前言：尋找寫作靈感？中文期刊網用心挑選的4種菌劑提高青蝦的生長性能，希望能為您的閱讀和創作帶來靈感，歡迎大家閱讀并分享。
高密度、集約化養殖是提高水產養殖產量與效益的有效方式，但該方式以人工投餌為主，易產生并積累大量的殘餌和糞便，這些物質在長期厭氧的養殖水體下層將分解產生氨態氮、亞硝酸氮、硫化氫、有機酸、胺類、低級脂肪酸和甲烷等對養殖動物有毒有害物質(Funge-Smith＆Briggs，1998;俞勇等，2003)，引起病原微生物的大量滋生，水體的微生態平衡被打破，病害頻繁發生，繼而嚴重制約了集約化、規模化養殖的發展。因此，改善水質、修復和維持養殖水體的微生態平衡，已成為水產養殖防病的關鍵技術。微生態制劑是人工分離正常菌群并通過特殊工藝制成的生物制劑。世界上已有許多國家正在大量使用微生態制劑，日本1989年的益生素用量就在1000t以上。在我國，微生態制劑在改善水質和維持微生態平衡等方面的功能也受到廣泛關注(馮俊榮等，2005;王篤彩等，2011);人們利用有益微生物菌群等微生態制劑的各種生理生化作用，分解、合成或轉化水中的有害物質，調節和凈化水質。目前，水產養殖業應用的凈水微生物主要有光合細菌、芽孢桿菌、硝化細菌、酵母菌、放線菌等，但由于各種菌劑的性質不同、產品質量存在差異，對水產養殖水體的調節效果并不一致。本試驗比較研究了復合芽孢桿菌、EM菌、類球紅細菌、光合細菌對雜交青蝦“太湖1號”養殖池水質及其生長性能的影響，以期為青蝦標準化養殖過程中的水質調控提供依據。 1材料與方法 1．1試驗菌種 本試驗選擇生產上常用的復合芽孢桿菌、EM原露、類球紅細菌和超濃縮光合細菌共4種微生態制劑，按生產廠家推薦用量全池潑灑。試驗菌均購于蘇州相城區某漁藥店，其中，復合芽孢桿菌(活菌數為2．2×109CFU/g)潑灑后養殖水體含菌量為6．6×107CFU/m3;EM原露(活菌數不少于1．0×108CFU/mL)內含光合細菌、乳酸菌、酵母菌、芽孢桿菌、醋酸菌、雙歧桿菌和放線菌，潑灑后養殖水體含菌量為1．5×108CFU/m3;類球紅細菌(活菌數為5．0×109CFU/mL)潑灑后養殖水體含菌量為1．5×1010CFU/m3;超濃縮光合細菌(活菌數為1．0×1010CFU/mL)主要為沼澤紅假單胞菌，潑灑后養殖水體含菌量為2．5×109CFU/m3。 1．2試驗設計 試驗在江蘇省蘇州市陽澄湖現代農業發展有限公司雜交青蝦“太湖1號”養殖示范區進行，池塘面積為0．44～0．57hm2，平均水深1．2m。隨機選擇20個標準養殖池，每種微生態制劑重復使用4個池，另4個作為對照池，不用微生態試劑。池底種植伊樂藻、輪葉黑藻等沉水植物作為蝦的隱蔽場所，沉水植物覆蓋率在30%～40%。試驗青蝦是蘇州市陽澄湖現代農業發展有限公司引進的雜交青蝦“太湖1號”(品種登記號:GS-02-002-2008)，經繁殖后的F1代苗，于2011年7月31日放蝦苗，放養密度為120萬尾/hm2，初始平均體長(1．5±0．3)cm，平均體重(0．11±0．02)g。從8月15日開始用微生態制劑調節水質，每隔10～15d全池潑灑1次，至11月21日，共潑灑8次。 1．3飼養管理 試驗時間為150d。由于是室外池塘養殖，試驗期間水溫從8月的32℃逐漸下降至8℃。每日8∶00～9∶00、15∶00～16∶00投喂，投喂量為青蝦總重的3%～4%，并根據試驗蝦采食情況靈活調整，記錄投喂量。高溫季節，每天14∶30打開增氧機增氧1h。放養后20d，用廣州精博生物技術有限公司生產的纖蟲凈6kg/hm2全池潑灑，每月1次。