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飼用抗生素在預防動物疾病、促進生長、提高飼料報酬、提高畜禽產品產量等方面發揮了積極的作用［1］。但是飼用抗生素的濫用也給人類帶來了越來越大的麻煩，如耐藥菌株的增多、破壞動物機體正常的菌群、引起微生態失調、抑制機體免疫反應形成、導致免疫功能下降等，另外，抗生素等藥物在畜產品中的殘留，也威脅著人類的健康和安全。因此，為了解決抗生素添加劑在應用中存在的問題，研究者們一直在致力于尋求一種無毒副作用、無殘留、促進動物生長的綠色添加劑。微生態制劑是指含活菌和（或）死菌，包括其組分和產物的細菌制品，經口或其他黏膜途徑攝入，旨在改善黏膜表面微生物或酶的平衡，或者刺激特異性或非特異性免疫機制，能夠起到防治消化道疾病、促進生長、改善畜產品品質、減少糞便惡臭、防治環境污染的作用。該試驗旨在研究山東寶來利來生物工程股份有限公司生產的微生態制劑———肽菌素在肉雞生產中的應用效果，從而為肽菌素在肉雞生產中的推廣應用提供試驗依據。 1材料與方法 1.1試驗材料 肽菌素由植物乳酸桿菌、雙歧桿菌和枯草芽胞桿菌B7348組成，其活菌總數不低于5.0×108cfu/g；供試雞為1日齡健康AA肉公雞，購自山東省泰安市省莊肉雞場；新城疫（ND）LaSotaⅣ系疫苗，購自齊魯動物保健品廠；EMB培養基和LBS培養基，購自青島高科園海博生物技術有限公司。 1.2試驗設計及飼養管理 試驗采用單因子設計，在基礎日糧中分別添加抗生素（金霉素100mg/kg）、肽菌素0、0.1%、0.2%、0.4%（見表1），每個處理3個重復，每個重復30只雞。選用450只健康1日齡AA肉公雞，按照大小和健康狀況基本相同的原則隨機分配到5個處理，每個重復為一籠，飼養方式為平養。試驗分為前期（1~21d）和后期（22～42d）2個階段，為期6周。試驗雞自由采食和飲水，光照、免疫等均按常規飼養管理進行。 1.3試驗飼糧 基礎飼糧為玉米—豆粕型飼糧，參考中國雞飼養標準（2004）［2］配制，各階段基礎飼糧組成及營養成分見表2。所有飼糧均為粉料。 1.4檢測指標與測定方法 1.4.1生長性能：分別于試驗的第1天、第21天、第42天早晨空腹進行稱重。計算1~21、22~42日齡和1~42日齡的平均日增重、平均日采食量和料肉比。 1.4.2消化道生理指標①樣品采集：于試驗的第21、42天每個處理的每個重復隨即抽取2只雞進行屠宰，分離十二指腸、空腸和回腸，然后分別剪下十二指腸（離胃幽門5cm處）、空腸中段和回腸中段約1cm的腸段組織，盡快放入10%福爾馬林固定液中，制作組織切片用作顯微鏡觀察。②小腸長度：用軟尺測量十二指腸、空腸和回腸的長度。③腸道形態：10%福爾馬林試劑中固定十二指腸、空腸和回腸24h后，經洗滌、脫水、透明、透蠟、包埋、修塊后，切成較厚石蠟切片，進行HE染色，封片后用顯微攝影分析系統測量隱窩深度、絨毛高度，并計算絨毛高度與隱窩深度的比值。 1.4.3盲腸內容物中大腸桿菌和乳酸桿菌的檢測：于試驗期的第21天和第42天，從每個重復中隨機選取2只雞，稱活重后靜脈放血處死，用5%新潔爾滅消毒液浸泡5min，然后將其置于無菌操作臺上，剖開腹腔，無菌取出一側盲腸放于無菌平皿里，取其內容物進行計數。 1.4.4數據處理：試驗數據采用SPSS13.0軟件中的單因子方差分析，用LSD進行組間多重比較，對試驗數據進行統計分析，結果均以平均數±標準差表示。 2結果與分析 2.1肽菌素對肉雞生長性能的影響 不同處理對肉雞生長性能的影響見表3。對體重來說，1日齡體重各組之間差異不顯著（P>0.05）。21日齡的體重以對照組最低，添加金霉素和肽菌素均能提高肉雞的體重，差異顯著（P＜0.05）；肽菌素各組的體重均低于金霉素組，但只有微生態制劑0.4%組（處理5）與之差異顯著（P＜0.05）。