前言：尋找寫作靈感？中文期刊網用心挑選的對雌性去勢大鼠的作用及藥效對比研究，希望能為您的閱讀和創作帶來靈感，歡迎大家閱讀并分享。
【摘要】探討定坤丹口服液與定坤丹水蜜丸對雌性去勢大鼠模型的性激素調節作用，并對兩種 劑型的藥效進行對比。方法：將雌性 SD 大鼠隨機分為空白組、模型組、陽性對照組（給予補佳樂 0. 12 mg/kg）、定坤丹水蜜丸組（給藥劑量為 1. 75 g/kg）以及定坤丹口服液高、中、低劑量組（給藥劑量分 別為 10、5、2. 5 mL/kg）。除空白組外，其余大鼠采用手術去除雙側卵巢的方法建立去勢大鼠模型，術 后 1 周開始灌胃給藥，每天灌胃 1 次，連續灌胃 4 周。給藥期間觀察大鼠一般狀態；ELISA 法檢測大鼠 血清中卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）、雌二醇（E2）、孕酮（P）、前列腺素 E2（PGE2）及前列腺素 F2α（PGF2α）水平的變化情況；取全血放入促凝管中測定凝血功能；摘取子宮計算臟器系數，并通過 HE 染色法檢測大鼠子宮的病理變化。結果：給藥期間，與模型組相比，定坤丹口服液中劑量組大鼠體 質量明顯增加（P < 0. 01），與定坤丹水蜜丸組相比差異無統計學意義（P > 0. 05）；子宮指數結果顯示， 與模型組相比，定坤丹口服液各劑量組、定坤丹水蜜丸組及陽性對照組大鼠子宮指數均較模型組顯著 升高（P < 0. 01）；凝血功能結果顯示，與模型組相比，定坤丹口服液高劑量組大鼠的 PT 值顯著降低 （P < 0. 05），定坤丹口服液高、中劑量組及定坤丹水蜜丸組大鼠的 TT 值較模型組明顯降低（P < 0. 01， P < 0. 05），定坤丹口服液與定坤丹水蜜丸組大鼠 PT 及 TT 值相比差異無統計學意義（P > 0. 05）；ELISA 結果顯示，與模型組相比，定坤丹口服液各劑量組、定坤丹水蜜丸組大鼠血清 P、E2、PGE2 水平均不同 程度升高，LH、FSH、PGF2α 水平均不同程度降低（P < 0. 05 或 P < 0. 01），其中定坤丹口服液高劑量組 大鼠 PGE2 水平、中劑量組大鼠 FSH 的水平優于定坤丹水蜜丸組（P < 0. 01，P < 0. 05）；病理檢查結果 顯示，與模型組相比，各給藥組大鼠子宮均有不同程度的萎縮，水蜜丸組及定坤丹口服液高劑量組大 鼠子宮萎縮情況減輕，間質細胞排列密集，兩者相比無統計學意義。結論：定坤丹口服液與定坤丹水 蜜丸對去勢大鼠模型均有顯著的治療作用，能升高大鼠血清 P、E2、PGE2 水平，降低 LH、FSH、FGF2α 水 平，二者藥效無明顯差異。
【關鍵詞】定坤丹口服液；定坤丹水蜜丸；去勢大鼠模型；卵巢功能不全；藥效對比
定坤丹由紅參、鹿茸、西紅花等藥物組成，具有滋 補氣血、調經舒郁的功效，主要用于氣血兩虛、氣滯血 瘀所致的月經不調、行經腹痛、崩漏下血、赤白帶下、血 暈血脫、產后諸虛和骨蒸潮熱等，被廣泛應用于婦科疾 病，如卵巢功能不全、月經病、不孕癥和更年期綜合征 等［1］。目前定坤丹產品主要有口服液、水蜜丸與大蜜 丸 3 種劑型，其中定坤丹口服液具有口感好、吸收快且 起效迅速的優點，而定坤丹水蜜丸則具有作用緩慢、藥 效持久且容易保存的優點。本實驗通過復制雌性去勢 大鼠模型，使大鼠處于卵巢功能缺失狀態，從而引起大 鼠雌激素分泌紊亂，以此來探究定坤丹口服液及定坤 丹水蜜丸對卵巢功能的調節作用，同時對二者的藥效 進行對比。
1 材料
1. 1 動物
健康雌性 SD 大鼠，SFP 級，200 只，體質量 180～ 200 g，由北京斯貝福生物技術有限公司提供，許可證 號：SCXK（京）2019－0010。大鼠飼養于清潔恒溫環 境，平均溫度 25 ℃，平均濕度 37%，15～20 次/h 全新 風，光照12 h明、12 h暗。
1. 2 主要藥物、試劑與儀器