9月開始出現藍藻，在9月25日用6kg/hm2纖蟲凈加1．5kg/hm2硫酸銅全池潑灑，使用后的第4天潑灑微生態制劑。 1．4測量指標 試驗期間，每隔20d測定池塘底層水質1次，采樣時間為9∶00～11∶00，檢測離池底15～20cm處的pH值、溶氧(DO)、氨態氮(NH+4-N)和亞硝酸鹽(NO-2-N)含量。pH值用EC10便攜式pH計測定，碘量法(GB7489-89)測定溶氧(DO)，水楊酸分光光度法(GB7481-87)測定氨態氮(NH+4-N)，重氮偶合比色法測定亞硝態氮(NO-2-N);同時，每池抽取150尾左右的青蝦檢查其生長情況，分別用電子天平(精確度為0．01g)和游標卡尺測量體重與體長。2011年12月底收獲，統計產量、規格、飼料系數等指標。 1．5數據分析 采用Excel2003和SPSS16．0軟件輔助進行統計分析，數據取平均值±標準誤差(X±SD)，統計顯著水平設定為P＜0．05。 2結果與分析 2．1微生態制劑對養殖水質的影響 本試驗在7月31日統一放養蝦苗，當蝦苗生長15d(8月15日)后使用微生態制劑，在9月25日用6kg/hm2纖蟲凈加1．5kg/hm2硫酸銅殺滅藍藻;間隔20d測定池塘底層的主要水質指標pH值、DO、NH+4-N、NO-2-N，結果見圖1。圖1－A顯示，養蝦池中的pH值始終在7．5以上，隨著青蝦的不斷長大及投餌量的增加，水體的pH值不斷升高。雖然在9月25日使用纖蟲凈和硫酸銅后水體pH值有所回落，但在10月中下旬再一次升高，對照池的pH值高達9．3，此現象在蝦、蟹養殖水體較為常見，這可能與養殖水體栽培大量的水生植物，在溫度適宜、陽光充足時產氧高而消耗過多CO2有關，但高pH值對青蝦及水體微小生物的成長有較大的影響。整個養殖過程中，使用類球紅細菌和EM菌的水體pH值升幅小于其它養殖水體，起到較好的穩定水質作用。圖1－B顯示了微生態制劑對水體DO的影響。在8～10月青蝦快速生長的高溫季節，隨著青蝦的長大，因水體生物量和池塘殘餌量的增加引起池塘需氧量快速增加，顯示水體的DO不斷下降。在使用硫酸銅等藥物后，潑灑類球紅細菌與EM菌的水體DO基本保持穩定，其它3組均有所下降，下降幅度由大到小排列為:對照組＞超濃縮光合細菌組＞復合芽孢桿菌組，對照組下降到5．34mg/L，一定程度上對蝦的生長產生了影響。圖1－C顯示了微生態制劑對水體NO-2-N的影響。在8～10月青蝦快速生長的高溫季節，有機物分解后，水體的NO-2-N含量不斷升高。定期使用微生態制劑后，水體NO-2-N含量均比對照組低;其中，潑灑芽孢桿菌與EM菌的水體NO-2-N含量控制在0．06mg/L以下，類球紅細菌組稍高于這兩組但低于光合細菌組和對照組。說明芽孢桿菌與EM菌具有較強的降NO-2-N功能。圖1－D顯示了微生態制劑對水體NH+4-N的影響。在高溫季節，隨著養殖水體有機物的增加，NH+4-N也會增加，但隨著4種微生態制劑使用次數的增加，水體NH+4-N均低于對照組;其中，使用類球紅細菌的水體NH+4-N降幅最大，EM菌組次之。說明類球紅細菌和EM菌具有較強的降NH+4-N功能。#p#分頁標題#e# 2．2微生態制劑對養殖池藍藻的抑制作用 在試驗中發現，不同微生態制劑對雜交青蝦“太湖1號”養殖池藍藻的抑制效果也不一致。