42日齡的體重仍以對照組最低，但與各組間差異不顯著（P＞0.05）。對體增重來說，1~21d的平均日增重以對照組最低，添加金霉素和肽菌素均能提高肉雞的平均日增重，差異顯著（P＜0.05）。與對照組相比，金霉素組提高了12.1%，肽菌素各組分別提高了8.39%、10.10%、6.71%。肽菌素各組的平均日增重均低于金霉素組，但僅肽菌素0.4%組（處理5）與之差異顯著（P＜0.05）。22~42d的平均日增重以對照組最低，但與各處理組間差異不顯著（P＞0.05）。1~42d的平均日增重仍以對照組最低，除與肽菌素0.1%組（處理3）差異顯著（P＜0.05）外，與其余各組差異不顯著（P＞0.05）。對采食量來說，1~21d的平均日采食量以對照組最低，添加金霉素和肽菌素均能提高肉雞的平均日采食量；與對照組相比，抗生素組提高了9.73%，肽菌素各組分別提高了2.19%、4.62%、3.64%。肽菌素組的平均日采食量均低于金霉素組，但僅肽菌素0.1%組（處理3）與之差異顯著（P＜0.05），其余肽菌素組與之差異不顯著（P＞0.05）。22~42d的平均日采食量以肽菌素0.2%組（處理4）最低；與對照組相比，添加金霉素和肽菌素均未顯著提高肉雞的平均日采食量（P>0.05）。1~42d的平均日采食量仍以肽菌素0.2%組（處理4）最低，添加金霉素和肽菌素后有提高平均日采食量的趨勢。對料肉比來說，1~21d的料肉比以對照組最高，添加金霉素和肽菌素均有降低料肉比的趨勢；與對照組相比，金霉素組降低了2.17%，各肽菌素組分別降低了5.80%、5.07%、2.90%；并且各肽菌素組的料肉比均低于抗生素組，分別降低了3.70%、2.96%、0.74%。22~42d和1~42d的料肉比，肽菌素組均低于金霉素組和對照組，尤以肽菌素0.1%組（處理3）最低。 2.2肽菌素對肉雞消化道生理的影響 2.2.1肽菌素對肉雞小腸相對長度的影響：由表4可以看出，與對照組和金霉素組相比，各肽菌素組均降低了21日齡肉雞十二指腸（P<0.05）、空腸（P<0.05）、整個小腸（P<0.05）的相對長度，增加了回腸（P<0.05）相對長度。與對照組相比，金霉素組對十二指腸、空腸和整個小腸的長度無顯著影響（P>0.05），但回腸相對長度顯著增加（P<0.05）。42日齡時，與對照組和金霉素組相比，除空腸（P<0.05）的相對長度顯著增加外，各肽菌素組腸段的相對長度差異不顯著（P>0.05）。#p#分頁標題#e# 2.2.2肽菌素對肉雞小腸形態的影響：由表5可以看出，與對照組和金霉素組相比，各肽菌素組對21日齡肉雞的十二指腸、空腸、回腸的絨毛高度、隱窩深度以及絨隱比值均無顯著影響（P>0.05）；但與對照組相比，各處理組有提高十二指腸、空腸和回腸絨毛高度的趨勢；與金霉素組相比，添加肽菌素也有提高十二指腸絨毛高度的趨勢。由表6可以看出，與對照組和金霉素組相比，各肽菌素組對42日齡肉雞的十二指腸、空腸、回腸的絨毛高度、隱窩深度以及絨隱比值均無顯著影響（P>0.05）；與對照組相比，各處理組十二指腸絨隱比值分別提高了2.68%、1.57%、2.24%、0.89%（P>0.05）；與對照組相比，各處理回腸絨隱比值分別提高了10.00%、9.11%、14.60%、10.90%（P>0.05）。 2.3肽菌素對盲腸內容物中大腸桿菌和乳酸桿菌的影響 由表7可以看出，在21日齡時，與對照組相比，添加肽菌素有提高乳酸菌數量和降低大腸桿菌數量的趨勢，各組差異不顯著（P>0.05），乳酸桿菌數量分別提高了47.9%、46.7%、46.7%；大腸桿菌數量分別降低了21.8%、29.1%、25.5%；金霉素組降低了乳酸桿菌和大腸桿菌的數量，差異顯著（P<0.05）。