陣林丹的主要原因之一。
表2李宗偉與林丹吊球情況一覽表
頭頂直線 頭頂斜線 正手直線正手斜線 總計
李宗偉 0 1 124
林丹 10 0 01
吊球是把對方擊過來的高球，從后場輕擊或輕切、輕劈到對方的網前附近。它是羽毛球比賽中常用的基本技術，通常與高遠球相結合，來充分拉開對手或者消耗對手體能，從而獲得突擊進攻的機會。從表2可以看出，李宗偉吊球得分為4分。對手吊球總直接得分1分。結果表明：李宗偉在吊球上發揮了優勢，說明與隊手拉吊的場面處于主動優勢，直接得分也比對手多了3分。
表3李宗偉與林丹網前球技術分析情況一覽表
撲球 對角對手下網推球 總計
李宗偉 4 27 0 13
林丹 6010 2 18
勾網前對角是使突然改變來球的飛行路線，用勾的動作回擊到對角網前區，球飛行速度快，貼網而過，弧線恰到好處，是一項動作要求非常細膩，技巧性很強的技術。搓網前球是擊球后球在過網的瞬間有強烈的不規則旋轉和翻滾，飛行距離短，落地快。由表3可以看出，李宗偉在本場比賽撲球得分4分，對角2分推球0分，結果表明：李宗偉在撲球、勾對角均低于對手13：18.兩人在搓網前球技術上反手都比正手略強，主要從搓球成功的次數和失誤率兩方面。對李宗偉來說網前小球技術細膩沒有發揮好，也是失誤增多的主要因素。
表4李宗偉與林丹對手失誤得分情況一覽表
對手判斷錯對手出邊線對手殺球下網對手撲球下網 總計
李宗偉 1 8 5 216
林丹 5 11 4 121
羽毛球比賽中，得分形式主要包括兩種：第一，直接得分，就是直接打死對方而得分，如：扣殺球、網前撲球、吊球等；第二，失誤得分，就是靠對手出現的主動、判斷失誤等得到的分數。從表4的統計數字可以看出，李宗偉在三局比賽中靠對手的失誤得分共16分；反觀對手直接得分21分。結果表明：李宗偉在比賽中主動進攻機會比較少，得分能力也比較差，比對手少了5分，失誤也比較多，在比賽中也暴露出步法不夠靈活、技術特點沒有發揮、戰術變化少等現象。
失誤是避免不了的，由于羽毛球體積小，重量輕的特點，容易受風向、氣流的影響。因此，給羽毛球運動員的發球和接發球都帶來了麻煩。隨著新賽制的改革，比賽的進攻性加強、節奏明顯加快、偶然性增大。這就要求運動員不能有過多的失誤，有時候一個小小的失誤可能扭轉比賽的局勢。羽毛球運動員所關心的問題，是把這種最低級的失誤減小為零。
三、結論與建議
（一）結論
1．網前撲殺球、勾對角、搓球、中場平高球，直接得分方面都略低于對手，主動失誤過多。
2．吊球技術上發揮良好成功率高于對手，比賽中被對手拉吊的場面比較多，直接得分高于對手。
3．李宗偉在扣殺球總數上明顯少于對手，被對手壓制的比較厲害，沒有太多的主動進攻的機會，不但沒有限制住對手技術特點的發揮，而且一度陷入到對方的戰術中，跟著對手的節奏打球。
4．在對方失誤率方面，李宗偉在失誤率方面要大于林丹的失誤率，連續得分能力弱，主動進攻意識不夠。
（二）建議
1．主動進攻訓練
新賽制的改革，比賽時間和節奏的加快，比較有利于進攻型打法。因此，平時訓練就要養成“以攻為主”的戰略思想。在“積極進攻”的同時還必須重視進攻的有效性和穩定性的有機結合，減少失誤。
2．專項素質訓練
在羽毛球比賽中21分每球得分制尤其對單打羽毛球運動員的爆發力、專項跑動能力、無氧代謝能力等體能提出了更高的要求。因此，平時要加強這些專項能力的訓練。
3．提倡“以我為主，以快為主，攻守結合”的戰術思想
羽毛球比賽本身就是一個控制與反控制的過程，在比賽中應該用自己的特長去攻擊對方的薄弱之處，以我為主，以快為主，并做到攻守兼備，從而牢牢控制住比賽的節奏和主動權。
參考文獻：
[1] 肖杰.羽毛球運動理論與實踐[M].北京:人民教育出版社.2005.