定坤丹口服液（山西廣譽遠國藥有限公司，批號： 4112011002）；定坤丹水蜜丸（山西廣譽遠國藥有限公 司，批號：3282011096）；補佳樂戊酸雌二醇片（Bayer， 批號：583A）。 大鼠孕酮（P）ELISA 試劑盒（批號：202104）、大鼠 雌二醇（E2）ELISA 試劑盒（批號：202104）、大鼠促卵泡 刺激素（FSH）ELISA 試劑盒（批號：202104）、大鼠黃體 生成素（LH）ELISA 試劑盒（批號：202104）、大鼠前列 腺素 E2（PGE2）ELISA 試劑盒（批號：202104）、大鼠前 列腺素 F2α（PGF2α）ELISA試劑盒（批號：202104）均購 自江蘇酶免實業有限公司；C5 微孔板檢測儀（美國 伯騰）。
2 方法
2. 1 去勢大鼠模型的建立
全部大鼠隨機分為空白組、模型組、陽性對照組、 定坤丹水蜜丸組（水蜜丸組）以及定坤丹口服液高劑量 組（高劑量組）、定坤丹口服液中劑量組（中劑量組）、定 坤丹口服液低劑量組（低劑量組）。雌性大鼠腹腔注射 10%水合氯醛溶液麻醉，仰臥位固定于大鼠板上，剃毛 消毒后，沿腹部正中線距陰道口 2. 5 cm 處切開，使用 剪刀在正中定位處打開約 1. 5～2 cm 的皮膚切口。除 空白組外，其余大鼠分離兩側輸卵管進行結扎，結扎后 完整摘除兩側卵巢，分兩層縫合切口，用無菌生理鹽水 沖洗傷口，碘伏消毒；空白組大鼠僅切開，不結扎。術 后連續 3 d 各組大鼠腹腔內注射青霉素 4 萬 IU/d 以預 防感染，6 d 后拆線，結扎術后大鼠可正常存活即為去 勢大鼠模型復制成功。
2. 2 分組給藥
術后 1 周開始灌胃給藥，按人與大鼠體表面積換 算系數確定給藥劑量。高、中、低劑量組分別灌胃定坤 丹 口 服 液 10、5、2. 5 mL/kg，陽性對照組予補佳樂 0. 12 mg/kg，水蜜丸組給予定坤丹水蜜丸 1. 75 g/kg，空 白組和模型組大鼠灌服等劑量蒸餾水，每天灌胃 1 次， 連續灌胃4周。每周稱量大鼠體質量，調整給藥劑量。
2. 3 標本采集
末次給藥結束后，禁食不禁水 12 h，10% 水合氯醛 溶液麻醉后進行大鼠腹主動脈取血，一部分放入抗凝 管中測定凝血功能，另一部分放入 EP 管中室溫靜置 2 h后3 000 r/min離心20 min，取上清，制備血清，?20℃ 保存。摘取大鼠子宮，并稱取子宮的質量，計算子宮指 數。子宮組織用生理鹽水沖洗后，立刻置于 10% 甲醛 中固定。 子宮指數 = 子宮質量（g）/體質量（g）×100%
2. 4 ELISA 法檢測
大鼠血清中 FSH、LH、E2、P、PGE2、 PGF2α含量 嚴格根據 ELISA 試劑盒說明書步驟進行操作， 檢測大鼠血清中 FSH、LH、E2、P、PGE2 和 PGF2α 的 含量。
2. 5 HE染色觀察
大鼠子宮組織病理變化 生理鹽水沖洗后，立刻將子宮置于 10% 的甲醛溶 液中固定，石蠟包埋，切片，HE 染色，200 倍光鏡下觀 察子宮內膜損傷等病理形態學的變化情況。
3 結果
3. 1 各組大鼠一般狀態及子宮指數比較
造模期間，空白組大鼠皮毛光滑，攝食、飲水規 律，體質量持續穩定增長；模型組大鼠毛發暗淡無光 澤 ，情 緒 易 激 惹 ，體 質 量 較 空 白 組 明 顯 增 加（P < 0. 01）。給藥后，與模型組相比，中劑量組大鼠體質 量繼續增加（P < 0. 01），水蜜丸組大鼠體質量有增加 趨勢，但差異無統計學意義（P > 0. 05）；定坤丹口服 液各劑量組與水蜜丸組大鼠相比，差異無統計學意 義（P > 0. 05）。模型組大鼠子宮指數較空白組明顯 降低（P < 0. 01）；定坤丹口服液各劑量組、水蜜丸組 及陽性對照組大鼠子宮指數較模型組顯著升高（P < 0. 01）；中、低劑量組與水蜜丸組相比，差異無統計學 意義（P > 0. 05）。見表 1。