從9月中旬開始，部分池塘出現藍藻，經顯微鏡檢測，優勢種群為阿氏擬魚腥藻(Anabaenopsisarnoldii)和水花銅綠微囊藻(Microcystisaeruginosaflos-aquae);到9月24日，對照組的藍藻較多，生物量達(2～4)×108個/L;芽孢桿菌組的9、11、12號池及超濃縮光合細菌組的36、38、39號池的藍藻較多，生物量達(3～5)×104個/mL，芽孢桿菌組的10號、超濃縮光合細菌組的37號、EM菌組16號池的藍藻生物量達1×104個/mL;EM菌組13、14、15號的藍藻數量則為(2～6)×103個/mL，生物量少了1個數量級;類球紅細菌組的水體有少量藍藻，18、19號池生物量為(1～2)×103個/mL，17、20號池為(1～2)×102個/mL;說明類球紅細菌與EM菌具有較好的抑制藍藻作用。從青蝦產量與規格分析(表1)，當池塘中出現一定數量的藍藻后，產量并不一定低，但規格相對變小，將藍藻較多的復合芽孢桿菌組與藍藻相對較少的EM菌組進行比較，復合芽孢桿菌組的青蝦產量不比EM菌組少，但規格則變小;而超濃縮光合細菌組與EM菌組相比，不僅青蝦規格小而且產量低，說明藍藻生物量達到一定數量級后會抑制青蝦的生長，乃至影響其成活率。 2．3微生態制劑對青蝦生長性能的影響 養殖試驗結果見表1。各試驗組的青蝦肥滿度與平均規格均大于對照組，但沒有達到顯著水平;飼料系數從低到高為:類球紅細菌＜復合芽孢桿菌組＜EM菌組＜超濃縮光合細菌＜對照組，其中類球紅細菌組與其它各組間的差異達到顯著水平(P＜0．05);成蝦(2．8g/尾以上)上市率從高到低排列為:類球紅細菌組＞EM菌組＞復合芽孢桿菌組＞超濃縮光合細菌＞對照組，除了超濃縮光合細菌與對照組差異不顯著外，其它各組間均差異顯著(P＜0．05);青蝦的產量，類球紅細菌組均顯著好于對照組及其它3個試驗組(P＜0．05)，其它組間差異不顯著。表1還顯示，不同試驗組的投入產出比與養殖效益差異顯著。從全程使用微生態制劑的投入成本分析，EM菌組＞復合芽孢桿菌＞類球紅細菌組＞超濃縮光合細菌。從凈利潤上看，類球紅細菌組顯著高于其它4組(P＜0．05)，復合芽孢桿菌組與EM菌組顯著高于超濃縮光合細菌組與對照組(P＜0．05)，復合芽孢桿菌組與EM菌組、超濃縮光合細菌組與對照組差異不顯著。綜合其生長性能及養殖效益，使用效果分別是:類球紅細菌組＞EM菌組＞復合芽孢桿菌＞超濃縮光合細菌。 2．4微生態制劑對青蝦生長速度的影響 當青蝦苗進入試驗池后，每隔20d在各個池抽取150尾左右青蝦，測量其體重與體長，測定結果見圖2。圖2－A顯示，潑灑超濃縮光合細菌的池塘中，蝦的體重始終比其它試驗組的小，與對照組相近;潑灑復合芽孢桿菌組，在10月生長高峰時，體重略高于EM菌和類球紅細菌組，后期其體重卻低于類球紅細菌組，但差異均不顯著。與體重變化趨勢一樣，潑灑超濃縮光合細菌組的蝦體長速度均小于其它組(圖2－B)而與對照組相近，在10月生長高峰期，其它3組蝦的體長生長速度較一致，到12月，復合芽孢桿菌組略高于類球紅細菌組和EM菌組，但差異不顯著。 3討論 3．1微生態制劑的調水能力及對青蝦生長的影響 口服微生態制劑能提高養殖動物的生長性能，是通過有益微生物分解有機質、提供菌體蛋白作為營養(黃永春等，1999;王蘭和廖麗華，2004;李卓佳等，2006;韓慶莉等，2010)，同時菌體分泌一些活性物質增強養殖動物的免疫力(周小輝等，2008;俞吉安等，2002)來實現的。本次試驗結果表明，這4種微生態制劑對青蝦生長性能產生了相應的功效。雖然在雜交青蝦“太湖1號”的生長速度、肥滿度、平均規格等指標上4個試驗組差異不顯著，但飼料系數、單位產量、上市規格的青蝦比例等指標差別顯示，類球紅細菌組顯著好于其它各組(P＜0．05)，這可能是類球紅細菌在水體密度達到一定程度后，其代謝產物SOD酶、輔酶Q、類胡蘿卜素、氨基乙酰丙酸等活性物質通過水體改善了養殖蝦免疫力(俞吉安等，2002;任鵬等，2010)。