[2] 程勇民.“快、狠、準、活”技術風格對中國羽毛球運動的促進與制約[J].體育學刊.2005(2):99-101.
肌球蛋白范文5
【關鍵詞】 手足口??；患兒；檢測；血清免疫球蛋白；C反應蛋白
手足口病（HFMD）易發病于夏秋季節， 多見于學齡前兒童， 3歲以下發病率高， 其主要原因可能是該年齡段小兒細胞免疫及體液免疫均不成熟， 免疫功能低下， 機體缺乏保護性抗體[1]。手足口病是由腸道病毒（ 以柯薩奇A組16型、Ev71多見） 引起的急性傳染病， 少數病例多因Ev71感染引發腦脊髓、腦膜炎、腦炎、肺水腫、循環障礙等。手足口病的臨床表現為發熱， 在口腔、手心、足底臀部位散在紅色的皰疹， 可伴有咳嗽、流涕、食欲不振等癥狀。手足口病可引起患兒多項檢驗指標異常[2]， 為了解手足口病患兒血清免疫球蛋白與C反應蛋白的濃度變化情況并同時為臨床提供一種檢測方法， 本研究通過對在本院住院治療的110例手足口病患兒的血清聯合檢測其免疫球蛋白與C反應蛋白水平， 分析其變化情況， 進而判斷患兒免疫狀況， 并為臨床采取相應的治療措施提供科學依據。現將結果報告如下。
1 資料與方法
1. 1 一般資料 選取自2012年4月～2014年1月來本院就診并確診的小兒手足口病患兒110例， 將其作為研究組。其中男64例， 女46例， 年齡9個月～5歲， 所有患兒均有發熱、手足口處均有皰疹等癥狀， 并符合衛生部制定《手足口病診療指南2010年版》的診斷標準?；純翰〕淘? d以內， 平均病程3.7 d。隨機選取90例（男58例， 女32例）同期住院的非手足口病患兒作為對照組。
1. 2 方法 在研究組以及對照組患兒入院當日或者第2天， 分別抽取兩組靜脈血3 ml后， 分離血清備用， 采用免疫散射比濁法檢測血清免疫球蛋白與C反應蛋白濃度。
1. 3 臨床檢測 主要測量研究組及對照組的IgA、IgG、IgM及超敏C反應蛋白水平， 比較研究組以及對照組各個指標的大小。
1. 4 統計學方法 應用SPSS17.0軟件進行統計學處理。計量資料以均數±標準差（ x-±s）形式表示， 實施t檢驗。P
2 結果
研究組IgA、IgG平均水平低于對照組， 兩組比較差異具有統計學意義（P
3 討論
手足口病已成為全球性傳染病之一， 春夏季易于流行， 發病人群多集中于1～3歲的兒童。該病目前尚無疫苗和針對性的藥物防治。手足口病傳染性強且傳播途徑復雜， 流行速度快， 嚴重危及兒童身體健康。該病的潛伏期一般2～6 d， 易從最常見的無癥狀或僅有輕度不適， 至嚴重并發癥甚至引發死亡。據相關研究表明， 因該年齡階段的兒童機體內缺乏保護性抗體， 所以發病率和病死率較高。目前多數患兒感染后經治療后愈后良好， 少數患兒可引起心肌炎、肺水腫、無菌性腦膜腦炎等較嚴重病變， 有的患兒甚至會死亡。因此， 如何防治HFMD感染已成為國內研究熱點之一。