42日齡時，對大腸桿菌來說，各組之間的數量差異均不顯著（P>0.05）；對乳酸桿菌來說，肽菌素組與對照組、金霉素組差異均顯著（P<0.05），但金霉素組與對照組之間差異不顯著（P>0.05）。 3討論 3.1肽菌素對肉雞生長性能的影響 該試驗比較了肽菌素與抗生素（金霉素）促生長的效果，結果發現，金霉素和肽菌素均能促進肉雞生長，從體增重改善程度來看，肽菌素效果不如金霉素；從料肉比來看，0.1%~0.4%肽菌素劑量組在前期低于抗生素組；全期肽菌素各處理組均低于金霉素組或與金霉素組相當，說明添加一定劑量的肽菌素能夠達到與添加金霉素相同的效果，但并非是添加量越多越好。這可能是因為添加了過多的肽菌素，打破了動物機體腸道微生物的平衡而不利于動物的生長。從發揮促生長作用的時間來看，肽菌素與金霉素發揮作用的時間相同，均是在飼養前期作用效果優于飼養后期。這可能是由于該試驗采用的金霉素為飼料級，后期機體產生了耐藥性，效果不如前期明顯［3］；而肽菌素的后期作用效果不如前期明顯的原因可能是隨著肉雞日齡的增加，其腸道微生物菌群越加穩定，受外界干擾越小。 3.2肽菌素對肉雞消化道生理的影響 3.2.1肽菌素對肉雞小腸相對長度的影響：該試驗結果表明，在飼糧中添加肽菌素后能夠顯著降低21日齡肉雞十二指腸、空腸、回腸長度及小腸總的長度，金霉素組對十二指腸、空腸和整個小腸的長度無顯著的影響，但顯著增加了回腸相對長度。42日齡時，肽菌素各組除對空腸有顯著影響外，對其余腸道均無顯著影響。這與陳佳等［4］的研究結果相似，可能是由于添加肽菌素之后，提高了動物機體對營養物質的消化吸收能力，減輕了對消化系統的刺激，從而緩解了動物消化系統的代償性增生和肥大。同時小腸重量減輕、長度變短，可以減少機體內臟器官的維持需要，更有利于雞的生長，這可能是肉雞生產性能改善的原因之一。 3.2.2肽菌素對肉雞小腸形態的影響：小腸是機體營養物質消化吸收的主要場所，小腸皺襞還能加大小腸的吸收面積。微生態制劑可以促進動物腸道的生長發育，提高絨毛高度和隱窩深度以及二者的比值等。該試驗結果表明，與對照組相比，添加肽菌素之后，對21d和42d的小腸絨毛高度、隱窩深度以及二者比值沒有顯著影響，但有提高的趨勢，這與Sun等［5］的研究結果相似。Samanya等［6］研究發現，飼喂益生菌后，28日齡肉雞的十二指腸和回腸絨毛顯著變長。該試驗結果不如前人研究結果影響顯著的原因可能是由于所使用的菌種以及飼養環境的不同。吸收養分是小腸絨毛的主要功能，腸腺則主要具有分泌功能，因此動物小腸黏膜結構的良好狀態是養分消化吸收和動物正常生長的生理學基礎。絨隱比值是反映小腸功能狀態的綜合指標，比值上升，則黏膜改善、消化吸收功能增強、生長加快。肽菌素促進腸道發育的作用可能是通過采食量而發揮的。盧建軍等［7］報道，低采食量是腸道黏膜萎縮的原因而不是腸道黏膜萎縮后的結果。同時該試驗研究發現，添加乳酸菌后，肉雞采食量有提高的趨勢，這與肉雞的生產性能提高的趨勢基本一致。 3.3肽菌素對盲腸內容物中大腸桿菌和乳酸桿菌的影響 乳酸桿菌、雙歧桿菌是動物腸道中的優勢菌種，它能在腸道中迅速生長繁殖，產生大量酸，使腸道的pH值和Eh下降，既可抑制病原微生物的生長繁殖，又能促進腸道中其他厭氧菌的生長繁殖。同時，腸道中的酸性環境，既有利于營養物質的消化吸收，也有利于提高飼料利用率。因此，在肉雞出殼后盡早攝入乳酸菌等益生菌可以幫助其機體內盡早形成優勢乳酸菌、雙歧桿菌等菌群，從而有助于動物提高抵抗力，避免外來有害細菌的感染。該試驗結果表明，肽菌素能顯著促進肉雞腸道內乳酸桿菌的增殖（P<0.05），并且能抑制大腸桿菌的繁殖。 4結論 ①金霉素和肽菌素均能促進肉雞的生長；從體增重改善程度來看，肽菌素的效果略低于金霉素；從料肉比改善程度來看，0.1%~0.4%肽菌素略優于金霉素。肽菌素前期的使用效果大于后期。②肽菌素能降低肉雞腸道長度，可改善腸道形態，且有降低盲腸內容物中大腸桿菌和增加乳酸桿菌數量的趨勢。