EM菌組的青蝦生長性能僅次于類球紅細菌組，而效果不太理想的是超濃縮光合細菌，養殖效果差異更多的是與這些微生態制劑調節水質的能力有關。有研究證實，養殖水體高濃度氨氮會使蝦體代謝失衡、生長不良、抗病力下降、疾病發生乃至死亡(聶月美和邵慶均，2006);亞硝酸鹽氮含量過高可導致養殖生物的機體免疫力下降(葛立安等，2008)。本試驗再一次證實了水質的好壞是養殖成敗的關鍵，從穩定水體pH值和DO、降低氨態氮和亞硝酸鹽及抑制藍藻繁殖等功能指標綜合考察，4種試驗菌劑的調水效果排序為:類球紅細菌＞EM菌＞復合芽孢桿菌＞超濃縮光合細菌。 3．2影響微生態制劑水質調節效果的因素 3．2．1水環境的平衡和穩定 微生態平衡、水質穩定是池塘高產穩產的關鍵因素，引入功能性微生物穩定養殖水質已得到業界的認可。影響微生態制劑調水效果的因素很多，起決定性作用的首先是各種微生物的生理特性，如芽孢桿菌可以迅速、有效地分解池底沉積的排泄物、殘餌等有機廢物，降低水體中的亞硝酸鹽、氨氮和硫化氫濃度，從而改善水質，減少換水頻率，而且還可補充有益微藻營養成分，改善水色(陳鵬飛和李淘洪，2009);類球紅細菌在厭氧、好氧、黑暗、光照條件下均能生長，較好地利用低級脂肪酸、氨基酸和糖類，菌體富含蛋白質營養，氨基酸指標平衡，可作為飼料生物的營養(韓慶莉等，2010)。細菌是一類易產生變異的生物，不同生態環境下分離的同一種菌的不同菌株，其生理特性也有所差異。Kim等(2009)從枯草芽孢桿菌A－53中分離純化出羧甲基纖維素酶，經SDS-PAGE確定其分子量達到56kDa;而張鐸等(2008)從土壤中分離得到的枯草芽孢桿菌能產生一種分子量為3．5kDa的抗菌肽，其抗菌譜廣，對光、熱及pH等環境因素不敏感。本次試驗表明，4種微生態制劑的調水效果，類球紅細菌的功能最強，EM原露次之，超濃縮光合細菌的效果不明顯。#p#分頁標題#e# 3．2．2水體有機污染物 水體有機污染物濃度也影響微生態制劑的調水能力。雖然芽孢桿菌、EM菌、類球紅細菌、光合細菌等制成的微生態制劑在生產中已得到廣泛應用，并取得很好的效果;但也應該看到，這些微生態制劑也并非無所不能。本試驗后期，隨著有機物的積聚，池中氨態氮、亞硝酸鹽的含量上升，提示微生態制劑處理有機物的能力也有一定限度。保持池中水質的穩定，不能完全依賴微生態制劑，需要采取綜合措施，如降低放養密度、投入穩定性強且營養全面的顆粒飼料等。 3．2．3制劑中的活菌數量 微生態產品中的活菌數量是其發揮調水作用的根本保證。本試驗中，4種菌潑灑后在水體的活菌數由高到低排列順序為:類球紅細菌(1．5×1010CFU/m3)＞超濃縮光合細菌(2．5×109CFU/m3)＞EM菌(1．5×108CFU/m3)＞復合芽孢桿菌(6．6×107CFU/m3);而使用效果也是菌濃度高者調水效果明顯，超濃縮光合細菌的效果不明顯還有待探討。關于產品中的活菌數，瑞典已規定乳酸菌制劑中活菌要達到2×1011CFU/g;我國在正式批準生產的制劑中，對含菌數量和用量也有規定，如芽孢桿菌含量高于5×108CFU/g;但是，由于同一種菌不同菌株分解有機物及調節水質的能力是不同的，在生產中常常有養殖者反映，一些微生態制劑要加量，有的甚至需要翻幾倍使用說明劑量才能有效，因此在高溫季節常出現藥害事故。這就要求微生態制劑生產商在自己的產品面市前須做必要的應用試驗，細致制定使用劑量、使用方法、保質期及注意事項，才能安全銷售;另一方面，養殖者應根據池塘的有機物濃度確定使用量。只有這樣，才能充分發揮微生態制劑的調水和促生長作用。