目前， 臨床上用免疫球蛋白和超敏C反應蛋白來檢測手足口病病情進展狀況， 其主要原因是免疫球蛋白IgM、IgG、IgA水平可以一定程度反映機體體液免疫狀態。其中IgM 是體液免疫最早出現的抗體， 有中和游離的外毒素， 增強吞噬細胞的吞噬作用。IgA 的水平下降常伴隨分泌型 IgA 下降， 而分泌型 IgA 是防止呼吸道感染的主要免疫球蛋白。因此， IgA 水平下降導致患兒口腔出現皰疹[3]。CRP 是一種由肝臟合成的急性相蛋白， 可結合多種真菌、細菌及原蟲等體內的多糖物質。也可Ca2+存在下， 結合卵磷酸和核酸形成聚合物， 激活補體系統， 引發對侵入細胞的免疫調節作用和吞噬作用而表現出炎癥反應[4]。超敏C反應蛋白的微小變化可反映出心血管及部分其他疾病密切相關[5]。
本研究數據表明手足口患兒血清免疫球蛋白水平與正常值比較， 差異具有統計學意義（P
綜上所述， 臨床防治方面應關注手足口病患兒免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、超敏C反應蛋白水平變化， 并針對存在的問題及時采取適當的措施， 以防止嚴重并發癥的發生。另外還應繼續加強對手足口病的深入研究， 制定更好更有針對性的治療措施， 以促進患兒早日康復。
參考文獻
[1] 路黎娟， 李廷俊， 董焱， 等.脾氨肽口服凍干粉預防小兒手足口病療效觀察.兒科藥學雜志， 2014， 20（1）：29-32.
[2] 李蘭娟， 手足口病.杭州：浙江科學技術出版社， 2008：61.
[3] 陳慰鋒.醫學免疫學.第3版.北京：人民出版社， 2001： 32-33.
[4] 劉小英.超敏 C-反應蛋白和心肌酶聯合檢測對手足口病患兒早期診治的意義. 中國醫藥導報， 2011， 8（14） ：20-22.
肌球蛋白范文6
者4例。發病后2個月心臟彩超復查，2例冠狀動脈擴張者均恢復正常。靜注丙種球蛋白期間發生心衰3例，心率增快、煩躁2例，出現高熱、寒戰1例。結論：丙種球蛋白屬于血液制品，在發揮治療作用的同時，有時可以產生不同程度的不良反應。護理人員一定要熟悉所用藥物的作用及不良反應，嚴密觀察患兒病情，及時與醫生聯系，以便病人得到及時治療。
[關鍵詞] 川崎??；丙種球蛋白
[中圖分類號]R472[文獻標識碼]C [文章編號]1673-7210（2007）03（c）-069-02
川崎?。╧avasaki disease，KD）又稱皮膚黏膜淋巴結綜合征，是一種病因未明的幼兒高發的血管炎綜合征，以冠狀動脈病變最為嚴重[1]，因冠狀動脈常常受損，給患兒造成嚴重危害。近年來由于大劑量丙種球蛋白的應用，使該病的預后有所改觀。我院自2003年1月～2006年2月共應用大劑量丙種球蛋白治療川崎病21例，現將護理體會報道如下：
1 對象與方法
1.1 一般資料
川崎病患兒21例，均符合實用兒科學診斷標準[2]，其中男15例，女6例，男∶女比例約為2.4∶1。發病年齡8個月～9歲3個月，中位年齡為3歲7個月。臨床表現：發熱21例。其中～38.5℃ 5例，～39℃ 7例，＞39℃ 9例。皮疹17例，多數為多形性紅斑性皮疹，斑丘疹2例，猩紅熱樣皮疹及麻疹樣皮疹各1例。雙眼球結膜充血19例，口唇潮紅皸裂、口腔黏膜充血19例。楊梅舌16例。手足硬性水腫15例。趾端及肛周脫屑15例。淋巴結腫大12例。伴隨癥狀：咳嗽、流涕8例。