3. 2 各組大鼠凝血功能指標比較
模型組大鼠PT、TT較空白組顯著升高（P < 0. 01）； 高劑量組大鼠 PT值較模型組降低（P < 0. 05），高、中劑 量組及水蜜丸組的 TT值較模型組顯著降低（P < 0. 01， P < 0. 05）；定坤丹口服液各劑量組與水蜜丸組大鼠 PT 及TT值相比，差異無統計學意義（P > 0. 05）。見表2。
3. 3 各組大鼠性激素指標比較
與空白組相比，模型組大鼠血清 P、E2、PGE2 水平 顯著降低，FSH、LH、PGF2α 水平顯著增高（P < 0. 01）； 與模型組相比，定坤丹口服液各劑量組、水蜜丸組大鼠 血清 P、E2、PGF2α 水平均不同程度升高，LH、FSH、 PGE2 水平均不同程度降低（P < 0. 05，P < 0. 01），其中 中劑量組大鼠的 FSH 水平以及高、中劑量組大鼠的 PGE2 水平較水蜜丸組改變更明顯（P < 0. 05），其余指 標無統計學意義（P > 0. 05）。
3. 4 各組大鼠子宮病理形態的比較
與空白組比較，模型組大鼠子宮明顯萎縮，內膜上 皮及子宮腺上皮細胞呈小圓柱狀，質核比下降，子宮內 膜層變薄，間質細胞呈紡錘形，細胞變小，肌層萎縮變 ??；與模型組相比，各給藥組大鼠子宮均有不同程度的 萎縮，水蜜丸組及定坤丹口服液高劑量組子宮萎縮情 況減輕，間質細胞排列密集，兩者相比無顯著差異。
4 討論
定坤丹始于清乾隆年間，為宮廷秘方，乾隆帝因其 可“安定坤富”而將其命名為“定坤丹”。該方由紅參、 鹿茸、西紅花等中藥組成，由四君子湯、四物湯、逍遙 散、八珍益母丸、理中丸、柴胡疏肝散等經典名方化裁， 共行補益氣血、滋補肝腎、調經舒郁、健脾行氣、溫中祛 寒、活血止痛之功效，用于氣血兩虛、氣滯血瘀所致的 月經不調、行經腹痛、崩漏下血、赤白帶下、血暈血脫、 產后諸虛和骨蒸潮熱等。 現代藥理研究發現，定坤丹在原發性卵巢功能不 全（POI）的治療中具有良好的效果［2-3］。POI 的發病原 因包括遺傳學、免疫學、醫源性、環境和生活方式等因 素［4］。LH、FSH、E2、P作為女性卵巢功能不全的早期標 志物，在疾病的發生過程中可表現為 LH、FSH 含量升 高，E2、P含量降低，其中 FSH 最為敏感［5］。女性的卵泡 發育、性激素水平的調節以及正常生殖功能的維持主 要依靠下丘腦－垂體－卵巢軸，E2、FSH 和 LH 是女性 生殖軸的重要激素［6］，其中 E2受 LH 和 FSH 的調節，共 同維護女性生殖系統正常的生理功能［7］。有研究表 明，前列腺素與子宮收縮有密切關系，其中研究較多的 是 PGF2α 和 PGE2，PGF2α 可促進子宮收縮，而 PGE2 則對子宮收縮產生抑制作用［8-9］。 本實驗通過摘除大鼠卵巢復制雌性去勢大鼠模 型，使大鼠處于卵巢功能缺失的狀態，并在此基礎上進 行定坤丹口服液與定坤丹水蜜丸的藥效對比。實驗結 果表明，定坤丹口服液和水蜜丸均能不同程度升高大 鼠血清 P、E2、PGE2 水平，降低 LH、FSH、PGF2α 水平， 證明定坤丹能夠通過調節大鼠雌激素紊亂的狀態從而 促進卵巢功能的恢復，另外給藥后 TT降低也說明出定 坤丹能夠促進凝血功能的改善。 水蜜丸是指藥材細粉以水和蜂蜜按適當比例混勻 為黏合劑制成的藥丸，其作用緩慢，藥效持久，優點在 于使用的蜂蜜量較少，含水量低，可便于長期保存和服 用?？诜簞┦且灾兴帨珓榛A，提取中藥內的有 效成分，并按照注射劑的加工工藝合成的口服液體制 劑，具有服用劑量小、味道好、吸收快、奏效迅速和質量 穩定等優點。通過本實驗對定坤丹口服液和水蜜丸進 行藥效學對比，結果顯示二者具有相似的治療效果，因 此可以在不同的應用場景根據使用人群的偏好進行選擇。
作者:張潤濤 李佳 高喬 節笑笑 劉聰 倪艷 康永 張愛榮 趙惠淳 單位:山西省中醫藥研究院 山西廣譽遠國藥有限公司