表現為腹痛、腹瀉、嘔吐6例。頭痛2例。21例患兒均作血常規檢查，其中WBC＜10×109/L 2例，～15×109/L 7例，～20×109/L 6例，＞20×109/L 6例。血小板計數＞300×109/L 14例，血沉增快7例。CRP增高13例?？埂癘”檢查均正常。心肌酶譜檢查18例，異常10例，主要表現為GOT、LDH升高。血培養檢查6例，均陰性。尿常規檢查21例，有5例為鏡下白細胞+～++，余正常。心臟彩超檢查19例，異常3例：冠狀動脈擴張2例，三尖瓣反流1例。
1.2方法
21例患兒均給予大劑量丙種球蛋白（1.0 g/kg）治療，癥狀控制不理想時次日同樣劑量再用1劑。同時應用阿司匹林治療，阿司匹林用量為30～50 mg/（kg?d），口服，分3次給予，熱退后減量為5 mg/（kg?d）。本組患兒應用1次丙種球蛋白者16例，應用2次丙種球蛋白者5例。
2 結果
體溫1 d內控制者10例，2 d內控制者7例，＞2 d者4例。發病后2個月復查心臟彩超，2例冠狀動脈擴張者均恢復正常。靜注丙種球蛋白期間發生心衰3例，心率增快、煩躁2例，出現高熱、寒戰1例。
3 討論
川崎病對冠狀動脈的損害已引起人們高度關注，大劑量丙種球蛋白治療具有縮短病程、緩解癥狀、減輕冠狀動脈損害、促進已受損冠狀動脈恢復的作用，臨床應用日益廣泛。由于丙種球蛋白屬血液制品，在發揮治療作用的同時，有時可以產生不同程度的不良反應，如作者觀察的21例患兒中，心衰3例，血清學反應1例，所以作為護理人員一定要熟悉所應用藥物的作用及不良反應，做到以下幾點，盡量減少藥物不良反應，避免醫療差錯及醫療事故。① 丙種球蛋白為血液制品，在使用過程中應注意有無血清學反應發生。血清學反應常發生在靜脈輸注開始后1 h，主要表現為寒戰、發熱、頭痛、胸悶、胸痛、肌痛、不適、惡心、瘙癢、皮疹等，一旦發現此類癥狀，應及時報告醫生，給予相應處理。本組2例出現血清學反應，患兒經應用地塞米松、異丙嗪治療后癥狀得到控制。②大劑量的丙種球蛋白在短時間內輸入可致心功能不全，可能與增加血容量及部分患兒原有心臟疾患有關，因此，在輸注丙種球蛋白時，全過程定期觀察患兒的一般情況和呼吸、心率、肝臟的動態變化十分重要，應注意輸注速度，丙種球蛋白應在12～24 h內均勻滴入[2]。如果出現心衰癥狀，應減慢或暫停輸注，必要時靜脈應用毛花甙丙。③大劑量丙種球蛋白治療用藥量大，價格比較昂貴，且該藥物需要低溫保存，所以一定要有專人管理，避免造成不必要的差錯和損失。④口服阿司匹林具有抗凝、抗血小板聚集作用，但長期服用對胃腸道有刺激作用，可以引起胃酸增多、反酸、噯氣、腹痛，嚴重者導致胃腸道出血。所以，做好臨床指導十分重要，應囑咐患兒飯后服藥，必要時加用胃腸黏膜保護劑，以盡量減少胃腸道反應。⑤ 嚴密觀察患兒病情，及時與醫生聯系，以便病人得到及時的治療、護理。此外，應把好藥源關，無正規批號的藥物不用，批號不清楚的藥物不用，院外購置的藥物不用。
[參考文獻]
[1]黃平，胡大一，金小燕，等.川畸病冠狀動脈病變介入療法的研究現狀[J].中華兒科雜志，2002，40（11）:675-677.